高 琳

（遼陽(yáng)市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法隊(duì)，遼寧 遼陽(yáng) 111000）

鴨疫里默氏桿菌病俗稱鴨疫綜合征、鴨敗血癥、新鴨病、鴨傳染性漿膜炎，是由鴨疫里默氏桿菌感染危害雛火雞、雛鴨、鵝及其他禽類的急、慢性接觸性或者敗血性傳染疾病。病禽表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、綠色下痢、眼、鼻有分泌物、抽搐與神經(jīng)癥狀；腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、干酪性輸卵管炎、氣囊炎、纖維素性肝周炎、纖維素性心包炎為主要病變特征。鴨疫里默氏桿菌的傳播途徑為皮膚傷口、呼吸道、消化道等。1～35日齡雛鴨易感染該菌，發(fā)病率最高可達(dá)90%、病死率也高達(dá)80%，嚴(yán)重影響鴨類養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。國(guó)際公認(rèn)該菌共20多種血清型，不同類型的血清型可交叉感染，不同國(guó)家與地區(qū)、不同時(shí)期相同地區(qū)或相同養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)出現(xiàn)多類型血清型混合感染。目前控制該病菌的關(guān)鍵舉措為疫苗免疫與藥物治療。

1 流行病學(xué)

鴨疫里默氏桿菌屬黃桿菌科，是侵害禽類感染敗血癥的病原體。該菌通過(guò)呼吸道或表皮傷口進(jìn)入禽類體內(nèi)繁殖，由血液循環(huán)遍布全身各個(gè)器官。在通風(fēng)不良、營(yíng)養(yǎng)素供給不平衡、育雛密度大等情況下，均可誘發(fā)該病。鴨疫里默氏桿菌耐受性較強(qiáng)，可伴隨飲水、飼糧、飛沫、粉塵等因素侵害雛鴨，多量的病原侵入病禽體內(nèi)，增加了感染率與病亡率，是我國(guó)禽類養(yǎng)殖主要的細(xì)菌性疾病。

2 病原學(xué)

鴨疫里默氏桿菌為革蘭氏陰性菌的一種，短桿狀、近球狀，有莢膜形成，無(wú)鞭毛，單個(gè)菌體大小為0.4微米×（0.8～1.5）微米。建議使用胰酶大豆瓊脂、巧克力瓊脂、馬丁肉湯瓊脂等固體培養(yǎng)基，在5%～10%二氧化碳培養(yǎng)箱中對(duì)該菌進(jìn)行培養(yǎng)，24～48小時(shí)之后，表面呈現(xiàn)邊緣整齊、光滑、凸起、無(wú)色、呈圓形、直徑小于2毫米的小菌落，并散發(fā)藍(lán)綠光芒。

3 耐藥性

鴨疫里默氏桿菌本身固有耐藥，容易形式耐藥性，另外，臨床上抗生素的大量應(yīng)用，使鴨疫里默氏桿菌的耐藥性日趨嚴(yán)重。該菌病常見的治療西藥包括恩諾沙星、慶大霉素、卡那霉素、硫酸鏈霉素與頭孢類藥物等；常見的治療中藥包括石榴皮、板藍(lán)根、大黃、蒲公英、黃連等。在臨床試驗(yàn)中，鴨疫里默氏桿菌對(duì)20多種藥物都具有很強(qiáng)的耐藥性。中藥可以達(dá)到一定的預(yù)防效果，但是持久性差，不用藥，該菌就會(huì)復(fù)發(fā)，成本較高。隨著民眾對(duì)食品安全的認(rèn)識(shí)程度的提高，“無(wú)抗化”動(dòng)物健康養(yǎng)殖的推進(jìn)，疫苗免疫成為鴨疫里默氏桿菌病防治的重要舉措。

4 鴨疫里默氏桿菌疫苗研究進(jìn)展

4.1 滅活疫苗

滅活疫苗是指人工培育病毒，分離培養(yǎng)的病原體，用甲醛、福爾馬林等化學(xué)藥劑對(duì)其滅活。鴨疫里默氏桿菌滅活疫苗在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)占有率較高，安全性高、免疫持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、保護(hù)效果較好。

4.1.1 福爾馬林滅活疫苗 國(guó)際上福爾馬林滅活苗于1979年已開始研制，學(xué)者們?cè)趹敉馀c實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，分別對(duì)3周齡的鴨子接種疫苗，免疫效果良好。我國(guó)鴨疫里默氏桿菌滅活疫苗的研究始于1987年，研究者從病死鴨體內(nèi)分離出血清l型病菌，使用福爾馬林，研發(fā)滅活疫苗，并在實(shí)驗(yàn)室與戶外進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)，保護(hù)率達(dá)到86.7%～100%。

4.1.2 油乳劑滅活疫苗 我國(guó)研究人員分離出血清2型與2型鴨疫里默氏桿菌，對(duì)細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)、滅活等程序，采用先進(jìn)的液體培養(yǎng)工藝，增菌后試制出二價(jià)油乳劑滅活疫苗，篩選出6株毒性較強(qiáng)的菌株，在7～77天分別進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果顯示，皮下注射一次免疫效果較差，在后腿肌肉注射的疫苗免疫持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。另有研究者選取地方優(yōu)勢(shì)流行株血清2型鴨疫里默氏桿菌為菌種，研制了安全性與穩(wěn)定性較高好的甲醛油乳劑滅活苗，對(duì)麻鴨進(jìn)行免疫后，檢測(cè)抗體滴度，免疫保護(hù)率達(dá)88%，比同類滅活疫苗保護(hù)率高(63%)。油乳劑類滅活苗產(chǎn)生的保護(hù)效果較好，兩次注射后，保護(hù)周期可達(dá)兩個(gè)月，保護(hù)率高達(dá)91%。

