楊欣雨 陳聰慧 夏 翠 段春輝* 劉月琴* 王 媛 張英杰 馬玉忠 郭云霞 紀守坤

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，保定 071000；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，保定 071000；3.衡水志豪畜牧科技有限公司，衡水 053401；4.河北省肉羊產(chǎn)業(yè)研究院，衡水 053401)

運輸應(yīng)激是由運輸過程中環(huán)境變化、禁食禁水、心理壓力等復(fù)雜多因素應(yīng)激原的綜合作用所引起的機體抵抗性、防御性、適應(yīng)性反應(yīng)[1]。在運輸應(yīng)激的刺激下，羊的代謝機能、血液生化指標發(fā)生改變，免疫功能下降，甚至造成死亡。目前我國運輸動物的方式主要以公路運輸為主，大部分動物以及動物產(chǎn)品進入流通環(huán)節(jié)，公路運輸占整個流通量的97%以上[2]。運輸導(dǎo)致的動物發(fā)病率及死淘率分別高達73.2%、14.2%，由于運輸過程中養(yǎng)殖戶經(jīng)驗不足，準備不充分，羊的運輸應(yīng)激導(dǎo)致的死亡率可高達35%[3-4]，給養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟損失，因此，及時采取有效的緩解措施至關(guān)重要。

抗應(yīng)激添加劑可以有效緩解應(yīng)激反應(yīng)，應(yīng)用抗應(yīng)激添加劑是目前緩解運輸應(yīng)激的主要方法[5]。常用的抗應(yīng)激添加劑種類包括維生素類、益生菌類、氨基酸類、抗生素類、礦物質(zhì)元素類和中草藥類等。維生素C作為高效抗氧化劑，不僅可以防止氧化自由基對組織的破壞，還可以減少運輸應(yīng)激引起的犢牛腹瀉現(xiàn)象[6]。研究表明，維生素C和維生素E可調(diào)控與運輸應(yīng)激有關(guān)的皮質(zhì)激素，降低免疫球蛋白的損失，提高機體抗運輸應(yīng)激能力[7]。電解多維可以調(diào)解機體電解質(zhì)平衡，促進機體的新陳代謝，增強機體對疾病的抵抗力，因而具有明顯應(yīng)激的調(diào)節(jié)作用。Gupta等[8]研究表明，聯(lián)合使用維生素和電解質(zhì)相比單獨使用維生素可更有效地緩解山羊運輸應(yīng)激。植物乳酸桿菌是動物腸道中最早定植的健康菌群之一，能促進有益菌的增殖、減少病原菌的數(shù)量，具有促進生長、改善腸道健康、增強免疫力的效果[9-10]。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid, γ-GABA)屬于功能性氨基酸，在哺乳動物大腦中模仿內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)工作并被確認為是哺乳動物神經(jīng)中樞的一種抑制性遞質(zhì)，具有鎮(zhèn)靜的作用[11]。在應(yīng)激過程中，γ-GABA可以抑制呼吸中樞，降低由應(yīng)激引起的機體代謝增強、血壓升高、產(chǎn)熱增加等耗能生理狀態(tài)[12]。研究報道，γ-GABA可提高蝦[13]、雞[14]、鴨[15]的生長性能，明顯降低血清應(yīng)激激素含量，并提高機體免疫力。運輸應(yīng)激后動物機體往往免疫力下降，易受細菌感染導(dǎo)致消化道疾病[16-17]，臨床上，關(guān)于抗運輸應(yīng)激作用的研究主要集中在豬[18]、牛[19-20]、驢[21]，在羊上鮮有報道，且關(guān)于電解多維、乳酸菌、γ-GABA及新霉素的抗運輸應(yīng)激效果研究較少。因此，本試驗通過在羔羊道路運輸前后應(yīng)用電解多維，運輸后應(yīng)用乳酸菌、γ-氨基丁酸和新霉素，研究運輸前后不同處理和時間對湖羊羔羊生長性能及血清應(yīng)激指標、免疫球蛋白、炎癥因子含量的影響，為生產(chǎn)中緩解羊運輸應(yīng)激添加劑的選擇和應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點

