程征　王永強(qiáng)　錢明珠　王海棚

關(guān)鍵詞：豬脾轉(zhuǎn)移因子；肉雞；免疫

我國(guó)是養(yǎng)禽業(yè)大國(guó)，禽的飼養(yǎng)量、出欄量和人均消耗量已連續(xù)多年位居世界首位。隨著養(yǎng)禽業(yè)的不斷擴(kuò)大，疾病已成為困擾禽業(yè)健康生產(chǎn)的重要因素。隨著人們健康意識(shí)的不斷提高，綠色環(huán)保藥物已成為動(dòng)物疾病防治的首選。轉(zhuǎn)移因子（Transfer Factor，TF） 是T淋巴細(xì)胞所釋放的一類小分子物質(zhì)。TF攜帶有致敏淋巴細(xì)胞的特異性免疫信息，在受者體內(nèi)能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋灾旅袅馨图?xì)胞，因此，它能夠特異性地將供者的細(xì)胞免疫被動(dòng)地轉(zhuǎn)移到受者體內(nèi)，使受者獲得特異性細(xì)胞免疫功能，即轉(zhuǎn)移和擴(kuò)大細(xì)胞的免疫力。被廣泛應(yīng)用于人與動(dòng)物病毒病、細(xì)菌病、真菌病和寄生蟲(chóng)病乃至腫瘤等疫病的預(yù)防和治療，還可提高弱毒疫苗和滅活疫苗免疫后的抗體水平[1]。

一、試驗(yàn)材料與方法

（一） 試驗(yàn)材料

豬脾轉(zhuǎn)移因子為河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院牧業(yè)工程學(xué)院實(shí)驗(yàn)室制作。其制作過(guò)程為：取成年健康豬的新鮮脾臟，用純凈蒸餾水清洗血跡和污漬，剝掉系膜、脂肪等結(jié)締組織，以滅菌生理鹽水沖洗3～5次，剪碎或用機(jī)器絞碎，加1～2倍滅菌生理鹽水混勻，倒入滅菌容器內(nèi)，在－20℃左右凍存，反復(fù)凍融3～5次（反復(fù)凍融是將組織有效成份全部釋解出來(lái)），融化溫度不超過(guò)37℃，然后離心取上清液，將上清液倒入透析袋中透析，兌入體積比為1∶2 的滅菌生理鹽水，透析48～72h，收集透析液即為轉(zhuǎn)移因子原液，滅菌、分裝、冷藏備用。其制作嚴(yán)格按照《中國(guó)生物制品規(guī)程》進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn)、熱源檢驗(yàn)和過(guò)敏試驗(yàn)，并且檢驗(yàn)結(jié)果均為陰性，所制備的豬脾轉(zhuǎn)移因子可以用于臨床試驗(yàn)[2]。

（二） 試驗(yàn)雞群分組

試驗(yàn)在商丘市寧陵縣某肉雞廠進(jìn)行，2020年4月6日新進(jìn)一批雛雞，品種為艾維因白羽肉雞，飼養(yǎng)方式為籠養(yǎng)。為保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性和可對(duì)比性，本次試驗(yàn)的3000只肉雞均為同一批次、同一棟雞舍的雞群。即同日齡、同品種，其他飼養(yǎng)條件完全相同。

（三） 試驗(yàn)方法

本試驗(yàn)在肉雞的一個(gè)完整飼養(yǎng)周期內(nèi)進(jìn)行，對(duì)照組A按肉雞群正常免疫程序進(jìn)行免疫（見(jiàn)表1），實(shí)驗(yàn)組B1除正常免疫程序外，加入1份量TF，通過(guò)飲水的方式進(jìn)行免疫接種，實(shí)驗(yàn)組B2除正常免疫程序外，加入0.5份量TF，通過(guò)飲水的方式進(jìn)行免疫接種。

（四） 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理及分析

采用Excel 2007數(shù)據(jù)分析工具進(jìn)行單因素方差分析，并用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重復(fù)比較分析，所有測(cè)定結(jié)果用平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤來(lái)表示。

二、結(jié)果與分析

（一） ND、IB、IBD抗體檢測(cè)

為進(jìn)一步證實(shí)轉(zhuǎn)移因子在肉雞生產(chǎn)中的作用，尤其對(duì)疫苗免疫增效效果，對(duì)上述三組雞群同時(shí)進(jìn)行ND （新城疫）抗體檢測(cè)、IB（傳染性支氣管炎） 抗體檢測(cè)、IBD（傳染性法氏囊） 抗體檢測(cè)，分別于14日齡、21日齡、28日齡、35日齡在三組雞群中隨機(jī)采血取樣，進(jìn)行以上抗體效價(jià)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2、表3和表4（A組為正常免疫；B1組為正常免疫加1 份量TF 飲水；B2 組為正常免疫加0.5 份量TF 飲水；表中數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）。

