劉夢(mèng)陽(yáng)，李海勇，郭燕，張富賡，劉征堂

1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院老年病科（北京100091）；2.蘇州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院康復(fù)科（蘇州215101）；3.北京香山社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心中醫(yī)科（北京100093）；4.天津市環(huán)湖醫(yī)院藥劑科（天津 300350）

糖尿病腎臟?。╠iabetic kidney disease，DKD）是由糖尿病導(dǎo)致的慢性腎臟疾病（chronic kidney disease，CKD），是目前引起終末期腎臟疾病（End-stage renal disease，ESRD）最主要的原因[1]。文獻(xiàn)報(bào)道我國(guó)2 型糖尿病患者DKD患病率為20%～40%[2-3]；與不合并DKD的糖尿病病人相比，DKD病人死亡率更高。

糖尿病腎臟病屬于中醫(yī)“水腫”、“關(guān)格”范疇。中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院老年病科自2型糖尿病作為臨床路徑以來(lái)，通過(guò)不斷梳理，經(jīng)層次聚類(lèi)和復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)分析得到：糖尿病由早中期進(jìn)展至晚期，病性由實(shí)轉(zhuǎn)虛、病位由上中二焦轉(zhuǎn)向下焦，核心處方由以清利濕熱、涼血散瘀、疏達(dá)上中二焦郁滯的“桑蠶飲”（科室另一自擬方）過(guò)渡到以補(bǔ)腎填精、利濕化濁為法的六味地黃湯類(lèi)方?？剖易詳M仙芪消渴飲，針對(duì)糖尿病腎功能受損這一并發(fā)癥療效顯著[4]。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以網(wǎng)絡(luò)靶標(biāo)為核心，對(duì)藥物與疾病的機(jī)制性關(guān)聯(lián)進(jìn)行系統(tǒng)化、可視化地揭示解構(gòu)；因其研究思路和學(xué)科特點(diǎn)與中醫(yī)藥整體觀念不謀而合，故近年來(lái)已被廣泛應(yīng)用于中藥研發(fā)[5-6]。分子對(duì)接是將配體分子置于受體分子活性位點(diǎn)區(qū)域并通過(guò)幾何互補(bǔ)、能量互補(bǔ)等原則找到二者的最佳結(jié)合模式[7]。本研究擬借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接法探索仙芪消渴飲治療糖尿病腎臟病的核心藥效團(tuán)及其作用機(jī)制，以期為優(yōu)化臨床路徑、經(jīng)典名方再開(kāi)發(fā)提供循證醫(yī)學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 活性成分收集和靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

應(yīng)用數(shù)據(jù)庫(kù)TCMSP（http://tcmspw.com/tcmsp.php）以藥物口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%，類(lèi)藥性（drug-likeness，DL）≥0.18 作為篩選條件，依次搜索仙芪消渴飲中的10味中藥得到各自的活性成分；再通過(guò)文獻(xiàn)挖掘予以補(bǔ)充后查詢出相應(yīng)靶點(diǎn)信息。

1.2 確定DKD相關(guān)靶點(diǎn)

1.2.1 提取基因芯片樣本信息 登錄GEO數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/），輸入“diabetic kidney disease”進(jìn)行檢索，篩選出同時(shí)含有DKD 腎組織和對(duì)照腎組織的人源基因芯片并從中提取樣本數(shù)據(jù)。

1.2.2 獲取差異基因（DEGs）序列 首先，通過(guò)Perl腳本將DKD 相關(guān)基因芯片的樣本數(shù)據(jù)分組條理化；之后在R3.6.2 環(huán)境下，按照P.Val＜0.05、|log2（FC）|＞0.5 的條件依托Bioconductor（www.bioconductor.org/）功能包篩選出DKD 腎組織較對(duì)照腎組織顯著上調(diào)、下調(diào)的差異基因序列，合為DKD 相關(guān)靶點(diǎn)；同時(shí)繪制相應(yīng)的熱圖和火山圖。

1.3 創(chuàng)建“中藥復(fù)方成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)”