本試驗于2021年6月1日—2021年6月30日，在河北省張家口蘭海畜牧養(yǎng)殖有限公司進行。

1.2 試驗材料

電解多維粉購自于湖南某藥業(yè)公司，主要成分及含量見表1。植物乳酸菌液(乳酸菌數(shù)量1×1010CFU/mL)由河北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實驗室提供。γ-GABA粉(純度99%)購自于濟南某生物技術(shù)公司。新霉素粉購自于成都某藥業(yè)公司。

表1 電解多維粉主要成分及含量

1.3 試驗動物與試驗設(shè)計

選用健康、平均體重為(20.71±0.70) kg的4月齡湖羊公羔50只，隨機分為5組，分別為1組(對照組)、2組(電解多維組)、3組(乳酸菌組)、4組(γ-GABA組)、5組(新霉素組)。運輸當(dāng)天記為0 d，運輸當(dāng)天所有試驗羊于09：00—17:00進行8 h公路運輸，1組羔羊運輸前后飼喂基礎(chǔ)飼糧；2組羔羊在運輸前2 d至運輸后7 d于基礎(chǔ)飼糧中添加電解多維粉[375 mg/(只·d)]；3組和4組羔羊在運輸當(dāng)天至運輸后7 d于基礎(chǔ)飼糧中分別添加乳酸菌液[4 mL/(只·d)]和γ-GABA粉[(200 mg/(只·d)]；5組羔羊在運輸當(dāng)天至運輸后7 d于基礎(chǔ)飼糧中添加新霉素粉[200 mg/(只·d)]。電解多維粉、γ-GABA粉和新霉素粉均在飼喂前拌于基礎(chǔ)飼糧中飼喂，乳酸菌液在飼喂前均勻噴灑于基礎(chǔ)飼糧表面進行飼喂?；A(chǔ)飼糧由羊場提供，其組成及營養(yǎng)水平見表2。

1.4 運輸條件

試驗羊均無運輸經(jīng)歷，在裝車前對所有羊進行檢查，以排除有損傷、腫脹或者任何形式明顯疾病的羊，運輸前6 h禁飼不禁水。運輸車為車廂長13 m、寬2.55 m、高4 m的3層半掛車，運輸前對其進行徹底打掃、消毒，試驗羊均放置卡車第2層，運輸途中禁食禁水，運輸?shù)缆愤x擇外環(huán)公路和坑洼公路，時速30～70 km/h，運輸密度2.7 m2/只，運輸當(dāng)天平均溫度為22 ℃，平均相對濕度為21%。運輸?shù)竭_羊場后1 h內(nèi)不飼喂，不飲水。

表2 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.5 飼養(yǎng)管理

所有試驗羊在試驗前7 d轉(zhuǎn)入圈舍，圈舍在試驗羊轉(zhuǎn)入前徹底清掃、消毒。試驗開始前試驗羊進行驅(qū)蟲處理，每天巡視羊舍并對羊舍進行清掃。試驗期間，每組試驗羊每天07:00和17:00分別給料1.5 kg，第2天早上喂料前稱取剩料量，每天每組均有剩料(10%以內(nèi))，自由飲水。

1.6 試驗指標

1.6.1 生長性能指標

分別于運輸前1 d和運輸后14 d對所有羊進行稱重，統(tǒng)計初重和末重，計算平均日增重。試驗期間每天記錄每只試驗羊的給料量和剩料量，計算平均日采食量。根據(jù)平均日采食量和平均日增重計算料重比。

1.6.2 血清應(yīng)激指標

試驗羊運輸后0、7和14 d采集頸靜脈血，每只羊采5 mL血液，室溫靜置0.5 h后，3 500 r/min離心10 min，分離血清于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法，按照試劑盒說明檢測血清應(yīng)激指標，包括促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)、皮質(zhì)醇(COR)、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)活性及免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-1β(IL-1β)含量，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

利用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件對生長性能試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，血清應(yīng)激指標試驗數(shù)據(jù)進行雙因素方差分析，用LSD法進行多重比較。P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。數(shù)據(jù)均以平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊生長性能的影響

由表3可知，運輸前各組間初重差異不顯著(P>0.05)，各組間平均日采食量差異極顯著(P<0.01),對照組平均日采食量極顯著低于其余4組(P<0.01)，乳酸菌組與電解多維組、γ-GABA組、新霉素組間平均日采食量差異不顯著(P>0.05)，γ-GABA組平均日采食量顯著低于電解多維組、新霉素組(P<0.05)。各組間料重比差異極顯著(P<0.01)，各組料重比的關(guān)系為γ-氨基丁酸組>對照組>乳酸菌組>新霉素組>電解多維組。

