婁海偉，楊創(chuàng)明，趙 玉，牛永武，田雙起,*，趙仁勇,*

（1.河南工業(yè)大學(xué) 小麥和玉米深加工國(guó)家工程研究中心，河南 鄭州 450001；2.河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院，河南 鄭州 450001）

黃曲霉毒素（aflatoxin，AF）是一類(lèi)主要由黃曲霉（Aspergillus flavus）和寄生曲霉（A.parasiticus）產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物[1]。目前已發(fā)現(xiàn)的AF有20余種，該類(lèi)化合物均具有一個(gè)二呋喃環(huán)和一個(gè)氧雜萘鄰?fù)ㄏ愣顾兀?，常?jiàn)的AF有AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、AFM1、AFM2等，其毒性由強(qiáng)到弱依次為AFB1、AFM1、AFG1、AFB2、AFM2、AFG2[2]。由于AFB1的毒性強(qiáng)、污染性廣、致癌性強(qiáng)，已被世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)列為IA類(lèi)致癌物[3]，AFB1污染食品會(huì)對(duì)人類(lèi)和牲畜健康造成極大的危害[4]。因此，各個(gè)國(guó)家和組織對(duì)食品和飼料中AFB1含量有明確的限量要求，如我國(guó)GB 2761-2017《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》和GB 13078-2017《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》分別對(duì)食品和飼料原料、飼料產(chǎn)品中AFB1含量有明確的限量要求。不可控的自然環(huán)境因素（如高溫、降雨等）以及谷物收獲后不適宜的貯藏或加工條件都會(huì)引起谷物中霉菌大量繁殖并產(chǎn)生真菌毒素，最終導(dǎo)致谷物中AFB1含量超出限量標(biāo)準(zhǔn)，谷物食用價(jià)值降低或喪失，造成重大經(jīng)濟(jì)損失，因此研究人員一直致力于研究減少或消除谷物中的AFB1的方法。目前，消減谷物中AFB1的方法主要有如下3 類(lèi)[5]：1）物理法，包括高溫、輻照等方法，對(duì)AFB1消減有一定效果，但會(huì)導(dǎo)致谷物營(yíng)養(yǎng)成分的損失；2）化學(xué)法，包括堿處理、氧化劑處理等，對(duì)AFB1的脫毒效果好，但會(huì)造成二次污染；3）生物法，該方法是利用微生物或酶制劑降解AFB1，是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，該方法對(duì)底物AFB1的專(zhuān)一性強(qiáng)、反應(yīng)條件溫和、降解效果穩(wěn)定且效率高，極具發(fā)展?jié)摿6]。漆酶（EC 1.10.3.2）[7-9]、錳過(guò)氧化物酶[10-11]、葡萄糖氧化酶[12]等均可以降解AFB1，其中漆酶是一種無(wú)污染的綠色環(huán)保型催化劑[13]，因此利用漆酶降解AFB1引起了研究人員的廣泛關(guān)注。

漆酶是一種廣泛存在于植物（如漆樹(shù)、棉花、馬鈴薯等）、真菌（如云芝、平菇、杏鮑菇等）、細(xì)菌（如芽孢桿菌、假單胞桿菌等）和昆蟲(chóng)中的酚類(lèi)氧化酶[14]，在食品工業(yè)、纖維改性、生物合成、環(huán)境保護(hù)、印染、造紙、生物傳感器、生物能源、免疫監(jiān)測(cè)、飼料等領(lǐng)域已有廣泛的應(yīng)用[13,15]。相對(duì)于植物漆酶和細(xì)菌漆酶，真菌漆酶的相關(guān)研究報(bào)道較多[16-17]，而食用菌是真菌漆酶的主要來(lái)源之一[18]。無(wú)毒無(wú)害且可食用的產(chǎn)漆酶食用菌可作為食品或飼料領(lǐng)域降解AFB1的重要微生物?；诖?，本文從美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）數(shù)據(jù)庫(kù)（www.ncbi.nlm.nih.gov）和Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)（Unified Protein Database，www.uniprot.org）中篩選具有漆酶基因序列或氨基酸序列的食用菌，總結(jié)已報(bào)道的產(chǎn)漆酶食用菌，并介紹食用菌漆酶的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及其對(duì)AFB1的降解作用，以期為食用菌漆酶安全、高效、綠色降解AFB1提供參考。

