杜海琳，谷曉陽，李嘉珊

1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院，北京 100080 2首都醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)人文學(xué)院，北京 100069 3北京中醫(yī)藥大學(xué)護(hù)理學(xué)院，北京 102488

在臨床生物化學(xué)(下文簡稱“生化”)領(lǐng)域，F(xiàn)olin-Wu法(又稱“福林-吳憲法”)是血糖測定的經(jīng)典方法之一。該方法于1920年問世，由美國生化學(xué)家奧托·福林(Otto Folin)和我國生化學(xué)家吳憲聯(lián)合發(fā)明?？茖W(xué)界普遍認(rèn)為該方法是吳憲早年間的代表性研究成果，亦是我國科學(xué)家在世界生化史上的杰出貢獻(xiàn)之一[1]。醫(yī)學(xué)界、醫(yī)學(xué)史學(xué)界有關(guān)吳憲和生化史的研究中常提及這一方法的重大意義[2- 8]。但關(guān)于Folin-Wu法發(fā)明的具體歷史過程、當(dāng)時學(xué)術(shù)界給出的評價和反饋以及身為福林博士生的吳憲在這一研究中的學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)，目前尚無系統(tǒng)考證資料可循。

考慮到Folin-Wu法的影響力和吳憲在中國醫(yī)學(xué)界的學(xué)術(shù)地位，筆者認(rèn)為，對Folin-Wu法的歷史進(jìn)行研究很有必要。通過查閱福林、吳憲等人的原始論文及相關(guān)史料，本文梳理了Folin-Wu法的發(fā)明和完善過程，以及當(dāng)時學(xué)界圍繞其產(chǎn)生的學(xué)術(shù)爭論，希望能夠以此為例探討科學(xué)家良性競爭合作對學(xué)術(shù)發(fā)展的影響。此外，筆者亦希望能夠在史料研究的基礎(chǔ)上，客觀評價Folin-Wu法的影響和吳憲在此方法發(fā)明過程中的學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)，豐富相關(guān)醫(yī)學(xué)史研究。

1 Folin-Wu法誕生的背景

1.1 血糖和尿糖測定簡史

早在公元前1500年前后，埃及的醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中即對糖尿病有所記載[9]。后世醫(yī)生對糖尿病的癥狀有許多描述，記錄了患者尿液嘗起來發(fā)甜、能夠吸引螞蟻等現(xiàn)象。17世紀(jì)，英國醫(yī)生托馬斯·威利斯(Thomas Willis)推測，糖尿病患者尿中的糖最初來源于血液[10]。18世紀(jì)，英國醫(yī)生馬修·多布森(Matthew Dobson)對糖尿病患者的血液和尿液進(jìn)行了檢測，發(fā)現(xiàn)糖尿病患者尿液蒸餾后會有糖存留，并確定尿中的糖來自血液[11]。雖然許多醫(yī)學(xué)家懷疑糖尿病患者的血糖和尿糖升高，但由于不了解這種糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)，一直無法進(jìn)行測定。直至1815年，法國化學(xué)家米歇爾·謝弗勒爾(Michel Chevreul)從糖尿病患者的尿中分離出糖，并指出其化學(xué)性狀類似于葡萄糖，才為后來的生化檢測奠定了基礎(chǔ)[12]。1841年，德國化學(xué)家埃爾哈德·米切利希(Eilhard Mitscherlich)發(fā)現(xiàn)，將含有氫氧化鈉和硫酸銅的溶液與尿液共同加熱至沸騰，若尿液中含有還原性物質(zhì)(如葡萄糖、乳糖、果糖等)，就會生成淡黃色或淡紅色沉淀[13]。1848年，德國化學(xué)家赫爾曼·馮·斐林(Hermann von Fehling)在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出由氫氧化鈉、硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制而成的試劑(后稱“斐林試劑”)，用于檢測尿液中的葡萄糖[13]。19世紀(jì)末，數(shù)位生化學(xué)家先后提出了適于實(shí)驗(yàn)室開展的血糖測定方法，其原理大多與斐林的實(shí)驗(yàn)類似(基于對還原性物質(zhì)的檢測推測血糖含量)，但所需血量較大，定量測量的準(zhǔn)確性也有限[14]。

