劉 倩，張興利，陸浩翔，吳 杰，楊飛，邱宏春

（江蘇省昆山市第三人民醫(yī)院血液腫瘤科，江蘇 昆山 215300）

骨髓增生異常綜合征（MDS）是一種血液系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，影響患者預(yù)后的因素較多。目前，對MDS 發(fā)病機(jī)制及預(yù)后影響因素的研究仍在不斷探索中，新的分子標(biāo)志不斷被發(fā)現(xiàn)[1]。細(xì)胞因子IP-10、MBL 在多種疾病中發(fā)揮著重要的作用，但其在MDS 患者血清中含量的相關(guān)研究較少。在本文中，筆者主要是檢測50 例初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的含量，并探討其在MDS 診治中的臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2021 年10 月在我科診治的初發(fā)MDS 患者50 例作為初發(fā)MDS 組，所有患者均符合MDS 的診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)國際預(yù)后積分系統(tǒng)、修訂的國際預(yù)后積分系統(tǒng)的積分將其分為較低危組和較高危組[2]。其中17 例患者接受去甲基化治療/ 化學(xué)治療?；颊叩幕举Y料見表1。本課題通過了昆山市第三人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

表1 初發(fā)MDS 患者的基本資料

1.2 檢測方法

抽取正常對照組（30 例健康者）和初發(fā)MDS 組（治療前及治療1 ～3 個療程后）的空腹靜脈血（5mL），靜置2 h 后以3000 r/min 的速度離心15min，分離血清，置于-80℃的環(huán)境下凍存待測。采用ELISA 法檢測血清標(biāo)本IP-10 和MBL 的含量。嚴(yán)格按照說明書操作。人IP-10 和MBL ELISA 試劑盒購自南京戟貝生物科技有限公司。

1.3 治療方案

去甲基化治療：阿扎胞苷或地西他濱；去甲基化聯(lián)合化療：阿扎胞苷或地西他濱+ 阿克拉霉素/ 阿糖胞苷/ 粒細(xì)胞集落刺激因子（CAG）或高三尖杉酯堿/阿糖胞苷/ 粒細(xì)胞集落刺激因子（HAG）等方案。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 23.0 軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析SNKq 檢驗。計數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。兩變量關(guān)聯(lián)性分析采用線性相關(guān)分析法。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平

初發(fā)MDS 組患者血清IP-10 的含量明顯高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-4.775,P＜0.05）；其血清MBL 的含量明顯低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=4.823,P＜0.05）。較低危組患者血清IP-10 的含量顯著低于較高危組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；其血清IP-10 的含量顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。較低危組患者血清MBL 的含量顯著高于較高危組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；其血清MBL 的含量顯著低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2、表3。

表2 初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s ）

表2 初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s ）

注：a 與正常對照組比較，P ＜0.05。

分組 例數(shù) IP-10 MBL正常對照組 20 1.2803±0.2291 3.4871±1.2496初發(fā)MDS 組 50 1.9215±0.8776a 2.0627±0.6758a t 值 -4.775 4.823 P 值 ＜0.05 ＜0.05

表3 各亞組血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s）

表3 各亞組血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s）

注：a 與正常對照組比較，P ＜0.05 ；b 與較低危組比較，P ＜0.05。

分組 例數(shù) IP-10 MBL正常對照組 20 1.2803±0.2291 3.4871±1.2496較低危組 27 1.7366±0.6821a 2.3074±0.5699a較高危組 23 2.1386±1.0366b 1.7754±0.6881b F 值 7.187 22.435 P 值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 初發(fā)MDS 患者治療后血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平

初發(fā)MDS 患者中有17 例患者接受去甲基化治療/ 化學(xué)治療，其中12 例患者獲得骨髓或血液學(xué)改善（有效組），5 例患者無骨髓或血液學(xué)改善（無效組）。有效組患者治療后血清IP-10 的含量為(1.5592±0.2907)ng/mL，與治療前相比明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.895,P＜0.05）。其治療后血清MBL 的含量為(2.5637±0.6500)ng/mL，與治療前相比明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-6.933,P＜0.05）。無效組患者治療后血清IP-10、MBL 的含量與治療前相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.309、-1.291,P＞0.05）。詳見表4。

