陳 斌，王 可

(1黃梅縣人民醫(yī)院，湖北黃岡 435500；2 湖北文理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室，湖北襄陽(yáng) 441053；3湖北文理學(xué)院臨床循證與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心，湖北襄陽(yáng) 441053)

研究證實(shí)，喂養(yǎng)方式是嬰兒腸道菌群改變的重要影響因素之一，包括混合喂養(yǎng)、配方奶粉喂養(yǎng)、純母乳喂養(yǎng)等方式[1-4]。母乳喂養(yǎng)是世界公認(rèn)且提倡的最健康的嬰兒飲食方式，母乳中所含有的低聚木糖、菊粉、低聚果糖等益生元能夠作為腸道有益菌群的“食物”刺激其生長(zhǎng)繁殖，同時(shí)還能抑制有害菌群的過(guò)度繁殖，維持腸道微生態(tài)平衡，從而提高嬰兒對(duì)腸道致病菌的抵抗力，促進(jìn)其健康發(fā)育[5]。因此，含益元配方奶粉相較于未含益元配方奶粉或更適合無(wú)法母乳喂養(yǎng)的嬰兒，但相關(guān)研究鮮有。基于此，本研究隨機(jī)抽取2021年12月—2022年6月黃梅縣人民醫(yī)院產(chǎn)科分娩的足月健康新生兒作為試驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)對(duì)比不同方式喂養(yǎng)下嬰兒腸道特征及腸道常見(jiàn)細(xì)菌數(shù)量，分析含益元配方奶粉對(duì)嬰兒腸道微生態(tài)調(diào)節(jié)作用。

1 一般資料與方法

1.1 一般資料

研究對(duì)象選取2021年12月—2022年6月我院產(chǎn)科分娩的足月健康新生兒129名。納入標(biāo)準(zhǔn)：①母孕期無(wú)微生態(tài)制劑服用史、放射線接觸史、特殊用藥史；②胎齡37～42周，新生兒阿氏評(píng)分7分以上，出生體重2 500～4 000 g；③無(wú)先天性發(fā)育畸形、出生窒息史、缺血缺氧性腦病等；④分娩方式均為陰道分娩。排除標(biāo)準(zhǔn)：①家長(zhǎng)不愿納用試驗(yàn)指定配方奶粉喂養(yǎng)；②因乳糖不耐受、乳蛋白過(guò)敏等原因不適合配方奶粉喂養(yǎng)；③處于疾病治療期或恢復(fù)期；④試驗(yàn)期間未嚴(yán)格按照喂養(yǎng)方式要求進(jìn)行喂養(yǎng)。本試驗(yàn)已通過(guò)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查，所選嬰兒家長(zhǎng)均已簽署相關(guān)醫(yī)療文書(shū)，并自愿入組觀察。

1.2 干預(yù)及分組

采取數(shù)表法將新生兒隨機(jī)分為3組，給予不同喂養(yǎng)方式干預(yù)，分別為益元組(含益元配方奶粉喂養(yǎng))、普通組(未含益元普通奶粉喂養(yǎng))和母乳組(純母乳喂養(yǎng))。益元組和普通組均是出生后1周內(nèi)因不足、不愿、不能等各種原因無(wú)法母乳喂養(yǎng)才選用配方奶粉喂養(yǎng)，其中普通組中的配方奶粉除未含有益生元外，其它成分均與益元組一致，碳水化合物總量相同，且為同一品牌同一生產(chǎn)批次。另將以純母乳喂養(yǎng)的43例嬰兒納入母乳組作為參考對(duì)照，母乳組均可堅(jiān)持純母乳喂養(yǎng)3個(gè)月以上。3組嬰兒在胎齡、胎次、出生體重、性別、出生身高等基線數(shù)據(jù)上未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P> 0.05)，說(shuō)明本試驗(yàn)有可比性(表1)。入組后均由兒科專(zhuān)業(yè)人員指導(dǎo)喂養(yǎng)，并詳細(xì)告知嬰兒家長(zhǎng)喂養(yǎng)相關(guān)注意事項(xiàng)。連續(xù)喂養(yǎng)3個(gè)月后入院采集嬰兒糞便標(biāo)本，置于無(wú)菌干燥容器中，編號(hào)后-80℃保存?zhèn)溆?。采用雙盲法進(jìn)行樣本收集、信息采集和數(shù)據(jù)分析。

