黃德喜， 黃 麗， 張 宏， 程二銀， 羅小寶

(安徽省銅陵市立醫(yī)院檢驗(yàn)科， 安徽 銅陵 244000)

細(xì)菌感染是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)急性加重的主要原因，在細(xì)菌感染刺激下，支氣管黏膜上皮細(xì)胞變性、壞死，杯狀細(xì)胞增多肥大，基底膜變厚壞死，支氣管壁伴隨炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，急性發(fā)作期可見(jiàn)到大量中性粒細(xì)胞[1]。隨著氣道炎癥加重，肺組織彈性阻力減弱，動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性降低，通氣換氣功能發(fā)生障礙。隨著近年來(lái)抗菌藥的濫用，細(xì)菌譜不斷改變，耐藥菌株也逐漸增多[2]，這給COPD感染防控與治療帶來(lái)極大挑戰(zhàn)。本研究分析我院近年來(lái)COPD患者的細(xì)菌群譜及藥敏結(jié)果，為臨床合理用藥與治療提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料：回顧性分析2018年1月至2022年6月我院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)病區(qū)212例COPD患者的痰培養(yǎng)資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合COPD的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；②處于COPD急性發(fā)作期；③痰培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性，明確檢出致病菌。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肺炎；②痰培養(yǎng)前使用過(guò)抗菌藥治療。男163例，女49例；年齡55～91歲，平均(76.12±8.84)歲。

1.2方 法

1.2.1菌株培養(yǎng)與鑒定：在患者清晨起床時(shí)，采集深咳后咳出的痰液標(biāo)本，痰液量>1mL，使用專門的痰液采集瓶，立即送檢。接種于血平板，麥康凱平板和巧克力平板，培養(yǎng)箱的溫度在35～37℃、75%濕度下培養(yǎng)48h。使用VITEK 2-compact微生物鑒定系統(tǒng)(梅里埃公司)進(jìn)行菌株鑒定，真菌用顯色培養(yǎng)基和顯微鏡鏡檢進(jìn)行鑒定。

1.2.2藥敏試驗(yàn)：采用瓊脂擴(kuò)散法(K-B法)，藥敏試紙購(gòu)自英國(guó)OXOID公司。藥敏結(jié)果判讀參考美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(clinical and laboratory standards institute，CLSI)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(CLSI M100-2018)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：使用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)數(shù)資料以n(%)表示進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。

2 結(jié) 果

2.1痰培養(yǎng)病原菌分布特征：本研究痰培養(yǎng)標(biāo)本共分離出212株病原菌，其中革蘭氏陰性菌111株(52.36%)，革蘭氏陽(yáng)性菌9株(4.24%)，真菌92株(43.40%)。革蘭氏陰性菌中，銅綠假單胞菌占比例最高(23.11%)，其次為大腸埃希菌(8.02%)、肺炎克雷伯菌(7.55%)等。革蘭氏陽(yáng)性菌中，肺炎鏈球菌占比例最高(1.89%)，其次為溶血葡萄球菌(1.41%)、金黃色葡萄球菌(0.94%)。真菌中，白色念珠菌占比例最高(40.09%)，其次為光滑念珠菌(1.89%)、熱帶念珠菌(0.94%)、煙曲霉菌(0.47%)。病原菌分布特征見(jiàn)表1。

表1 212株病原菌分布特征

2.2病原菌耐藥性分析：銅綠假單胞菌49株中共檢出CRPAE 7株，占比14.29%。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌對(duì)粘菌素100%敏感，對(duì)其他抗菌藥存在一定程度的耐藥，耐藥率為6.12%～28.57%，具體見(jiàn)表2。

表2 銅綠假單胞菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果n(%)

表3 大腸埃希菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果n(%)

表4 克雷伯菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果n(%)

2.3大腸埃希菌17株中檢出ESBLs大腸埃希菌12株，占比70.59%。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，大腸埃希菌對(duì)美羅培南、替加環(huán)素100%敏感，對(duì)亞胺培南、厄他培南的敏感率為94.12%，對(duì)頭孢哌酮、頭孢他啶、左氧氟沙星、頭孢噻肟、頭孢曲松、氨芐西林舒巴坦的耐藥率為58.82%～100%，對(duì)阿米卡星、頭孢西丁、阿莫西林克拉維酸的耐藥率為5.88%～47.06%，具體見(jiàn)表3。

