黃振強(qiáng),馬亞萍,曲春生,張旭穎,楊景森

呼吸道病毒是指由于侵犯呼吸道所引起的呼吸道或呼吸道外組織器官病變的一大類病毒,是引起呼吸道感染的主要病原體,其它類型的病原體,包括肺炎支原體、肺炎衣原體等,也可引起呼吸道系統(tǒng)感染[1-2]。呼吸道系統(tǒng)感染是人類最常見的傳染病之一,嚴(yán)重的可直接導(dǎo)致患者死亡?？諝鈧鞑ナ瞧渲饕獋鞑ネ緩?具有傳播速度快、傳播能力強(qiáng)、傳播范圍廣等特點(diǎn),極易引起大范圍的暴發(fā)流行。因此,呼吸道病原體的檢測和分型對疾病的診療和防控具有重要的意義。呼吸道病原體抗原或抗體的檢測是實(shí)驗(yàn)室常用的檢測方法,但是免疫學(xué)方法由于特異度和靈敏度的局限性,以及與患者的免疫狀態(tài)關(guān)聯(lián)性較大,檢測結(jié)果常給臨床造成困擾[3]。實(shí)時(shí)熒光PCR法具有高靈敏度和特異度,但單次檢測能夠鑒定的病原體種類較少,不利于呼吸道病原體的鑒定與分型。PCR毛細(xì)電泳片段分析法在保留PCR高靈敏度和特異度的基礎(chǔ)上,可同時(shí)鑒定多種呼吸道病原體,提高檢測效率。本研究回顧性分析2020年3月至2021年12月麗水市人民醫(yī)院接診的4035例患者13項(xiàng)呼吸道病原體感染情況,以了解本市呼吸道病原體感染現(xiàn)狀,為臨床診療和疾病防控提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 對象 回顧性分析2020年3月至2021年12月麗水市人民醫(yī)院就診的4035例呼吸道感染患者的鼻咽拭子呼吸道病原體PCR毛細(xì)電泳檢測結(jié)果,年齡1月至107歲不等,其中男性2408例,女性1627例。呼吸道感染診斷按照《內(nèi)科學(xué)》[4]診斷標(biāo)準(zhǔn):出現(xiàn)噴嚏、咳嗽、鼻塞、咽喉痛癢干等癥狀的患者或者體溫＞38℃的發(fā)熱患者,就診前患者未服用藥物。

1.2 方法 采集患者鼻咽拭子,利用寧波海爾施公司提供的核酸提取或純化試劑盒(貨號:1060132)及全自動核酸提取儀SLA-32(臺灣圓點(diǎn)奈米公司)提取核酸,采用PCR毛細(xì)電泳片段分析法,利用寧波海爾施公司生產(chǎn)的13種呼吸道病原體多重檢測試劑盒(貨號:1060071)進(jìn)行PCR擴(kuò)增并通過T400 Sabger測序儀(寧波海爾施公司)進(jìn)行呼吸道病原體的檢測與分型。同時(shí)檢測人源RNA和DNA以監(jiān)控樣本檢測質(zhì)量,人源RNA或DNA為陰性時(shí)需重新進(jìn)行采樣復(fù)檢。通過毛細(xì)電泳標(biāo)準(zhǔn)品判斷檢測結(jié)果,判斷標(biāo)準(zhǔn):擴(kuò)增產(chǎn)物目的位點(diǎn)峰高度低于標(biāo)準(zhǔn)品低峰時(shí)判斷為陰性;高于標(biāo)準(zhǔn)峰高峰時(shí)判斷為陽性;高于標(biāo)準(zhǔn)品低峰而低于標(biāo)準(zhǔn)品高峰時(shí)判斷為灰區(qū),需重新進(jìn)行檢測,若仍為灰區(qū)時(shí)則判斷為陽性。所有操作均按照試劑盒及儀器說明書進(jìn)行。13項(xiàng)呼吸道病原體包括呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)、肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,Mp)、衣 原 體(chlamydia,Ch)、甲型流感病毒(influenza A virus,Inf A)、甲型H1N1流感病毒(influenza A virus H1N1)、甲型H3N2流感病毒(influenza A virus H3N2)、冠狀病毒(human coronavirus,HCo V)、乙型流感病毒(influenza B virus,Inf B)、鼻病毒(human rhinovirus,HRV)、副流感病毒(human parainfluenza virus,HPIV)、偏肺病毒(human metapneumovirus,HMPV)、腺病毒(human adenovirus,HADV)、博卡病毒(bocavirus,Boca)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)利用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道各類病原體感染情況 4035例就診患者中共檢出陽性1301例,陽性檢出率為32.24%。各類呼吸道病原體檢出情況見表1。檢出率前5位分別 是HRV(16.60%)、HRSV(7.09%)、HPIV(2.87%)、HMPV(2.21%)、HADV(1.96%)。

2.2 混合感染情況 1301例陽性病例中,99例檢測出2種及以上病原體,混合感染在陽性病例占比為7.61%。其中雙重感染93例,三重感染6例,混合感染以HRV＋Boca及HRSV＋HRV為主,見圖1。在13項(xiàng)呼吸道病原體中,Boca(76.0%)發(fā)生混合感染率最高,其次為Ch(46.15%),見表2。