1.3 觀察指標(biāo)

益元組、普通組和母乳組嬰兒在滿3個(gè)月時(shí)入院進(jìn)行糞便采樣以檢測(cè)其中的擬桿菌、腸桿菌、腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌等腸道常見(jiàn)細(xì)菌數(shù)量以及乙酸含量，并測(cè)定糞便pH值。同時(shí)記錄3組嬰兒觀察期間嘔吐、便秘、脹氣、哭鬧等喂養(yǎng)不良情況。

1.4 樣本處理與培養(yǎng)

益生菌培養(yǎng)：取糞便標(biāo)本1g置入10 mL的已進(jìn)行還原處理的腦心浸注液中，在5%二氧化碳培養(yǎng)箱充分混勻并10倍稀釋?zhuān)∠♂寴?biāo)本10 μL均勻涂布于Rogosa SL Agar(日水)培養(yǎng)基中，37 ℃恒溫下厭氧培養(yǎng)，于48 h菌落計(jì)數(shù)乳酸桿菌，于96 h菌落計(jì)數(shù)擬桿菌、雙歧桿菌。腸桿菌、腸球菌培養(yǎng)：取糞便標(biāo)本1 g置入10 mL的已進(jìn)行還原處理的腦心浸注液中，充分混勻并10倍稀釋于超凈臺(tái)，取稀釋標(biāo)本10 μL均勻涂布于MacConkey Agar(中國(guó)藥典)培養(yǎng)基中，37℃恒溫培養(yǎng)，于24h菌落計(jì)數(shù)腸桿菌、腸球菌。乙酸檢測(cè)：取糞便標(biāo)本1 g置入pH值為6.5的0.1 mmol/L磷酸鈉緩沖液中，充分混勻后離心分離，取懸浮液，應(yīng)用GC-7890型氣相色譜儀檢測(cè)糞便乙酸含量。pH檢測(cè)：取糞便標(biāo)本1 g置入ddH2O(重蒸水)中，充分混勻后離心分離，取懸浮液，應(yīng)用多色指示紙檢測(cè)糞便pH值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果與分析

2.1 3組腸道常見(jiàn)細(xì)菌數(shù)量差異比較

單因素方差分析結(jié)果顯示，益元組、普通組和母乳組嬰兒擬桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.05)，腸桿菌及腸球菌數(shù)量各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。進(jìn)一步采用SNK-q法進(jìn)行兩組間比較結(jié)果顯示，益元組和母乳組嬰兒擬桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量均高于普通組(P均<0.05)，益元組與母乳組各指標(biāo)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)(表2)。

表2 3組腸道常見(jiàn)細(xì)菌數(shù)量差異比較

2.2 3組腸道乙酸水平及pH值差異比較

采用單因素方差分析，比較益元組、普通組和母乳組乙酸含量及pH值，結(jié)果顯示3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均<0.05)。SNK-q法進(jìn)行2組間比較結(jié)果顯示，益元組和母乳組的乙酸含量較普通組高，pH值較普通組低(P均<0.05)，益元組與母乳組間各指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)(表3)。

表3 3組腸道乙酸水平及pH值差異比較

2.3 3組喂養(yǎng)不良情況比較

收集3個(gè)月后益元組、普通組和母乳組嬰兒喂養(yǎng)期間發(fā)生的不良情況，表4結(jié)果顯示，益元組和母乳組嬰兒均未發(fā)生明顯不良情況，普通組嬰兒共5例發(fā)生嘔吐、便秘、脹氣、哭鬧等不良情況(占比11.63%)。普通組喂養(yǎng)不良情況發(fā)生率與益元組和母乳組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。

表4 3組喂養(yǎng)不良情況比較(n，%)

