彭業(yè)韶，賈真，胡簫篁，王培，李柱衡，佘智彩，喻達(dá)輝

（1.北部灣大學(xué)海洋學(xué)院，廣西北部灣海洋生物多樣性養(yǎng)護(hù)重點實驗室，廣西 欽州 535011；2.廣西南洋海產(chǎn)科技有限責(zé)任公司，廣西 欽州 535034）

香港牡蠣（Crassostrea hongkongensis），俗稱欽州大蠔，是我國重要的經(jīng)濟(jì)貝類，主要分布在廣西、廣東等咸淡水交匯海區(qū)[1]。香港牡蠣具有生長速度快，營養(yǎng)價值高，對環(huán)境的適應(yīng)能力強[2]，深受人們的喜愛。香港牡蠣養(yǎng)殖主要分布在廣西欽州、北海和防城港等地區(qū)，其中2015 年欽州市香港牡蠣養(yǎng)殖面積約200 km2，年產(chǎn)牡蠣約40 萬t[3]。欽州市茅尾海（北緯21°49'51.59″，東經(jīng)108°33'05.26″）面積約45 km2，平均水深9 m，是全國最大香港牡蠣天然采苗基地[4]。天然采苗要“看天吃飯”，尤其是近年來，受氣候和海區(qū)環(huán)境變化影響，天然苗產(chǎn)量不穩(wěn)定，海上中培稚育貝生長速度慢，易發(fā)生大規(guī)模死亡，生產(chǎn)效率低下。天然苗數(shù)量和質(zhì)量無法滿足市場需求，苗種問題已成為制約香港牡蠣養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的瓶頸。

季節(jié)和環(huán)境因子如溫度、鹽度和可利用的浮游植物等均影響貝類的生長[5-7]。牡蠣死亡也與溫度、應(yīng)激、性成熟、病原體和污染物[8-10]等諸多因素有關(guān)。盡管牡蠣對環(huán)境脅迫有一定的適應(yīng)能力[11-13]，但它們的代謝活動在受到任何外界脅迫時均有所下降。

池塘生態(tài)養(yǎng)殖中建立一個合理的生物群落結(jié)構(gòu)，利用不同生物之間互利作用，使池塘無機營養(yǎng)鹽、有機物、浮游生物及微生物得以充分利用，促進(jìn)池塘物質(zhì)循環(huán)，改善池塘生態(tài)環(huán)境，提高養(yǎng)殖生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益[14]。近些年來，池塘生態(tài)養(yǎng)殖有了較快發(fā)展，但尚未見到用該方法對貝類中間培育的報道。

本文通過池塘生態(tài)養(yǎng)殖方法對香港牡蠣稚貝進(jìn)行中間培育，定期測量稚貝生長率、水體溫度、鹽度及餌料密度等環(huán)境因子，并與傳統(tǒng)海上中培模式進(jìn)行比較，探索新型高效的香港牡蠣中間培育技術(shù)，為香港牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)并開拓新的思路。

1 材料與方法

1.1 材料

中間培育試驗池位于欽州市龍門港鎮(zhèn)海邊池塘（北緯21°43'38.96″；東經(jīng)108°31'50.24″）。茅尾海中沙井港（北緯21°49'40.36″；東經(jīng)108°35'38.55″）、亞公山（北緯21°45'15.53″；東經(jīng)108°33'46.80″）和青菜頭（北緯21°40'40.52″；東經(jīng)108°36'19.81″）三個池塘為香港牡蠣養(yǎng)殖聚集地對照池，具體位置如圖1。廣西南洋海產(chǎn)科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)的同一批香港牡蠣殼高（3.90±0.96）mm 的人工苗種分成四份，每份10 串，分別放在四個不同的養(yǎng)殖地點，采用浮筏養(yǎng)殖進(jìn)行中間培育。

1.2 環(huán)境因子監(jiān)測

從2019 年11 月2 日—2019 年12 月8 日，每周測量一次養(yǎng)殖海水的溫度、鹽度和餌料密度。溫度和鹽度采用水溫計和手持式折射鹽度計現(xiàn)場測量；餌料密度測量使用XB.K.25 血球計數(shù)板。首先在水樣中加入適量的魯哥氏碘液，搖勻固定單胞藻。靜置24 h 后，緩慢倒出上清液，將水樣濃縮10倍，測量濃縮后海水中單胞藻的密度。每個水樣重復(fù)測量三次。