表4 初發(fā)MDS 患者治療后血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s ）

表4 初發(fā)MDS 患者治療后血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平（ng/mL，± s ）

注：a 有效組治療后與治療前比較，P ＜0.05 ；b 無效組治療后與治療前比較，P ＞0.05。

分組 例數(shù) 治療前IP-10 治療后IP-10 t 值 P 值 治療前MBL 治療后MBL t 值 P 值有效組 12 2.4326±0.5208 1.5592±0.2907a 9.895 ＜ 0.05 1.8051±0.7882 2.5637±0.6500a -6.933 ＜ 0.05無效組 5 3.6062±1.1304 3.4603±1.1159b 1.309 ＞0.05 1.1619±0.5359 1.2187±0.495b -1.291 ＞0.05

2.3 初發(fā)MDS 患者治療后血清IP-10、MBL 的下降百分比

有效組患者與無效組患者治療后血清IP-10 下降的百分比分別為（35.33±6.93）%、（6.04±2.03）%，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-8.203，P＜0.05）。有效組患者與無效組患者治療后血清MBL 升高的百分比分別為（51.52±30.90）%、（8.59±1.47）%，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-4.505，P＜0.05）。

2.4 初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的相關(guān)性

對50 例初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的表達(dá)水平進(jìn)行線性相關(guān)分析的結(jié)果顯示，二者具有顯著的負(fù)相關(guān)性（r=-0.642，P＜0.05）。

