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在水凝膠中平面嵌入多個(gè)3D細(xì)胞模型可實(shí)現(xiàn)高通量的微觀組織學(xué)

2022-12-18 18:53
關(guān)鍵詞:石蠟組織學(xué)高通量

據(jù)Heub S 2022年6月15日[Sci Rep,2022,12(1):9991-9991.]報(bào)道,瑞士CSEM SA 研究人員提出了一種高性價(jià)比、高效率的微組織組織學(xué)處理方法,促進(jìn)了球狀體和器官組織的組織學(xué)處理,使凝膠嵌入的三維(3D)細(xì)胞模型具有精確的共面排列,與切片平面平行,最大限度地減少了樣品材料的損失。

類器官或類腫瘤(統(tǒng)稱為微組織)是一種復(fù)雜的體外3D 細(xì)胞模型,越來越受到研究人員的重視。與二維(2D)培養(yǎng)物相比,3D細(xì)胞模型能更好地實(shí)現(xiàn)與生理有關(guān)的組織功能、結(jié)構(gòu)和界面。有利于全息影像學(xué)和藥物篩選分析。目前,研究人員已經(jīng)為一些3D體外模型的生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)處理開發(fā)了標(biāo)準(zhǔn)化和高通量方法。然而,仍然缺少適應(yīng)性分析工具,以充分利用類器官在臨床前藥物測(cè)試和精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)中的潛力。組織學(xué)是用于結(jié)構(gòu)和功能組織分析的成熟、經(jīng)濟(jì)高效和金標(biāo)準(zhǔn)方法。但標(biāo)準(zhǔn)組織學(xué)過程應(yīng)用于3D 細(xì)胞模型具有挑戰(zhàn)性且成本高昂,它們尺寸偏小,通常會(huì)導(dǎo)致樣品對(duì)齊不良,從而降低分析通量。

瑞士研究人員使用瓊脂糖基底物以標(biāo)準(zhǔn)陣列格式制備多個(gè)樣品--HistoBrick。HistoBrick 旨在促進(jìn)樣品定位、凝膠包埋、脫水、石蠟包埋、切片和光學(xué)成像,同時(shí)通過將樣品對(duì)準(zhǔn)在單一平面上來減少需要分析的所需切片數(shù)量??梢栽u(píng)估HistoBrick 內(nèi)標(biāo)本的相對(duì)排列和切片機(jī)上塊的定位。

研究發(fā)現(xiàn),HistoBrick 功能與自動(dòng)化標(biāo)準(zhǔn)兼容,可允許自動(dòng)將樣品從多孔板轉(zhuǎn)移到凝膠設(shè)備。HistoBrick 適用于組織學(xué)處理步驟,包括脫水、石蠟包埋、切片機(jī)切片和染色。研究人員通過展示直徑為150~200 μm 的HepG2 培養(yǎng)球狀體的排列驗(yàn)證了Histo-Brick 技術(shù)。經(jīng)過組織學(xué)處理后,它們?cè)诰哂兄睆健?0 μm 精度范圍的平面上對(duì)齊。雖然孔、陣列和樣品的尺寸受到脫水和石蠟包埋程序的影響,但由于其2D 排列是守恒的,因此可以清楚地跟蹤樣品。此外,HistoBrick 允許在最小切片中研究多達(dá)96 個(gè)樣品,為微組織學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化和高通量自動(dòng)化鋪平了道路??傊?,HistoBrick 方法有助于使用微觀組織學(xué)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化樣品分析,有利于促進(jìn)類器官模型在研究和分層醫(yī)學(xué)中廣泛實(shí)施。

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