1.3 中間培育效果監(jiān)測

1.3.1 香港牡蠣稚貝生長率監(jiān)測

隨機抽取30 只稚貝，使用電子游標(biāo)卡尺每周測量一次稚貝殼高。按照如下公式計算稚貝的生長率：

式中，H0—稚貝初始?xì)じ?；Hi—稚貝第i 次測量時的殼高。

1.3.2 香港牡蠣稚貝存活率監(jiān)測

隨機抽取3 串附著基，從每串附著基上、中、下三個固定位置分別抽取一片瓷片，每周計數(shù)一次存活的稚貝數(shù)量，計算稚貝存活率：

式中，N0—稚貝初始數(shù)量；Ni—稚貝第i 次測量時的數(shù)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

結(jié)果均采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s 進(jìn)行多重比較，以P＜0.05 表示差異顯著，使用GraphPad Prism5 作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 環(huán)境因子變化

2.1.1 水溫

亞公山、沙井港、青菜頭和池塘最高水溫28.0℃～26.3℃，最低水溫17.8℃～16.6℃，平均水溫22℃～23℃。四個地點的水溫均呈下降趨勢，且在同一時間的溫度相近，四者之間并無顯著差異（P＞0.05）（圖2）。

圖2 不同中培地點的水溫變化Fig.2 Water temperature changes in different sites during intermediate cultivation

2.1.2 鹽度

亞公山、沙井港、青菜頭和池塘最高鹽度21～30，最低鹽度18～23，平均鹽度20～27。四個中培地點鹽度由高到低依次為：青菜頭、亞公山，沙井港和海邊池塘，且青菜頭和亞公山的鹽度顯著高于沙井港和海邊池塘（P＜0.05）。整個實驗期間，四個地點鹽度均呈上升趨勢（圖3）。

圖3 不同中間培育地點的鹽度變化Fig.3 Salinity changes in different sites during intermediate cultivation

2.1.3 餌料密度

11 月2 日測量池塘餌料密度最高，為（326±27.88）ind./mL；亞公山餌料密度最低，為（172±34.12）ind./mL，兩點之間差異顯著（P＜0.05）；沙井港與青菜頭餌料密度居中（圖4）。11 月9 日和11 月23 日測量，沙井港餌料密度明顯上升，最高達(dá)到（664±41.60）ind./mL，顯著高于其他三個地點（P＜0.05）。11 月30 日測量亞公山餌料密度最高為（1 100±179）ind./mL，顯著高于其他三個采樣地點（P＜0.05）。12 月8日四個地點測量餌料密度都在300～600 ind./mL 的范圍內(nèi)波動，各地點之間無顯著性差異（P＞0.05）。

圖4 不同中培地點的餌料密度Fig.4 The density of bait at different sites of intermediate cultivation

2.2 香港牡蠣的中間培育效果

2.2.1 香港牡蠣稚貝的生長率

各地點牡蠣稚貝初始?xì)じ邽椋?.90±0.96）mm，11 月9 日測量，海邊池塘的稚貝生長最快，殼高達(dá)到（7.91±2.0）mm，生長率為（120.83±80.37）%，且殼高和生長率均顯著高于其他三個中培地點的稚貝（P＜0.05）。亞公山稚貝殼高（5.06±0.95）mm，生長率為（25.86±35.32）%；沙井港稚貝殼高（4.74±0.97）mm，生長率為（32.16±49.14）%；青菜頭稚貝殼高（4.65±0.86）mm，生長率為（33.19±45.16）%。亞公山、沙井港和青菜頭三地之間的稚貝殼高和生長率無顯著差異（P＞0.05）（圖5、圖6）。

圖5 香港牡蠣稚貝的殼高Fig.5 Shell height of oyster C.hongkongensis juveniles

圖6 香港牡蠣稚貝的生長率Fig.6 Growth rate of oyster C.hongkongensis juveniles

11 月23 日測量時，海邊池塘的牡蠣稚貝殼高達(dá)到（14.07±2.23）mm，生長率為（293.60.±115.09）%，均顯著高于其他三地的稚貝（P＜0.05）。亞公山稚貝殼高（8.49±1.39）mm，生長率為（111.27±57.25）%；沙井港稚貝殼高（10.10±1.48）mm，生長率為（185.13±119.99）%；青菜頭稚貝殼高（7.93±1.14）mm，生長率為（125.64±65.79）%。沙井港稚貝的殼高顯著高于亞公山和青菜頭（P＜0.05），亞公山和青菜頭之間的稚貝殼高無顯著差異（P＞0.05），沙井港稚貝的生長率顯著高于亞公山（P＜0.05）。