2.2 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清應(yīng)激指標的影響

由表4可知，處理極顯著影響了羔羊血清中ACTH含量和LDH活性(P<0.01)，添加電解多維、新霉素處理血清ACTH含量極顯著低于對照處理(P<0.01)，添加乳酸菌、γ-GABA處理血清ACTH含量顯著低于對照處理(P<0.05)。添加電解多維和γ-GABA處理血清LDH活性極顯著低于對照處理(P<0.01)，添加乳酸菌、新霉素處理血清LDH活性顯著低于對照處理(P<0.05)；處理有降低羔羊血清中COR含量(P=0.050)和CK活性(P=0.070)的趨勢。

時間顯著影響了血清中ACTH含量(P<0.05)，運輸后7 d血清ACTH含量顯著低于0(運輸當(dāng)天)和運輸后14 d(P<0.05)；時間極顯著影響了血清COR含量、LDH活性(P<0.01)，0 d血清COR含量極顯著高于運輸后7和14 d(P<0.01)，0 d血清LDH活性極顯著高于運輸后14 d(P<0.01)，顯著高于運輸后7 d(P<0.05)。

處理和時間交互作用顯著影響了血清中ACTH含量(P<0.05)，而對血清COR含量及CK、LDH活性無顯著影響(P>0.05)。

表3 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊生長性能的影響

表4 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清應(yīng)激指標的影響

續(xù)表4項目Items時間Time/d促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH/(ng/L)皮質(zhì)醇COR/(ng/mL)肌酸激酶CK/(U/L)乳酸脫氫酶LDH/(U/L)處理Treatment對照 Control 59.07±5.36Aa8.50±0.87135.11±9.87783.33±39.36Aa電解多維Electrolytic multidimensional 25.65±5.36BCbd5.30±0.8799.77±9.87551.10±39.36Bb乳酸菌Lactobacillus35.98±5.36ABCbc6.70±0.87101.22±9.87637.05±39.36ABbγ-GABAGamma-aminobutyric acid 42.73±5.36ABc7.29±0.87124.11±9.87573.62±39.36Bb新霉素 Neomycin 14.44±5.36Cd5.10±0.87108.55±9.87642.05±39.36ABb時間Time/d 0 41.85±4.15a8.84±0.67Aa124.13±7.64719.51±30.49Aa7 25.43±4.15b5.66±0.67Bb114.66±7.64621.23±30.49ABb14 39.44±4.15a5.23±0.67Bb102.47±7.64571.55±30.49BbP值 P-value處理 Treatment<0.0010.0530.0700.002時間 Time0.0190.0010.1500.006處理×?xí)r間 Treatment×time0.0210.1510.9850.106

2.3 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清中免疫球蛋白含量的影響

由表5可知，處理極顯著影響了血清IgA含量(P<0.01)，對照處理血清IgA含量極顯著低于其他4個處理(P<0.01)，4個處理間血清IgA含量差異不顯著(P>0.05)；處理對血清IgG、IgM含量影響不顯著(P>0.05)。時間對血清IgA、IgG、IgM含量影響不顯著(P>0.05)。處理和時間交互作用對血清中IgA、IgG、IgM含量無顯著影響(P>0.05)。

表5 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清中免疫球蛋白含量的影響

續(xù)表5項目 Items時間Time/d免疫球蛋白AIgA/(ng/mL)免疫球蛋白GIgG/(mg/mL)免疫球蛋白MIgM/(mg/mL)γ-GABA組Gamma-aminobutyric acid group0 10.09±0.40b7.38±2.8520.24±1.867 9.86±0.41b5.12±0.8319.67±2.4114 10.15±0.26b6.35±1.5219.28±2.00新霉素組Neomycin group0 11.45±0.50ab4.04±0.5219.58±3.687 9.08±2.03b4.96±1.3017.22±3.8914 10.13±0.27b5.84±1.0413.08±6.02主效應(yīng) Main effect處理Treatment對照 Control 9.05±0.94Bb4.99±0.6612.65±2.53電解多維Electrolytic multidimensional14.71±0.94Aa5.72±0.6619.91±2.53乳酸菌Lactobacillus10.74±0.94Aa5.53±0.6616.94±2.53γ-GABAGamma-aminobutyric acid 10.03±0.94Aa6.28±.06619.73±2.53新霉素 Neomycin 10.22±0.94Aa4.95±0.6616.62±2.53時間Time/d010.68±0.735.52±0.5117.73±1.96710.93±0.735.17±0.5116.64±1.961411.24±0.735.79±0.5117.15±1.96P值 P-value 處理 Treatment0.0020.6040.274時間 Time0.8630.7000.926處理×?xí)r間 Treatment×time0.8800.9190.903

