馬 濤，劉 哲，遲歸兵

(1.山西省檢驗(yàn)檢測(cè)中心(山西省標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量技術(shù)研究院)，山西 太原 030025；2.吉林省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，吉林 長(zhǎng)春 130033；3.山東省農(nóng)藥檢定所，山東 濟(jì)南 250100)

1 前言

氯蟲苯甲酰胺是鄰甲酰氨基苯甲酰胺類廣譜殺蟲劑，最早由美國(guó)杜邦公司于2008年在我國(guó)登記，化學(xué)式為C18H14BrCl2N5O2，CAS登錄號(hào)500008-45-7。熔點(diǎn)(℃)208～210，水中溶解度(mg/L，pH4～9，20～25℃)1.0；有機(jī)溶劑中溶解度(g/L，20～25℃)丙酮3.4、乙腈0.71、二氯甲烷2.48、二甲基甲酰胺124、乙酸乙酯1.14、乙腈1.71[1]。殺蟲機(jī)理：主要通過(guò)激活害蟲體內(nèi)魚尼丁(肌肉)受體，造成過(guò)度釋放細(xì)胞內(nèi)的鈣離子，導(dǎo)致昆蟲癱瘓死亡。氯蟲苯甲酰胺高效廣譜，對(duì)鱗翅目的夜蛾科、螟蛾科、蛀果蛾科、卷葉蛾科、粉蛾科、菜蛾科、麥蛾科、細(xì)蛾科等均有很好的控制效果，還能控制鞘翅目象甲科，葉甲科；雙翅目潛蠅科等多種非鱗翅目害蟲。虱螨脲屬苯甲酰脲類殺蟲殺螨劑，最早由瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司于2003年在我國(guó)取得登記，分子式為C17H8Cl2F8N2O3，CAS登錄號(hào)103055-07-8。熔點(diǎn)(℃)168.7～169.4，水中溶解度(mg/L，pH7.7，20～25℃)0.048，有機(jī)溶劑中溶解度(g/L，20～25℃)丙酮460、二氯甲烷84、乙酸乙酯330、正己烷0.10、乙腈52、甲苯66[1]。作用機(jī)理：通過(guò)抑制幼蟲幾丁質(zhì)合成酶的形成而發(fā)生作用，干擾幾丁質(zhì)在表皮的沉積，導(dǎo)致昆蟲不能正常蛻皮變態(tài)而死亡。主要用于防治棉花、玉米、蔬菜、果樹等鱗翅目等幼蟲，適于防治對(duì)合成除蟲菊酯和有機(jī)磷農(nóng)藥產(chǎn)生抗性害蟲。氯蟲苯甲酰胺由于不科學(xué)合理使用，早在2012年就有報(bào)道其在防治對(duì)象上形成嚴(yán)重抗性報(bào)道[2]，與虱螨脲混配，在取得更好的防治效果同時(shí)，將大大減緩抗性問(wèn)題。

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料以“±s”表示；采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

“Canterbury”英格蘭肯特郡的一個(gè)城市，有許多古舊精美的建筑，包括英國(guó)國(guó)教會(huì)的著名的中心大教堂。1170年托馬斯·貝克特在這里遇害后，此地成為基督徒朝圣地?，F(xiàn)在是重要的旅游勝地。1988年坎特伯雷大教堂入選世界遺產(chǎn)名錄（克勞瑟，2007）。[13]譯者采用音譯的方法，保留了源語(yǔ)言文化，但是由于兒童讀者在身心發(fā)展兩方面都還沒有發(fā)育完全，太多的異質(zhì)語(yǔ)言會(huì)超過(guò)他們的知識(shí)范圍和理解能力。添加注釋，會(huì)更易于兒童讀者接受。

這一切，天空中的青辰看得十分清楚。他不明白，白鷲這類生物，一向以尸體為食，除非生命受到威脅，否則不會(huì)攻擊活物。即使它處于饑餓中，而面前恰巧有一只瀕死的獵物，它也要等，直到對(duì)方的最后一絲氣息斷絕。

目前國(guó)內(nèi)該混劑的分析方法尚未見公開報(bào)道，本文介紹了一種用高效液相色譜法同時(shí)分離測(cè)定氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲的方法。該方法操作簡(jiǎn)單、快速，分離效果和穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確度和精密度均能達(dá)到定量分析要求，是一種比較實(shí)用的產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)方法。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器和試劑

式中：

2.1.2 試劑 超純水(電阻率：25℃，18.2 MΩ.cm)；乙腈(色譜純)；氯蟲苯甲酰胺標(biāo)樣99.7%；虱螨脲標(biāo)樣98.5%；15%氯蟲苯·虱螨脲懸浮劑(氯蟲苯甲酰胺10%、虱螨脲5%)。