4.1.3 氫氧化鋁膠滅活苗 泰國(guó)學(xué)者使用該菌肉湯培養(yǎng)液研究了氫氧化鋁膠滅活疫苗，設(shè)計(jì)了不同類型血清型交叉保護(hù)的試驗(yàn)、疫苗濃度差異試驗(yàn)與間隔時(shí)間不同的攻毒試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果為，正常濃度與稀釋2倍的疫苗保護(hù)率大致相同，稀釋十倍、百倍、千倍的保護(hù)率差異明顯。對(duì)10日齡前首免的雛鴨進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，14日齡保護(hù)效果最好，可達(dá)96%。我國(guó)研究人員分離出鴨疫里默氏菌血清型2型，研發(fā)氫氧化鋁膠滅活疫苗，對(duì)5日齡首免的櫻桃谷雛鴨進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，該滅活苗的保護(hù)率可達(dá)60%，于25日齡進(jìn)行第二次皮下免疫，攻毒后，保護(hù)率高達(dá)92%。

4.1.4 含免疫增強(qiáng)劑的滅活疫苗 研發(fā)疫苗的進(jìn)程中，蜂膠、黃芪多糖等可作為免疫增強(qiáng)劑提高機(jī)體抗病能力。蜂膠是具有芳香氣味的膠黏性固形物，含有芳香酸、芳香酸脂類于黃酮類化合物，是一種天然藥物。蜂膠可以作為添加劑應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)中，添加適量蜂膠至飼糧中提高機(jī)體的抵抗力。我國(guó)學(xué)者制備含蜂膠的鴨疫里默氏菌滅活疫被注射至雛鴨后，未產(chǎn)生紅腫與結(jié)節(jié)現(xiàn)象，保護(hù)效果良好。黃芪多糖是一種安全性高的中藥成分，提高動(dòng)物機(jī)體抗病能力。研究者分離出鴨疫里默氏菌l型菌株，研制出含黃芪多糖的滅活苗，對(duì)5日齡雛鴨首免，分別5次攻毒，保護(hù)率均在90%以上。

4.2 減毒活疫苗

減毒活疫苗是經(jīng)過(guò)人工干預(yù)減弱病原體毒性或自然篩選菌株為弱毒或無(wú)毒制成的活力完整的微生物制劑。美國(guó)學(xué)者利用1、2與5血清型的菌株，制備三價(jià)減毒活疫苗。通過(guò)噴氣霧劑或口服的途徑分別對(duì)北京鴨進(jìn)行首免。結(jié)果顯示，單一血清型減毒活疫苗與對(duì)應(yīng)血清型保護(hù)效果較好，但對(duì)其他血清型并未達(dá)到保護(hù)目的。服用三價(jià)減毒活疫苗對(duì)感染1、2與5血清型的病菌保護(hù)效果良好。

4.3 亞單位疫苗

亞單位疫苗是采用生物學(xué)技術(shù)提取細(xì)菌表面抗原蛋白，引發(fā)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生抗體。該疫苗減輕了免疫副反應(yīng)等相關(guān)問(wèn)題，為研究者指明了精確免疫與聯(lián)合免疫的發(fā)展方向。我國(guó)研究人員提取細(xì)菌莢膜，對(duì)7日齡北京鴨進(jìn)行首免，對(duì)同源病菌進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，保護(hù)率可達(dá)90%。國(guó)外研究人員將血清2型的OmpA亞單位疫苗，以CpG-ODN為佐劑，對(duì)雛鴨進(jìn)行免疫，經(jīng)檢測(cè)，細(xì)胞因子含量均有所提升，并能夠增強(qiáng)細(xì)胞與體液免疫。與滅活疫苗、減毒活疫苗相比，亞單位疫苗保護(hù)率高、能夠解決使用減毒活疫苗時(shí)抗生素的使用問(wèn)題。但由于制備成本高、市場(chǎng)推廣難，其研發(fā)受到了一定約束。

4.4 核酸疫苗

核酸疫苗通過(guò)引發(fā)動(dòng)物機(jī)體形成液體免疫繼而產(chǎn)生細(xì)胞免疫，免疫記憶持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，穩(wěn)定性、安全性高。研究人員提取鴨疫里默氏桿菌血清2型的基因Vap D1，作為抗原，重組真核表達(dá)質(zhì)粒，試制成疫苗，對(duì)雛鴨進(jìn)行肌肉注射免疫，對(duì)同類型毒株有防護(hù)作用，但是免疫效果略遜色于Vap D1編碼的亞單位疫苗。

5 結(jié)語(yǔ)

鴨群爆發(fā)疫病嚴(yán)重影響禽類養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，鴨疫里默氏桿菌作為最為常見且危害性極強(qiáng)的細(xì)菌性疾病，因而，增強(qiáng)該病菌的疫苗防控極其關(guān)鍵。疫苗的研制也趨于多元化，亞單位疫苗、基因疫苗與其他新型疫苗的研發(fā)不斷深入，為鴨疫里默氏桿菌的防控提供強(qiáng)力支撐。