劉婕妤 周恩 楊慕 肖禹 秦念 張錕藝 肖旭平

聲音是在大腦皮質(zhì)以及皮質(zhì)下神經(jīng)中樞控制和協(xié)調(diào)下，通過正常的發(fā)聲器官、聽覺系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)共同作用形成的自動(dòng)反饋的發(fā)聲系統(tǒng)產(chǎn)生的[1]。

聲帶由甲杓肌、固有層深層、固有層中層、固有層淺層和鱗狀上皮層組成，固有層深層和固有層中層形成聲韌帶，發(fā)聲主要?dú)w功于固有層，它可以在100～1 000 Hz頻率承受高達(dá)30%的應(yīng)變，并且可以在短暫拉伸后快速恢復(fù)[2]。它主要由細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)組成，如：纖維蛋白(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型膠原蛋白，彈性蛋白)、間質(zhì)分子(糖胺聚糖:透明質(zhì)酸HA、蛋白多糖、糖蛋白)、脂質(zhì)和碳水化合物；在人和動(dòng)物中聲帶固有層三層肉眼下并沒有明顯分開。固有層淺層可以在聲韌帶上自由移動(dòng)，深層膠原蛋白和彈性蛋白越來越密集，固有層中層和固有層深層含有最高濃度的彈性蛋白和膠原蛋白(Ishii等，1996；de Melo等，2003)；由于硬度和粘度增加，聲帶局部瘢痕會(huì)影響?zhàn)つげɑ蚵晭У倪\(yùn)動(dòng)，還會(huì)導(dǎo)致聲門閉合不完全(Benninger等，1996)。硬度和粘度增加的綜合效應(yīng)導(dǎo)致聲帶振動(dòng)減弱，也可致發(fā)聲嘶啞和疲勞(Thibeault等，2002；Sataloff等，2015)?？梢娐晭侨祟惏l(fā)聲的主要結(jié)構(gòu)，從極輕微的聲嘶到完全失聲，多為聲帶病變或其他病因使聲帶的正常運(yùn)動(dòng)發(fā)生障礙所致。美國約3%～9%的人口患有嗓音障礙[3]，老年人嗓音障礙患病率較高[4]。故聲帶損傷后的修復(fù)與再生對臨床以及人類日常生活和社會(huì)交際有重要意義。本文對不同手術(shù)方式及范圍致聲帶損傷后的修復(fù)和再生研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為進(jìn)一步認(rèn)識聲帶損傷及修復(fù)機(jī)制提供參考。

1 不同手術(shù)方式和范圍所致聲帶損傷后的修復(fù)過程

1.1聲帶銳性切除術(shù) 徐文等[5]通過在支撐喉鏡下對兔一側(cè)聲帶行前中部銳性切除，深達(dá)聲韌帶，觀察到在術(shù)后3天～3個(gè)月聲帶固有層內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)分泌增加,主要表現(xiàn)為以膠原為主的纖維組織明顯增多且呈無序排列,透明質(zhì)酸略有增加,纖維連接蛋白明顯增加;在術(shù)后6～12個(gè)月，膠原和纖維連接蛋白含量持續(xù)高于正常,聲帶局部瘢痕形成；而聲帶瘢痕形成則可引起發(fā)聲障礙甚至呼吸障礙，因此，認(rèn)為在聲帶損傷后 3～40天可能是聲帶損傷介入治療的關(guān)鍵時(shí)期，如果能在此時(shí)抑制膠原的沉積，可能會(huì)減少損傷后期聲帶瘢痕的形成。

聲帶損傷的預(yù)后與損傷程度直接相關(guān)。聲帶黏膜上皮層和固有層淺層的損傷愈合后不留瘢痕,因?yàn)楣逃袑訙\層的基質(zhì)中含有許多抗瘢痕形成的物質(zhì),如：透明質(zhì)酸、核心蛋白聚糖和纖維蛋白，透明質(zhì)酸可以抑制成纖維細(xì)胞合成膠原及膠原沉積,核心蛋白聚糖和纖維蛋白可以阻止膠原的形成和膠原纖維的生成(Hedlund等，1994)。而固有層中層以下即聲韌帶甚至聲帶肌受損,愈合過程中纖維組織廣泛增生,排列紊亂,將產(chǎn)生不可逆的瘢痕,導(dǎo)致聲帶黏膜波減弱或缺失及聲門閉合不全,成為影響發(fā)聲的兩個(gè)關(guān)鍵因素[6]。