2.4 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清中相關(guān)炎癥因子含量的影響

由表6可知，處理顯著影響了血清IFN-γ含量(P<0.05)，添加電解多維、乳酸菌處理血清IFN-γ含量顯著低于對照處理(P<0.05)；處理極顯著影響了血清IL-6含量(P<0.01)，添加電解多維、乳酸菌、新霉素處理血清IL-6含量極顯著低于對照處理(P<0.01)，添加γ-GABA與對照、電解多維、乳酸菌、新霉素處理間血清IL-6含量差異不顯著(P>0.05)。

時間極顯著影響了羔羊血清中IL-6含量(P<0.01)，對血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量無顯著影響(P>0.05)，運輸后7 d血清IL-6含量極顯著高于14 d(P<0.01)。

處理和時間交互作用極顯著影響了血清中IL-6含量(P<0.01)，對血清IFN-γ、TNF-α、IL-1β含量無顯著影響(P>0.05)。

3 討 論

3.1 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊生長性能的影響

羔羊在道路運輸中禁食禁水，受到生理和心理雙重應(yīng)激壓力，分解代謝加強，機體養(yǎng)分消耗加速，免疫機能下降，運輸后常導(dǎo)致腹瀉率升高，影響生長性能[22-23]。研究發(fā)現(xiàn)，運輸后飼喂富含維生素和電解質(zhì)的復(fù)合營養(yǎng)性添加劑，可以顯著提高蛋雞[24]和斷乳仔豬[25]的生長性能，緩解運輸應(yīng)激。Gupta等[8]對山羊進行了8 h的運輸，運輸前后口服維生素C(180 mg/kg)+電解質(zhì)(7 g/kg)有效緩解了運輸應(yīng)激。本試驗中，電解多維組羔羊的平均日增重比對照組提高42.9%，說明運輸前2 d至運輸后7 d添加電解多維可有效緩解應(yīng)激、提高生長性能，可能是因為電解質(zhì)改善了運輸應(yīng)激引起的酸堿失衡狀況[26]，維生素降低了自由基對動物機體的損傷，提高了羔羊健康水平。研究表明，復(fù)合益生菌(地衣芽孢桿菌、枯草桿菌和植物乳桿菌)和植物乳酸菌顯著緩解了肉用雞[27]、斷乳仔豬[28]的應(yīng)激反應(yīng)并提高生長性能。本試驗中，乳酸菌組羔羊的平均日增重比對照組提高了12.15%，說明乳酸菌可以緩解羔羊運輸應(yīng)激，可能是因為乳酸菌抑制了腸道有害菌生長，維持腸道菌群平衡，提高了營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率[29]。γ-GABA可以促進機體分泌促食欲神經(jīng)肽，抑制神經(jīng)興奮，有鎮(zhèn)靜作用可緩解運輸應(yīng)激[30]。王迪銘[31]發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加包被的γ-GABA(140 mg/d)可顯著提高斷奶湖羊平均日采食量和平均日增重。本試驗中，在羔羊運輸后7 d內(nèi)補充γ-GABA對平均日采食量和平均日增重?zé)o顯著影響，可能與γ-GABA未包被有關(guān)，至于包被γ-GABA后是否會緩解運輸應(yīng)激有待進一步研究。長途運輸后，由于羔羊腸道菌群失衡，致病菌增加，常引起腹瀉，新霉素在獸醫(yī)臨床上主要用于畜禽細菌性腸炎治療[32]。本試驗中，添加新霉素組羔羊的平均日采食量顯著高于對照組，平均日增重比對照組提高21.87%，料重比顯著低于對照組，說明羔羊運輸后7 d內(nèi)進行新霉素治療可以有效緩解應(yīng)激，提高生長性能。