1908年，年僅24歲的美國生化學(xué)家斯坦利·本尼迪克特(Stanley Benedict)在斐林試劑的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出了一種新的尿糖檢測試劑，即現(xiàn)在為醫(yī)學(xué)生所熟知的“本尼迪克特試劑”，其中包含硫酸銅、檸檬酸鈉和碳酸鈉。本尼迪克特指出，碳酸鹽對葡萄糖的破壞性明顯小于斐林試劑中的氫氧化銅試劑[6]。這種方法的原理依然是還原性物質(zhì)檢測，但對尿中葡萄糖含量測定的敏感性顯著高于其他方法，因此成為當(dāng)時臨床檢測中應(yīng)用最廣的方法[13]。

20世紀(jì)初，糖尿病的臨床治療尚無有效辦法，主要依靠飲食限制。醫(yī)生們迫切需要一種便捷的血糖測定方法以了解患者的血糖情況。1913年，美國著名糖尿病學(xué)家弗雷德里克·艾倫(Frederick Allen)在《關(guān)于糖尿和糖尿病的研究》(StudiesConcerningGlycosuriaandDiabetes)一書中呼吁，“在臨床實(shí)踐中，需要一種快速、準(zhǔn)確的血糖測定方法。”[15]正是在這樣的歷史背景下，美國生化學(xué)界頗有聲名的福林和本尼迪克特都投身到了血糖檢測方法的研究之中。而二者的學(xué)術(shù)競爭，不僅成為他們科研生涯中的一個重要主題，也間接推動了Folin-Wu法的誕生和完善。

1.2 福林與本尼迪克特的競爭

福林是20世紀(jì)美國生化學(xué)史上最著名的生化學(xué)家之一，也被稱為美國第一個臨床生化學(xué)家。他1867年出生在瑞典南部，1892年獲得明尼蘇達(dá)大學(xué)學(xué)位后，進(jìn)入芝加哥大學(xué)攻讀有機(jī)化學(xué)專業(yè)的研究生。此時歐洲的生理化學(xué)(physiological chemistry)領(lǐng)域正蓬勃發(fā)展，福林決定前往歐洲學(xué)習(xí)此方面的知識。1897—1898年，福林先后跟隨德國生化學(xué)家恩斯特·薩爾科夫斯(Ernst Salkowski)、阿爾布雷希特·科塞爾 (Albrecht Kossel)學(xué)習(xí)。他在德國了解了用于釀酒業(yè)的比色新技術(shù)，掌握了最新版比色計(jì)的用法，這成為其后來設(shè)計(jì)生化檢測中比色方法的基礎(chǔ)。1898年，福林返回芝加哥并獲得了博士學(xué)位。1904年，福林就職于麥克萊恩醫(yī)院(McLean Hospital)期間，提出可使用簡單比色法(simple colorimetric method)定量測定尿液中肌酐的含量。他利用尿肌酐與堿性環(huán)境中的苦味酸離子在室溫下反應(yīng)變紅的性質(zhì)，將尿肌酐的量與紅色的深淺建立相關(guān)性，再用比色計(jì)比較顏色的深淺度，從而得出較為準(zhǔn)確的定量結(jié)果。將比色計(jì)應(yīng)用于尿肌酐定量分析這一舉措，極大地推進(jìn)了臨床血液生化檢測方法的發(fā)展[3]。1905年，福林在《美國生理學(xué)雜志》(AmJPhysiol)接連發(fā)表3篇論文，描述了尿液中尿素、氨、肌酸、肌酐和尿酸的分析方法，這些文章及其中分析方法的日益普及為福林贏得了巨大學(xué)術(shù)聲譽(yù)[16]。1907年，他被哈佛大學(xué)任命為生化系教授，并于1909年成為系主任[3]。