1.2聲帶CO2激光術(shù) Remacle等(2000年)將內(nèi)鏡下聲帶CO2激光手術(shù)分為I型(聲帶上皮切除術(shù))、Ⅱ型(聲韌帶下聲帶切除術(shù))、Ⅲ型(跨肌肉聲帶切除術(shù))、Ⅳ型(全聲帶切除術(shù))、Ⅴ型(擴(kuò)大聲帶切除術(shù))5種術(shù)式，其中Ⅴ型又分為Ⅴa型：對側(cè)聲帶和前連合；Ⅴb型：杓狀軟骨;Ⅴc型：聲門下；Ⅴd型:喉室。

梁耕田等[7]將4只實(shí)驗(yàn)犬于支撐喉鏡下行Remacle Ⅲ型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，功率為6 W；術(shù)后6 h可見聲帶創(chuàng)面大量炎性細(xì)胞浸潤、紅細(xì)胞滲出，細(xì)胞充血水腫；術(shù)后3周聲帶創(chuàng)面輕度充血水腫及炎性滲出，有成纖維細(xì)胞增生，新生血管形成，大量纖維組織無序排列；術(shù)后8周創(chuàng)面充血水腫消失，局部攣縮凹陷，無粘連和肉芽形成，但各層纖維組織增生紊亂，血管增粗；術(shù)后12周雙側(cè)聲帶表面光滑，局部攣縮，聲帶瘢痕形成，固有層增厚，膠原纖維增多，排列紊亂，呈團(tuán)狀或束狀，纖維間較多不規(guī)則間隙，血管和腺體少見或消失；認(rèn)為損傷后3個(gè)月聲帶瘢痕基本形成。張慶翔等[8]觀察315例聲帶病變行CO2激光術(shù)后患者的聲帶及嗓音恢復(fù)情況，依據(jù)病變類型及范圍行RemacleⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴa型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，每組63例，隨訪6個(gè)月以上；結(jié)果表明：Ⅰ、Ⅱ型手術(shù)后聲帶形態(tài)及功能恢復(fù)較好；Ⅲ型手術(shù)后聲帶的形態(tài)和功能部分恢復(fù)；Ⅳ型及Ⅴa型手術(shù)后患者發(fā)聲功能常難以恢復(fù)；認(rèn)為手術(shù)切除聲帶的范圍與深度是影響術(shù)后聲帶自主修復(fù)的主要因素，如果手術(shù)不涉及聲帶肌，則具備恢復(fù)形態(tài)的框架和基礎(chǔ)；如果聲帶完全切除，則失去了恢復(fù)形態(tài)和功能的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。張燚等[9]將30只實(shí)驗(yàn)犬隨機(jī)分A(CO2功能1 W)、B(CO2功能3 W)、C(CO2功能5 W)、D(CO2功能8 W)、E(冷器械)5組，分別行Remacle I型聲帶CO2激光顯微手術(shù)，觀察到C、D組創(chuàng)面黏膜反應(yīng)較A、B、E組重，創(chuàng)面愈合慢，可見病理性瘢痕；在光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)單位面積內(nèi)纖維細(xì)胞數(shù)量及毛細(xì)血管數(shù)量，C、D組明顯高于A、B、E組；在電鏡下觀察發(fā)現(xiàn)A、B、E組損傷較輕，聲帶修復(fù)過程無明顯差別，而C、D組損傷較重，聲帶修復(fù)后固有層內(nèi)彈力纖維稀少，膠原纖維明顯增多；認(rèn)為采用低功率CO2激光(1～3 W)行聲帶上皮下切除術(shù)，組織修復(fù)結(jié)果與冷器械手術(shù)相似。Shen等[10]對早期聲門型喉癌患者行聲帶CO2激光切除術(shù)，發(fā)現(xiàn)術(shù)后聲帶黏膜愈合過程在形態(tài)學(xué)上分為四個(gè)階段：階段1為創(chuàng)面暴露；階段2為滲出，于創(chuàng)面表面形成白色涂層；階段3為肉芽；階段4為穩(wěn)定的黏膜。認(rèn)為聲帶損傷在滲出和肉芽形成后120天內(nèi)形成新生聲帶，此階段內(nèi)應(yīng)密切監(jiān)測隨訪行喉鏡檢查，若出現(xiàn)異常表現(xiàn)，如：復(fù)發(fā)性白斑、肉芽組織增生或愈合持續(xù)時(shí)間超過4個(gè)月，應(yīng)考慮進(jìn)行干預(yù)。