1 產(chǎn)漆酶食用菌的篩選

1.1 基于生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)和文獻(xiàn)報(bào)道篩選產(chǎn)漆酶的食用菌

食用菌種類(lèi)繁多，且不同菌種之間性狀差異很大，篩選產(chǎn)漆酶的菌種是一項(xiàng)任務(wù)非常繁重的工作。因此，基于生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)NCBI和Uniprot，能夠快速篩選到具有漆酶基因序列或氨基酸序列的食用菌，基于NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)檢索具有漆酶基因序列食用菌的路徑為NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)→選擇Nucleotide→輸入laccase并點(diǎn)擊Search→選擇“真核生物（eukaryotes）”條目下的“真菌（fungi）”，可獲得13858 條目（items）；基于Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)檢索具有漆酶氨基酸序列食用菌的路徑為Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)→選擇UniProtKB→輸入laccase并點(diǎn)擊Search→獲得16885 條目，然后從上述獲得的條目中篩選出食用菌（表1）。此外，本文亦對(duì)已報(bào)道的產(chǎn)漆酶食用菌進(jìn)行總結(jié)（表1）。從NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出97 種具有漆酶基因序列的食用菌，從Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出93 種具有漆酶氨基酸序列的食用菌，已報(bào)道的能夠產(chǎn)漆酶食用菌有75 種，合計(jì)篩選出食用菌133 種，這有利于學(xué)者們縮小食用菌的篩選范圍或快速、簡(jiǎn)便地鎖定產(chǎn)漆酶食用菌。

表1 產(chǎn)漆酶的食用菌和具有漆酶基因序列（或氨基酸序列）的食用菌Table 1 Edible fungi with the ability to secrete laccase and those with laccase gene sequences (or amino acid sequences)

續(xù)表1

1.2 產(chǎn)漆酶食用菌的實(shí)驗(yàn)篩選方法

從眾多的食用菌中篩選出產(chǎn)漆酶食用菌是一項(xiàng)繁重而復(fù)雜的工作，因此，學(xué)者們建立了產(chǎn)漆酶食用菌的實(shí)驗(yàn)篩選方法（初篩和復(fù)篩）。即使對(duì)于表1中的食用菌，也需要采用如下方法進(jìn)行驗(yàn)證。

1.2.1 初篩方法

產(chǎn)漆酶食用菌的初篩方法為平板顯色法。根據(jù)培養(yǎng)基中添加底物的不同，平板顯色法劃分類(lèi)型如表2所示。除了表2中的幾種初篩方法外，也有學(xué)者向培養(yǎng)基中添加聯(lián)苯胺、2,6-二甲氧基苯酚等試劑進(jìn)行平板顯色初篩[23,100]，但是相比而言，學(xué)者們認(rèn)為愈創(chuàng)木酚平板顯色法產(chǎn)生的氧化帶顏色較明顯、顯色較早、結(jié)果較可靠且相關(guān)研究報(bào)道較多[101]。

表2 檢測(cè)食用菌是否產(chǎn)漆酶的平板顯色法Table 2 Features of chromogenic plate methods for detecting for the secretion of laccase from edible fungi

以上方法常依據(jù)變色速率、顏色、變色圈直徑、變色圈和菌絲圈直徑的比值來(lái)判斷食用菌是否產(chǎn)漆酶和產(chǎn)漆酶的能力。筆者課題組研究（結(jié)果尚未發(fā)表）表明，采用平板顯色法判斷食用菌是否產(chǎn)漆酶的準(zhǔn)確性較高，而通過(guò)顏色深淺、比值（變色圈和菌絲圈直徑的比值）判斷食用菌所產(chǎn)漆酶的活力大小有時(shí)會(huì)存在較大差異，因此，筆者認(rèn)為平板顯色法適用于判斷食用菌是否產(chǎn)漆酶，不適用于對(duì)食用菌所產(chǎn)漆酶的活力進(jìn)行定量分析。