利用韋恩圖（Venn Diagram）確定仙芪消渴飲治療DKD的潛在作用靶點(diǎn)，即二者靶點(diǎn)之交集。通過(guò)Cyto?scape3.7.2軟件將“中藥復(fù)方成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)”可視化。

1.4 分析靶蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

利用Cytoscape3.7.2 插件Bisogenet 構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（protein-protein interaction，PPI）；CytoNCA 插件對(duì)其進(jìn)行拓?fù)浞治?，先后點(diǎn)擊Centralities 下“degree（DC）”、analyze、DC＞61 和Centralities 下“Betweeness（BC）”、analyze、BC＞600，得到PPI核心網(wǎng)絡(luò)。

1.5 挖掘PPI核心網(wǎng)絡(luò)功能模塊

利用MCODE插件的聚類(lèi)算法尋找基因簇，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)PPI 核心網(wǎng)絡(luò)的模塊化分析。在操作過(guò)程中分別設(shè)定“Degree Cutoff”、“Node Score Cutoff”、“K-Core”和“Max.Depth”，依次為2、0.2、5、100。

1.6 GO功能富集分析及KEGG通路富集分析

運(yùn)行R3.6.2軟件以P＜0.05作為靶基因篩選條件，借助Bioconductor 功能包實(shí)現(xiàn)GO 和KEGG 分析；同時(shí)根據(jù)P.adjust分別繪制柱狀圖和氣泡圖。

1.7 分子對(duì)接

選取PPI 核心網(wǎng)絡(luò)中Degree 參數(shù)大于中位數(shù)且與顯著性較強(qiáng)的富集分析結(jié)果密切相關(guān)的重要靶點(diǎn)（HSP90AA1、CDK2、ESR1、MDM2）作為蛋白受體，相應(yīng)的藥物成分（槲皮素、熊竹素、食脂素、木犀草素）作為配體。分別應(yīng)用PDB（http://www.rcsb.org/）和Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）篩選出靶點(diǎn)蛋白三維結(jié)構(gòu)和藥物成分二維結(jié)構(gòu)。運(yùn)用PyMol 軟件刪除靶點(diǎn)蛋白三維結(jié)構(gòu)上的水分子及小分子配體并保存為pdb 格式。運(yùn)行ChemBio3D 軟件將藥物成分二維結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)換為三維結(jié)構(gòu)并對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化（選擇“calcula?tions”-“MM2”-“Minimize Energy”-“Run”），保存為mol2 格式。應(yīng)用AutoDock 軟件將二者轉(zhuǎn)化為PDBQT格式并確定活性口袋。最后使用Vina軟件進(jìn)行分子對(duì)接，利用Pymol軟件將對(duì)接結(jié)果可視化。

2 結(jié)果

2.1 仙芪消渴飲活性成分收集和靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果

經(jīng)篩選仙芪消渴飲各中藥所含活性成分分別為山藥16 個(gè)、山茱萸20 個(gè)、熟地2 個(gè)、牡丹皮11 個(gè)、茯苓15個(gè)、澤瀉10 個(gè)、黃芪20 個(gè)、仙靈脾（淫羊藿）23 個(gè)、北沙參8個(gè)、甘草92個(gè)；在剔除重復(fù)項(xiàng)后共得到193個(gè)活性成分，按照OB 值由高至低排序后選取前20 項(xiàng)結(jié)果展示見(jiàn)表1。通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)搜索后共得到潛在靶點(diǎn)245個(gè)，部分靶標(biāo)展示見(jiàn)表2。

表1 仙芪消渴飲部分活性成分基本信息Table 1 Active ingredients in Xianqixiaoke Decoction

表2 仙芪消渴飲部分靶點(diǎn)基本信息Table 2 Targets of Xianqixiaoke Decoction

2.2 DKD相關(guān)靶點(diǎn)

2.2.1 基因芯片篩選結(jié)果與樣本數(shù)據(jù) 研究共納入樣本69例，其中實(shí)驗(yàn)組（DKD 腎組織）19 例、對(duì)照組50例；源自GEO數(shù)據(jù)庫(kù)DKD基因芯片（編號(hào)：GSE30122）。

