吳 斌

（福建省淡水水產(chǎn)研究所，福建福州 350002）

病毒性神經(jīng)壞死病（viral nervous necrosis，VNN），也被稱作病毒性腦病和視網(wǎng)膜?。╲iral encephalopathy and retinopathy，VER），病原為神經(jīng)壞死病毒（nervous necrosis virus，NNV）。該病毒屬諾達病毒科β-諾達病毒屬，結(jié)構(gòu)為直徑25～30 nm 的二十面體，無囊膜[1-2]。根據(jù)病毒顆粒衣殼蛋白基因序列不同，NNV 主要分為赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒（red-spotted grouper NNV，RGNNV）、紅鰭東方鲀神經(jīng)壞死病毒（tiger puffer NNV，TPNNV）、黃帶擬鲹神經(jīng)壞死病毒（striped jack NNV，SJNNV）和條斑星鰈神經(jīng)壞死病毒（barfin flouder NNV，BFNNV）4 種基因型[2-3]。目前我國主要流行RGNNV 基因型[4-6]。

NNV 可感染多種魚類的稚魚和幼魚，對成魚也有一定危害，存在垂直傳播和水平傳播兩種感染途徑?；疾◆~常出現(xiàn)典型的癥狀，小規(guī)格（體長小于3 cm）苗種患病后表現(xiàn)行為不協(xié)調(diào)，呈螺旋狀游泳，鰾腫脹導(dǎo)致腹部膨大，活力下降，漂浮于水面（圖1），死亡后魚體僵硬；中、大規(guī)格苗種多表現(xiàn)體色發(fā)黑，反應(yīng)遲鈍，離群分散在池底四周，或側(cè)躺于池底，眼球渾濁外凸，死亡后魚體柔軟。該病的累積死亡率為65%～100%。NNV 主要攻擊魚腦和視網(wǎng)膜組織，因此患病魚的典型病理變化是中樞神經(jīng)組織和視網(wǎng)膜組織的壞死和空泡化（圖2）。

圖1 患病魚苗浮于水面，螺旋游動

圖2 病魚視網(wǎng)膜和腦上皮組織空泡化

VNN 在世界范圍內(nèi)廣泛流行，除非洲外，其他地區(qū)均有發(fā)現(xiàn)魚類被感染的報道[7]。1985 年該病在澳大利亞、日本以及東南亞和加勒比海等地區(qū)暴發(fā)，死亡率在90%以上。1991 年日本學(xué)者Mori等[8]通過回歸感染試驗首次證實了NNV 是導(dǎo)致石斑魚神經(jīng)組織空泡化的病原。2001 年Lin 等[9]首次報道我國大陸地區(qū)養(yǎng)殖石斑魚發(fā)生該病。NNV宿主廣泛，目前已有在石斑魚[10]、鱸魚[11]、卵形鯧鲹[12]、半滑舌鰨[13]、牙鲆[14]等多種海水魚類上出現(xiàn)相關(guān)感染病例的報道。部分淡水魚如孔雀魚，也有感染NNV 的報道[15]。

近年來，NNV 危害程度不斷增加，總體呈現(xiàn)危害范圍廣、致病性強、死亡率高等特點[16]。為及時掌握該病的流行情況，2016 年起我國將VNN列入了水生動物疫病監(jiān)測計劃病種，至2021 年，已連續(xù)開展了6 年，累計設(shè)置監(jiān)測點718 個，檢測樣品1 214 份，其中檢出陽性238 份。本研究根據(jù)全國2016—2021 年海水魚VNN 監(jiān)測結(jié)果，對該病的宿主種類、規(guī)格、易感水溫和季節(jié)、流行區(qū)域、發(fā)病養(yǎng)殖場類型等方面進行分析，以期為我國VNN 的有效防控提供數(shù)據(jù)支持。

1 流行情況

1.1 宿主種類

2016 年以來，水生動物疫病監(jiān)測計劃共檢測到VNN 陽性樣品238 份，包括石斑魚219 份、卵形鯧鲹11 份、鲆3 份、河鲀2 份、大黃魚1 份、鱸（海）2 份，具體分布見表1。監(jiān)測結(jié)果顯示：我國NNV 的宿主種類逐漸增多，涵蓋了6 個主要海水養(yǎng)殖品種，其中石斑魚是主要品種。2016—2021 年，每年均有石斑魚VNN 陽性樣品被檢出，且陽性率最高，達38.69%，數(shù)量占感染宿主數(shù)量的92.02%（表1、圖3～4）。