11 月30 日測量，海邊池塘的牡蠣稚貝殼高達(dá)到（16.78±2.72）mm，生長率為（373.53±153.37）%，均顯著高于其他三地的稚貝（P＜0.05）。亞公山稚貝殼高（9.65±0.98）mm，生長率為（141.59±64.47）%；沙井港稚貝殼高（11.78±1.69）mm，生長率為（234.73±156.17）%；青菜頭牡蠣稚貝殼高（9.17±1.71）mm，生長率為（162.88±92.03）%。沙井港稚貝的殼高顯著高于亞公山和青菜頭（P＜0.05），亞公山和青菜頭之間的稚貝殼高無顯著差異（P＞0.05），沙井港稚貝的生長率顯著高于亞公山（P＜0.05）。

12 月8 日測量，海邊池塘的牡蠣稚貝殼高達(dá)（20.11±2.62）mm，生長率為（457.51±125.98）%，均顯著高于其他三地的稚貝（P＜0.05）。亞公山稚貝殼高（11.21±1.01）mm，生長率為（179.98±71.98）%；沙井港稚貝殼高（12.56±1.51）mm，生長率為（256.56±155.17）%；青菜頭稚貝殼高（10.00±1.01）mm，生長率為（186.09±85.86）%。三點之間稚貝的殼高存在顯著差異（P＜0.05），沙井港稚貝的生長率顯著高于亞公山（P＜0.05），亞公山和青菜頭之間生長率無顯著差異（P＞0.05）。

12 月8 日實驗結(jié)束時，四個地點牡蠣稚貝殼高從大到小依次為：海邊池塘（20.11±2.62）mm，沙井港（12.56±1.51）mm，亞公山（11.21±1.01）mm，青菜頭（10.00±1.01）mm（圖5），海邊池塘的稚貝殼高顯著高于其他三個地點（P＜0.05）。四個地點稚貝生長率從大到小依次為：海邊池塘（457.51±125.98）%、沙井港（256.56±155.17）%、亞公山（179.98±71.98）%、青菜頭（186.09±85.86）%（圖6、圖7），海邊池塘的稚貝生長率顯著高于其他三個地點（P＜0.05）。

圖7 不同中間培育地點香港牡蠣稚貝生長對比Fig.7 Comparison of growth in oyster C.hongkongensis juveniles during intermediate cultivation in different sites

2.2.2 香港牡蠣稚貝的存活率

11 月9 日—12 月8 日不同中間培育地點香港牡蠣稚貝的存活率變化在：海邊池塘98.78%～96.34%，亞公山97.90%～86.19%，沙井港98.25%～92.13%，青菜頭為97.93%～80.68%。

實驗結(jié)束時，池塘的牡蠣稚貝存活率最高（93.90%），其次為沙井港（89.95%），最后是亞公山（81.58）%和青菜頭（80.68%）（圖8）。

圖8 香港牡蠣稚貝的存活率Fig.8 Survival rate of oyster C.hongkongensis juveniles

3 討論

3.1 牡蠣稚貝中間培育環(huán)境條件分析

中間培育期間，亞公山、青菜頭、沙井港及海邊池塘的水溫均呈下降趨勢；四個地點的鹽度呈上升趨勢，亞公山和青菜頭鹽度比池塘和沙井港高。對沙茅尾海水質(zhì)參數(shù)周年檢測發(fā)現(xiàn)，沙井港和青菜頭秋冬季節(jié)水溫和鹽度變化趨勢與本研究結(jié)果相似[15,16]。河口是高生產(chǎn)力的環(huán)境，河流排放的淡水與高鹽度海水混合[17,18]提供了豐富的營養(yǎng)鹽；高金榮等[19]和藍(lán)文陸等[20]對茅尾海浮游植物研究發(fā)現(xiàn)，河口的富營養(yǎng)化導(dǎo)致靠近河口區(qū)域的浮游植物較多，外海的富營養(yǎng)化程度低浮游植物少，這與本研究結(jié)果一致。池塘是個相對封閉的水體，會加速懸浮物沉淀，導(dǎo)致光線更容易穿透水體；如果養(yǎng)分供應(yīng)充足，浮游植物會大量繁殖[21,22]。于金海等[23]發(fā)現(xiàn)，進(jìn)入11 月份池塘水溫開始下降，南方冬季低溫少雨，池塘鹽度上升幅度不大，溫度低且光照強度弱，導(dǎo)致水中大型藻類生物較少，只有200～1 000 ind./mL，這與本研究結(jié)果一致。比較證實，海邊池塘、茅尾海內(nèi)灣（沙井港）和外海青菜頭，以及池塘的水溫、鹽度、餌料密度變化都有所不同。