2.4克雷伯桿菌17株中共檢出肺炎克雷伯桿菌16株(其中產(chǎn)ESBLs的克雷伯桿菌4株)、產(chǎn)酸克雷伯桿菌1株，藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，克雷伯桿菌對(duì)阿米卡星、美羅培南、替加環(huán)素、厄他培南100%敏感，對(duì)頭孢吡肟的敏感率為88.24%，對(duì)氨曲南、哌拉西林、慶大霉素、頭孢呋肟、頭孢哌酮、頭孢西丁、頭孢他啶、左氧氟沙星、氨芐西林舒巴坦的耐藥率為11.76%～29.41%，具體見(jiàn)表4。

2.5革蘭氏陽(yáng)性菌中溶血葡萄球菌、金黃色葡萄球菌均為MRS，藥敏結(jié)果具體見(jiàn)表5。

表5 革蘭氏陽(yáng)性菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 討 論

COPD是一種氣流受限不完全可逆、呈進(jìn)行性發(fā)展的呼吸道疾病，該病與氣道炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，氣道炎癥導(dǎo)致支氣管纖毛功能障礙，粘液腺肥大，氣道纖維化，肺泡破壞，肺泡彈性回縮力喪失[4]。本研究分析COPD細(xì)菌群譜特征，痰培養(yǎng)標(biāo)本結(jié)果顯示，革蘭氏陰性菌占比例最高，這與既往研究[5]報(bào)道相符。另外，本研究還可見(jiàn)少量嗜麥芽窄食單胞菌、陰溝腸桿菌、檸檬酸桿菌等。本研究藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌對(duì)粘菌素100%敏感，對(duì)其他抗菌藥的耐藥率為6.12%～28.57%；大腸埃希菌對(duì)美羅培南100%敏感，對(duì)亞胺培南、厄他培南的敏感率為94.12%，說(shuō)明其對(duì)碳青霉烯類有著較好的敏感性，這與Flannery等[6]、Damiano等[7]研究報(bào)道相符；克雷伯桿菌對(duì)阿米卡星、替加環(huán)素、厄他培南100%敏感，對(duì)其他抗菌藥的耐藥率為11.76%～29.41%。黃琪等[8]研究分析COPD對(duì)肺部感染病原菌分布與耐藥性的影響，發(fā)現(xiàn)肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢呋辛、氨芐西林/舒巴坦耐藥率較高；銅綠假單胞菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、妥布霉素的敏感性較好。王姣等[9]研究分析194株COPD感染菌株，革蘭氏陰性菌56.19%，其中肺炎克雷伯菌占比例最高，對(duì)亞胺培南、阿米卡星敏感，另外革蘭陽(yáng)性菌占24.23%，真菌占19.59%。

在革蘭氏陽(yáng)性菌中，主要檢出肺炎鏈球菌、溶血葡萄球菌和MRSA，占比例均較小，這與Wang等[10]研究報(bào)道相符。MRSA是一種高度耐藥菌，藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)呋喃妥因、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺敏感，與既往文獻(xiàn)[11]報(bào)道相符，臨床上可以應(yīng)用呋喃妥因、萬(wàn)古霉素、利奈唑胺藥物治療。習(xí)靜等[12]研究發(fā)現(xiàn)，COPD病原菌均以革蘭陰性菌為主，包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌等，真菌主要為白念珠菌，對(duì)伏立康唑敏感。本研究發(fā)現(xiàn)，COPD患者真菌感染比例為43.40%，檢出率偏高，其中主要為白色念珠菌。近年來(lái)也有文獻(xiàn)[13,14]報(bào)道，COPD伴隨真菌感染的比例呈增多趨勢(shì)，分析原因：COPD患者多為老年患者，免疫力較低，本研究數(shù)據(jù)中多數(shù)患者病程達(dá)十年以上，曾多次使用抗生素及激素治療，可能是革蘭陽(yáng)性菌檢出率占比較小和真菌檢出率偏高的原因。白色念珠菌為機(jī)會(huì)致病性真菌，在患者免疫力下降或應(yīng)用糖皮質(zhì)激素時(shí)侵襲感染。

綜上所述，COPD致病菌以革蘭氏陰性菌為主，主要為銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯桿菌，建議臨床參照藥敏試驗(yàn)結(jié)果給藥；COPD患者中真菌的感染的比例呈增多趨勢(shì)，應(yīng)引起臨床注意。