【摘要】" 目的" 調(diào)查新型冠狀病毒滅活疫苗免疫后特異性抗體水平。方法" 本研究選取2021年2月- 2022年2月，在重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院接種新型冠狀病毒滅活疫苗的健康人士40例為接種組，選擇同期未實施疫苗接種的健康人士40例為對照組。對所有研究對象進行新型冠狀病毒免疫球蛋白IgM、IgG、中和抗體、總抗體（化學發(fā)光法）檢測與比較。結果" 接種組對象新型冠狀病毒IgM、IgG、中和抗體和總抗體水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。接種組對象抗體水平隨接種劑次的增加而增加，差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。結論" "新型冠狀病毒滅活疫苗免疫后，特異性抗體水平與接種疫苗情況存在較大聯(lián)系，接種次數(shù)一定程度上影響著新型冠狀病毒的免疫情況。

【關鍵詞】" 新型冠狀病毒；滅活疫苗免疫；特異性抗體水平；免疫球蛋白；中和抗體

中圖分類號" R446.6;R186" " 文獻標識碼" A" " 文章編號" 1671-0223（2023）24--03

新型冠狀病毒感染是一種傳染性強、潛伏期長、易感性高的呼吸系統(tǒng)疾病，對人類健康、經(jīng)濟發(fā)展、造成巨大威脅[1]。在我國，新型冠狀病毒感染已經(jīng)歸為乙類傳染病，但按照甲類傳染病進行管理。目前，接種新冠疫苗是戰(zhàn)勝病毒、降低危重患者發(fā)病率、控制疫情發(fā)展的有效方法之一[2]。滅活疫苗已成為我國接種率較高的疫苗[3]，在接種新冠滅活疫苗之后，人體會產(chǎn)生特異性抗體，包括免疫球蛋白IgM、IgG等，其可以對抗病毒入侵和感染[4]。所以，通過對血清中抗體水平的檢測，是評價疫苗保護效果的指標之一。本研究通過調(diào)查新型冠狀病毒滅活疫苗免疫后特異性抗體水平，探討疫苗的保護效果。

1" 對象與方法

1.1" 調(diào)查對象

本研究選取2021年2月- 2022年2月，在重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院接受新型冠狀病毒滅活疫苗的健康接種者40例為接種組，選擇同期未接受疫苗接種的健康者40例為對照組。接種組男性12例，女性28例，年齡19～60歲，平均年齡34.85±10.25歲，接種劑次：1劑10例、2劑16例、3劑14例。對照組男性6例，女性34例，年齡22～58歲，平均年齡31.70±8.96歲。兩組調(diào)查對象基礎資料差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05），具有可比性。本研究經(jīng)重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)療倫理委員會審核后通過；調(diào)查對象均對本研究知情，并簽署相關協(xié)定。

（1）納入標準：年齡18～60歲；無免疫性疾病，健康人士指未受到新型冠狀病毒感染，且不存在其他傳染病史、重大臟器器官受損與慢性疾病。

（2）排除標準：伴有全身免疫性疾病或傳染病者；接種組兩劑之間的接種時間不足28 d；未留取足夠的血液樣本。

1.2" 資料收集

資料內(nèi)容包括性別、年齡、吸煙史、體質(zhì)量以及接種疫苗后30min觀察期及之后的72h健康監(jiān)測中不良反應的發(fā)生情況，如出現(xiàn)乏力、皮疹、發(fā)燒、頭疼等癥狀都是常見的不良反應。

1.3" 實驗室檢測

取外周靜脈血6ml，在室溫條件下，待血清樣本完全凝固后，用2500×g離心10min，取上層血清，放入-20℃冰箱保存待檢。采用安圖AUTO LUMO A2000全自動化學發(fā)光測定儀和安圖的新冠病毒2019-nCoV IgM、IgG抗體測定試劑（化學發(fā)光法）進行測定；采用博奧賽斯（重慶）2019-nCoV中和抗體檢測試劑以及2019-nCoV總抗體檢測試劑盒（磁微?；瘜W發(fā)光法）進行測定。

1.4" 質(zhì)量控制與檢測結果評價標準

全部樣本均在檢測前、檢測中、檢測后進行質(zhì)控，確保檢測結果可控。測定樣本中的抗體效價，IgM、IgG、總抗體結果以COI為單位，用S/CO表示，S/CO＝檢測出的樣本發(fā)光值/通過校準品發(fā)光值計算出的臨界值，其中臨界值＝陽性對照發(fā)光值均值×0.1+陰性對照發(fā)光值均值；中和抗體以AU/ml為單位。實驗室工作人員根據(jù)試驗程序，對樣本進行檢驗，并對結果進行判斷。新型冠狀病毒的IgM、IgG以及總抗體的檢測結果，≥1COI為陽性；中和抗體檢測結果，≥2AU/ml為陽性。

1.5" 數(shù)據(jù)分析方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進分析，計量資料以“±s”表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗；多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。計數(shù)資料計算百分率，組間率比較采用χ2檢驗；利用Spearman相關分析方法對兩個變量的相關性進行分析。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2" 結果

