王欣，張濤，李敏，邱潤(rùn)苓，蘇曉蘭，魏瑋

（1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院，北京 100102；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)藥信息研究所，北京 100700）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種慢性、遷延性、炎癥性腸病。近年來UC發(fā)病率顯著增加，UC成為全球性疾病，已經(jīng)受到世界各國(guó)醫(yī)療工作者的關(guān)注[1]。UC治療缺乏特異性，病程遷延反復(fù)，治愈難度大，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[2]。西醫(yī)指南和共識(shí)中涉及的藥物取得了一定的臨床療效，但仍不能滿足目前治療的需求。中醫(yī)藥治療UC從整體觀念出發(fā)，針對(duì)患者不同的體質(zhì)及UC病情發(fā)展不同時(shí)期制定相應(yīng)的個(gè)體化干預(yù)措施，可以緩解患者的臨床癥狀，提高其生活質(zhì)量，尤其在誘導(dǎo)緩解、預(yù)防復(fù)發(fā)等方面具有明顯的優(yōu)勢(shì)[3]。在臨床取得良好療效的前提下，深入探討中醫(yī)藥治療UC的效應(yīng)機(jī)制顯得極為迫切。目前UC發(fā)病機(jī)制可能是環(huán)境、遺傳、微生物等多種因素共同作用，誘發(fā)腸道局部炎癥。在諸多發(fā)病因素當(dāng)中，免疫調(diào)節(jié)異常占據(jù)重要地位[4]。

魏瑋教授在傳承國(guó)醫(yī)大師路志正先生“重脾胃、調(diào)臟腑”學(xué)術(shù)思想的基礎(chǔ)上，立足于UC活動(dòng)期“濕熱蘊(yùn)腸，氣血不調(diào)”的核心病機(jī)，結(jié)合大量臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)總結(jié)和現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，提出“清熱、化濕、調(diào)樞”理論。既往臨床研究發(fā)現(xiàn)，路志正經(jīng)驗(yàn)方烏梅敗醬方能夠較好地緩解UC患者臨床癥狀、改善生存質(zhì)量，臨床有效率為85.0%～91.5%[5-6]。根據(jù)烏梅敗醬方化裁而成的清熱化濕調(diào)樞方經(jīng)過多年臨床實(shí)踐取得了較好的臨床療效，但其干預(yù)機(jī)制尚未闡明。故本研究采用葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)法建立UC小鼠模型，以免疫平衡角度作為切入點(diǎn)闡釋清熱化濕調(diào)樞方治療UC的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8周齡C57BL/6雄性小鼠60只，體質(zhì)量（20±2）g，購(gòu)于北京斯貝福生物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2015-0015。小鼠飼養(yǎng)于中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所（IAM CACMS）清潔級(jí)動(dòng)物房，12 h光照、12 h黑暗循環(huán)，溫度（24±2）℃，相對(duì)濕度35%～45%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的所有操作均嚴(yán)格遵守中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院針灸研究所動(dòng)物研究委員會(huì)指南，并經(jīng)機(jī)構(gòu)動(dòng)物護(hù)理和使用委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)：D2021-03-16-2）。所有手術(shù)均在麻醉狀態(tài)下（10%烏拉坦腹腔注射）進(jìn)行，以盡量減少痛苦。

1.2 藥物與試劑 清熱化濕調(diào)樞方，方藥組成：烏梅15 g，敗醬草12 g，黃連6 g，木香9 g（后下），當(dāng)歸10 g，炒白芍12 g，炒枳實(shí)10 g，太子參15 g，炒白術(shù)15 g，茯苓15 g，葛根12 g，炙甘草6 g。上述藥物采用中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院中藥顆粒藥房提供的中藥免煎劑。美沙拉嗪腸溶片（批準(zhǔn)文號(hào)：H20171358）購(gòu)于Losan Pharma GmbH；葡聚糖硫酸鈉（DSS，43 kDa）（批號(hào)：160110）購(gòu)于美國(guó)MP Biomedicals公司；便潛血（OB）試劑（批號(hào)：B210601）購(gòu)于珠海貝索生物技術(shù)有限公司；APC antimouse IL-17A（批號(hào)：506916）、Alexa Flour 488 anti-mouse/rat/huaman FOXP3（批號(hào)：320012）均購(gòu)于Biolegend公司。

