高 陽,吉彤珍,楊冬梅,劉 然

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院/北京婦幼保健院 檢驗科，北京100026)

新生兒感染是新生兒常見疾病，也是引起新生兒死亡的主要原因，由于新生兒免疫功能尚不健全以及侵入性操作較多，所以新生兒重癥監(jiān)護室(NICU)是醫(yī)院感染防控的重點，導(dǎo)管相關(guān)血流感染、呼吸道感染是新生兒常見的醫(yī)院感染[1-2]。近年來由于抗生素的廣泛使用，越來越多的耐藥菌被檢出[3]。本研究通過對北京婦產(chǎn)醫(yī)院NICU2019年1月至2021年12月患者標本中分離出的783病原菌和耐藥情況進行分析，為臨床治療和院感防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

1.1.1試驗菌株 收集北京婦產(chǎn)醫(yī)院2019年1月至2021年12月NICU患兒的送檢標本(包括咽拭子、血液、氣管插管尖端、靜脈置管斷端等)培養(yǎng)分離出的病原菌783株，已剔除同一患兒相同部位的重復(fù)菌株。送檢標本嚴格依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行接種。

1.1.2質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC29213。質(zhì)控菌株均購自國家菌毒種中心。

1.2 培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗

1.2.1培養(yǎng)基和藥敏紙片使用OXIOD產(chǎn)品，有哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)皿、3號麥康凱培養(yǎng)皿、萬古霉素巧克力培養(yǎng)皿。

1.2.2細菌鑒定是通過識別菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶等試驗進行初篩，將分離的菌株在梅里埃VITEK2 COMPACT儀器進行菌株鑒定和藥敏試驗。藥敏結(jié)果是根據(jù)美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)M100標準判定敏感、中介和耐藥。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

實驗數(shù)據(jù)采用WHONET5.6及SPSS25軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布

783株病原菌中共檢出革蘭陰性菌432株(55.17%)，革蘭陽性菌295株(37.68%)，真菌56株(7.15%)。革蘭陰性菌中檢出較多的為大腸埃希菌331株(42.27%)，肺炎克雷伯菌26株(3.32%),鮑曼不動桿菌26株(3.32%)。革蘭陽性菌中凝固酶陰性菌和腸球菌較常見，其中表皮葡萄球菌79株(10.09%)，溶血葡萄球菌64株(8.17%)，沃氏葡萄球菌18株(2.30%)，糞腸球菌38株(4.85%)，屎腸球菌25株(3.19%)。真菌中白色念珠菌30株(3.83%),近平滑念珠菌17株(2.17%)。

2.2 革蘭陰性菌耐藥情況

檢出的革蘭陰性菌主要包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢出率分別為23.26%和7.69%。大腸埃希菌對阿米卡星、頭孢替坦、碳青霉烯類藥物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐藥；肺炎克雷伯菌對頭孢吡肟、碳青霉烯類藥物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐藥；沒檢出鮑曼不動桿菌耐藥株(表1)。

表1 主要革蘭陰性菌對抗生素的耐藥率(%)

2.3 主要凝固酶陰性葡萄球菌對抗生素的耐藥情況

檢出的凝固酶陰性葡萄球菌中表皮葡萄球菌占比最大；所有凝固酶陰性葡萄球菌均未檢測到對利奈唑胺、奎奴普丁/達福普丁、替加環(huán)素、萬古霉素的耐藥株(表2)。

表2 主要革蘭陽性葡萄球菌對抗生素的耐藥率(%)

2.4 腸球菌對抗生素的耐藥情況

腸球菌以糞腸球菌和屎腸球菌為主；糞腸球菌和屎腸球菌均未檢出奎奴普丁/達福普丁、替加環(huán)素、萬古霉素的耐藥株(表3)。

表3 糞腸球菌和屎腸球菌對抗生素的耐藥率(%)

2.5 真菌對抗生素的耐藥情況

白色念珠菌和近平滑念珠菌為主要檢出菌，檢出菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶均敏感(表4)。

表4 主要真菌對抗生素的耐藥率(%)

3 討論

新生兒重癥監(jiān)護室收治的多為早產(chǎn)兒、嚴重宮內(nèi)窘迫綜合征、低體重兒和多種并發(fā)癥的新生兒，多數(shù)經(jīng)口氣管插管進行呼吸機輔助呼吸及深靜脈置管，抗菌藥物應(yīng)用時間長，這些因素增加了感染的風(fēng)險[4]。在本研究中，大腸埃希菌的檢出率最高達42.27%，ESBLs 是主要的耐藥菌。ESBLs能夠特異性地將β-內(nèi)酰胺環(huán)打開，使頭孢菌素和青霉素類抗菌藥失活，它可通過質(zhì)粒介導(dǎo)在細菌間傳播耐藥性，同時還能攜帶耐藥基因并造成ESBLs對磺胺類、氨基糖苷類、β-內(nèi)酰胺類及喹諾酮類抗菌藥耐藥[5-7]。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的增多可能與患兒自身免疫系統(tǒng)不完善、抵抗力差、呼吸支持、中心靜脈置管等治療措施和抗感染治療時選用相對安全的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物等因素導(dǎo)致大腸埃希菌的高產(chǎn)酶率[8]，所以合理使用抗菌藥尤為重要。本研究還顯示凝固酶陰性葡萄球菌感染中表皮葡萄球菌占比較大，與曾月瑤等[9]研究相似，溶血葡萄球菌感染率高于其研究，可能與地區(qū)病原學(xué)分布差異有關(guān)。凝固酶陰性葡萄球菌是人類皮膚和黏膜的正常菌群，NICU新生兒由于各個器官和功能發(fā)育不成熟，免疫力較低，凝固酶陰性葡萄球菌會通過機械通氣、靜脈置管等有創(chuàng)操進入血液循環(huán)，增加了患兒感染的風(fēng)險[10-12]。另外工作人員手部衛(wèi)生不合格及環(huán)境污染也會增加患兒葡萄球菌定植[13]。在腸球菌中糞腸球菌和屎腸球菌對奎奴普丁/達福普丁、替加環(huán)素、萬古霉素均不耐藥，在真菌感染中白色念珠菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶無耐藥情況，近平滑念珠菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶、氟康唑和伏立康唑無耐藥出現(xiàn)。白色念珠菌對氟康唑和伏立康唑的耐藥率分別為23.33%和26.67%，高于吳思穎等[14]的分析，不同念珠菌對常用抗真菌藥物敏感性有差異或固有耐藥，以及因治療產(chǎn)生的獲得性耐藥使其成為治療的主要問題[15]，由于抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，病原菌的耐藥率明顯上升，不同地區(qū)不同科室耐藥率也有差異。