張曉燕，楊 靜，沈 娜，洪 玲，黃 力，曾奎杰，梅 廣，鄧樹華，李滑滑

(湖南省糧油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測中心//國家糧食-稻谷產(chǎn)后工程技術(shù)研究中心，湖南 長沙 410000)

稻谷、玉米在儲藏過程中，脂肪在脂肪酶的作用下易發(fā)生水解和氧化，產(chǎn)生脂肪酸，隨著儲藏時間的延長，脂肪酸也逐漸上升。不同的儲藏條件、不同的溫濕度，脂肪酸上升的速度也不同。一般而言，溫濕度越高，脂肪酸上升速度越快[1-4]。因此，脂肪酸值被確定為判斷稻谷、玉米儲存品質(zhì)的關(guān)鍵性指標。

國家標準方法[5-6]中的樣品操作方法嚴謹，加液、移液均用單標線移液管，準確度得到保證，但是操作過程較繁雜，工作效率受到限制，而且操作過程中用到大量玻璃器具，檢驗員清洗玻璃器具的工作量和勞動強非常度大。急需一種既能保證準確度，又能提升工作效率，還可以降低勞動強度，且適合于大批量稻谷、玉米脂肪酸值操作方法。

1 材料

1.1 實驗設備

3100型錘式旋風磨，瑞典波通儀器集團公司；PL602E/02型電子天平，日本島津公司；BLH-3280K型礱谷機，浙江伯利恒儀器設備有限公司；DE-M17J03008瓶口分液器(量程5～50 ml)、連續(xù)性分液器(量程0～25 ml)，德國普蘭德有限公司；HY-2型往復式振蕩器(100 r/min)，常州國華儀器設備有點公司；一次性塑料杯(200 ml)，購于超市。

1.2 實驗試劑和溶液

無水乙醇(分析純)、95%乙醇(分析純)，上海國藥集團化學試劑有限公司；0.100 1 mol/L氫氧化鉀-乙醇標準溶液，北京海岸鴻蒙標準物質(zhì)技術(shù)有限公司。

2 實驗方法

樣品制備操作按國標方法規(guī)定[5-6]執(zhí)行。

2.1 水分測定方法

制備好的脂肪酸值用樣品，按照GB 5009.3—2016 直接干燥法測定。

2.2 國標方法

稻谷按照GB/T 20569—2006附錄A的方法進行測定，玉米按照GB/T 20570—2015附錄A的方法進行測定。

2.3 改進方法[7-9]

準確稱取制備好的樣品10.00±0.50 g，于250 ml具塞磨口錐形瓶中，用0～50 ml瓶口分液器(已校準)加入50.00 ml無水乙醇，置往返式振蕩器上震蕩(稻谷10 min，玉米30 min)，振蕩頻率為100次/min。靜置1～2 min，濾紙過濾(棄去前5～6滴)至一次性透明塑料杯中。過濾好后用0～25 ml連續(xù)分液器(專用連續(xù)移液吸頭，已校準)吸取25.00 ml濾液于150 ml三角瓶中，用瓶口分液器加50 ml不含CO2的蒸餾水，滴加3～4滴指示劑，用0.01 mol/L的氫氧化鉀標準滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不褪色。

2.4 改進方法精密度實驗

選取脂肪酸值為23.8 mg/100 g的1份稻谷樣品和脂肪酸值為54.9 mg/100 g的1份玉米樣品，采用改進方法，在同一實驗室內(nèi)對稻谷、玉米樣品的脂肪酸值進行10次平行測定，計算稻谷、玉米樣品脂肪酸值測定結(jié)果，分析其精密度。

2.5 改進方法準確度實驗

選取脂肪酸值分別為18.0、22.0、30.0、37.0 mg/100 g左右的稻谷樣品各3份；脂肪酸值分別為45.0、55.0、65.0、78.0 mg/100 g左右的玉米樣品各3份，分別采用國標方法和改進方法測定其脂肪酸值結(jié)果，對比兩種方法測得的脂肪酸值結(jié)果。

3 結(jié)果與討論

3.1 國標方法與改進方法操作過程對比

詳細對比國標方法與改進方法操作過程，查找操作過程中的不同之處，分析總結(jié)改進方法的優(yōu)點，結(jié)果見表1。

表1 國標方法與改進方法操作過程對比及改進方法的優(yōu)點

由表1可以看出，改進方法操作過程中提取劑、水的加入由瓶口分液器代替國標方法操作過程中的單標線移液管和量筒；濾液的收集由一次性透明塑料杯代替比色管，同時省去漏斗；移取濾液用連續(xù)分液器代替單標線移液管。改進方法操作過程中省去大量移液管、比色管、漏斗、量筒等玻璃器具，不僅減輕了檢驗員清洗玻璃器具的工作量和勞動強度，還節(jié)約了檢測成本，縮短了工作時間，大大提升了工作效率。

3.2 改進方法精密度

采用改進方法分別對05號稻谷樣品和17號玉米樣品進行10次平行測定，脂肪酸值測定結(jié)果及精密度分析見表2。由表2可見，稻谷10次平行測定結(jié)果的極差最大為1.75 mg/100 g，玉米10次平行測定結(jié)果的極差最大為1.04 mg/100 g，均小于國標規(guī)定的重復性臨界值2 mg/100 g，說明改進方法測定結(jié)果符合國標方法中的重復性要求。稻谷脂肪酸值10次平行測定結(jié)果標準偏差0.64 mg/100 g，變異系數(shù)為2.63%；玉米脂肪酸值10次平行測定結(jié)果標準偏差為0.31 mg/100 g，變異系數(shù)為0.56%，說明改進方法具有較高的精密度。

表2 改進方法測定選定樣品脂肪酸值結(jié)果 mg/(100 g)

3.3 改進方法準確度

采用國標方法和改進方法分別對選取的12份稻谷樣品(編號01～12)和12份玉米樣品(編號13～24)的脂肪酸值進行測定，并比較兩種方法的測定結(jié)果，見表3。

表3 國標方法和改進方法測定選取樣品的脂肪酸值結(jié)果 mg/(100 g)

由表3可見，12個稻谷脂肪酸值測定結(jié)果誤差為0.1～1.0 mg/100 g，12個玉米脂肪酸值測定結(jié)果誤差為0.2～1.1 mg/100 g，測定結(jié)果誤差均小于國標方法規(guī)定的重復性臨界值2 mg/100 g。用配對試驗法進行顯著性分析，可得稻谷樣品改進方法與國標方法測定脂肪酸值時t=0.210.05；玉米樣品改進方法與國標方法測定脂肪酸值時t=0.190.05，說明改進方法與國標方法測定稻谷、玉米脂肪酸值無顯著性差異。

4 結(jié)論

本實驗對國標方法中操作過程進行改進，改進方法的測定結(jié)果與國標方法相比，有較高的準確度、精密度；操作過程中省去大量移液管、比色管、漏斗、量筒等玻璃器皿，不僅減輕了檢驗員清洗工作和勞動強度，還節(jié)約了檢測成本，縮短了工作時間，大大提升了工作效率，非常適用于大批量樣品的測定，具有較高的推廣價值。