20世紀(jì)初期，臨床糖尿病學(xué)家呼吁發(fā)明更快速準(zhǔn)確的血糖測定法[17]。同時，福林也意識到尿液分析的局限性——在人體新陳代謝研究領(lǐng)域，與其研究經(jīng)腎臟排泄出的代謝產(chǎn)物，不如直接研究血液中的生化成分。他隨后改進(jìn)了用來定量測量尿肌酐的比色法，使其適用于血液中各項(xiàng)生化指標(biāo)的檢測。1914年，福林首次公開發(fā)表此種分析方法，得到了廣泛好評[18]。

但彼時身為康奈爾大學(xué)醫(yī)學(xué)院生化教授的本尼迪克特卻對福林的方法提出了批評。本尼迪克特發(fā)現(xiàn)，當(dāng)應(yīng)用福林的比色法測定尿液中的尿素含量時，隨著尿素分解成氨和二氧化碳，一些肌酐和尿酸也發(fā)生了分解，生成相同的產(chǎn)物。這證明，以福林方法測得的尿素值高于實(shí)際尿素值。本尼迪克特對此進(jìn)行了深入研究，設(shè)計(jì)出了一種特異性更強(qiáng)的檢測方法，使測得的尿素含量更接近真實(shí)值。接下來的幾年里，每當(dāng)福林研究出一種分析方法，本尼迪克特就會對其研究進(jìn)行審視和批判，在一些重要細(xì)節(jié)上進(jìn)行改進(jìn)[18]。

同樣，福林也在不斷批評本尼迪克特的方法。本尼迪克特在1908年改進(jìn)的銅還原法是20世紀(jì)初應(yīng)用最廣泛的尿糖定量檢測方法，但缺陷為尿液中存在干擾葡萄糖定量檢測的物質(zhì)，此類物質(zhì)可促進(jìn)銅還原，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏高[6]。當(dāng)時許多生化學(xué)家都想解決這一問題，剔除這類物質(zhì)的干擾，降低測定結(jié)果，福林也不例外。1915年，福林發(fā)表了1篇關(guān)于尿糖含量測定的論文，指出本尼迪克特的方法及當(dāng)時其他方法的準(zhǔn)確度均不夠高，并提出引入苦味酸來沉淀尿中存在的肌酐等還原性物質(zhì)，該法不僅可減少對堿性銅試劑的還原作用，敏感度亦明顯提升[19]。

就在福林提出引入苦味酸的同時，本尼迪克特也決定應(yīng)用苦味酸法測定血糖。1913年，本尼迪克特和生化學(xué)家羅伯特·劉易斯(Robert Lewis)共同發(fā)表了1篇使用苦味酸法估算少量血液中血糖含量的論文。文章指出，當(dāng)葡萄糖與苦味酸、碳酸鈉共熱時溶液變紅，可利用此顯色反應(yīng)進(jìn)行比色，從而估計(jì)血液中葡萄糖的含量。隨后幾年，本尼迪克特及其團(tuán)隊(duì)在此基礎(chǔ)上不斷改進(jìn)，發(fā)表了以改進(jìn)版苦味酸法測定血糖和尿糖的一系列論文[6]。

福林對血糖測定的探索也未曾停止。早在1912年，他閱讀了1篇以磷鎢和磷鉬酸化合物作為顯色劑的論文，便以此為基礎(chǔ)開啟了進(jìn)一步研究[20]。同年，福林及其助手、美國生化學(xué)家威利·丹尼絲(Willey Denis)共同研制出了一種Folin-Denis試劑。該試劑由鎢酸鈉、磷鉬酸、磷酸組成，用于測量血液中的非蛋白含氮物質(zhì)[20]。在考察本尼迪克特的苦味酸測血糖法研究之后，福林思考：能否在此基礎(chǔ)上，再作一些改進(jìn)呢？正是該研究思路，催生了Folin-Wu法。