1.3 主要儀器ML4002/02型電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）；SL202N型電子天平（上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司）；JT-A20型凈水開水器（上海宏溪實(shí)業(yè)有限公司）；U-TvO.5xC.24H01726型電子顯微鏡、AHB-2-LB型萬能照相機(jī)（日本奧林巴斯公司）；Eq150H型脫水機(jī)、H1122Q型烤片機(jī)、RM2255型切片機(jī)（徠卡公司）；Multiskan FC型酶標(biāo)儀（賽默飛世爾科技）；42592型96孔酶標(biāo)板（康寧公司）；TDZ4-WS型低速臺(tái)式離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司）。

1.4 造模與分組60只小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，根據(jù)小鼠體質(zhì)量使用Excel中的Rand函數(shù)隨機(jī)分為正常組、模型組、清熱化濕調(diào)樞方高劑量組、清熱化濕調(diào)樞方中劑量組、清熱化濕調(diào)樞方低劑量組、美沙拉嗪腸溶片組，每組10只。除正常組外，其余各組均參照WIRTZ S等[7]的造模方法進(jìn)行UC模型復(fù)制，具體操作：將DSS用蒸餾水配制成2.5%的溶液，除正常組外，其余組小鼠自由飲用，正常組小鼠自由飲用蒸餾水，連續(xù)7 d。

1.5 實(shí)驗(yàn)給藥 在UC小鼠模型復(fù)制同時(shí)給予藥物干預(yù)。給藥濃度計(jì)算方法參照《中藥藥理研究方法學(xué)》[8]。按實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人體表面積比等效劑量換算比率[9]，將人每天劑量折算成小鼠等效劑量作為中劑量。高劑量為2倍中劑量，低劑量為1/2中劑量。造模第1天開始，清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組小鼠每天分別灌胃給予清熱化濕調(diào)樞方，0.736、0.368、0.184 g/kg；美沙拉嗪腸溶片組小鼠每天灌胃給予美沙拉嗪腸溶片溶液，0.011 g/kg；正常組和模型組小鼠灌胃給予等體積純凈水，0.5 mL/次，2次/d，連續(xù)7 d。

1.6 觀察指標(biāo)

1.6.1 一般情況觀察 分別于干預(yù)前和干預(yù)結(jié)束后，觀察小鼠的精神狀態(tài)、毛發(fā)光澤度、活動(dòng)情況、體質(zhì)量、腹瀉、便血等情況。

1.6.2 疾病活動(dòng)指數(shù)（disease activity index，DAI）評(píng)分[10]以MURANO M等[11]制定的DAI評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為基準(zhǔn)。觀察各組小鼠體質(zhì)量下降情況、糞便性狀和便血情況，并計(jì)算DAI評(píng)分。DAI評(píng)分=（體質(zhì)量下降分?jǐn)?shù)+大便性狀分?jǐn)?shù)+便血分?jǐn)?shù)）／3。

1.6.3 結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)觀察 干預(yù)結(jié)束后，使用10%的水合氯醛麻醉且處死小鼠，分離小鼠結(jié)腸位置，測(cè)量結(jié)腸長(zhǎng)度。取結(jié)腸遠(yuǎn)端約1 cm處，用10%的中性甲醛將其固定，使用石蠟包埋HE染色及切片。光鏡下觀察切片組織學(xué)變化情況。

1.6.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟組織Treg、Th17細(xì)胞百分比 剖取完整脾臟，用手術(shù)剪剪碎，冰浴勻漿，轉(zhuǎn)移至70 μm孔徑的Falcon細(xì)胞篩網(wǎng)濾過，收集細(xì)胞懸液，再加紅細(xì)胞裂解液，反應(yīng)停止，離心，棄上清，重復(fù)2次，MACS緩沖液重懸，將細(xì)胞懸液通過40 μm孔徑的Falcon細(xì)胞篩網(wǎng)，去除細(xì)胞團(tuán)塊，采集過濾后的細(xì)胞懸液，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”（±s）表示，當(dāng)滿足正態(tài)分布且方差齊時(shí)，采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；當(dāng)不滿足正態(tài)分布或方差不齊時(shí)，則采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組小鼠一般情況 干預(yù)前，各組小鼠活潑好動(dòng)、毛色黑亮、狀態(tài)均正常。干預(yù)結(jié)束后，正常組小鼠狀態(tài)正常；模型組小鼠活動(dòng)遲緩，精神萎靡，喜蜷縮呈弓背狀；與模型組比較，美沙拉嗪腸溶片組和清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組小鼠精神狀態(tài)和活動(dòng)度均有改善。實(shí)驗(yàn)過程中無小鼠死亡。