表1 2016—2021 年VNN 陽性樣品檢出情況

圖4 2016—2021 年VNN 陽性樣品不同宿主占比

1.2 感染宿主規(guī)格

VNN 對成魚的危害相對較小，主要危害稚魚和幼魚，尤其是20～60 日齡的魚苗，感染后病死率可達90%～100%。2016—2021 年的海水魚類VNN監(jiān)測結(jié)果（圖5）顯示：238 份陽性樣品中，體長≤5 cm 的141 份（59.24%），5～10 cm 的62 份（26.05%），1～15 cm 的27 份（11.35%），＞15 cm的8 份（3.36%）。結(jié)果提示，NNV 的感染宿主規(guī)格范圍較廣，不僅對小規(guī)格苗種產(chǎn)生危害，也感染較大規(guī)格的魚，甚至是商品魚。

圖5 2016—2021 年VNN 陽性樣品不同規(guī)格占比

1.3 易感水溫和季節(jié)

海水魚養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，VNN 一般在4—11月流行，其中6—8 月易暴發(fā)，且有較高的死亡率，低溫季節(jié)一般較少發(fā)生。根據(jù)我國2016—2021 年海水魚類VNN 監(jiān)測結(jié)果，VNN 在我國的流行時段較長，4—11 月均有NNV 陽性樣品被檢出，水溫低至20 ℃時仍能檢出NNV 陽性，但易感高峰仍然集中在5—8 月、水溫25～33 ℃的高溫季節(jié)（表2，圖6）。

圖6 2016—2021 年VNN 陽性樣品采樣時間分布

表2 2016—2021 年VNN 陽性樣品養(yǎng)殖水溫和采樣時間

1.4 主要感染地區(qū)

2016—2021 年海水魚類VNN 監(jiān)測結(jié)果（圖7）顯示：廣東、福建、海南、天津、廣西、河北、浙江和山東等多個地區(qū)均有VNN 陽性樣品被檢出，其中南方沿海石斑魚主要養(yǎng)殖區(qū)的福建、廣東、海南、廣西等省份陽性檢出率較高，說明VNN 在我國南方海水養(yǎng)殖區(qū)域尤其是石斑魚主要養(yǎng)殖區(qū)域有較為廣泛的流行。

圖7 2016—2021 年VNN 陽性樣品區(qū)域分布

1.5 養(yǎng)殖場類型

2016—2021 年海水魚類VNN 監(jiān)測結(jié)果（表3，圖8～9）顯示：VNN 陽性樣品主要來源于苗種場、成魚養(yǎng)殖場和省級原良種場，并且省級原良種場和苗種場的VNN 陽性樣品檢出率高于成魚養(yǎng)殖場。結(jié)果提示，有必要重點加強對苗種場和省級原良種場的VNN 預(yù)防和控制，以減少進一步傳播風(fēng)險。

圖8 2016—2021 年VNN 陽性樣品不同類型養(yǎng)殖場占比

表3 2016—2021 年不同類型的養(yǎng)殖場VNN 陽性樣品檢出情況 單位：份

2 討論

2.1 易感宿主及規(guī)格

2016—2021 年海水魚類VNN 監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，VNN 陽性品種涉及石斑魚、卵形鯧鲹、鲆、河鲀、大黃魚、鱸（海）等多個品種，雖然仍以石斑魚為主，但種類在逐漸增加。因此，在全國海水魚主要養(yǎng)殖區(qū)域，應(yīng)對主要養(yǎng)殖品種及養(yǎng)殖過程中的各個環(huán)節(jié)加強VNN 檢測，特別是近年來新增的NNV 宿主品種，以便更好地掌握VNN 在我國海水魚中的流行情況。同時，監(jiān)測發(fā)現(xiàn)NNV 感染宿主規(guī)格范圍正在擴大，這與養(yǎng)殖戶普遍認為的NNV 主要感染魚苗種等情況有所差異，因此養(yǎng)殖管理中應(yīng)該做好不同養(yǎng)殖規(guī)格海水魚的分隔，避免病原在不同規(guī)格海水魚間傳播。

圖9 2016—2021 年不同類型養(yǎng)殖場樣品陽性率分布

2.2 流行季節(jié)及水溫

雖然VNN 在我國流行時段較長，但流行高峰集中在夏秋高溫季節(jié)，主要為5—8 月，這與產(chǎn)業(yè)中VNN 的集中發(fā)生時間基本吻合。在VNN 流行季節(jié)，應(yīng)進一步加強養(yǎng)殖生產(chǎn)管理，定期開展養(yǎng)殖水體和工具的消毒工作，育苗和養(yǎng)殖過程中定期投喂益生菌等增強苗種免疫力，以減少VNN 發(fā)病率。