2.2 液相色譜條件 色譜柱：Ultimate?LP-C184.60×250 mm，5 μm不銹鋼柱；柱溫：30℃；流動(dòng)相：乙腈∶水=70∶30(V/V)；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm；進(jìn)樣量：5.0 μL。在上述條件下，氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲的保留時(shí)間分別約為4.8 min和13.1 min。

2.3 操作步驟

A2—試樣溶液中氯蟲苯甲酰胺(虱螨脲)峰面積的平均值；

2.3.2 試樣溶液的配制 稱取0.5 g(精確至0.000 2 g)的試樣，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩10 min，靜置到室溫，搖勻，用0.2 μm孔徑針頭式濾器過(guò)濾，備用。

2.3.3 測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的2個(gè)待測(cè)組分響應(yīng)值相對(duì)變化均≤1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.3.4 計(jì)算 采用外標(biāo)法計(jì)算。將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣中的氯蟲苯甲酰胺(或虱螨脲)峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中氯蟲苯甲酰胺(或虱螨脲)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X(%)按下式計(jì)算：

1）扭轉(zhuǎn)沖擊工具可將流體的液壓能轉(zhuǎn)換成周向的、高頻的機(jī)械能，用于給鉆頭施加周期性的低幅高頻扭轉(zhuǎn)沖擊，能對(duì)鉆頭施加高效的破巖扭矩，大幅減小或消除鉆頭的黏滑振動(dòng)。

2.1.1 儀器與設(shè)備 Agilent HPLC 1100液相色譜儀(配工作站、在線脫氣機(jī)、100位自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器)；梅特勒AG285十萬(wàn)分之一電子天平；Agilent針頭式過(guò)濾器(RC 0.2 μm)；Millipore QG超純水機(jī)；超聲波清洗機(jī)；常用玻璃器皿；2.5 mL一次性注射器。

A1—標(biāo)樣溶液中氯蟲苯甲酰胺(虱螨脲)峰面積的平均值；

審計(jì)畫像指標(biāo)體系分為正向“經(jīng)責(zé)像素體系”和負(fù)向的“風(fēng)險(xiǎn)像素體系”，兩大類，正向經(jīng)責(zé)像素體系主要用來(lái)描述所屬公司的基本運(yùn)營(yíng)情況。涵蓋集團(tuán)公司戰(zhàn)略、優(yōu)化配置資源及管理提升情況、網(wǎng)絡(luò)投資建設(shè)及資產(chǎn)運(yùn)營(yíng)效率情況、業(yè)務(wù)經(jīng)營(yíng)情況、市場(chǎng)拓展及發(fā)展能力情況五大類指標(biāo)組成，目前共由36個(gè)細(xì)項(xiàng)指標(biāo)組成。風(fēng)險(xiǎn)像素指標(biāo)主要涉及的是企業(yè)的經(jīng)營(yíng)風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)，主要分成收入、成本、業(yè)務(wù)發(fā)展、資金資產(chǎn)、紅線等七大類指標(biāo)體系，目前共由35個(gè)風(fēng)險(xiǎn)指標(biāo)組成。

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取氯蟲苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品0.05 g(精確至0.000 2 g)、虱螨脲標(biāo)準(zhǔn)品0.03 g(精確至0.000 2 g)置于同一100 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩10 min，靜置到室溫，搖勻，用0.2 μm孔徑針頭式濾器過(guò)濾，備用。

m1—標(biāo)樣氯蟲苯甲酰胺(虱螨脲)的質(zhì)量，g；

3.3 精密度測(cè)定 將樣品分別稱取6份，分別測(cè)定，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.061 887和0.064 704，變異系數(shù)分別為0.61%和1.20%。

3.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 分別將某一濃度氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析，利用DAD檢測(cè)器進(jìn)行光譜掃描，得到二者的紫外吸收光譜圖(圖3、4)，可見二者最大吸收均在低紫外區(qū)。經(jīng)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，選擇波長(zhǎng)在260 nm處時(shí)，各雜質(zhì)不影響測(cè)定，兩個(gè)待測(cè)組分都有較大吸收，且遠(yuǎn)離低波長(zhǎng)紫外區(qū)。

3 結(jié)果與討論

3.1 流動(dòng)相的選擇 15%氯蟲苯·虱螨脲懸浮劑中雜質(zhì)成分較少，為確保待測(cè)組分與雜質(zhì)完全分離，分別用甲醇/水和乙腈/水的不同比例進(jìn)行了試驗(yàn)。結(jié)果表明：使用同樣比例的情況下，乙腈/水的系統(tǒng)壓力顯著低于甲醇/水，隨著流動(dòng)相中乙腈所占比例的減小，出峰時(shí)間會(huì)延遲。在乙腈∶水=70∶30(V/V)時(shí)，各待測(cè)組分與雜質(zhì)能得到較理想地分離，且基線平穩(wěn)、峰形對(duì)稱，分析時(shí)間也較短。在上述分析條件下，同一樣品溶液間隔72 h以上進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，對(duì)所得譜圖分析比對(duì)，兩個(gè)感興趣組分的保留時(shí)間、峰形和峰面積大小等均一致。(圖1、2)