1.2.2 復(fù)篩方法

由于初篩不能確定菌株所產(chǎn)漆酶的活力，因此，需要采用復(fù)篩來(lái)進(jìn)一步確定菌株是否產(chǎn)漆酶及所產(chǎn)漆酶的活力?；谑秤镁崦甘前饷?，在復(fù)篩時(shí)常將食用菌進(jìn)行液體深層發(fā)酵，然后離心獲得含有漆酶的上清液，對(duì)含有漆酶的上清液進(jìn)行酶活力測(cè)定[102]。測(cè)定漆酶活力的方法有高效液相色譜法、微量熱法、測(cè)O2法、分光光度計(jì)法、脈沖激光光聲法等。其中分光光度計(jì)法具有操作簡(jiǎn)便、設(shè)備成本低、測(cè)定快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)用廣泛，相關(guān)研究報(bào)道也最多。根據(jù)底物的不同，分光光度計(jì)法又分為愈創(chuàng)木酚法[103]、ABTS法[23]、丁香醛連氮法[104]等，其中ABTS法、愈創(chuàng)木酚法測(cè)定漆酶活力的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性較好，較為常用，如Xu Jianzhong等[33]采用ABTS法測(cè)定大杯傘漆酶的活力（701 U/L），Umar等[41]采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定白肉靈芝漆酶的活力（6540 U/L）。

2 食用菌漆酶的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)

2.1 食用菌漆酶的結(jié)構(gòu)

漆酶是一類(lèi)含銅離子的多酚氧化酶，食用菌漆酶一般為高度糖基化的胞外分泌的蛋白[105]，其穩(wěn)定性很大程度上是由糖基化貢獻(xiàn)的[106]，通常含有4 個(gè)銅離子（I型銅離子1 個(gè)、II型銅離子1 個(gè)、III型銅離子2 個(gè)），4 個(gè)銅離子分布在漆酶的3 個(gè)氧化還原活性中心。T1活性中心（即I型銅離子（單電子受體）所在位點(diǎn)）是漆酶與底物的結(jié)合位點(diǎn)，該位點(diǎn)的氧化還原電勢(shì)直接影響漆酶的氧化能力[107]。食用菌漆酶在催化底物時(shí)，其T1活性中心首先與底物結(jié)合，然后I型銅離子（Cu2＋）奪取底物電子并轉(zhuǎn)變?yōu)镃u＋，電子再經(jīng)由His-Cys-His三肽區(qū)域傳遞給II型銅離子和III型銅離子中心，在此催化過(guò)程中，底物被氧化降解，O2被轉(zhuǎn)化為H2O，無(wú)其他副產(chǎn)物產(chǎn)生[108]，因此，漆酶被稱(chēng)為綠色催化劑[13]。

2.2 食用菌漆酶的理化性質(zhì)

不同來(lái)源漆酶的理化性質(zhì)存在一定的差異，漆酶的理化性質(zhì)主要由其蛋白編碼基因決定。不同食用菌漆酶的氨基酸序列（或核苷酸序列）并不相同，而且食用菌基因組中通常存在多條漆酶編碼基因，如平菇有12 條漆酶編碼基因[109]、香菇有14 條漆酶編碼基因[110]、真姬菇有10 條漆酶編碼基因[111]、黑木耳有7 條漆酶編碼基因[29]、草菇有11 條漆酶編碼基因[112]，這些差別使食用菌漆酶具有不同的理化性質(zhì)。

2.2.1 pH值

不同食用菌漆酶常具有不同的最適pH值，但通常最適pH值偏酸性，如松杉靈芝漆酶（分子質(zhì)量52 kDa）的最適pH值為4，在此pH值條件下，松杉靈芝漆酶具有良好的穩(wěn)定性，當(dāng)pH值降低或升高時(shí)，其穩(wěn)定性逐漸下降[113]；巴爾喀什蘑菇漆酶的最適pH值為2.2，在pH值為7～9時(shí)，其活力基本喪失[19]；一種中國(guó)美味蘑菇漆酶的最適pH值為5.0[23]。綜上，食用菌漆酶的最適pH值通常在2～6之間，偏離此pH值范圍，漆酶活力會(huì)顯著降低。如果欲在堿性條件下使用食用菌漆酶，可考慮采用基因工程技術(shù)改變漆酶的最適pH值或pH值適用范圍，如采用定點(diǎn)突變技術(shù)改變漆酶的氨基酸序列，篩選獲得在堿性條件下具有良好漆酶活力的基因工程改造酶，然后通過(guò)異源表達(dá)獲得大量改造后的漆酶，以滿(mǎn)足應(yīng)用需求。

