羅其鑫　楊瑩　李思　尚曉靜　侯瑞

摘要：為明確貴州省黔東南苗族侗族自治州麻江縣藍(lán)莓葉斑病病原菌種類及其生物學(xué)特性，采用組織分離法獲得了代表性病原菌株Y2，科赫氏法則證明Y2是引起藍(lán)莓葉斑病的病原菌。形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)綜合鑒定菌株Y2為鏈格孢菌（Alternaria alternate）。生物學(xué)特性研究結(jié)果表明，病原菌Y2在PDA培養(yǎng)條件下，氣生菌絲較發(fā)達(dá)，菌絲呈白色、密集，基質(zhì)背面呈淡黃色，分生孢子單生，褐色，卵圓形、倒棒形，有縱橫隔膜。該菌菌絲生長(zhǎng)的最佳培養(yǎng)基為察氏培養(yǎng)基，產(chǎn)孢最適培養(yǎng)基為WA培養(yǎng)基；菌絲生長(zhǎng)的最適溫度為25 ℃，產(chǎn)孢最適溫度為5 ℃；菌絲對(duì)碳源葡萄糖利用效果最好，但麥芽糖能更好地促進(jìn)Y2產(chǎn)孢；菌絲生長(zhǎng)最適氮源為蛋白胨，產(chǎn)孢最適氮源為硫酸銨；全光照適宜菌絲生長(zhǎng)，但全黑暗促進(jìn)Y2產(chǎn)孢；菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢最適pH值為7。通過Y2菌株生物學(xué)特性研究，能夠?yàn)樗{(lán)莓葉斑病防治提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：藍(lán)莓；葉斑病；鏈格孢菌；生物學(xué)特性

中圖分類號(hào)：S436.639文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2023）05-0146-09

藍(lán)莓學(xué)名篤斯越橘（Vaccinium uliginosum L.），屬杜鵑花科（Ericaceae）越橘亞科（Vaccination）越橘屬（Vaccinium）植物。藍(lán)莓漿果中含有豐富的花青素、鞣花酸等活性物質(zhì)，可以抗衰老、減少癌癥等的發(fā)病率［1-3］。隨著我國(guó)藍(lán)莓種植規(guī)模的逐漸擴(kuò)大，日趨突出的藍(lán)莓病害導(dǎo)致藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展受阻［4］。目前已報(bào)道的藍(lán)莓常見病害主要有藍(lán)莓葉斑?。?］、枝枯?。?］、根癌?。?］、灰霉?。?］、間座殼芽枯?。?］和枝干潰瘍?。?0］等。藍(lán)莓葉斑病已成為藍(lán)莓常見病害，西澳大利亞州報(bào)道了在藍(lán)莓上由極細(xì)鏈格孢菌（Alternaria tenuissima）引起的葉斑?。?1］，Norman等報(bào)道了由青枯菌（Ralstonia solanacearum）引起的藍(lán)莓青枯病［12］，國(guó)內(nèi)研究報(bào)道的有由根癌土壤桿菌（Agrobacterium tumefaciens）引起的藍(lán)莓根癌病［7］、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）引起的藍(lán)莓灰霉?。?3］和極細(xì)鏈格孢引起的藍(lán)莓葉斑病［4］。藍(lán)莓葉斑病致病菌復(fù)雜多樣，嚴(yán)雪瑞等研究發(fā)現(xiàn)引起藍(lán)莓葉穿孔病的致病菌為鏈格孢菌（Alternaria alternate）［14］，張國(guó)輝等在貴州省黔東南州臺(tái)江縣發(fā)現(xiàn)了巨腔莖點(diǎn)霉（Phoma macrostoma）為病原的藍(lán)莓葉斑病［15］。明確致病菌種類及其生物學(xué)特性有助于該病害后續(xù)的綜合防治。

由于藍(lán)莓葉斑病病原菌的多樣性，導(dǎo)致不同地域葉斑病致病菌的生物學(xué)特性不同，使藍(lán)莓葉斑病的防治較為困難。本試驗(yàn)對(duì)引起貴州省黔東南苗族侗族自治州麻江縣藍(lán)莓葉斑病的病原菌進(jìn)行鑒定和生物學(xué)特性研究，明確其菌絲生長(zhǎng)的最適條件和產(chǎn)孢情況，研究結(jié)果可為防治藍(lán)莓葉斑病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試發(fā)病藍(lán)莓葉片在貴州省黔東南苗族侗族自治州麻江縣藍(lán)莓栽培生產(chǎn)基地采集，塑封袋封裝帶回實(shí)驗(yàn)室后于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藍(lán)莓葉斑病病原菌的分離及致病性測(cè)定