2 Folin-Wu法的發(fā)明

福林把改進(jìn)本尼迪克特苦味酸測血糖法的研究任務(wù)指派給了自己的博士研究生吳憲。吳憲出生于中國福州的一個書香門第。1911年，他懷揣著投身中國海軍的夢想，遠(yuǎn)赴重洋，進(jìn)入麻省理工學(xué)院學(xué)習(xí)造船工程。機(jī)緣巧合之下，他閱讀了托馬斯·赫胥黎(Thomas Huxley)的《生命的物質(zhì)基礎(chǔ)》(OnthePhysicalBasisofLife)等一系列論文，遂對生命科學(xué)產(chǎn)生興趣，于是轉(zhuǎn)而攻讀化學(xué)和生物學(xué)。1916年獲得學(xué)士學(xué)位后，他考入哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院，進(jìn)入福林的實(shí)驗(yàn)室，開始對血糖測定進(jìn)行研究[7]。

吳憲和福林最初的想法是對本尼迪克特的苦味酸鹽測血糖法作一些改進(jìn)，但在多次實(shí)驗(yàn)后卻發(fā)現(xiàn)Folin-Denis試劑與苯酚混合后，可與氧化亞銅發(fā)生強(qiáng)烈而穩(wěn)定的顯色反應(yīng)，這遠(yuǎn)比通過苦味酸反應(yīng)得到的顏色明顯。而用于還原的溶液，是一種對微量糖極為敏感的堿性酒石酸銅試劑(由碳酸鈉、酒石酸和硫酸銅組成)，不受肌酸或尿酸的影響。除此之外，為了進(jìn)一步提高測量的準(zhǔn)確度，福林與吳憲還研制出了一種鎢酸濾血法來沉淀血液中的蛋白質(zhì)。此過程無須加熱，也不存在過量酸的加入，可產(chǎn)生接近于中性的濾液。如此，便可排除血液中的蛋白對試劑氧化還原反應(yīng)的干擾，從而降低測量誤差。這種濾過血液中蛋白質(zhì)的方法是臨床生化研究發(fā)展的里程碑，其不僅可用于血糖測定，還可廣泛應(yīng)用于血液中肌酐、尿酸、非蛋白氮和氯化物等的測定[3]。福林和吳憲把自己的檢測結(jié)果和苦味酸法測得的數(shù)值進(jìn)行比較，認(rèn)為“相較于現(xiàn)存的測血糖法，我們的方法最為準(zhǔn)確”[21]。

1919年，該研究成果發(fā)表于《生物化學(xué)雜志》(JBiolChem)，其中對血糖含量的測定方法，便是Folin-Wu法的雛形。而文章中呈現(xiàn)的豐富、精確的研究細(xì)節(jié)，也被后世學(xué)者視為福林生化研究風(fēng)格的典型代表[16]。

本尼迪克特密切關(guān)注著福林和吳憲的研究進(jìn)展。二人的文章發(fā)表后不久，美國生化學(xué)家協(xié)會年會召開。在此次會議上，本尼迪克特公開指出了Folin-Wu法的缺陷，“這種方法存在大量的、不可避免且不可控制的亞銅再氧化”，即在實(shí)驗(yàn)的過程中，銅離子被葡萄糖還原所生成的亞銅離子又會被空氣中的氧氣重新氧化成銅離子，使實(shí)際測得的亞銅離子量變少，導(dǎo)致血糖測定值不準(zhǔn)確[6]。

吳憲立刻著手解決本尼迪克特提出的問題?？紤]到導(dǎo)師福林與本尼迪克特學(xué)術(shù)上的爭端，他在研究出確切的改進(jìn)方法前并未告訴福林，直到獨(dú)立完成改進(jìn)工作后才向福林匯報[7]。1920年，吳憲和福林在《生物化學(xué)雜志》上再次發(fā)文，文中對本尼迪克特的批評作出了詳細(xì)回應(yīng)。首先，他們承認(rèn)在實(shí)驗(yàn)過程中的確存在亞銅再氧化現(xiàn)象，但指出該問題所造成的誤差并不會太大。其次，針對再氧化問題，他們設(shè)計(jì)出了一種特殊試管(圖1)，即Folin-Wu式血糖管，以最大程度降低亞銅再氧化的發(fā)生，這種試管至今仍在生化實(shí)驗(yàn)中使用。他們還在文章中寫道，“我們很感謝本尼迪克特先生，因?yàn)橛心?，我們得以重新審視自己的研究方法?！盵22]