（二） 雞脾臟、法氏囊重量測(cè)定

出欄時(shí)隨機(jī)抽取對(duì)照組A和實(shí)驗(yàn)組B1、B2各6只體重和體型均等的肉雞，其活體重在2.5～2.7kg，宰殺后取其脾臟和法氏囊，立即稱重，結(jié)果見(jiàn)表5和表6。

（三） 試驗(yàn)表觀效果統(tǒng)計(jì)

三組雞群試驗(yàn)過(guò)程中，除抗體水平、抗病力有所不同，其他表觀現(xiàn)象也有明顯差別，分別從出欄時(shí)間、平均體重、料肉比、成活率等方面進(jìn)行比較（見(jiàn)表7）。

三、結(jié)論與討論

由表2、表3和表4得出，試驗(yàn)組B1和B2在ND抗體檢測(cè)、IB抗體檢測(cè)、IBD抗體檢測(cè)中顯著高于對(duì)照組A，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)組B1 和試驗(yàn)組B2 之間差異不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)組的抗體效價(jià)明顯高于對(duì)照組，證明轉(zhuǎn)移因子具有免疫增效作用，可提高其抗體水平。實(shí)驗(yàn)組B1和試驗(yàn)組B2的數(shù)據(jù)也說(shuō)明TF與疫苗聯(lián)合使用時(shí)，TF的劑量與抗體效價(jià)有一定關(guān)系，但不完全是正相關(guān)。徐磊等研究了豬脾轉(zhuǎn)移因子提高LaSota株雞新城疫弱毒疫苗的免疫保護(hù)率，結(jié)果表明，TF 可增強(qiáng)IFN－γ、IL－12 介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和IL－4介導(dǎo)的體液免疫，提高LaSota株弱毒疫苗的免疫保護(hù)率，降低疫苗PD50，在抵抗NDV F48E9強(qiáng)毒攻擊時(shí)，聯(lián)合免疫組的免疫保護(hù)率明顯高于單獨(dú)免疫組[3]。

由表5和表6中的數(shù)據(jù)可以看出，實(shí)驗(yàn)組B1、B2組雞脾臟、法氏囊的重量明顯高于對(duì)照組A， 差異顯著（P＜0.05）；且實(shí)驗(yàn)組B1、B2組雞只的脾臟、法氏囊重量有一定差異，但差異不顯著（P＞0.05），說(shuō)明TF對(duì)免疫器官有刺激作用，對(duì)其增重作用比較明顯。由表7可知，三組雞群同時(shí)在42d出欄，用料量相差不大，出欄總重量差別較大，其中，B1組與A組相差185.8kg，B2組與A組相差157.3kg，B1組與B2組相差28.5kg，顯然，實(shí)驗(yàn)組B1、B2的經(jīng)濟(jì)效益明顯大于對(duì)照組A。說(shuō)明在肉雞不同免疫時(shí)間添加轉(zhuǎn)移因子，對(duì)提高雞群整齊度，提高肉雞成活率和日增重等效果明顯。王樹(shù)平等對(duì)出欄時(shí)綜合比較發(fā)現(xiàn)，TF試驗(yàn)組與對(duì)照組相比具有明顯的促生長(zhǎng)和抗病作用[4]。

總之，TF可刺激免疫器官增長(zhǎng)，增強(qiáng)免疫效果，提高免疫抗體水平，降低傳染病發(fā)生率，達(dá)到增加養(yǎng)殖效益的目的，在家禽疾病防治中可以作為疫苗的免疫佐劑。TF對(duì)于目前抗體不足或者抗生素?zé)o法有效控制的傳染病及免疫缺陷疾病的預(yù)防都有重要作用，可以提高肉雞的細(xì)胞免疫水平和體液免疫水平[5]。TF來(lái)源廣泛，在臨床上可應(yīng)用于各種動(dòng)物，無(wú)藥物殘留、無(wú)抗原性、無(wú)毒副作用、無(wú)種屬特異性，屬新型而又安全的免疫制劑。

作者簡(jiǎn)介：程征（1977-），男，河南南陽(yáng)人，碩士，講師，研究方向：臨床獸醫(yī)。