2.2 各組小鼠干預(yù)前后體質(zhì)量比較 干預(yù)前，6組小鼠體質(zhì)量比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。干預(yù)后，與正常組比較，模型組小鼠體質(zhì)量明顯降低（P＜0.05）；與模型組比較，美沙拉嗪腸溶片組和清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組小鼠體質(zhì)量均明顯升高（P＜0.05）。（見表1）

表1 各組小鼠干預(yù)前后體質(zhì)量比較 （±s，g）

表1 各組小鼠干預(yù)前后體質(zhì)量比較 （±s，g）

注：與正常組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）干預(yù)前 干預(yù)后正常組 10 - 23.99±0.98 24.96±0.93模型組 10 - 24.14±1.14 20.18±1.52a美沙拉嗪腸溶片組 10 0.011 24.17±1.83 22.23±2.39a b清熱化濕調(diào)樞方高劑量組10 0.736 24.33±1.25 22.27±2.67a b清熱化濕調(diào)樞方中劑量組10 0.368 23.82±1.31 22.80±1.67a b清熱化濕調(diào)樞方低劑量組10 0.184 24.18±0.99 22.68±1.26a b F 1.744 5.889 P 0.142 0.002

2.3 各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度比較 與正常組比較，模型組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度明顯縮短（P＜0.05）；與模型組比較，美沙拉嗪腸溶片組和清熱化濕調(diào)樞方高、中劑量組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度均明顯增加（P＜0.05）；清熱化濕調(diào)樞方低劑量組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度與模型組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（見表2）

表2 各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度比較 （±s，cm）

表2 各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度比較 （±s，cm）

注：與正常組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）結(jié)腸長(zhǎng)度正常組 10 - 7.03±0.06模型組 10 - 4.50±0.87a美沙拉嗪腸溶片組 10 0.011 6.13±0.64b清熱化濕調(diào)樞方高劑量組10 0.736 6.43±0.31b清熱化濕調(diào)樞方中劑量組10 0.368 6.43±0.51b清熱化濕調(diào)樞方低劑量組10 0.184 5.70±0.99 F 8.855 P 0.000

2.4 各組小鼠DAI評(píng)分比較 與正常組比較，模型組小鼠DAI評(píng)分明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，美沙拉嗪腸溶片組和清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組小鼠DAI評(píng)分均明顯降低（P＜0.05）。（見表3）

表3 各組小鼠DAI評(píng)分比較 （±s，分）

表3 各組小鼠DAI評(píng)分比較 （±s，分）

注：與正常組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）DAI評(píng)分正常組 10 - 0.22±0.67模型組 10 - 4.00±0.13a美沙拉嗪腸溶片組 10 0.011 2.15±0.44a b清熱化濕調(diào)樞方高劑量組10 0.736 2.50±0.59a b清熱化濕調(diào)樞方中劑量組10 0.368 2.19±0.56a b清熱化濕調(diào)樞方低劑量組10 0.184 2.50±0.71a b F 7.146 P 0.029

2.5 各組小鼠脾臟Treg、Th17細(xì)胞百分比比較 與正常組比較，模型組小鼠脾臟中Treg細(xì)胞百分比明顯減少（P＜0.05），Th17細(xì)胞百分比明顯增加（P＜0.05）；與模型組比較，清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組和美沙拉嗪腸溶片組小鼠脾臟中Treg細(xì)胞百分比明顯增加（P＜0.05），Th17細(xì)胞百分比明顯減少（P＜0.05）。與正常組比較，模型組小鼠脾臟中Treg/Th17值明顯降低（P＜0.05）；與模型組比較，清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組和美沙拉嗪腸溶片組小鼠脾臟中Treg/Th17值均明顯升高（P＜0.05）。（見表4、圖1～2）