圖1 1920年的Folin-Wu式血糖管[22]

同時，吳憲還獨(dú)立提出了Folin-Denis與苯酚混合試劑的改進(jìn)版本，該試劑由磷酸、鎢酸鈉和鉬酸組成，可在酸性環(huán)境下與亞銅離子反應(yīng)[7]。原試劑中由于堿性酒石酸銅顯藍(lán)色，而酚試劑顯黃色，在進(jìn)行比色定量時會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。但新試劑為比色反應(yīng)提供了弱酸性環(huán)境，無酒石酸銅(堿性)生成，且無酚類物質(zhì)參與反應(yīng)，故誤差減小[22]。這使得Folin-Wu法得到了進(jìn)一步完善，測得的血糖值更加準(zhǔn)確。

1925年，本尼迪克特對改進(jìn)后的Folin-Wu法又提出了新的批評。他提出了一種改良版的銅還原測血糖法——在堿性銅試劑中加入亞硫酸氫鈉。當(dāng)用此法測定血糖時，得到的結(jié)果數(shù)值明顯低于Folin-Wu法，“新方法測得的數(shù)據(jù)始終是Folin-Wu法的1/3左右”，也就是說比Folin-Wu法更準(zhǔn)確[6]。此外，本尼迪克特還批評了Folin-Wu式血糖管。他認(rèn)為，可用普通的試管代替Folin-Wu式血糖管，只需用惰性氣體取代試管內(nèi)的空氣，并用棉塞封閉試管口就可以得到同樣的效果[23]。

1926年，福林發(fā)表了《測定血液和正常尿液中糖含量》(TheDeterminationofSugarinBloodandinNormalUrine)一文，該文對Folin-Wu法的堿性酒石酸銅試劑改進(jìn)方法進(jìn)行描述，并反駁了本尼迪克特的看法。福林指出，“銅試劑中碳酸鈉的存在給銅還原反應(yīng)營造了一種過強(qiáng)的堿性環(huán)境”，且葡萄糖在堿性溶液中性質(zhì)不穩(wěn)定，會與堿性試劑緩慢發(fā)生反應(yīng)，由此他在原始試劑的基礎(chǔ)上加入了堿性更弱的碳酸氫鈉，組成了一種新型的弱堿性酒石酸銅試劑。這種測試方法的適用范圍很廣，可用來測定血糖和尿糖[24]。同時，文章中提到，他重復(fù)了本尼迪克特的實(shí)驗(yàn)，認(rèn)為沒有證據(jù)能證明本尼迪克特新方法測得的血糖值低于Folin-Wu法，且本尼迪克特改進(jìn)時使用的亞硫酸氫鹽性質(zhì)不穩(wěn)定，會自發(fā)氧化成硫酸鹽[24]。而關(guān)于Folin-Wu式血糖管，福林寫道，“我們試驗(yàn)過本尼迪克特提出的方法，但并沒有效果，因此才設(shè)計(jì)出了Folin-Wu式血糖管。”[24]

面對福林的回應(yīng)，本尼迪克特承認(rèn)亞硫酸氫鹽的不穩(wěn)定性，他表示，“很抱歉在這點(diǎn)上犯錯誤”，但接著又指出了福林這篇新文章中的錯誤——改良版銅試劑無法用于測定尿糖含量。本尼迪克特將定量的葡萄糖加入尿液中，并應(yīng)用福林改進(jìn)后的Folin-Wu法測定尿糖，“添加的40 mg葡萄糖中損失了約25%。顯然，改進(jìn)后的Folin-Wu法不適用于尿液中糖含量的測定。”福林也最終屈服并接受了本尼迪克特的批評，認(rèn)可“以此種方法測量尿糖含量誤差很大?！盵6]

至此，福林和本尼迪克特圍繞測血糖法持續(xù)了近10年的爭論終于落下帷幕。在雙方不斷的切磋交流中，F(xiàn)olin-Wu法也在不斷完善(表1)，成為了如今我們熟知的血糖測定方法。

