蘇立貞，孟 潔,晉 婕,賈萬(wàn)理,楊 陽(yáng),劉羨偉,高 楠

1.西安高新醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，陜西西安 710075；2.西安高新醫(yī)院輸血科，陜西西安 710075；3.西安金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司，陜西西安 710018；4.西安高新醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西西安 710075

子宮內(nèi)膜癌是我國(guó)女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性上皮性腫瘤，發(fā)病率位居生殖系統(tǒng)腫瘤第2位，病死率位居?jì)D科惡性腫瘤第3位，嚴(yán)重威脅我國(guó)女性健康[1]。子宮內(nèi)膜癌早期治療效果較好，但大多數(shù)患者發(fā)病初期癥狀不明顯，容易被忽視，確診時(shí)多已達(dá)到中晚期，常常伴有腹腔轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差[2]。因此尋找早期診斷以及預(yù)后評(píng)估的指標(biāo)對(duì)提高患者治愈率尤為重要。微小核糖核酸-155(miR-155)與子宮內(nèi)膜癌肌層浸潤(rùn)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]；人附睪分泌蛋白4(HE4)與子宮內(nèi)膜癌患者病情進(jìn)展及預(yù)后狀況密切相關(guān)[4]；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者復(fù)發(fā)方面具有較高價(jià)值[5]。本研究主要探討miR-155、HE4、VEGF在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)，并分析其與患者預(yù)后的關(guān)系，旨在為臨床早期診斷及預(yù)后評(píng)估提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究采用回顧性方法，收集2017年1月至2018年12月西安高新醫(yī)院收治的子宮內(nèi)膜癌患者102例作為癌癥組，年齡30～65歲，平均(48.1±8.7)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床資料完整，依從性高；(2)初次確診且符合《子宮內(nèi)膜癌診斷與治療指南(2021年版)》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)術(shù)后組織病理切片檢查證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)嚴(yán)重肝、腎功能受損；(2)預(yù)計(jì)生存期低于6個(gè)月；(3)合并感染性疾?。?4)合并其他生殖系統(tǒng)疾?。?4)合并其他惡性腫瘤；(6)處于妊娠期或哺乳期。對(duì)所有患者進(jìn)行為期3年的隨訪，無(wú)失訪。將出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、死亡情況的患者納入預(yù)后不良組(32例)，其余納入預(yù)后良好組(70例)。另外同期收集100例子宮肌瘤患者作為對(duì)照組，年齡30～65歲，平均(47.8±8.5)歲。兩組研究對(duì)象的一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)西安高新醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2方法 所有入組對(duì)象均空腹8 h以上于次日8點(diǎn)抽取靜脈血3 mL,負(fù)壓吸入紅色無(wú)添加劑干燥試管中，3 000 r/min離心10 min，取上清液保存在-80 ℃超低溫冰箱中待統(tǒng)一檢測(cè)。miR-155采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法進(jìn)行檢測(cè)，儀器為美國(guó)ABI7500型熒光定量PCR儀，試劑盒由生工生物工程(上海)股份有限公司提供，采用2-ΔΔCt算法計(jì)算miR-155相對(duì)表達(dá)水平；HE4、VEGF采用羅氏cobas601電化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1癌癥組和對(duì)照組的miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平比較 癌癥組miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 癌癥組和對(duì)照組的miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平比較

2.2不同預(yù)后子宮內(nèi)膜癌患者miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平比較 預(yù)后不良組miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平均明顯高于預(yù)后良好組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同預(yù)后子宮內(nèi)膜癌患者miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平比較

2.3miR-155、HE4、VEGF對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值分析 繪制ROC曲線得出，miR-155、HE4、VEGF三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的曲線下面積(AUC)為0.900，靈敏度和特異度可達(dá)90.1%、75.2%，優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)的預(yù)測(cè)效能。見(jiàn)表3、圖1。

表3 miR-155、HE4、VEGF對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值比較

圖1 miR-155、HE4、VEGF預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的ROC曲線

2.4影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的多因素Logistic回歸分析 將血清miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平作為自變量，以是否發(fā)生預(yù)后不良為因變量(0代表未發(fā)生，1代表發(fā)生)，建立多因素Logistic回歸模型，結(jié)果顯示，miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平升高是子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

近年來(lái)，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率呈直線增長(zhǎng)的趨勢(shì)，而且發(fā)病年齡逐漸年輕化[7]。早期子宮內(nèi)膜癌預(yù)后較好，晚期預(yù)后較差，5年生存率不足10%[8]。因此，早診斷、早治療對(duì)改善子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后十分重要。但目前早期診斷較為困難，臨床多采用超聲、磁共振成像等技術(shù)來(lái)進(jìn)行診斷，但靈敏度和特異度不是很理想，而血清學(xué)檢測(cè)因具有方便快捷、創(chuàng)傷性小等特點(diǎn)而成為研究的熱點(diǎn)。

微小核糖核酸(miRNA)是由19～24個(gè)核苷酸組成的單鏈非編碼RNA分子，在多種腫瘤中可異常表達(dá)，并參與腫瘤的增殖、分化、凋亡等多種生物學(xué)過(guò)程。miR-155屬于miRNA，在子宮內(nèi)膜癌患者中其相對(duì)表達(dá)水平的升高促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移[9]。HE4是一種新型腫瘤標(biāo)志物,主要由WFDC2基因編碼，在卵巢上皮癌、子宮內(nèi)膜癌中可出現(xiàn)高表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、黏附、增殖、轉(zhuǎn)移等相關(guān)[10]。HE4在診斷子宮內(nèi)膜癌時(shí)靈敏度較高，對(duì)臨床篩查工作具有指導(dǎo)意義[11]。VEGF是一種與血管生長(zhǎng)相關(guān)的特異性生長(zhǎng)因子，主要參與維持血管內(nèi)皮的完整性，促進(jìn)腫瘤血管形成，參與腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移[12]。 在本研究中VEGF水平在子宮內(nèi)膜癌患者血清中明顯升高。分析其原因主要是由于VEGF的高表達(dá)可以提高血管通透性,促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌患者腫瘤內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移,加速腫瘤進(jìn)程[13]。本研究為子宮內(nèi)膜癌的篩查挑選了miR-155、HE4、VEGF這3個(gè)指標(biāo)，再根據(jù)預(yù)后情況進(jìn)行分組，發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良組miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平均明顯高于預(yù)后良好組，推測(cè)這些指標(biāo)與患者預(yù)后密切相關(guān)。繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，三者聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良的靈敏度和特異度可達(dá)90.1%、75.2%，預(yù)測(cè)價(jià)值高于單項(xiàng)檢測(cè)。對(duì)這些指標(biāo)進(jìn)行多因素Logistic回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平上升是子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，再次印證了上述推測(cè)。這與王會(huì)忠等[14]、呂俊杰等[15]的研究結(jié)果一致。

綜上所述，miR-155相對(duì)表達(dá)水平及HE4、VEGF水平在子宮內(nèi)膜癌患者中明顯上升，miR-155相對(duì)表達(dá)水平，以及HE4、VEGF水平上升是患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，三者聯(lián)合檢測(cè)有助于患者預(yù)后評(píng)估。但本次研究屬于回顧性研究，病例均來(lái)自同一醫(yī)院，可能存在選擇偏倚，待日后進(jìn)行前瞻性、多中心研究來(lái)驗(yàn)證此次結(jié)論的正確性。