3 討論

腸道微生態(tài)是目前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，人體的胃腸道在正常情況下可寄生上千種細(xì)菌包括有益菌、條件致病菌、有害菌[6-7]。微生態(tài)平衡便是指這三大類(lèi)細(xì)菌在腸道內(nèi)維持著一定的比例。有益菌的減少、條件致病菌的過(guò)多過(guò)少或有害菌的增多均會(huì)導(dǎo)致腸道微生態(tài)失衡，引發(fā)諸如便秘、腹瀉、消化不良等癥狀，或會(huì)引起機(jī)體炎癥的發(fā)生[8-10]。對(duì)于嬰兒而言，腸道菌群的建立是從出生后開(kāi)始，嬰兒期是腸道細(xì)菌定植和演變的關(guān)鍵時(shí)期。有研究發(fā)現(xiàn)，在嬰兒期腸道菌群的改變與多種疾病相關(guān)，尤其是炎癥性腸病、心血管疾病、過(guò)敏性疾病等，且認(rèn)為腸道微生物群的建立在嬰兒神經(jīng)發(fā)育及腦發(fā)育中具有重要作用[11]。因此，調(diào)節(jié)嬰兒腸道菌群、維護(hù)其腸道微生態(tài)平衡意義重大。

據(jù)報(bào)道，影響嬰兒腸道菌群改變的因素除與分娩方式、環(huán)境等有關(guān)外，喂養(yǎng)方式也占據(jù)重要地位[12]。母乳作為嬰兒最為理想的飲食來(lái)源，其所含有的益生元是母乳中第三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，僅次于脂肪和乳糖[13]。益生元是一種在人體內(nèi)不被消化但可選擇性地刺激并改變腸道內(nèi)對(duì)人體健康有益菌群的生長(zhǎng)和生理活性的碳水化合物，常見(jiàn)有低聚木糖、菊粉、低聚果糖等[14]。目前，已有研究證實(shí)，益生元作為擬桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌的“生長(zhǎng)因子”，能夠?yàn)槠湓谀c道內(nèi)定植提供能量供應(yīng)，加速腸道有益菌群的定植和建立，對(duì)提高免疫力、改善胃腸道微環(huán)境、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)作用巨大[15]。因此，對(duì)于因不足、不愿、不能等各種原因無(wú)法母乳喂養(yǎng)的，或可選用含益元配方奶粉替代母乳。鑒于此，本研究以足月健康新生兒為試驗(yàn)對(duì)象，分析含益元配方奶粉對(duì)其腸道微生態(tài)調(diào)節(jié)作用。本次研究結(jié)果顯示，益元組和母乳組的益生菌(擬桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌)數(shù)量均較普通組更高，而益元組與母乳組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，腸桿菌及腸球菌數(shù)量各組間比較，未見(jiàn)顯著性差異。說(shuō)明含益元配方奶粉能夠使嬰兒腸道內(nèi)益生菌增加明顯，且可達(dá)到與母乳相近效果，對(duì)改善腸道微生態(tài)效果顯著。這也證實(shí)了龍曉蕾等[16]的研究結(jié)論。益生元在腸道內(nèi)的發(fā)酵會(huì)產(chǎn)生乳酸、乙酸、氣體等，降低腸道pH值的同時(shí)也能起到通便的效果。研究結(jié)果顯示，益元組和母乳組的乙酸含量較普通組更高，pH值較普通組更低，而益元組與母乳組之間不存在顯著性差異；益元組和母乳組均未見(jiàn)明顯不良情況，而普通組發(fā)生5例，與另兩組相比差異明顯。說(shuō)明含益元配方奶粉能夠使嬰兒腸道內(nèi)乙酸含量提高，pH值降低，從而有效改善嬰兒腸道微環(huán)境，維護(hù)其腸道微生態(tài)平衡，且無(wú)明顯喂養(yǎng)不良反應(yīng)，相較于未含益元的普通奶粉更適合作為母乳替代品。

綜上所述，含益元配方奶粉可部分模擬母乳功能，在調(diào)節(jié)嬰兒腸道微生態(tài)方面可達(dá)到與母乳相近效果，對(duì)促進(jìn)嬰兒健康發(fā)育作用顯著。