圖1 各組小鼠脾臟組織Treg細(xì)胞流式圖

表4 各組小鼠Treg、Th17細(xì)胞百分比比較 （±s，%）

表4 各組小鼠Treg、Th17細(xì)胞百分比比較 （±s，%）

注：與正常組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05

組別 動(dòng)物數(shù)（只）給藥劑量（g/kg）Treg Th17 Treg/Th17正常組 10 - 5.20±0.16 1.78±1.64 2.92±0.12模型組 10 - 2.16±0.67a 4.01±1.62a 0.54±0.08a美沙拉嗪腸溶片組 10 0.011 4.64±1.21b 2.20±2.56b 2.11±0.07b清熱化濕調(diào)樞方高劑量組10 0.736 4.17±0.49b 2.38±0.62b 1.75±0.11b清熱化濕調(diào)樞方中劑量組10 0.368 4.66±1.20b 2.62±4.33b 1.78±0.09b清熱化濕調(diào)樞方低劑量組10 0.184 4.09±0.99b 2.58±4.25b 1.59±0.10b F 17.062 45.389 9.697 P 0.000 0.000 0.000

2.6 各組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)情況 正常組小鼠腸黏膜上皮完整，上皮細(xì)胞連接緊密，固有層可見完整隱窩結(jié)構(gòu)，有序排列，杯狀細(xì)胞分泌旺盛，黏膜下層未見明顯病變；模型組小鼠腸黏膜上皮缺損，而上皮細(xì)胞連接疏松，隱窩結(jié)構(gòu)破壞，排列紊亂，杯狀細(xì)胞明顯減少，間質(zhì)層可見大量淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，黏膜下層不同程度充血、水腫；清熱化濕調(diào)樞方高劑量組和美沙拉嗪腸溶片組小鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)較模型組明顯改善，黏膜缺損情況均得到明顯修復(fù)，上皮細(xì)胞連接較緊密，杯狀細(xì)胞分泌增多，極少隱窩破壞，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度低于模型組；清熱化濕調(diào)樞方中劑量組小鼠部分結(jié)腸黏膜組織中斷，缺損面積小，少量隱窩破壞，黏膜下層可見少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、水腫；清熱化濕調(diào)樞方低劑量組小鼠仍見多處結(jié)腸組織黏膜中斷、隱窩破壞、間質(zhì)出現(xiàn)充血、水腫及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。（見圖3）

圖2 各組小鼠脾臟組織Th17細(xì)胞流式圖

圖3 各組小鼠結(jié)腸組織病理切片圖（HE，×100）

3 討 論

中醫(yī)學(xué)根據(jù)臨床表現(xiàn)將UC歸屬于“腸癖”“腸風(fēng)”“臟毒”等范疇[12-14]。UC中醫(yī)病機(jī)可歸納為外感時(shí)邪、飲食不節(jié)（潔）、情志內(nèi)傷、素體脾腎不足，基本病理因素包括氣滯、濕熱、血瘀、痰濁。病位在大腸，但與脾（胃）、肝、腎密切相關(guān)，而肺氣失調(diào)，大腸不固亦與UC發(fā)病相關(guān)。濕熱蘊(yùn)腸為主要病理因素。研究[15]顯示，大腸濕熱證為UC最常見的證型。脾虛肝郁為主要發(fā)病基礎(chǔ)，飲食不調(diào)為主要發(fā)病誘因。魏瑋教授在傳承國(guó)醫(yī)大師路志正先生“持中央、運(yùn)四旁，怡情志、調(diào)升降，顧潤(rùn)燥、納化?！睂W(xué)術(shù)思想的基礎(chǔ)上，創(chuàng)立清熱化濕調(diào)樞方。方中君藥烏梅收澀止瀉；臣藥敗醬草、黃連清熱化濕，解毒排膿；當(dāng)歸、白芍養(yǎng)血活血，柔肝止痛；葛根、枳實(shí)二味亦為臣藥，調(diào)理中焦氣機(jī)，一陰一陽，一升一降，葛根升清陽，枳實(shí)降濁陰；佐以木香行氣止痛，恢復(fù)中焦脾升胃降之生理機(jī)能；佐藥太子參、炒白術(shù)、茯苓健脾化濕；甘草為使藥，取其調(diào)和之性。諸藥合用，共奏清熱、化濕、健脾、調(diào)樞之功。其中“調(diào)樞”可以看作是調(diào)控疾病及其病理變化過程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。全方方小藥專，切中病機(jī)，輕清靈動(dòng)，符合路志正臨證治療脾胃病的主要學(xué)術(shù)思想。