3.2 不同中間培育方法效果分析

傳統(tǒng)海區(qū)中間培育稚貝方式效率低、稚貝生長緩慢，并受到氣候、鹽度、潮汐等環(huán)境條件和敵害生物的影響；范建勛等[24]通過縊蟶（Sinonouacula constricta）池塘路基集約化中間培育模式與傳統(tǒng)灘涂中培模式比較發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)灘涂中培模式下稚貝的規(guī)格不統(tǒng)一、生長率低。池塘中間培育稚貝通過魚蝦貝混養(yǎng)，能夠充分利用水體、人為控制敵害、提供穩(wěn)定餌料及鹽度，提高貝類存活率[25]。劉強等[26]通過研究毛蚶（Scapharca subcrenata）稚貝池塘中培技術(shù)發(fā)現(xiàn)，在河口地區(qū)的池塘對毛蚶稚貝進(jìn)行中間培育效果明顯；稚貝通過池塘網(wǎng)籠吊養(yǎng)充分利用池塘空間，能減少敵害，提高稚貝的成活率，這與本研究結(jié)果一致。海洋雙殼類的生長主要受水溫、鹽度和浮游植物等環(huán)境變量影響[27-29]。多數(shù)具有經(jīng)濟(jì)價值的牡蠣在15～30℃的水溫都能正常生長，香港牡蠣最適生長水溫為22℃[30,31]。本實驗中，海區(qū)和池塘中間培育地點水溫均值在22～23℃范圍內(nèi)，推測引起稚貝生長率和存活率的差異并不是由水溫引起。鹽度波動時，牡蠣會關(guān)閉外殼，如果鹽度波動明顯且持續(xù)，牡蠣呼吸將停止并可能發(fā)生死亡[32]；Chávez 等[33]通過比較內(nèi)灣和外海養(yǎng)殖牡蠣發(fā)現(xiàn)，內(nèi)灣牡蠣存活率低于外海，這一結(jié)果與本實驗相反，出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是內(nèi)灣靠近河口導(dǎo)致海水鹽度偏低，不利于長牡蠣存活，但香港牡蠣是低鹽種，對低鹽度有較強適應(yīng)性，河口的咸淡水交匯處與海邊池塘更適合香港牡蠣的存活[27,34,35]。浮游植物作為牡蠣主要食物來源，養(yǎng)殖區(qū)域浮游餌料密度差異決定牡蠣攝入能量的多少，直接影響牡蠣的生長[36]；本研究結(jié)果表明，池塘餌料密度低于沙井港，但池塘中蠣稚貝的生長率大于沙井港，這可能是因為在食物供應(yīng)量相對較低時，較小的餌料差異不能對牡蠣的生長產(chǎn)生太大的影響[37]。雖然池塘的餌料密度相對沙井港較低，但其變化幅度不大，能夠提供相對穩(wěn)定的生物餌料供稚貝攝食，使稚貝維持較高的生長率。

3.3 結(jié)論

本實驗選擇四個實驗地點對牡蠣稚貝進(jìn)行中間培育，通過監(jiān)測鹽度、水溫、餌料密度、生長率和存活率發(fā)現(xiàn)，四個地點水溫差異不明顯，均呈下降趨勢；青菜頭、亞公山的鹽度高于池塘與沙井港；相對于其他三個實驗地點，池塘餌料密度變化穩(wěn)定。實驗結(jié)果表明，池塘中間培育牡蠣稚貝的生長率和存活率高于青菜頭和亞公山中培牡蠣稚貝，主要原因可能是長期的高鹽脅迫使牡蠣稚貝的生長受到影響。本研究有望彌補香港牡蠣傳統(tǒng)保苗方式的不足，突破香港牡蠣保苗技術(shù)瓶頸，為香港牡蠣養(yǎng)殖提供理論指導(dǎo)及新的思路。