2.2.2 溫度

食用菌漆酶的最適溫度一般不超過(guò)60 ℃，這主要與其結(jié)構(gòu)和來(lái)源有關(guān)，如花臉香蘑漆酶有3 個(gè)保守結(jié)構(gòu)域（Cu-oxidase I、Cu-oxidase II和Cu-oxidase III），其最適溫度為60 ℃，當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí)，其活力隨著溫度的升高而逐漸增大，當(dāng)溫度高于60 ℃時(shí)，其活力隨著溫度的升高而急劇減小[55]；巴爾喀什蘑菇漆酶不耐高溫，最適溫度為40 ℃，在4～50 ℃之間相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)溫度高于50 ℃時(shí)，其酶活力急劇下降[19]。來(lái)自同一食用菌的不同基因編碼漆酶，其最適溫度也存在不一樣的情況，如白靈側(cè)耳的漆酶Lac1（分子質(zhì)量68 kDa）和Lac3（分子質(zhì)量51 kDa）的最適溫度為50～60 ℃，漆酶Lac2（分子質(zhì)量64 kDa）的最適溫度為60 ℃，在熱穩(wěn)定性方面，漆酶Lac2較Lac1和Lac3更穩(wěn)定[114]。食用菌漆酶的不耐高溫特性使其應(yīng)用范圍受到一定的限制，如果需要耐高溫的漆酶，可采用基因工程技術(shù)（如定點(diǎn)突變和異源表達(dá)）改造漆酶的氨基酸序列以構(gòu)建耐高溫漆酶。

2.2.3 金屬離子

金屬離子對(duì)食用菌漆酶的活性有顯著的影響，對(duì)漆酶活力起促進(jìn)作用還是抑制作用，這與金屬離子的種類(lèi)和濃度有關(guān)，如Fe3＋對(duì)平菇漆酶的活力起抑制作用，隨著Fe3＋濃度的增加，對(duì)漆酶活力的抑制作用增強(qiáng)，而Cu2＋對(duì)平菇漆酶活力的影響主要與其濃度有關(guān)，當(dāng)Cu2＋濃度為1 mmol/L時(shí)，對(duì)漆酶的活力起促進(jìn)作用，當(dāng)Cu2＋濃度為5 mmol/L時(shí)，漆酶的活力受到抑制[115]；Na＋、K＋、Mg2＋對(duì)花臉香蘑漆酶的活力無(wú)顯著影響，Zn2＋、Al3＋抑制花臉香蘑漆酶的活力且隨離子濃度的增加抑制作用顯著增強(qiáng)，Mn2＋在低濃度時(shí)促進(jìn)花臉香蘑漆酶活力，在高濃度時(shí)抑制漆酶活力[55]；Hg2＋顯著抑制口蘑漆酶的活力[89]，Hg2＋和Cd2＋亦顯著抑制中國(guó)美味蘑菇漆酶的活力[23]。因此，在使用食用菌漆酶時(shí)要嚴(yán)格控制或調(diào)整金屬離子的種類(lèi)和濃度，使漆酶的活力得到充分發(fā)揮。

3 食用菌漆酶對(duì)AFB1的降解作用

3.1 食用菌漆酶的作用

漆酶在食用菌生長(zhǎng)過(guò)程中主要起到如下5 個(gè)方面作用：1）參與食用菌色素的形成[13]；2）降解木質(zhì)素，為食用菌生長(zhǎng)發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng)[116]；3）參與食用菌的呼吸作用并承擔(dān)傳遞電子的作用，促進(jìn)食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育[117]；4）催化木質(zhì)素降解產(chǎn)生酚類(lèi)或醌類(lèi)物質(zhì)，酚類(lèi)和醌類(lèi)物質(zhì)的毒性能夠抑制雜菌的生長(zhǎng)[118]；5）調(diào)控食用菌原基的分化，改善食用菌產(chǎn)量和品質(zhì)[119-120]。

3.2 漆酶的底物

漆酶的作用底物十分廣泛，主要包括：1）酚類(lèi)及其衍生物[108]；2）芳胺類(lèi)及其衍生物（芳胺類(lèi)化合物與酚類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)相似）[121]；3）羥酸及其衍生物[122]；4）生物色素和甾體激素[123-124]；5）金屬有機(jī)化合物[125]；6）一些非酚類(lèi)化合物[126]。漆酶催化底物氧化需要滿(mǎn)足2 個(gè)條件，首先底物能夠進(jìn)入漆酶的活性中心并與漆酶結(jié)合；其次底物和漆酶之間要存在氧化還原電勢(shì)差。如果底物的氧化還原電勢(shì)較高或無(wú)法進(jìn)入漆酶的活性中心，導(dǎo)致底物不能被漆酶直接氧化，此時(shí)可借助小分子介體實(shí)現(xiàn)底物和漆酶之間電子的傳遞，以間接實(shí)現(xiàn)底物的氧化，這就是漆酶的介體體系，此體系可擴(kuò)大漆酶催化的底物范圍[6,127]。