表1 Folin-Wu法的主要試劑及改進(jìn)過程

3 Folin-Wu法的影響

此前，學(xué)術(shù)界和大眾媒體評價Folin-Wu法時，經(jīng)常引用生化學(xué)家汪猷的說法：“學(xué)術(shù)界認(rèn)為，如果沒有吳憲先生的血糖測定方法，胰島素的發(fā)現(xiàn)就會受到阻礙?！盵25]筆者對史料的考察基本佐證了這一觀點(diǎn)，并補(bǔ)充了一些細(xì)節(jié)。Folin-Wu法對當(dāng)時學(xué)界產(chǎn)生的最大影響，體現(xiàn)在如下兩點(diǎn)。

3.1 鎢酸濾血法極大改進(jìn)了血液生化檢測的方法學(xué)

Folin-Wu法相較于當(dāng)時其他測血糖法，尤為突出的優(yōu)點(diǎn)便是其中鎢酸濾血法的提出。利用鎢酸沉淀血液中的蛋白質(zhì)，以此制備無蛋白濾液，便避免了血液中多種蛋白質(zhì)的存在對實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性造成的影響。這對于當(dāng)時正蓬勃發(fā)展的臨床血液分析研究來說，是強(qiáng)有力的助推劑[3]。這種濾血方法廣泛應(yīng)用于世界各地的實(shí)驗(yàn)室，直至20世紀(jì)50年代后期才被自動分析儀所取代[3]。當(dāng)此法與福林所研究的比色法配合應(yīng)用時，還可用于檢測其他微量代謝產(chǎn)物，這是臨床生化發(fā)展史上的里程碑事件[4]。此外，福林和來自瑞典隆德大學(xué)的哈克文·馬爾姆羅斯(Haqvin Malmros)在1929年發(fā)表的微量測血糖法(Folin-Malmros法)也是基于這種無蛋白濾液設(shè)計(jì)出的。這種方法用α-氨基聯(lián)苯試劑代替堿性硫酸銅和酸性鉬酸鹽，如此便排除了除葡萄糖外的其他還原物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)的影響，極大提高了血糖測量的準(zhǔn)確性，也被視為非常優(yōu)秀的臨床測血糖法[26]。

3.2 Folin-Wu法助力了胰島素的臨床試驗(yàn)

胰島素研發(fā)的早期動物實(shí)驗(yàn)是由弗雷德里克·班廷(Frederick Banting)和查爾斯·貝斯特(Charles Best)在多倫多大學(xué)完成的。在動物實(shí)驗(yàn)中，貝斯特負(fù)責(zé)血糖測定，他采用了邁爾斯-貝利法(Myers-Bailey method)測血糖，這種方法首次發(fā)表于1916年，是本尼迪克特和劉易斯于1913年設(shè)計(jì)出的血糖測定法的改良版本[27]。醫(yī)史學(xué)家邁克爾·布利斯(Michael Bliss)在其著作《胰島素的發(fā)現(xiàn)》(TheDiscoveryofInsulin)一書中對此方法評價道：“這種方法的存在使1919年的動物實(shí)驗(yàn)更易進(jìn)行，跟以前比起來，只需很少量的血液樣品，便可測量血糖?！盵28]而在胰島素研究后期，加拿大的生化學(xué)家詹姆斯·科利普(James Collip)加入了多倫多大學(xué)團(tuán)隊(duì)，幫助進(jìn)一步純化牛胰島素提取物。1922年1月，1例糖尿病患兒使用了科利普提純的牛胰島素，血糖在24 h內(nèi)從28.9 mmol/L下降至6.7 mmol/L，尿糖從71 g下降至9 g，酮尿消失[27]。同年2月，6例患者使用了相同的方案進(jìn)行治療，臨床癥狀均得到極大改善。整個臨床試驗(yàn)期間，采用的血糖測量方法即是當(dāng)時較為先進(jìn)的Folin-Wu法[27]。Folin-Wu法僅需少量血液樣本，操作步驟簡單，推動了臨床試驗(yàn)的順利進(jìn)行。胰島素的發(fā)現(xiàn)獲得了1923年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。后來，在班廷的諾貝爾獎演講中，還特意提到了福林和吳憲[29]。