前期研究認(rèn)為，異常激活的腸黏膜免疫是引發(fā)UC發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的重要因素之一[16]。而T細(xì)胞17（helper T cells 17，Th17）)/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells，Treg）在免疫調(diào)節(jié)中起到關(guān)鍵作用，二者在分化上相互協(xié)同，在功能上相互拮抗[17]。Th17細(xì)胞主要通過合成IL-17等炎癥因子增強(qiáng)靶細(xì)胞通透性，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞募集和活化，最終促進(jìn)炎癥發(fā)生。大量基礎(chǔ)研究表明，與健康對(duì)照組比較，UC患者腸黏膜中Th17細(xì)胞數(shù)量及相關(guān)因子（RORγt、IL-17、IL-22、IL-23）的表達(dá)水平明顯升高，且與UC疾病活動(dòng)程度呈正相關(guān)[18-19]。Treg細(xì)胞是具有免疫抑制功能的T細(xì)胞亞群，在形成外周免疫耐受、維持機(jī)體免疫平衡方面具有重要作用。Treg細(xì)胞的主要作用是表達(dá)Foxp3，通過分泌IL-10等抑炎因子，直接或間接抑制過度激活的免疫應(yīng)答，從而抑制腸道炎癥反應(yīng)[20]。

本研究結(jié)果顯示，模型組小鼠脾臟中的Treg細(xì)胞百分比明顯低于正常組，Th17細(xì)胞百分比明顯高于正常組，且二者的比值亦明顯降低，說明模型組小鼠體內(nèi)存在Treg和Th17細(xì)胞比例失衡。而美沙拉嗪腸溶片組和清熱化濕調(diào)樞方高、中、低劑量組小鼠Treg/Th17值高于模型組，并接近正常組，說明清熱化濕調(diào)樞方和美沙拉嗪一定程度上糾正了UC模型小鼠Treg和Th17細(xì)胞的比例失衡，并且可以明顯改善病理形態(tài)，抑制隱窩破壞及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。近年來相關(guān)藥理研究表明清熱化濕調(diào)樞方組成藥物所提取的單體及有效成分所具有的抑制UC腸黏膜炎癥反應(yīng)的潛在機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Th17/Treg平衡有關(guān)。王小婷等[21]發(fā)現(xiàn)烏梅提取物可通過抑制小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)來延緩蓖麻油致腹瀉小鼠的初次腹瀉時(shí)間、減少稀便次數(shù)。LIN H H等[22]研究表明，白芍中提取的總苷可通過調(diào)節(jié)相關(guān)細(xì)胞因子的產(chǎn)生來緩解UC腸黏膜的損傷，并能降低UC大鼠的Th17相關(guān)細(xì)胞因子IL-17和TNF-α水平，增加Treg相關(guān)細(xì)胞因子TNF-β、IL-10的水平，抑制Th17細(xì)胞的效應(yīng)表型和促進(jìn)Treg反應(yīng)，從而達(dá)到調(diào)節(jié)平衡的作用。白芍與當(dāng)歸配伍可增強(qiáng)機(jī)體免疫力，降低血液黏稠度，促進(jìn)氧自由基清除[23]?；菀愕萚24]研究證實(shí)，黃連有效成分小檗堿的治療作用機(jī)制可能與通過抑制Notch通路從而有效修復(fù)UC小鼠受損的結(jié)腸黏膜有關(guān)。王鳳云等[25]發(fā)現(xiàn)，敗醬草總皂苷減少中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)達(dá)到治療作用的機(jī)制與降低UC大鼠結(jié)腸病變黏膜組織的丙二醛（MDA）水平及髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性，升高超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）水平相關(guān)。因此，調(diào)節(jié)免疫平衡、抑制腸黏膜炎癥反應(yīng)亦是清熱化濕調(diào)樞方干預(yù)過程中的靶點(diǎn)。

綜上所述，清熱化濕調(diào)樞方能有效改善DSS誘導(dǎo)的UC小鼠一般情況并恢復(fù)結(jié)腸形態(tài)，降低組織病理學(xué)評(píng)分，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)Treg/Th17免疫失衡狀態(tài)有關(guān)。但中藥復(fù)方治療UC的機(jī)制復(fù)雜，清熱化濕調(diào)樞方對(duì)Treg/Th17免疫平衡相關(guān)上下游通路細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的影響仍需進(jìn)一步挖掘和驗(yàn)證。后續(xù)研究可通過細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行多組學(xué)驗(yàn)證，豐富清熱化濕調(diào)樞方的干預(yù)機(jī)制研究，從而提供更有力的證據(jù)闡釋該方對(duì)UC的免疫調(diào)節(jié)作用。