1.3聲帶低溫等離子射頻消融手術(shù) 低溫等離子射頻消融是一種新型微創(chuàng)手術(shù)技術(shù)，范圍涵蓋口腔及口咽癌、下咽癌以及喉癌等，此類手術(shù)患者的預(yù)后與既往開放手術(shù)及經(jīng)口激光手術(shù)相當(dāng)，但恢復(fù)更快、圍術(shù)期及長期并發(fā)癥發(fā)生率亦極低，且功能保留率極高[11～14]。

2012年Divi等[15]對犬進(jìn)行喉部等離子射頻消融手術(shù)，在術(shù)后0、4、7天摘取喉部觀察，發(fā)現(xiàn)術(shù)后7天創(chuàng)面完全上皮化，未見聲帶肌肉的損傷，炎性反應(yīng)比先前報(bào)道的CO2激光術(shù)后輕，表明該技術(shù)是去除聲帶病損組織的可行方法，可最大限度地減少瘢痕的形成。黃鈞濤等[16]對低溫等離子射頻消融術(shù)和CO2激光手術(shù)治療早期聲門型喉癌效果比較的Meta分析表明，低溫等離子射頻消融術(shù)與CO2激光切除術(shù)都是治療早期聲門型喉癌的有效方式，相較于CO2激光，低溫等離子射頻消融術(shù)手術(shù)時(shí)間更短，術(shù)后嗓音恢復(fù)更好。

2 聲帶瘢痕的形成及分類

聲帶瘢痕主要是聲帶固有層內(nèi)纖維組織沉積而成[17]，其形成影響了發(fā)聲功能和嗓音質(zhì)量。過度用聲、炎性反應(yīng)、特異或非特異性感染、咽喉反流、外傷、腫瘤、化學(xué)刺激等都有可能導(dǎo)致聲帶瘢痕的形成。而聲帶注射、聲帶病變術(shù)后、器械損傷及長期氣管插管等使聲帶受到損傷，也可產(chǎn)生聲帶瘢痕[18]。王玲等[19]認(rèn)為聲帶瘢痕形成的患者主要有2種表現(xiàn)：一是聲音粗糙或出現(xiàn)復(fù)音，檢查可見聲帶表面尚光滑，聲門能閉合，但雙側(cè)聲帶振動(dòng)不對稱，局部振動(dòng)僵硬或可見白色瘢痕區(qū)；二是聲音低弱，發(fā)聲不能持久、乏力，檢查可見聲帶局部白色瘢痕突起，聲帶呈弓形，聲門閉合不全，聲時(shí)縮短。根據(jù)聲帶瘢痕的深度及單雙側(cè)可分為四種類型[20]：①固有層萎縮伴/不伴上皮受累；②上皮層、固有層和肌肉層均受到影響；③聲帶瘢痕位于前聯(lián)合處；④聲帶全長瘢痕形成且嗓音質(zhì)量明顯變差。目前預(yù)防聲帶瘢痕形成的最好的方法是采用適當(dāng)?shù)暮盹@微外科技術(shù)和激光進(jìn)行喉部手術(shù)。

3 聲帶修復(fù)與再生的材料及應(yīng)用

3.1組織工程學(xué)在聲帶修復(fù)與再生中的應(yīng)用 近幾年來組織工程學(xué)在聲帶修復(fù)與再生的研究方向主要集中在模擬天然聲帶組織機(jī)械特性的生物材料、捕捉動(dòng)態(tài)聲帶生物力學(xué)特性的生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)以及這些生物材料在體內(nèi)外的應(yīng)用?；诮M織工程的基本原理，可注射的、有生物活性的和可生物降解的聚合物和水凝膠具有合適的化學(xué)成分、結(jié)構(gòu)特征和特定的機(jī)械性能，已被廣泛應(yīng)用[21]。該材料比傳統(tǒng)的材料植入更具有優(yōu)勢，因?yàn)槠淠茉趽p傷部位固化成任何需要的形狀，且能增強(qiáng)與周圍正常組織的界面交鎖；該方法對患者的侵襲性和潛在創(chuàng)傷最小，限制了感染和繼發(fā)瘢痕形成的風(fēng)險(xiǎn)，簡單易行，患者易接受，降低了治療成本[21，22]。