表6 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清中相關(guān)炎癥因子含量的影響

續(xù)表6項目 Items時間Time/d干擾素-γ IFN-γ腫瘤壞死因子-αTNF-α白細胞介素-6IL-6白細胞介素-1βIL-1βP值 P-value處理 Treatment0.0150.123<0.0010.274時間 Time0.0990.441<0.0010.120處理×?xí)r間 Treatment×time0.8330.195<0.0010.254

3.2 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清應(yīng)激指標的影響

動物在應(yīng)激條件下，下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸功能增強使ACTH分泌增加，提高血清COR含量，因此，常用血清ACTH和COR含量判斷動物應(yīng)激情況。COR含量過高會使機體應(yīng)激反應(yīng)增強，機體免疫力降低[33]。本研究中，運輸前后添加電解多維，運輸后7 d內(nèi)添加乳酸菌、γ-GABA和新霉素極顯著降低了羔羊血清中ACTH含量，說明電解多維、乳酸菌、γ-GABA及新霉素可以緩解運輸應(yīng)激。各處理中，添加電解多維和新霉素血清ACTH含量最低，說明運輸前后使用電解多維或運輸后立即進行新霉素治療緩解運輸應(yīng)激的效果優(yōu)于乳酸菌和γ-GABA。各組血清COR含量變化與ACTH含量變化一致，均呈降低趨勢，說明添加電解多維或應(yīng)用新霉素治療均有效緩解了運輸應(yīng)激。梁偉超等[21]使用主要成分為電解多維的營養(yǎng)湯緩解驢運輸應(yīng)激中發(fā)現(xiàn)，血清中COR、ACTH含量在運輸后3～9 d恢復(fù)至運輸前，未使用營養(yǎng)湯的驢則需要15 d。本試驗中，相比于運輸當(dāng)天，羔羊血清中COR含量在運輸后7和14 d極顯著降低，說明羔羊在運輸后7 d內(nèi)應(yīng)激較大，14 d內(nèi)仍未得到恢復(fù)。在運輸當(dāng)天至運輸后14 d，添加電解多維、乳酸菌、新霉素血清ACTH含量呈下降趨勢，但對照和γ-GABA處理在運輸后14 d血清ACTH含量相比于7 d未見降低，說明未包被的γ-GABA未能緩解羔羊運輸應(yīng)激，這與添加γ-GABA未提高羔羊生長性能的結(jié)果相一致。

CK和LDH存在于肌細胞中，正常情況下由于細胞膜的屏障作用僅有少量細胞內(nèi)酶釋放入血，當(dāng)細胞受損細胞膜通透性升高時，細胞內(nèi)酶涌入血液，使血清內(nèi)酶活性明顯升高。CK是肌細胞特異酶，是肌細胞膜系統(tǒng)受損的標志，LDH參與機體能量代謝的糖酵解過程，應(yīng)激程度越大，LDH活性越高[34]。維生素C可以降低細胞膜的通透性，減少CK、LDH入血幾率，從而緩解運輸應(yīng)激[35]。本研究中，添加電解多維、乳酸菌、γ-GABA或進行新霉素治療均可緩解運輸應(yīng)激，從各處理血清LDH和CK活性看，運輸前后添加電解多維效果最好。運輸當(dāng)天至運輸后14 d，羔羊血清中LDH活性呈下降趨勢，說明運輸途中羔羊代謝增強，大量的氧優(yōu)先供應(yīng)大腦及心臟等維持生命體征的重要器官，機體組織由于缺氧產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)使細胞膜受到損傷，細胞內(nèi)LDH進入血液致使運輸后當(dāng)天血清LDH活性最高，隨著時間延長，動物機體逐漸從應(yīng)激中恢復(fù)過來，LDH活性隨之降低[36]。本試驗中，各處理羔羊血清CK活性在運輸后14 d內(nèi)呈下降趨勢，14 d活性最低，但各時間點無顯著差異，說明8 h的道路應(yīng)激造成的肌細胞損傷在運輸后14 d內(nèi)不能得到有效緩解。