2.1" 兩組調(diào)查對象新型冠狀病毒抗體水平比較

接種組對象IgM、IgG、中和抗體和總抗體水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表1。

2.2" 接種組調(diào)查對象不同接種次數(shù)的抗體水平比較

隨接種劑次的增加，接種組對象的IgM、IgG、中和抗體和總抗體水平逐漸增加，組間差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05），見表2。

3" 討論

目前，國內(nèi)在滅活疫苗方面的技術已經(jīng)比較成熟，生產(chǎn)體系也比較完善，技術路線安全、可靠，在中國仍然是優(yōu)先選擇的新型冠狀病毒疫苗的技術路線，并且已經(jīng)實現(xiàn)了對民眾的大規(guī)模免疫。近年來，新型滅活疫苗如脊髓灰質(zhì)炎疫苗、EV71滅活疫苗等相繼推出，并穩(wěn)定批量生產(chǎn)，已建立起了以細胞培養(yǎng)、病毒培養(yǎng)、高效滅活與提純、配方制劑等技術為核心的滅活疫苗制備與質(zhì)控系統(tǒng)[5]?！翱煅锌飚a(chǎn)”是新型冠狀病毒滅活疫苗發(fā)展的必然趨勢，經(jīng)過長期的研究和大量的臨床應用，證實了滅活疫苗的安全性和有效性。

本研究結果顯示，接種組對象新型冠狀病毒IgM、IgG、中和抗體和總抗體水平更高；并且抗體水平隨接種劑次的增加而增加，說明新型冠狀病毒滅活疫苗免疫后特異性抗體水平與接種疫苗情況存在較大聯(lián)系，為保持比較客觀的抗體水平，需要增加新型冠狀病毒疫苗接種劑次，以保持人群的免疫屏障。究其原因，在新型冠狀病毒感染后，體內(nèi)的免疫反應會產(chǎn)生特異的IgG和IgM抗體，這兩種抗體都屬于血清學檢查的標志物[6]。IgM抗體是最早在體內(nèi)產(chǎn)生的一種特異性抗體，中和抗體是直接有效的一種保護性抗體，是評價機體能否抵抗新型冠狀病毒的“金標準”[7]。新型冠狀病毒屬于單股正鏈RNA包膜病毒，來自β屬冠狀病毒家族，暴露在其表面的刺突蛋白及受體結合區(qū)域，會導致具有高效力的中和抗體發(fā)生，因此是滅活疫苗的主要靶標[8]。免疫后的IgG抗體水平與中和抗體定量分析有很好的相關性，盡管IgG抗體不能直接評估疫苗的免疫保護作用，但卻能反應疫苗的免疫原性[9]。所以，尋找一種與中和抗體在效價、作用時間上相近，并且便于快速檢測的抗體，可以幫助了解人體對新型冠狀病毒的免疫力[10]。但是，血清中抗體的含量并不能直接代表疫苗的有效性，尤其是在病毒變異的情況下，因此還需要更多的實驗來證明。

4" 參考文獻

[1] 徐娜妮，胡小煒，李海燕，等.接種新型冠狀病毒滅活疫苗血清抗體水平分析[J].預防醫(yī)學，2022，34（1）：33-36，41.

[2] 劉夢穎，梁雪梅，林虎，等.95例醫(yī)務人員接種新冠滅活疫苗后特異性抗體分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志，2022，32（22）：3497-3501.

[3] 丁龍飛，徐建青.從新冠感染者康復后外周血中成功分離獲得多個特異性中和抗體[J].上海醫(yī)藥，2020，41（S1）： 75.

[4] 楊蓉，李為棟，劉小娟，等.CpG 7909/鋁佐劑對新型冠狀病毒滅活疫苗的免疫增強作用[J].中國新藥雜志，2022，31（21）：2114-2119.

[5] 李瑩慧，張迪，張兆天，等.畢赤酵母提高產(chǎn)腸毒素大腸桿菌滅活疫苗免疫保護效果的研究[J].中國預防獸醫(yī)學報，2022，44（12）：1324-1331.

[6] 趙本南，鐘晶，岳勇，等.成都市91名醫(yī)務人員接種新冠疫苗加強針后特異性抗體分析[J].中國熱帶醫(yī)學，2022，22（4）：311-314，319.

[7] 康友敏.新型冠狀病毒滅活疫苗的應用及改進策略[J].青?？萍?，2022，29（4）：10-16.

[8] 蒼天樂，李克雷，蔣聰利，等.新冠滅活疫苗不同免疫針次和免疫間隔誘導抗體免疫反應的比較[J].中國生物制品學雜志，2022，35（4）：385-390，398.

[9] 蘇錦鋒，景璐，鄒文欣.我國新型冠狀病毒疫苗研發(fā)生產(chǎn)分析：以滅活疫苗為例[J].華南預防醫(yī)學，2021， 47（7）：861-864.

[10] 康莊，唐梅.新型冠狀病毒疫苗的研發(fā)進展及分析[J].生物醫(yī)學工程學雜志，2020，37（3）：373-379.

[2023-08-18收稿]