2.3 傳播范圍

2016 年以來，我國廣東、福建、海南、廣西等多個地區(qū)均有VNN 陽性樣品被檢出，相對來說，VNN 在南方海水養(yǎng)殖區(qū)域流行更為廣泛，這可能與NNV 的主要感染宿主石斑魚集中養(yǎng)殖在南方沿海地區(qū)有關(guān)。此外，我國北方地區(qū)的石斑魚苗種主要來源于海南、廣東、福建等地。因此，應(yīng)加強對海水魚類苗種流通的管控，嚴格執(zhí)行苗種產(chǎn)地檢疫制度，禁止攜帶NNV 苗種和親魚的流通，盡可能縮小VNN 在我國的流行范圍。

2.4 傳播途徑

來自苗種場的陽性樣品數(shù)量要高于來自成魚養(yǎng)殖場的數(shù)量，說明苗種場是NNV 傳播的高風(fēng)險點，應(yīng)給予更大關(guān)注。要進一步加強苗種場管理，尤其在苗種選育過程中應(yīng)重視生物安保工作，對海水養(yǎng)殖魚類，特別是石斑魚，要選擇臨床健康未攜帶NNV 的親魚進行苗種培育，對受精卵進行消毒，并進行苗種檢疫，避免因陽性苗種流動導(dǎo)致的NNV 擴散。在苗種生產(chǎn)過程中，要加強NNV 病原檢測，提前清除NNV 傳播媒介或病原攜帶者，從源頭上阻斷NNV 傳播。對有陽性樣品檢出的養(yǎng)殖場，要及時開展VNN 流行病學(xué)調(diào)查，對苗種來源和去向進行追溯調(diào)查，完善陽性養(yǎng)殖場點的詳細信息，在疫病處理過程中應(yīng)制定切實可行的管理辦法和操作細則，對陽性樣品及時進行無害化處理，并做好消毒措施。

2.5 石斑魚VNN 流行情況

石斑魚是海水魚類VNN 監(jiān)測計劃中重要的采樣品種，也是NNV 的主要感染養(yǎng)殖品種。2016—2021 年共采集樣品1 214 份，其中石斑魚566 份，發(fā)現(xiàn)陽性率達38.69%，遠高于其他品種。VNN 在我國南方養(yǎng)殖石斑魚的主要省份均有發(fā)生。該病多發(fā)生在夏、秋高溫季節(jié)，發(fā)病水溫多在24～33 ℃，但水溫21 ℃時也有陽性被檢出；石斑魚育苗期VNN發(fā)病率達80%以上，發(fā)病后死亡率可高達90%以上。感染石斑魚的NNV 基因型主要是RGNNV 型，主要感染石斑魚的苗種期，孵化后20～60 d 屬易感階段，尤其是體長小于5 cm 的小規(guī)格苗種，在體長10～15 cm 的較大苗種和成魚中也能檢出NNV。NNV 感染石斑魚的途徑主要有兩種：一種為親魚的垂直傳播，在親魚、受精卵及孵化1～2 d 的仔魚中能檢出NNV；另一種是通過養(yǎng)殖水體引起NNV水平傳播，病毒可能來自于帶毒但不發(fā)病的成魚，或被NNV 交叉感染的育苗工具等。

2.6 防控建議

VNN 作為一種嚴重影響水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的水生動物疫病，危害范圍廣、致病性強、死亡率高，且目前沒有可行和有效的治療方法，一旦暴發(fā)就容易造成重大經(jīng)濟損失。因此，應(yīng)把預(yù)防作為控制該病流行和蔓延的關(guān)鍵點，早預(yù)防、早控制，做到防患于未然。疫苗免疫是防治病毒性疾病的重要和有效方法之一，在魚類病毒性疾病研究中已有較多成功的報道。但是，NNV 主要感染海水魚類的稚魚、幼魚。這個階段魚苗的免疫系統(tǒng)還沒有完全發(fā)育完善，導(dǎo)致疫苗不能起到很好的保護效果[1]。因此，需要繼續(xù)開展NNV 免疫學(xué)研究，開發(fā)商業(yè)化的疫苗及合理的免疫方法，通過對繁殖親魚進行NNV疫苗免疫，使子代獲得免疫力，從而阻斷NNV 的垂直傳播[17]。

致謝：

本論文在撰寫過程中，得到了福建省淡水水產(chǎn)研究所樊海平研究員的指導(dǎo)，福建省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站李苗苗工程師、林楠工程師，福建省淡水水產(chǎn)研究所陳夢云助理工程師的支持與幫助，福建省水產(chǎn)研究所林克冰研究員提供了相關(guān)圖片。