鄭加銀 孟元華 扎西祝瑪

1.四川省涼山州涼山半細(xì)毛羊原種場，四川布拖 615350；2.四川省涼山州農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川西昌 615000；3.四川省木里縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，四川木里 615800

黃牛人工授精技術(shù)的應(yīng)用為四川省涼山州黃牛養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。為了加速本地黃牛品種改良，切實(shí)改善本地黃牛個體小、生長速度慢、產(chǎn)肉率低的問題，本文將推廣普及黃牛人工授精技術(shù)。

1 黃牛人工授精站（點(diǎn)）建設(shè)

人工授精站（點(diǎn)）的建設(shè)應(yīng)因地制宜，合理布局，充分考慮建站地點(diǎn)的能繁母牛數(shù)量，交通條件，人工授精技術(shù)員配備情況以及建站后的配種效益等。盡量結(jié)合國家建設(shè)項(xiàng)目，解決站（點(diǎn)）凍精來源及購買液氮、液氮罐等運(yùn)行經(jīng)費(fèi)。建在交通方便、能繁母牛相對較多、群眾養(yǎng)牛積極性高、有一定規(guī)模養(yǎng)牛戶的鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）。人工授精技術(shù)員可實(shí)行市場化運(yùn)作方式實(shí)行合理收費(fèi)。

2 黃牛冷凍精液的選擇

2.1 購買正規(guī)公司的冷凍精液

可廣泛收集信息和數(shù)據(jù)，選擇信譽(yù)度高、生產(chǎn)技術(shù)先進(jìn)、冷凍精液品質(zhì)優(yōu)良穩(wěn)定、有國家種畜生產(chǎn)經(jīng)營許可證的正規(guī)養(yǎng)殖公司產(chǎn)品[1]。

2.2 公牛冷凍精液的選擇

所選公牛應(yīng)具有完整的繁殖檔案。如系譜、身體結(jié)構(gòu)評分、育種價值報(bào)告、公牛后代測定、公牛親本表現(xiàn)、遺傳可靠性等，選擇改良效果明顯的育種公牛生產(chǎn)的冷凍精子。

2.3 冷凍精液的質(zhì)量要求

劑量、生產(chǎn)單位、公牛品種、公牛編號、生產(chǎn)日期或批號打印在薄壁管壁上。質(zhì)量要求：劑量≥0.18 mL，精子活力≥0.35，解凍后，具有有效活力的精子數(shù)量≥800 萬，畸形率≤18%。

3 黃牛冷凍精液的保存

3.1 儲 存

用液氮容器儲存，將冷凍精子浸入液氮生物容器中，并在液氮罐中保持足夠的優(yōu)質(zhì)液氮。應(yīng)經(jīng)常檢測并及時添加液氮生物容器中的液氮量，以確保冷凍精子因液氮減少而失效。

3.2 分 裝

冷凍精液儲存在液氮罐中時，應(yīng)采用50～100件/L 的小包裝，以便于取用。

3.3 清 潔

定期對液氮罐進(jìn)行清潔和檢查，一般每年要對液氮罐的內(nèi)罐進(jìn)行清洗1 次，以清除積水和污垢。

3.4 開 罐

打開液氮罐時，罐蓋兒應(yīng)當(dāng)?shù)怪?，以免污染?/p>

4 母黃牛發(fā)情規(guī)律與初配標(biāo)準(zhǔn)

4.1 發(fā)情規(guī)律

黃牛屬于常年發(fā)情的動物，但發(fā)情主要是集中在牧草豐盛、體況良好的夏秋兩季。本地黃牛發(fā)情周期為18～22 d，平均為20 d。

4.2 初配標(biāo)準(zhǔn)

黃牛16～20月齡達(dá)性成熟，母牛體重達(dá)200 kg可初配。經(jīng)產(chǎn)母牛分娩后60～90 d 即可配種[2]。

5 人工授精器械的準(zhǔn)備和消毒

5.1 設(shè)備準(zhǔn)備

人工授精前準(zhǔn)備好：1 個30 L 冷凍精液儲存液氮罐，2 支卡蘇槍，2 個1 000 mL 燒杯，2 個長鑷子，1 個普通顯微鏡，2 個溫度計(jì)，1 把細(xì)管剪刀，工作服，雨鞋，一次性長臂手套，水桶，毛巾，肥皂，消毒棉球等。