表2 呼吸道病毒混合感染率Tab.2 Rates of mixed respiratory pathogen infections

圖1 陽性比例中混合感染組合類型及分布Fig.1 Types and distribution of mixed infections

2.3 不同性別13項(xiàng)呼吸道病原體感染情況 2408例男性患者13項(xiàng)呼吸道病原體總檢出陽性797例(33.10%),1627例女性患者總檢出陽性505例(30.98%),二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2＝1.999,P＞0.05)。各類病原體在不同性別人群感染率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

2.4 不同季節(jié)13項(xiàng)呼吸道病原體感染情況 不同季節(jié)13項(xiàng)呼吸道病原體整體感染差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2＝1.607,P＝0.658),但HRSV、HRV、HPIV、HMPV及HADV在不同季節(jié)感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HRSV在春季感染率較低;與HPIV相反,HRV好發(fā)于春秋兩季;HMPV在冬季較為流行;春冬兩季比夏秋兩季更適宜HADV的流行。見表1。

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2.5 不同年齡段13項(xiàng)呼吸道病原體感染情況 未成年人較其它3個(gè)年齡段人群的13項(xiàng)呼吸道病原體整體感染率增高(χ2＝439.514,P＜0.001)。與整體感染率相似,未成年人群中HRSV、HRV、HPIV、HADV和Boca等呼吸道病原體感染率也高于其它3個(gè)年齡段(P＜0.001),提示未成年人是這類呼吸道病原體易感人群;InfB和HMPV在未成年和青年人群感染率高于中年和老年人群(P＜0.01);其它類型呼吸道病原體感染率在不同人群中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

3 討論

本研究主要利用PCR毛細(xì)電泳片段分析法進(jìn)行13項(xiàng)呼吸道病原體檢測與分型。4035例就診患者檢出陽性1301例,陽性檢出率為32.24%,HRV(16.60%)、HRSV(7.09%)、HPIV(2.87%)、HMPV(2.21%)和HADV(1.96%)是本市主要流行的呼吸道病原體,陽性檢出率與國內(nèi)一些報(bào)道相似,但主要流行病原體存在差異,可能與氣候、檢測人群、檢測方法等因素有關(guān)[5-7]。呼吸道病原體發(fā)生混合感染現(xiàn)象較普遍,陽性占比為7.61%,低于上海市[8]、常熟市[9]近年混合感染率。本市Boca病毒極易發(fā)生混合感染,其陽性占比為76.0%,其次為Ch(46.15%),與常熟地區(qū)[9]主要發(fā)生HMPV混合感染不同。

本研究中,男、女呼吸道病原體整體陽性率分別為33.10%和30.58%,二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與內(nèi)江市[10]等地區(qū)結(jié)果一致,同樣,各類病原體在不同性別人群感染率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。通常認(rèn)為,秋冬季是呼吸道疾病高發(fā)季節(jié)[11-12],但我們發(fā)現(xiàn)不同季節(jié)呼吸道病原體總體感染率并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,可能是由于不同病原體最適傳播季節(jié)不同從而降低了整體感染率季節(jié)間的差異性。通過進(jìn)一步分析,我們發(fā)現(xiàn)HRSV、HRV、HPIV、HMPV及HADV在不同季節(jié)感染率存在顯著差異,與HPIV相反,HRV在春秋兩季感染率較高,HRSV在春季感染率最低,HMPV在冬季感染率最高,HADV在春冬兩季感染率要高于夏秋兩季,揭示了這些病原體流行季節(jié)差異性造成了不同季節(jié)呼吸道病原體總體感染率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。未成年人群中HRSV、HRV、HPIV、HADV、Boca、Inf B和HMPV等呼吸道病原體檢出率較高,導(dǎo)致整體檢出率也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于中、青年人群及老年人群,與何義林[13]、李云[14]等研究結(jié)果相一致。這可能與未成年人群免疫系統(tǒng)不完善、生活衛(wèi)生習(xí)慣較差、人群聚集導(dǎo)致易于病原體傳播等因素相關(guān)[15],因此,未成年人群為呼吸道病原體易感人群,應(yīng)加強(qiáng)未成年人群呼吸道疾病的防控。

綜上所述,本研究系統(tǒng)性分析了本市近2年呼吸道病原體感染情況,進(jìn)一步加深對本市呼吸道病原體傳播特征的認(rèn)識,有助于呼吸道疾病的臨床診斷和用藥,從而為呼吸道疾病診療和防控提供一定的參考依據(jù)。由于時(shí)間跨度、受試人群、檢測方法、檢測病原體種類等方面的不同,尤其是某些呼吸道病原體會在特定年份發(fā)生暴發(fā)性流行,本研究結(jié)果與其它地區(qū),甚至本市以往研究結(jié)果存在一定的差異性,但是在一定程度上仍能反應(yīng)本市呼吸道病原體流行特征及變化情況,后續(xù)將加大時(shí)間跨度、擴(kuò)大受試人群繼續(xù)研究本市呼吸道病原體流行特點(diǎn),以期為本市呼吸道疾病防控提供更加準(zhǔn)確的參考依據(jù)。

利益沖突:無

引用本文格式:黃振強(qiáng),馬亞萍,曲春生,等.麗水市十三項(xiàng)呼吸道病原體感染情況及特點(diǎn)分析[J].中國人獸共患病學(xué)報(bào),2022,38(10):869-873.DOI:10.3969/j.issn.1002－2694.2022.00.138