4 吳憲在Folin-Wu法研究中的具體貢獻(xiàn)

吳憲雖然曾在福林指導(dǎo)下攻讀博士學(xué)位，但實(shí)際上是福林的合作者。他主導(dǎo)設(shè)計(jì)了極具突破性的鎢酸濾血法，且在Folin-Wu法的完善過程中，獨(dú)立對其進(jìn)行了一次改進(jìn)和完善[30]。在加入福林實(shí)驗(yàn)室的兩年內(nèi)，吳憲便與福林聯(lián)名發(fā)表了著名的《血液分析系統(tǒng)》一文。該文一經(jīng)發(fā)表，立即引起了生化學(xué)界的極大重視，被認(rèn)為“引起了一場血液化學(xué)方面的革命”[7]。從研究貢獻(xiàn)來看，吳憲完全匹配得上共同命名的榮譽(yù)。與福林齊名的生化學(xué)家唐納德·范·斯萊克(Donald Van Slyke)曾在北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院與吳憲共事，他在晚年回憶起吳憲時，用了這樣一句話來介紹當(dāng)時還年輕的吳憲：“北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的化學(xué)教授是吳憲，就是福林-吳憲法的那個吳憲。”[31]

福林和他身邊的人也高度贊揚(yáng)吳憲的工作。福林對學(xué)生頗為挑剔，但當(dāng)看到吳憲的論文時，激動地說“這值得第二個博士學(xué)位”[4，7]。福林夫人也認(rèn)為，吳憲對福林來講遠(yuǎn)不只是學(xué)生，她評價他們之間的關(guān)系，“不僅是同事，更是朋友”[4]。福林作為20世紀(jì)最著名的生化學(xué)家之一，一生有無數(shù)的學(xué)生和合作者。當(dāng)生化學(xué)界回顧臨床生化史的時候，吳憲被認(rèn)為是福林最杰出的合作者之一[3]。

5 余論

Folin-Wu法是最基礎(chǔ)、最重要的臨床血液生化檢查之一，被廣泛用于全世界的臨床實(shí)驗(yàn)室長達(dá)50年之久。直至20世紀(jì)60年代，在美國臨床化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)方法(Standard Method of Clinical Chemistry)中“Folin-Wu法”和“Nelson Somogyi法”還被同時推薦[32]。后期，酶作為試劑測定血糖的方法有了迅速發(fā)展，“酶法”專一性強(qiáng)，特異性高，結(jié)果準(zhǔn)確，便于在自動生化分析儀上使用。20世紀(jì)90年代末，己糖激酶法逐步替代葡萄糖氧化酶法，成為血糖測定的常用方法[32]。

如今，F(xiàn)olin-Wu法依然是所有醫(yī)學(xué)或生化相關(guān)專業(yè)學(xué)生必學(xué)的重要生化實(shí)驗(yàn)，在生化史上有無可取代的地位。哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的約瑟夫·奧布(Joseph Aub)教授曾評價，“Folin-Wu法的誕生為生化代謝研究開啟了新的篇章”[30]?！渡锘瘜W(xué)雜志》百年紀(jì)念經(jīng)典論文中，就包括吳憲和福林于1919年發(fā)表的《血液分析系統(tǒng)》一文[16]。

在Folin-Wu法的發(fā)現(xiàn)過程中，本尼迪克特與福林之間的學(xué)術(shù)競爭值得一提。在科研過程中，研究者們可能更關(guān)注與自己預(yù)設(shè)結(jié)論相近的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。而學(xué)術(shù)競爭的存在便可糾正這種由研究者個人認(rèn)知所造成的偏差。盡管科學(xué)家潛意識里可能不愿反駁自己的想法，但他們的競爭對手卻樂于為之[33]。正是因?yàn)檫@種學(xué)術(shù)競爭的存在，促使本尼迪克特以批判性眼光一次次檢視Folin-Wu法的準(zhǔn)確性，促使福林和吳憲不斷探索創(chuàng)新。福林和吳憲的“反擊”也不斷把本尼迪克特的研究推向新的高度[18]。1932年，由于福林和本尼迪克特在血液和尿液分析領(lǐng)域的杰出貢獻(xiàn)，二人均獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎提名[34]。