5.2 儀器消毒

人工授精前要對卡蘇槍、授精衣、鑷子、小管剪等用臭氧或紫外線消毒0.5～1 h。

6 人工授精的具體操作

6.1 輸精準(zhǔn)備

1）授精員準(zhǔn)備工作。剪去指甲，穿好工作服，清洗雙手并消毒。

2）器械準(zhǔn)備。準(zhǔn)備好卡蘇槍、外套管、細(xì)管剪、燒杯、溫度計(jì)等所需器材，并進(jìn)行無菌清毒處理。

3）做好場地和母牛牛體尤其是外陰部的清冼和消毒工作。

6.2 凍精解凍

在燒杯中裝入300～500 mL 的溫水，水溫控制在38～40 ℃。在液氮罐內(nèi)夾取細(xì)管凍精1 支，放入溫水中晃動10～15 s 取出。用棉球擦拭細(xì)管凍精上的水珠，擦拭好即可使用。取出凍精后，及時蓋上罐塞，防止揮發(fā)和異物落入罐中。

6.3 精子檢查

1）精子活率檢查。精子的活率是指直線前進(jìn)的精子占總精子數(shù)的百分率。在顯微鏡下觀察，全部精子都做直線運(yùn)動評為1 級，90%的精子做直線前進(jìn)運(yùn)動為0.9 級，以下以此類推[3]。

2）精子密度檢查。指每毫升精子的數(shù)量。在顯微鏡下，根據(jù)視野中的精子數(shù)量，可分為致密、中等和稀釋水平。

3）精子質(zhì)量評定。精子活力低于0.35 的精子不能使用。

6.4 輸精時間

輸精一般在母牛發(fā)情開始后4～16 h。主要從母牛的以下3 個方面確定。外部表現(xiàn)：當(dāng)發(fā)情母牛進(jìn)入發(fā)情后期時，母牛變得安靜，食欲逐漸恢復(fù)正常；當(dāng)其它牛爬上去時，臀部避開外陰，腫脹逐漸消退，出現(xiàn)皺紋。黏液：陰道黏膜呈暗紅色，黏液量小，黏液顏色混濁或灰白色。直腸檢查：宮頸由外向內(nèi)逐漸變硬，但有彈性。毛囊壁薄，波動明顯，觸摸時有破裂感。

6.5 輸精次數(shù)

為確保授精成功率，一般一個發(fā)情期可輸精2次，每次間隔時間為8～10 h。如果次日還有發(fā)情表現(xiàn)，應(yīng)進(jìn)行第3 次輸精。

6.6 輸精方法

1）直腸-宮頸灌注。授精人員，一方面通過直腸抓住并固定宮頸；另一方面通過直腸經(jīng)陰道將授精器插入宮頸。

2）直腸深部精子輸送。授精人員，一方面通過直腸固定宮頸；另一方面通過陰道將授精器插入宮頸，到達(dá)卵泡發(fā)育側(cè)的子宮體或子宮角，將精液推入宮頸3～5 cm。

7 人工授精的注意事項(xiàng)

1）切割后（進(jìn)入生殖道前），未經(jīng)消毒，小管內(nèi)精液不得接觸任何物體。

2）如果外陰用清水清洗，必須用0.1%高錳酸鉀溶液清洗。精子輸送槍頭不得接觸被清水污染的外陰。

3）授精槍不得直接面對授精人員的身體，以免母牛退場時將授精槍直接插入生殖道造成傷害。

4）托起母牛的尾根或后軀，避免意外傷害授精人員。授精后，慢慢拔出授精槍，捏陰蒂或腰部中心，使腰部塌陷，防止精液倒流。

5）在授精過程中，記住緩慢插入，適合深度，輕輕注射，緩慢退出，防止流動。插入輸精槍時，先將輸精槍以45 ℃的角度斜向上插入10～15 cm，然后平行向前插入，直至到達(dá)宮頸。

6）注意保護(hù)自身安全，避免被牛踢。

7）配種后隨時記錄配種結(jié)果。

8 結(jié) 語

采用人工授精技術(shù)，可克服因本地黃母牛個體小直配困難、公母牛所處地域相距過遠(yuǎn)、精液保存時間短等問題，同時可提高受胎率，降低不孕率，防止疾病傳播，提高肉牛養(yǎng)殖的水平和質(zhì)量，大幅增加養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)收入。