3.1.1透明質(zhì)酸(HA)及其衍生物 HA是一種天然存在的糖胺聚糖，由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰D-氨基葡萄糖重復(fù)單元組成[23]，它是聲帶中含量最豐富的糖胺聚糖，每毫克總蛋白質(zhì)中約有6 μg透明質(zhì)酸(Hahn等，2008年)，將HA從聲帶中移除會(huì)導(dǎo)致聲帶硬度增加25%～40%(Chan等，2001年)。HA具有生物活性，并與細(xì)胞遷移和傷口愈合有關(guān)。細(xì)胞表面受體CD44(Turley等，1991年)和透明質(zhì)酸介導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)性受體(Krasinski等，2007年)與血凝素結(jié)合，啟動(dòng)炎癥、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞生長等級聯(lián)反應(yīng)，從而在傷口愈合和促進(jìn)瘢痕形成過程中發(fā)揮重要作用[23]。鑒于HA可再生能力的前景，需要關(guān)注的是如何延長其短的半衰期，為了延長其停留時(shí)間，可通過功能化交聯(lián)位點(diǎn)，如：取代HA骨干上的羧基或羥基。

Hylan B凝膠是天然透明質(zhì)酸的衍生物，具有增強(qiáng)流變性、抗降解和促進(jìn)結(jié)締組織向注射部位生長的作用(Hallén等，1999年)。Jahan-Parwar等(2008年)采用CO2激光切除實(shí)驗(yàn)犬左側(cè)聲帶黏膜層和固有層，4周后，4只犬左側(cè)聲帶黏膜下注Hylan B凝膠，1只犬左側(cè)聲帶黏膜下注射生理鹽水，結(jié)果顯示激光切除術(shù)后4周時(shí)，所有動(dòng)物術(shù)側(cè)聲帶均表現(xiàn)為軟組織缺損和黏膜波消失，注射Hylan B的動(dòng)物術(shù)側(cè)聲帶黏膜波恢復(fù)，而注射生理鹽水的動(dòng)物術(shù)側(cè)聲帶黏膜波仍消失；注射12周后，注射Hylan B的犬聲帶組織再生、黏膜波恢復(fù)，而注射鹽水的犬聲帶組織無再生，黏膜波仍消失；組織學(xué)研究顯示注射Hylan B的犬聲帶有殘留的固有層，而注射生理鹽水的犬術(shù)側(cè)聲帶僅見致密的黏膜下瘢痕。該研究表明CO2激光切除犬聲帶后黏膜下注射Hylan B凝膠可在12周內(nèi)恢復(fù)聲帶組織結(jié)構(gòu)和黏膜波，并促進(jìn)功能性組織再生；Hylan B凝膠可作為軟組織支架用于固有層缺損聲帶的發(fā)聲功能修復(fù)。

HA天生存在于聲帶中，具有生物活性、生物相容性和非免疫原性，由于易于修飾，天然HA分子可以提供交聯(lián)位點(diǎn)，根據(jù)交聯(lián)程度和使用的濃度，其粘彈性和生物特性具有極好的可調(diào)性。多項(xiàng)研究表明HA支架可以支持聲帶組織再生，未來的研究應(yīng)該著重于HA支架與細(xì)胞的結(jié)合，并根據(jù)患者的需要進(jìn)一步細(xì)化調(diào)控其粘彈性，以提供充分和持續(xù)的組織再生功能。