2.2.2 差異基因（DEGs）序列的確定 經(jīng)篩選共得到638個(gè)差異基因，將該差異基因序列確定為DKD 相關(guān)靶點(diǎn)，所繪制的差異熱圖，見(jiàn)圖1（圖中僅顯示前20 位上調(diào)和下調(diào)基因）和差異火山圖，見(jiàn)圖2。

圖1 差異基因熱圖Figure 1 Heat map of DEGs

圖2 差異基因火山圖Figure 2 Volcano plot of DEGs

2.3 “中藥復(fù)方成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)”構(gòu)建結(jié)果

仙芪消渴飲治療DKD 的潛在作用靶點(diǎn)共24個(gè)，見(jiàn)圖3。

圖3 藥物靶點(diǎn)-疾病靶點(diǎn)韋恩圖Figure 3 Venn diagram of drug target-disease target

圖4 為經(jīng)Cytoscape3.7.2 軟件可視化處理后的“中藥復(fù)方成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)”圖，即中藥復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖，它共包含124個(gè)節(jié)點(diǎn)、167條邊：其中24個(gè)天藍(lán)色三角形節(jié)點(diǎn)代表24 個(gè)靶基因；另外100 個(gè)不同顏色的節(jié)點(diǎn)代表來(lái)自不同中藥且與靶基因相關(guān)聯(lián)的活性成分，綠色代表“甘草”、黃色代表“黃芪”、粉色象征“牡丹皮”、灰色視為“山藥”、紫色表示“山茱萸”、棕色視為“仙靈脾”、紅色則象征多種中藥共同所有；“多藥共有”成分集中在槲皮素（quercetin）為甘草、仙靈脾、黃芪、牡丹皮、北沙參共有，山萘酚（kaempferol）為甘草、仙靈脾、黃芪、牡丹皮共有，芒柄花黃素（formononetin）、異鼠李素（isorhamnetin）、毛蕊異黃酮（calycosin）、熊竹素（jaranol）均為甘草、黃芪共有，常春藤甙元（heder?agenin）為黃芪、茯苓共有，豆甾醇（stigmasterol）為山茱萸、熟地、北沙參、茯苓共有，食脂素（DFV）為甘草、仙靈脾共有。

圖4 中藥復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖Figure 4 Interaction network diagram of Chinese herbal compound

2.4 靶蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析

在Bisogenet 插件中導(dǎo)入仙芪消渴飲與DKD 共有的24個(gè)蛋白基因，初步得到一個(gè)包括1 761個(gè)節(jié)點(diǎn)、36 776 條邊的PPI 網(wǎng)絡(luò)；運(yùn)行CytoNCA 插件先后按DC＞61、BC＞600 對(duì)其進(jìn)行拓?fù)浞治?，分別創(chuàng)建出包括378個(gè)節(jié)點(diǎn)、13 690條邊和包括44個(gè)節(jié)點(diǎn)、454條邊的兩個(gè)新的子網(wǎng)絡(luò)，后者即PPI核心網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖5。

圖5 PPI 網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治鯢igure 5 Network topology analysis of PPI

2.5 PPI核心網(wǎng)絡(luò)模塊化分析

通過(guò)MCODE插件圍繞PPI核心網(wǎng)絡(luò)挖掘提煉出2 個(gè)關(guān)鍵的功能模塊，見(jiàn)圖6。

圖6 PPI核心網(wǎng)絡(luò)的2個(gè)功能模塊Figure 6 Two functional modules of PPI core network