3.3 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清免疫球蛋白含量的影響

動物在應(yīng)激時，免疫細胞受抗原刺激產(chǎn)生能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白，其中IgA、IgG、IgM是評定體液免疫功能最常用的指標[37]。研究表明，熱應(yīng)激可降低山羊血清IgA、IgG和IgM含量[38-39]。植物乳桿菌能提高斷奶仔豬血清IgA、IgG和IgM含量[28]。黃寶銀等[40]研究發(fā)現(xiàn)，包被γ-GABA可以提高肉牛血清IgA、IgG和IgM含量。本試驗中，各處理血清IgA含量極顯著高于對照處理。IgA在腸道黏膜免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用，說明各處理均具有阻斷病原微生物穿透腸道黏膜從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)的作用[41]，添加電解多維處理血清IgA含量最高，說明電解多維保護消化道黏膜作用最好，這與該處理生長性能最高的結(jié)果相一致。研究報道，山羊大多在運輸后第1～2周發(fā)病[42]。Stanger等[43]發(fā)現(xiàn)，經(jīng)72 h長途運輸?shù)某赡昶帕_門牛落地后6 d免疫細胞才恢復(fù)正常，但體質(zhì)明顯下降，易感染其他疾病。趙廣高等[44]、王顯慧[45]研究表明，維生素C、維生素E能加強胸腺淋巴細胞功能，增加血清中IgA含量。本試驗中，運輸后7 d電解多維組血清IgA含量顯著高于其他4組，顯著提高羔羊免疫力，這可能是因為維生素C可以抑制COR分泌，防止機體脂質(zhì)化反應(yīng)，增強IgA的合成[46]。

3.4 運輸應(yīng)激干預(yù)對羔羊血清炎癥因子含量的影響

細胞因子不僅是由免疫細胞產(chǎn)生的具有免疫調(diào)節(jié)功能的蛋白質(zhì)，也是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)與免疫系統(tǒng)之間傳遞信息的重要介質(zhì)，細胞因子分為Th1、Th2 2種類型，TNF-α、IFN-γ等屬于Th1型細胞因子，參與調(diào)節(jié)機體的細胞免疫，而IL-6屬于Th2型細胞因子，在體液免疫中發(fā)揮著重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，各種不同的應(yīng)激因素能誘導(dǎo)IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎細胞因子的分泌[47]，血清中TNF-α、IFN-γ含量上調(diào)會導(dǎo)致炎癥反應(yīng)。王曉娜等[35]發(fā)現(xiàn)，使用富含維生素的抗應(yīng)激添加劑可降低運輸后肉牛血清中IFN-γ含量。本研究中，相比于對照處理，添加電解多維和乳酸菌處理羔羊血清中IFN-γ、IL-6含量均降低，新霉素處理血清IL-6含量降低，說明添加電解多維、乳酸菌或進行新霉素治療可以提高羔羊免疫力，有利于緩解運輸應(yīng)激。本研究中，添加電解多維和新霉素處理血清TNF-α含量呈降低趨勢，降低了運輸應(yīng)激導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)。各組羔羊血清中IL-1β含量在運輸后7 d呈降低趨勢，說明羔羊在運輸后7 d應(yīng)激緩解，炎癥反應(yīng)減弱。在運輸后14 d血清IFN-γ含量顯著低于運輸當(dāng)天，IL-6含量極顯著低于運輸后7 d，說明羔羊運輸后7 d內(nèi)炎癥反應(yīng)最大。有研究發(fā)現(xiàn)，分別對體重35和50 kg的仔豬進行2和4 h運輸后，體重35 kg的仔豬血清中IL-6含量變化不顯著，而IL-1β含量極顯著下降；體重50 kg的仔豬進行4 h運輸后，血清IL-6含量極顯著下降，而血清TNF-α和IL-1β含量沒有顯著變化[48-49]。王曉娜等[35]對出欄育肥牛進行5 h運輸后血清中TNF-α含量顯著降低。本研究中，羔羊運輸前后不同處理對血清TNF-α和IL-1β含量無顯著影響，運輸后不同時間點血清TNF-α和IL-1β含量也無顯著差異。血清TNF-α和IL-1β含量的變化可能與品種、年齡和應(yīng)激強度等有關(guān)，究其原因還有待于進一步研究。

4 結(jié) 論

羔羊在運輸后7 d內(nèi)應(yīng)激最強烈，不同的運輸應(yīng)激干預(yù)處理和時間影響了羔羊的生長性能、血清應(yīng)激指標、免疫指標和炎癥因子含量，其中羔羊運輸前2 d至運輸后7 d在基礎(chǔ)飼糧中添加電解多維0.375 g/(d·只)抗運輸應(yīng)激效果最佳。