3.1.2細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)衍生的天然材料 脫細(xì)胞化ECM支架可以保存原生組織微結(jié)構(gòu)和ECM成分，為浸潤細(xì)胞(如：干細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)提供物理和生化環(huán)境，以促進(jìn)其良好的附著、生長和分化。ECM支架還可以保留對聲帶功能至關(guān)重要的固有力學(xué)性能，Huber等(2003年)進(jìn)行了第一次異種移植物植入聲帶重建的研究，此研究使用脫細(xì)胞豬膀胱黏膜下層(UBS-ECM)重建犬喉部組織以替代手術(shù)移除的犬甲狀軟骨和聲帶，3個(gè)月后，觀察到甲狀軟骨、上皮組織、結(jié)締組織、腺體結(jié)構(gòu)和部分骨骼肌的再生，但沒有恢復(fù)到原來的位置，重建的組織在微觀結(jié)構(gòu)和宏觀結(jié)構(gòu)上與原始組織非常相似。因此，可以推測ECM的組織和成分決定了聲帶的振動(dòng)特性，由于此支架是膀胱黏膜下層ECM的異種移植，聲帶功能不會(huì)完全恢復(fù)。2016年，Kitamura等[24]對犬行半喉切除術(shù)，術(shù)后植入豬膀胱黏膜下層脫細(xì)胞化細(xì)胞外基質(zhì)(UBM)衍生支架重建喉缺損組織，雖然在支架植入后一周內(nèi)有一只犬出現(xiàn)局部感染，但1個(gè)月內(nèi)所有犬的創(chuàng)面均顯示良好的再上皮化，并且并發(fā)癥較少；術(shù)后6個(gè)月對喉再生效果進(jìn)行評價(jià)，約一半動(dòng)物發(fā)聲閾值壓力和標(biāo)準(zhǔn)化黏膜波振幅為正?；蚪咏?。如前所述，膀胱黏膜下層異種移植物的使用可能會(huì)影響這些動(dòng)物的聲帶功能，因此，聲帶特異性ECM可能是聲帶修復(fù)的理想選擇。

3.1.3合成生物高分子材料 由于大多數(shù)用于聲帶損傷治療的可注射非細(xì)胞生物材料快速的酶降解和注射后原生細(xì)胞補(bǔ)充有限，導(dǎo)致其再生潛力有限。針內(nèi)壓力和宿主免疫反應(yīng)的作用，往往引起細(xì)胞凋亡?？山到馕⑶蚩赏ㄟ^增加細(xì)胞停留時(shí)間、在注射過程中保護(hù)細(xì)胞、提供早期免疫應(yīng)答保護(hù)來提高治療效果。Reyes Valenzuela等[25]采用包裹人聲帶成纖維細(xì)胞(HVFF)的微球(Ms)作為聲帶固有層損傷后的靶向再生材料，制備了海藻酸鈉、海藻酸鈉-聚L-賴氨酸、海藻酸鈉-殼聚糖微球，并對其生物相容性、溶脹性、力學(xué)性能以及細(xì)胞因子的產(chǎn)生進(jìn)行了研究；發(fā)現(xiàn)海藻酸鈉微球的聲帶再生性能最理想，能抵抗機(jī)械損傷，并且具有類似于天然聲帶固有層的硬度，能增加成纖維細(xì)胞的增殖。

3.1.4生物反應(yīng)器 生物反應(yīng)器通過提供有利的條件，如：最佳的溫度、壓力、底物或支架支持、調(diào)節(jié)生化信號和物理化學(xué)刺激，為細(xì)胞和組織的體外發(fā)育提供一個(gè)可控的環(huán)境[26]。用于聲帶組織工程的可靠的體外模型或生物反應(yīng)器必須包含四個(gè)精確控制的主要變量，即：頻率、振幅、可編程振蕩機(jī)制以及延長細(xì)胞生存能力的適宜環(huán)境。除了生物相容性外，這些系統(tǒng)中使用的材料還必須能夠抵抗開關(guān)應(yīng)力和摩擦能量耗散(Titze等，2004年)。通常有四種生物反應(yīng)器：①基于揚(yáng)聲器的生物反應(yīng)器；②基于執(zhí)行器的生物反應(yīng)器；③基于流變儀的生物反應(yīng)器；④基于氣流和真空的生物反應(yīng)器，生物反應(yīng)器對于在體外復(fù)制聲帶的發(fā)聲條件是必不可少的。迄今為止的研究主要集中在發(fā)展以執(zhí)行器和揚(yáng)聲器為基礎(chǔ)的生物反應(yīng)器，以及少量基于流變儀和空氣動(dòng)力學(xué)的生物反應(yīng)器。研究通過各種振蕩機(jī)制將張力應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)，涉及的頻率范圍為50～300 Hz，平面外位移為0.1～1.0 mm[27]。