2.6 富集分析

GO分析具體結(jié)果見(jiàn)圖7～9：功能模塊1BP共涉及90 個(gè)條目，主要包括蛋白酶體介導(dǎo)泛素依賴(lài)的蛋白質(zhì)分解代謝過(guò)程（proteasome?mediated ubiquitin?depen?dent protein catabolic process）、蛋白酶體蛋白質(zhì)分解代謝過(guò)程（proteasomal protein catabolic process）、細(xì)胞對(duì)胞外刺激的反應(yīng)（cellular response to extracellular stimu?lus）、有絲分裂細(xì)胞周期中的G1/S信號(hào)轉(zhuǎn)換機(jī)制（G1/S transition of mitotic cell cycle）、對(duì)由IRE1介導(dǎo)的未折疊蛋白反應(yīng)的調(diào)控（regulation of IRE1?mediated unfolded protein response）；CC共涉及17個(gè)條目，主要包括COP9信號(hào)復(fù)合體（COP9 signalosome）、黑色素體（Melano?some）、色素粒（pigment granule）、黏附斑（focal adhe?sion）、細(xì)胞-基底黏著連接（cell ?substrate adherens junction）、細(xì)胞-基質(zhì)間連接（cell?substrate junction）、cullin-環(huán)泛素連接酶復(fù)合物（cullin?RING ubiquitin li?gase complex）；MF 共涉及12 個(gè)條目，主要包括細(xì)胞粘附分子結(jié)合（cell adhesion molecule binding）、泛素蛋白連接酶結(jié)合（ubiquitin protein ligase binding）、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合（ubiquitin?like protein ligase binding）、參與蛋白質(zhì)折疊的蛋白質(zhì)結(jié)合（protein binding involved in protein folding）、錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)結(jié)合（misfolded pro?tein binding）。

圖7 GO生物過(guò)程分析（前20）Figure 7 GO biological process analysis（top 20）

功能模塊2BP得到535條結(jié)果，主要包括對(duì)未折疊蛋白的反應(yīng)（response to unfolded protein）、DNA 損傷檢控點(diǎn)（DNA damage checkpoint）、DNA 完整性檢控點(diǎn)（DNA integrity checkpoint）、細(xì)胞周期過(guò)程的負(fù)向調(diào)節(jié)（negative regulation of cell cycle process）；CC 共涉及36個(gè)條目，主要包括富含纖維膠凝蛋白-1的顆粒腔（fico?lin?1?rich granule lumen）、分泌顆粒腔（secretory gran?ule lumen）、細(xì)胞質(zhì)囊腔（cytoplasmic vesicle lumen）、囊泡腔（vesicle lumen）；MF共涉及65個(gè)條目，主要包括無(wú)序域特異性結(jié)合（disordered domain specific binding）、泛素蛋白連接酶結(jié)合（ubiquitin protein ligase binding）、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合（ubiquitin?like protein ligase binding）。

KEGG 分析結(jié)果，見(jiàn)圖10：功能模塊1 共富集6 條通路，主要包括細(xì)胞分裂周期（Cell cycle）、泛素介導(dǎo)的蛋白水解作用（Ubiquitin mediated proteolysis）、PI3KAkt信號(hào)通路（PI3K?Akt signaling pathway）；功能模塊2共富集28 條通路，主要包括前列腺癌（Prostate can?cer）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白加工（Protein processing in endoplas?mic reticulum）、甲狀腺激素信號(hào)通路（Thyroid hormone signaling pathway）、細(xì)胞分裂周期（Cell cycle）、PI3KAkt信號(hào)通路（PI3K?Akt signaling pathway）。

圖8 GO細(xì)胞組分析（前20）Figure 8 GO cellular component analysis（top 20）

圖9 GO分子功能分析（前20）Figure 9 GO molecular function analysis（top 20）

圖10 KEGG分析（前20）Figure 10 KEGG analysis（top 20）

2.7 分子對(duì)接驗(yàn)證

如表3 所示，仙芪消渴飲藥效分子與蛋白靶標(biāo)（HSP90AA1、CDK2、ESR1、MDM2）的最低結(jié)合能均小于0，說(shuō)明配體與受體均可以自發(fā)結(jié)合、形成最佳復(fù)合體。仙芪消渴飲可通過(guò)調(diào)節(jié)以上靶標(biāo)發(fā)揮治療作用。分子對(duì)接模式，見(jiàn)圖11。

圖11 仙芪消渴飲分子對(duì)接模式圖Figure 11 Molecular docking diagram of Xianqixiaoke Decoction