圖1 標(biāo)樣液相色譜圖

圖2 試樣液相色譜圖

p—標(biāo)樣氯蟲苯甲酰胺(虱螨脲)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

圖3 氯蟲苯甲酰胺紫外吸收譜圖

圖4 虱螨脲紫外吸收譜圖

m2—試樣的質(zhì)量，g；

表1 精密度測(cè)量結(jié)果

3.4 準(zhǔn)確度測(cè)定 采取添加回收率測(cè)定方法來(lái)計(jì)算本方法的準(zhǔn)確度，稱取5份已知含量的試樣，分別加入不同量的氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲標(biāo)樣，在上述2.2色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得氯蟲苯甲酰胺的平均回收率為100.11%，虱螨脲的平均回收率為100.30%。

調(diào)用中心隨后連接注冊(cè)中心，并通過(guò)服務(wù)名稱從注冊(cè)中心獲取服務(wù)所在的IP地址和端口號(hào)(即服務(wù)地址)，該過(guò)程稱為“服務(wù)發(fā)現(xiàn)”。由此，調(diào)用中心可根據(jù)服務(wù)地址，以反向代理的方式調(diào)用具體的服務(wù)容器，該過(guò)程稱為“服務(wù)調(diào)用”。

3.重視“服”好務(wù)。加強(qiáng)硬件和軟件建設(shè)，配足辦稅設(shè)備，優(yōu)化整合辦稅廳人員，堅(jiān)持執(zhí)行限時(shí)辦結(jié)制度，采取限時(shí)辦結(jié)+即時(shí)辦結(jié)，以及預(yù)約服務(wù)+延時(shí)服務(wù)等有效措施，為納稅人提供便捷的人工辦稅和自助辦稅服務(wù)，使辦稅服務(wù)質(zhì)量不斷提高。同時(shí)，結(jié)合“便民辦稅春風(fēng)行動(dòng)”大力做好政策宣傳，及時(shí)把稅收優(yōu)惠政策送到納稅人手中，讓納稅人應(yīng)知盡享稅收紅利。

表2 添加回收率測(cè)定結(jié)果

3.5 線性關(guān)系的測(cè)定 將已知含量的標(biāo)樣分別配制成一系列已知濃度的梯度溶液(包含分析方法中的檢測(cè)濃度水平)，以質(zhì)量濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制相關(guān)曲線，可知在下述濃度范圍內(nèi)，兩個(gè)待測(cè)組分均呈線性關(guān)系。虱螨脲線性方程為：y=16 333x+241.91，線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)為0.999 7；氯蟲苯甲酰胺線性方程為：y=15 844-49.303，線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)為0.999 9。試驗(yàn)數(shù)據(jù)(表3)。

表3 虱螨脲(氯蟲苯甲酰胺)的線性相關(guān)性試驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.6 方法特異性 方法特異性是指分析方法中特定組分產(chǎn)生的特定信號(hào)，即在其他成分(如雜質(zhì)、添加劑等)可能存在時(shí)，采用的分析方法能夠準(zhǔn)確測(cè)定目標(biāo)組分(有效成分、雜質(zhì)等)特性的能力[3]。為確證本方法分析兩種組分的特異性，用二極管陣列檢測(cè)器分別對(duì)15%氯蟲苯·虱螨脲懸浮劑試樣兩個(gè)待測(cè)組分峰的純度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果(圖5、6)，表明本方法可以有效分離兩個(gè)待測(cè)組分。

圖5 虱螨脲峰純度光譜圖

圖6 氯蟲苯甲酰胺峰純度光譜圖

3.7 方法各指標(biāo)結(jié)果判定 參照NY/T 2887-2016《農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認(rèn)指南》要求[3]，判定本分析方法各指標(biāo)參數(shù)結(jié)果是否滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。對(duì)于15%氯蟲苯·虱螨脲懸浮劑產(chǎn)品，氯蟲苯甲酰胺和虱螨脲分析方法精密度要求變異系數(shù)分別<1.89%和2.10%(計(jì)算公式：2(1-0.5logC)×0.67，對(duì)于氯蟲苯甲酰胺C=0.10，對(duì)于虱螨脲C=0.05)，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，添加回收率要求在97%～103%之間才合乎要求。與本文上述3.3、3.4、3.5各項(xiàng)計(jì)算結(jié)果值相比較可知，該方法線性相關(guān)系數(shù)、精密度和準(zhǔn)確度數(shù)值均滿足NY/T 2887-2016標(biāo)準(zhǔn)要求。待測(cè)組分峰純度指數(shù)均大于999.000，滿足方法特異性要求。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法的準(zhǔn)確度、精密度較高，線性關(guān)系和特異性良好，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，分離效果、穩(wěn)定好等特點(diǎn)，是一種比較實(shí)用的方法。