3.2干細(xì)胞 干細(xì)胞應(yīng)用的主要目的是恢復(fù)原生組織的生化特性，使細(xì)胞外基質(zhì)得以重建，并恢復(fù)聲帶的振動(dòng)和發(fā)聲功能。主要使用的干細(xì)胞為自體和非自體內(nèi)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)、成纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞、脂肪衍生的干細(xì)胞(ASCS)、人胚胎干細(xì)胞(HESC)和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(IPSCS)[28]。國內(nèi)胡蓉等[29]對34只實(shí)驗(yàn)兔的53側(cè)聲帶進(jìn)行聲帶銳性損傷，將自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞植入20側(cè)損傷聲帶后，示蹤觀察脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在聲帶固有層內(nèi)的生長分布；同時(shí)以單純支架(膠原或透明質(zhì)酸凝膠)植入18側(cè)受損聲帶(膠原10側(cè)，透明質(zhì)酸8側(cè))及單純損傷15側(cè)聲帶作為對照組，術(shù)后15 d～12個(gè)月時(shí)采用HE染色、Masson染色、Alcian Blue染色及免疫組化染色觀察聲帶形態(tài)學(xué)變化及聲帶固有層膠原、透明質(zhì)酸、纖維連接蛋白的含量及分布變化；結(jié)果表明脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞植入兔損傷聲帶后具有促進(jìn)聲帶細(xì)胞外基質(zhì)分泌、合理分布及部分有序化排列的功能，具有促進(jìn)聲帶修復(fù)再生的作用。Long等[30]將兔脂肪來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(ASC)嵌入三維纖維蛋白凝膠中，形成細(xì)胞基質(zhì)外聲帶替代物(COVR)；16只兔切除單側(cè)聲帶上皮及固有層，并采用纖維蛋白膠原、自體切除聲帶覆蓋再植、COVR植入三種方法分別重建；4周后，對喉部進(jìn)行組織學(xué)檢查和發(fā)聲功能檢查，結(jié)果表明兔聲帶切除術(shù)后植入COVR減少了瘢痕的產(chǎn)生，短期內(nèi)發(fā)聲時(shí)產(chǎn)生對稱的黏膜波；1個(gè)月后發(fā)聲功能優(yōu)于自體聲帶覆蓋再植組。干細(xì)胞重建在乳腺癌中得到了最廣泛的研究，也仍然存在極大的爭議[31]；一項(xiàng)對小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，使用MSC增加了導(dǎo)管癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移(Karnoub等，2007年)；頭頸部癌細(xì)胞株也出現(xiàn)了類似的結(jié)果[32]。因此在進(jìn)行喉癌切除術(shù)后喉部重建的干細(xì)胞療法之前，還需要更仔細(xì)的實(shí)驗(yàn)研究。

3.33D打印技術(shù) 3D打印技術(shù)具有易用性、可承受性、可用材料的多樣性以及創(chuàng)建復(fù)雜結(jié)構(gòu)的能力，該技術(shù)已被用于模擬喉切除術(shù)后的氣管形態(tài)[33]和環(huán)狀軟骨的重建[34]。Goldstein等[35]描述了一種3D打印聚乳酸移植物，植入成熟軟骨細(xì)胞用于喉氣管重建。Romero等[36]選擇并改進(jìn)了一種3D打印技術(shù)，可以將紫外線固化液體硅膠嵌入凝膠狀介質(zhì)，3D打印出立方體并接受拉伸測試來驗(yàn)證其材料性能，然后打印出自振蕩聲帶模型，涂上代表上皮細(xì)胞的薄層硅膠，用于發(fā)聲測試，以收集開始壓力、頻率和振幅數(shù)據(jù)。顯然，3D打印對聲帶修復(fù)再生有希望，但還需要進(jìn)一步研究。

4 總結(jié)

綜上所述，不同手術(shù)方式、不同手術(shù)范圍聲帶切除術(shù)后聲帶自主修復(fù)的過程有所不同，CO2激光切除術(shù)后3個(gè)月聲帶瘢痕基本形成，而手術(shù)范圍與深度是影響聲帶術(shù)后自主修復(fù)的主要因素。近年來等離子射頻消融手術(shù)開展越來越多，但對其具體術(shù)式暫無明確分類，對使用不同功率以及其損傷后不同時(shí)間段聲帶自主修復(fù)的機(jī)制也缺乏細(xì)致的研究。目前聲帶損傷后修復(fù)與再生的方法主要為組織工程學(xué)，但近年來已不局限于使用一種方法，因此應(yīng)將組織工程學(xué)、干細(xì)胞、3D打印結(jié)合起來，構(gòu)建綜合治療方案，進(jìn)行更多的實(shí)驗(yàn)研究，以待能夠臨床應(yīng)用于聲帶創(chuàng)傷的修復(fù)。