表3 仙芪消渴飲有效成分分子對(duì)接結(jié)果Table 3 Molecular docking results of active ingredients of Xianqixiaoke Decoction

3 討論

仙芪消渴飲共涉及193 個(gè)活性成分、24 個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)。對(duì)從PPI 核心網(wǎng)絡(luò)中挖掘出的2 個(gè)模塊進(jìn)行富集分析剔除重復(fù)項(xiàng)后發(fā)現(xiàn)：GO 分析共得到588 個(gè)生物學(xué)過(guò)程、47 個(gè)細(xì)胞組分、72 個(gè)分子功能；KEGG 分析共富集30 條通路。由此可見(jiàn)，仙芪消渴飲通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路對(duì)糖尿病腎臟病進(jìn)行干預(yù)。

從中藥復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)可以看出，仙芪消渴飲中與作用靶點(diǎn)密切相關(guān)的核心藥物為甘草、仙靈脾、黃芪、山藥。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道甘草及其有效成分可對(duì)糖尿病腎臟病起到一定防治作用：甘草的醇和水提取物都能對(duì)抗高糖刺激所誘導(dǎo)的腎小球系膜細(xì)胞過(guò)度增殖并易化腎小球系膜細(xì)胞基質(zhì)降解[8]；甘草酸不僅能抑制氧化應(yīng)激、減少腎臟細(xì)胞凋亡，還可通過(guò)調(diào)控轉(zhuǎn)化因子-β1/Smads 信號(hào)通路抑制高糖誘導(dǎo)的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白在腎小球和腎小管間質(zhì)中的過(guò)度沉積，延緩DKD 進(jìn)展[9-10]；而甘草次酸在降低血糖、血脂、改善腎功能的同時(shí)下調(diào)腎組織層黏連蛋白、α-平滑肌蛋白的表達(dá)從而改善系膜區(qū)纖維化及腎小管萎縮[11]。仙靈脾及其有效成分可通過(guò)上調(diào)內(nèi)皮NO合成酶發(fā)揮松弛血管、抑制血小板聚集和在一定程度上遏止血管平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖的作用[12]，還能明顯改善慢性腎功能不全的癥狀與相關(guān)生化指標(biāo)，其作用機(jī)制可能為①通過(guò)上調(diào)腎組織中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶水平，下調(diào)丙二醛水平，減輕氧化應(yīng)激損傷；②通過(guò)下調(diào)白介素1β、白介素6及單核細(xì)胞趨化蛋白-1水平，下調(diào)炎癥反應(yīng)水平；③通過(guò)下調(diào)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、磷酸化p65 表達(dá)，阻止腎組織纖維化；④下調(diào)caspase-3 表達(dá)，抑制腎組織細(xì)胞凋亡[13]。目前已證實(shí)黃芪有利于糖尿病病人糖原合成、改善胰島素抵抗，使機(jī)體血糖維持穩(wěn)定；在此基礎(chǔ)上，楊麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)黃芪可改善腎組織免受過(guò)度表達(dá)的內(nèi)皮素-1 和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 的破壞作用，從而抑制腎小球硬化及基質(zhì)堆積；宋恩峰等[15]研究發(fā)現(xiàn)黃芪能抑制2型糖尿病腎病大鼠的腎臟肥大及腎臟局部腫瘤壞死因子-α和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)，從而減少蛋白尿。山藥及其有效成分不僅增加胰島素分泌、改善受損胰島β細(xì)胞功能，還對(duì)腎功能有一定保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抑制高糖激活的醛糖還原酶/P38絲裂原活化蛋白激酶/環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白信號(hào)通路有關(guān)[16]。

磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B（Phosphoinositide 3 Kinese/Protein KinaseB，PI3K/AKT）信號(hào)通路參與調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、凋亡、分化[17]。PI3K 被激活后轉(zhuǎn)變成第二信使磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸（PIP3），PIP3進(jìn)而將AKT 活化為磷酸化AKT（p-AKT），p-AKT 可通過(guò)阻斷促凋亡分子Bad 與Bcl-2/Bcl-xL 結(jié)合而抑制細(xì)胞凋亡[18]。研究表明在糖尿病腎病進(jìn)程中，通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K/Akt 通路活性，不僅能夠改善腎臟足細(xì)胞表型、減輕足細(xì)胞損傷，還能在一定程度上抑制系膜細(xì)胞增生，[19]。

研究證實(shí)，亞臨床甲狀腺功能減退是糖尿病腎病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[20]。伴有亞臨床甲狀腺功能減退的老年糖尿病病人糖尿病腎病發(fā)生率更高，并與促甲狀腺素水平呈正相關(guān)；適度補(bǔ)充左旋甲狀腺素片，可減少蛋白尿，讓糖尿病腎病進(jìn)程減緩。[21]

泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（ubiquitin-proteasome-system，UPS）是一種能量依賴(lài)性、高度選擇性地調(diào)控蛋白質(zhì)降解的重要系統(tǒng)[22]，又稱(chēng)泛素蛋白酶體通路。研究發(fā)現(xiàn)絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1泛素化降解增加可使絲裂原活化蛋白激酶通路脫磷酸化減少、磷酸化增強(qiáng)，導(dǎo)致該通路持續(xù)活化、腎臟損傷加重，由此提示UPS參與了糖尿病腎病的發(fā)生[23]。

在GO 功能分析結(jié)果中，“IRE1介導(dǎo)的未折疊蛋白反應(yīng)的調(diào)節(jié)”“對(duì)未折疊蛋白的反應(yīng)”等條目均與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）密切相關(guān)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)的重要細(xì)胞器，參與各種蛋白的加工合成。在高血糖、氧化應(yīng)激、脂質(zhì)代謝障礙狀態(tài)下未折疊蛋白增多，當(dāng)超過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的處理能力時(shí)導(dǎo)致ERS 從而誘發(fā)未折疊蛋白反應(yīng)[24]。IRE1為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ⅰ型跨膜蛋白，ERS發(fā)生時(shí)IRE1α磷酸化，一方面通過(guò)激活轉(zhuǎn)錄因子X(jué)BP-1S，誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶GRP78/CHOP 的表達(dá)，增加蛋白質(zhì)的折疊能力，恢復(fù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)正常功能，促進(jìn)細(xì)胞生存；另一方面，持續(xù)的ERS可啟動(dòng)IRE1α-JNK通路介導(dǎo)細(xì)胞凋亡[25-26]。此外，相關(guān)研究表明與靶蛋白相結(jié)合的可能藥效分子槲皮素、熊竹素、食脂素、木犀草素均具有一定腎臟保護(hù)作用。槲皮素不僅能調(diào)節(jié)血糖還可減輕腎小球足細(xì)胞損傷[27]；而其通過(guò)抑制高糖引起的氧化應(yīng)激來(lái)保護(hù)腎單位的機(jī)制與木犀草素有異曲同工之妙[28-29]。熊竹素作用于細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶2（CDK2），CDK2表達(dá)異常與腎小球系膜細(xì)胞增殖、腎小球硬化有關(guān)[30]。食脂素可與雌激素受體（ESR1）結(jié)合，借助激素發(fā)揮調(diào)節(jié)腎素-血管緊張素系統(tǒng)、改善腎臟缺血狀態(tài)、減輕炎性反應(yīng)、抗凋亡、維持線粒體穩(wěn)態(tài)等功效[31]。

4 結(jié)論

本研究解析了仙芪消渴飲治療糖尿病腎臟病是通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路起效的可能作用機(jī)制，認(rèn)為其核心藥效團(tuán)主要通過(guò)泛素-蛋白酶體系統(tǒng)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、PI3K-Akt信號(hào)通路、甲狀腺激素信號(hào)通路等途徑發(fā)揮腎臟保護(hù)作用，進(jìn)而為提高臨床療效及經(jīng)典名方再開(kāi)發(fā)提供了循證醫(yī)學(xué)支撐。

（利益沖突：無(wú)）