3.3 食用菌漆酶對(duì)AFB1的降解

食用菌是一類(lèi)可以食用或藥用的大型真菌[128]，其產(chǎn)生的漆酶也是安全的，因此，采用食用菌或食用菌漆酶來(lái)降解谷物中的AFB1是一種安全、高效且極具發(fā)展?jié)摿Φ姆椒?，如果采用食用菌發(fā)酵已污染AFB1的谷物，不僅能夠降解AFB1，同時(shí)還能豐富谷物的營(yíng)養(yǎng)成分。目前，已報(bào)道的能夠降解AFB1的產(chǎn)漆酶食用菌主要有如下幾種。

3.3.1 平菇漆酶

有關(guān)平菇產(chǎn)漆酶的研究報(bào)道較多，然而有關(guān)平菇漆酶降解AFB1的報(bào)道較少。Alberts等[129]研究了不同液體培養(yǎng)基（葡萄糖-麥芽提取物-酵母提取物培養(yǎng)基、基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基、礦物鹽-麥芽提取物培養(yǎng)基、小麥秸稈培養(yǎng)基）對(duì)平菇產(chǎn)漆酶的影響，發(fā)現(xiàn)平菇在基礎(chǔ)鹽培養(yǎng)基中所產(chǎn)的漆酶活力最高（416.39 U/L），此培養(yǎng)基濾液（含漆酶）對(duì)AFB1的降解率可達(dá)35.90%。平菇不僅能夠降解谷物中的AFB1，還能降解農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物中的AFB1，如采用平菇發(fā)酵已污染AFB1的水稻秸稈，平菇菌株MTCC142和菌株GHBBF10對(duì)AFB1的降解率分別可達(dá)89.14%和91.76%，而且加入Cu2＋和Zn2＋可有效提高AFB1的降解率；因此，采用平菇發(fā)酵動(dòng)物飼料是一個(gè)生態(tài)環(huán)境友好的降解AFB1的方法[130]。平菇的漆酶活力越高，則降解AFB1的能力越強(qiáng)，即平菇的漆酶活力與其AFB1降解率呈正相關(guān)[131]。

3.3.2 云芝漆酶

云芝漆酶能夠直接氧化AFB1，且AFB1降解產(chǎn)物的致突變性、促氧化能力和肝毒性顯著降低[8,132]。何杜鵑等[133]采用雙水相法萃取云芝漆酶，并將萃取的云芝漆酶（80 U/mL）用于降解AFB1，使AFB1的降解率達(dá)到了46.32%。Alberts等[129]采用Sigma公司生產(chǎn)的云芝漆酶（1 U/mL）降解AFB1，AFB1的降解率達(dá)到了87.34%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于何杜鵑等研究中的結(jié)果，這可能是酶解條件（酶解溫度、酶解時(shí)間和AFB1的濃度）不同所致，Alberts等[129]認(rèn)為漆酶能夠破壞AFB1分子中呋喃環(huán)的雙鍵，從而影響其熒光和致突變性。Liu Yingli等[134]研究發(fā)現(xiàn)漆酶與AF的結(jié)合能力由強(qiáng)到弱依次為AFB1＞AFG2＞AFG1＞AFB2，結(jié)合能力越強(qiáng)，則漆酶降解AF的效率越高，同時(shí)，其將云芝漆酶基因在釀酒酵母中進(jìn)行異源表達(dá)，然后采用重組的云芝漆酶分別降解AFB1、AFB2、AFG1和AFG2，降解率分別可達(dá)90.33%、74.23%、85.24%和87.58%，最適降解條件為30 ℃、0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液、pH 5.7、降解時(shí)間48 h。