3 討論

MDS 是一種強(qiáng)異質(zhì)性的血液系統(tǒng)惡性疾病，在老年人和既往接受過細(xì)胞毒性治療的個體中更常見。雖然近年來隨著去甲基化藥物等新藥的應(yīng)用及支持治療技術(shù)的進(jìn)步，該病患者的生存率有了一定的提高，但其總體治療效果仍然較差[2]。學(xué)者們一直在探索MDS 的發(fā)病機(jī)制及影響預(yù)后的因素，細(xì)胞因子的表達(dá)已成為研究的熱點之一。有研究發(fā)現(xiàn)，不僅實體腫瘤組織內(nèi)存在血管新生，血液系統(tǒng)腫瘤如急性白血病[3]、多發(fā)性骨髓瘤（MM）[4]等患者的骨髓中也存在著調(diào)控血管新生細(xì)胞因子的異常表達(dá)。細(xì)胞因子IP-10、MBL 參與了許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，但是有關(guān)其在MDS 患者血清中含量的研究較少。IP-10 又被稱為CXC 趨化因子配體10（CXCL10），是一種小型細(xì)胞因子樣蛋白，屬于細(xì)胞因子超家族中的一類，在免疫調(diào)節(jié)、炎癥、造血、趨化和白細(xì)胞運輸中發(fā)揮著重要的作用[5]。同時它可以通過抑制免疫、旁分泌、影響腫瘤微環(huán)境等多種途徑來促進(jìn)腫瘤血管的生成，其與多種實體腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后等密切相關(guān)。有研究指出，IP-10 的高表達(dá)常提示預(yù)后不良[6-8]。IP-10 在血液系統(tǒng)疾病中的表達(dá)水平成為近年來研究的熱點之一。有研究表明，MM 患者骨髓和血清中IP-10 的表達(dá)水平顯著升高，這與自然殺傷細(xì)胞的調(diào)節(jié)有關(guān)[9-10]。Wenthe J 等[11]在運用Lokon 溶瘤腺病毒(LOAd) 治療MM 的研究中發(fā)現(xiàn)，LOAd 病毒可通過下調(diào)MM 進(jìn)展相關(guān)的標(biāo)志物CXCL10 等進(jìn)一步改變細(xì)胞表型，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。Li M 等[12]的研究顯示，經(jīng)過減毒鼠傷寒沙門菌株VNP20009 治療后的AML 小鼠其血清IP-10 的水平會顯著上調(diào)。這提示，VNP20009 可能通過調(diào)節(jié)IP-10 等的表達(dá)來發(fā)揮對急性白血病的治療作用。MBL 是一種參與免疫系統(tǒng)凝集素通路的重要蛋白，作為補(bǔ)體重要固有成分，可與病原微生物表面的甘露糖殘基相結(jié)合，進(jìn)而激活補(bǔ)體系統(tǒng)，其與腫瘤的相關(guān)性近年來受到了廣泛的關(guān)注[13]。Aykut B 等[14]的研究表明，病原真菌可通過激活MBL 來驅(qū)動補(bǔ)體級聯(lián)，促進(jìn)胰腺導(dǎo)管腺癌的發(fā)病。有研究發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞肝癌患者血漿MBL 的含量較正常人低，這可能與肝細(xì)胞肝癌患者肝功能異常造成的肝臟產(chǎn)生補(bǔ)體分子（如MBL）產(chǎn)量的降低有關(guān)[15]。近年來，MBL 在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的作用越來越受到重視。有學(xué)者針對MM 患者M(jìn)BL 基因多態(tài)性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，MBL2 基因突變可能與MM 的易感性有關(guān)[16]，這與Pehlivan M等[17]的報道相似。惡性血液病患者常需接受高強(qiáng)度化療或造血干細(xì)胞移植(HSCT)，患者在治療的過程中發(fā)生感染的風(fēng)險很大，多個研究證實MBL 在其中發(fā)揮著重要的作用。Soko?owska A 等[18]檢測157 例AML 患者化療前血清中MBL 的濃度發(fā)現(xiàn)，患者M(jìn)BL的中位水平較正常對照組高，高M(jìn)BL 水平提示其發(fā)生嚴(yán)重醫(yī)院感染( 伴有菌血癥和/ 或真菌血癥) 的風(fēng)險較高。然而Eleutherakis-Papaiakovou E 等[19]卻認(rèn)為，MM 患者auto-HSCT 后低水平的MBL 與感染風(fēng)險的增加有關(guān)，且與較短的總生存期相關(guān)。上述研究的結(jié)果不一致，可能與標(biāo)本采集、檢測技術(shù)、所選人群不同有關(guān)。但這些研究均表明補(bǔ)體凝集素途徑的關(guān)鍵分子MBL 可能參與了惡性血液腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，并且與其治療后的感染風(fēng)險存在一定的相關(guān)性。我們的研究顯示，初發(fā)MDS 患者血清IP-10 的含量明顯高于正常對照組，這與Chunyi Lyu[20]的報道一致。其中較低危組患者血清IP-10 的含量顯著低于較高危組，顯著高于正常對照組。初發(fā)MDS 患者血清MBL 的含量明顯低于正常對照組，其中較低危組患者血清MBL 的含量顯著高于較高危組，顯著低于正常對照組。推測這可能是由于腫瘤可增加患者發(fā)生基因突變的幾率, 使其產(chǎn)生的MBL 嚴(yán)重不足, 進(jìn)而可減弱甚至消除其免疫功能。經(jīng)過治療后，有效組MDS 患者血清IP-10 的含量較治療前顯著下降，而MBL 的含量顯著升高，無效組血清IP-10、MBL 的含量無明顯變化。這提示，不同狀態(tài)下患者血清IP-10 和MBL的含量存在差異，血清IP-10 和MBL 表達(dá)水平的變化可能與其預(yù)后有關(guān)。對17 例MDS 患者治療后血清IP-10、MBL 的水平進(jìn)行進(jìn)一步的分析發(fā)現(xiàn)，有效組與無效組患者的血清IP-10 下降百分比及MBL 升高百分比之間的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，提示動態(tài)監(jiān)測血清IP-10 及MBL 可能對患者的預(yù)后轉(zhuǎn)歸有一定的提示作用。此外，我們還發(fā)現(xiàn)初發(fā)MDS 患者血清IP-10、MBL 的含量存在顯著的負(fù)相關(guān)性。

綜上所述，聯(lián)合檢測血清IP-10 和MBL 的含量有助于初發(fā)MDS 患者臨床治療方案的選擇，對MDS的診治具有非常重要的意義。