福林和本尼迪克特在學(xué)術(shù)上的長期爭斗不但未造成私人關(guān)系的惡化，反而加深了他們對彼此的敬意。福林去世后，本尼迪克特在給朋友的一封信中寫道：“福林有著讓我十分敬佩的品質(zhì)，當(dāng)遇到涉及科學(xué)領(lǐng)域的分歧時，他能放下個性和情緒，這在科學(xué)研究中是極為罕見的。我認(rèn)識的所有人中，沒有人能如我倆這般在有著激烈學(xué)術(shù)分歧的同時，還保持著25年不變的親密友誼?！盵35]美國生化學(xué)家埃爾默·麥科勒姆(Elmer McCollum)在評價本尼迪克特的科研成果時提到，“本尼迪克特與福林進(jìn)行科學(xué)研究的時段重合且有著相同的研究旨趣。他們彼此促進(jìn)，學(xué)術(shù)生涯緊密關(guān)聯(lián)。”[18]

這段醫(yī)學(xué)史的第三位主角吳憲，不僅主導(dǎo)設(shè)計(jì)了鎢酸濾血法，制作出了無蛋白濾液，還在1920年獨(dú)自改進(jìn)了Folin-Wu法。由其參與設(shè)計(jì)的Folin-Wu式血糖管至今仍在生化實(shí)驗(yàn)室中使用，而這僅僅是他輝煌學(xué)術(shù)生涯的開端。1920年，吳憲義無反顧地選擇回國，任職于北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院(圖2)，并于1924年成為協(xié)和有史以來最年輕的系主任。他在生化領(lǐng)域不斷鉆研，在營養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域作出了卓越貢獻(xiàn)[7- 8]。此外，吳憲還曾指導(dǎo)并參與北京協(xié)和醫(yī)院的臨床血糖檢測，用自己發(fā)明的Folin-Wu法服務(wù)患者(1)筆者參觀北京協(xié)和醫(yī)院第六屆病歷展所見。。

圖2 吳憲在北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的工作照[36]

美國的中國史專家詹姆斯·里爾登-安德森(James Reardon-Anderson)將吳憲譽(yù)為“中國化學(xué)的巨人”，評價道：“毫無疑問，吳憲是20世紀(jì)前半葉中國最偉大的化學(xué)家，或者說是最偉大的科學(xué)家”[7]。吳憲求學(xué)和工作過的兩所機(jī)構(gòu)以相似的方式紀(jì)念著他：哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院設(shè)立了一間以“Folin-Wu”命名的研討室，而北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院在生化系建系100周年之際，以吳憲的名字命名了新的科研大樓。

對于西方科學(xué)界來說，相比于盛名在外的福林，吳憲的名字卻顯得有些陌生?！杜R床化學(xué)》(ClinChem)雜志的副主編托馬斯·安內(nèi)斯利(Thomas Annesley)曾為此專門撰寫1篇文章介紹吳憲的貢獻(xiàn)[5]。正如美國著名生化學(xué)家約翰·埃德索爾(John Edsall)所說：“遺憾的是，今天的許多生化學(xué)家都不知道吳憲的貢獻(xiàn)，他不應(yīng)該被忘記?！盵5]

對吳憲在Folin-Wu法發(fā)明中的貢獻(xiàn)進(jìn)行研究、宣傳，無疑是必要的，而筆者的這次歷史研究正是試圖厘清這一段醫(yī)學(xué)史，對這位偉大生化學(xué)家的早期工作進(jìn)行梳理，對其貢獻(xiàn)進(jìn)行審慎評價，希望能夠?qū)ΜF(xiàn)有的吳憲研究以及生化史研究起到補(bǔ)充作用。

作者貢獻(xiàn)：杜海琳負(fù)責(zé)文獻(xiàn)整理、論文初稿撰寫；谷曉陽負(fù)責(zé)文獻(xiàn)檢索、修訂論文；李嘉珊協(xié)助文獻(xiàn)整理、內(nèi)容校對。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突