3.3.3 杏鮑菇漆酶

有關(guān)杏鮑菇漆酶降解AFB1的研究報(bào)道較少，但杏鮑菇漆酶能夠有效降解AFB1。Brana等[135]從杏鮑菇菌糠中提取漆酶并獲得了漆酶粗提物，在25 ℃條件下，采用漆酶粗提物降解AFB1，分別孵育1、3、7 d，使AFB1的降解率分別達(dá)到了50%、75%和90%。介體不僅可提高漆酶對(duì)AFB1的降解效率，還可使漆酶同時(shí)降解多種真菌毒素，如Loi等[6]采用釀酒酵母表達(dá)杏鮑菇漆酶，經(jīng)純化獲得了重組漆酶，然后采用純化的重組漆酶分別降解AFB1、伏馬毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮和T-2，在25 ℃條件下降解72 h，上述毒素的降解率分別達(dá)到了73%、74%、27%、100%和40%，采用重組漆酶和氧化還原介體可同時(shí)降解AFB1和玉米赤霉烯酮，使AFB1和玉米赤霉烯酮的降解率分別達(dá)到了86%和100%。杏鮑菇在液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中均可降解AFB1，在含有128 μg/kg AFB1和質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%玉米的生長(zhǎng)培養(yǎng)基上栽培杏鮑菇，28 d時(shí)AFB1降解率為86%，而且杏鮑菇的生物效率和產(chǎn)量無(wú)顯著降低，在杏鮑菇菌絲體和子實(shí)體中均未檢測(cè)到AFB1及其降解產(chǎn)物，表明培養(yǎng)基中的AFB1并不向杏鮑菇中轉(zhuǎn)移[136]。

此外，肺形側(cè)耳漆酶亦能夠直接氧化AFB1，其對(duì)AFB1的直接氧化降解率為23%，添加乙酰丁香酮介體后，AFB1的降解率提高至90%，肺形側(cè)耳漆酶不僅能夠降解AFB1，而且還能夠完全降解AFM1[137]。除了上述幾種食用菌，其他產(chǎn)漆酶食用菌降解AFB1的研究鮮有報(bào)道。

4 結(jié)語(yǔ)

由于自然環(huán)境因素，每年存在大量的谷物被AFB1污染，不但造成重大經(jīng)濟(jì)損失，而且嚴(yán)重危害人體健康和生態(tài)環(huán)境，因此，高效降解AFB1已成為亟待解決的問(wèn)題。目前，降解AFB1的方法有物理法、化學(xué)法和生物法，生物法因具有底物特異性強(qiáng)、降解條件溫和等優(yōu)點(diǎn)，受到學(xué)者的廣泛關(guān)注。在降解谷物中AFB1時(shí)應(yīng)采用食用安全的微生物，因此，具有食用安全、營(yíng)養(yǎng)豐富等特點(diǎn)的食用菌可用于降解谷物中的AFB1。前人的研究結(jié)果表明，食用菌漆酶能夠高效降解AFB1?；诖?，本文首先從生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（NCBI和Uniprot）中篩選具有漆酶基因序列或氨基酸序列的食用菌，對(duì)已報(bào)道的能夠產(chǎn)漆酶的食用菌進(jìn)行了總結(jié)，并簡(jiǎn)述了產(chǎn)漆酶食用菌的實(shí)驗(yàn)篩選方法；其次，探討了食用菌漆酶的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)；最后，闡述了食用菌漆酶的作用、漆酶的作用底物及食用菌漆酶對(duì)AFB1降解作用的研究進(jìn)展，可為食用菌漆酶綠色、安全、高效降解AFB1提供參考，亦可為擴(kuò)大食用菌漆酶在食品或飼料領(lǐng)域的應(yīng)用提供思路。

采用食用菌漆酶降解AFB1極具發(fā)展?jié)摿Γ悄壳叭匀淮嬖谌缦聨讉€(gè)亟待解決的問(wèn)題：1）篩選高產(chǎn)漆酶的食用菌菌株；2）采用基因工程技術(shù)構(gòu)建耐高溫、耐酸或耐堿、酶活力高的工程漆酶以滿(mǎn)足不同領(lǐng)域的需求；3）鑒定AFB1降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和分析降解產(chǎn)物的性質(zhì)，以揭示漆酶對(duì)AFB1的降解機(jī)理；4）開(kāi)發(fā)食用安全、無(wú)環(huán)境污染的介體以擴(kuò)大漆酶作用的底物范圍或提高漆酶的催化效率；5）谷物中存在同時(shí)污染多種真菌毒素的情況，需開(kāi)發(fā)可同時(shí)高效降解多種真菌毒素的食用菌漆酶。