將分離純化后的菌株Y2接種至健康葉片上，致使健康藍(lán)莓葉片感病，結(jié)果發(fā)病藍(lán)莓的葉片上應(yīng)能得到與初始接種的菌株性狀一致的菌落，對(duì)照組不會(huì)得到與初始菌株一致的菌落。接種前先用75%乙醇對(duì)葉片表面進(jìn)行消毒，接著用無菌水反復(fù)沖洗3次，移入5%（體積分?jǐn)?shù)） NaClO溶液中滅菌2 min，用無菌水清洗后晾干備用。

離體接種：用消過毒的接種針在消過毒的健康藍(lán)莓葉片表面避開葉脈刺4個(gè)小孔，于小孔上貼直徑5 mm的菌餅，覆上滅菌的濕脫脂棉，再套保鮮袋保濕，試驗(yàn)每張藍(lán)莓葉片接種2個(gè)菌餅，每個(gè)菌株處理5個(gè)重復(fù)，1個(gè)對(duì)照組。

1.2.2 藍(lán)莓葉斑病病原菌的鑒定

形態(tài)學(xué)鑒定：超凈操作臺(tái)中，用內(nèi)徑為5 mm的打孔器在2種病原菌Y2的菌落邊緣打出菌餅，將Y2菌株的菌餅接種在PDA培養(yǎng)基上并置于28 ℃培養(yǎng)箱中2、4、6 d進(jìn)行培養(yǎng)皿觀察拍照，觀察其菌落特點(diǎn)（菌絲形態(tài)、顏色、基質(zhì)顏色、菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲密度等）。在光學(xué)顯微鏡下參照《真菌鑒定手冊(cè)》對(duì)菌絲的分生孢子梗及分生孢子進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，記錄其形態(tài)特征并測(cè)量分生孢子大小。

分子生物學(xué)鑒定：病原菌Y2用PDA平板進(jìn)行擴(kuò)繁后，刮取PDA平板上活化好的Y2菌株菌絲，用Fungal DNA Midi Kit真菌DNA提取試劑盒（OMEGA）提取病原菌Y2的DNA作為模板，采用真菌通用引物ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′） 和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）對(duì)提取的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)條帶后，切膠回收PCR目的條帶送至重慶擎科興業(yè)生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。將病原菌Y2的18S RNA序列與NCBI數(shù)據(jù)庫相近序列進(jìn)行比對(duì)。利用MEGA7.0的Clustal W進(jìn)行多序列比對(duì)，再采用鄰接法（neighbor joining，NJ）進(jìn)行菌株系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建。

1.2.3 藍(lán)莓葉斑病病原菌生物學(xué)特性研究

無菌環(huán)境下，截取直徑5 mm的病原菌新鮮菌餅，置于7個(gè)不同的碳源（葡萄糖、D-果糖、乳糖、D-麥芽糖、可溶性淀粉、甘露醇、蔗糖）培養(yǎng)基，不同的氮源（硫酸銨、尿素、甘氨酸、蛋白胨、酵母粉、牛肉膏、硝酸鈉）培養(yǎng)基，6個(gè)不同營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)（PDA、燕麥、PSA、藍(lán)莓煎葉、WA、C）中培養(yǎng)，第3天量取菌落直徑，第5天時(shí)對(duì)培養(yǎng)皿拍照，30 d后測(cè)定產(chǎn)孢量；接種在pH值初始值分別為 5、7、9、11的PDA平板中央，第3天量取菌落直徑，第5天時(shí)對(duì)培養(yǎng)皿拍照，30 d后測(cè)定產(chǎn)孢量；置于不同溫度（5、15、25、28、35 ℃）下培養(yǎng)3 d，測(cè)量菌落直徑，在第5天時(shí)對(duì)培養(yǎng)皿拍照，30 d 后測(cè)定產(chǎn)孢量；置于3個(gè)光照處理（全黑暗：24 h 黑暗；全光照：24 h光照；半光照：光照12 h/黑暗 12 h）下培養(yǎng)，第3天量取菌落直徑，第5天時(shí)對(duì)培養(yǎng)皿拍照，30 d 后測(cè)定產(chǎn)孢量。以上所有處理均設(shè)置3個(gè)重復(fù)，菌落直徑測(cè)量采用十字交叉法，產(chǎn)孢量用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定。

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用Excel 2010、SPSS 19進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和Photoshop作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍(lán)莓葉斑病病原菌的分離及鑒定

分離得到編號(hào)為Y2的病原菌。在28 ℃恒溫環(huán)境下，病原菌Y2在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 6 d 時(shí)，病原菌的生長(zhǎng)速度較慢，產(chǎn)孢，氣生菌絲較發(fā)達(dá)，菌絲呈白色、密集，基質(zhì)背面呈淡黃色（圖1）。分生孢子單生，褐色，卵、圓形倒棒形，有縱橫隔膜（圖2）。

結(jié)合病原菌Y2的菌落形態(tài)和顯微特征，初步將病原菌Y2判定為鏈格孢屬（Alternaria）菌物。對(duì)病原菌Y2進(jìn)行rDNA-ITS測(cè)序，將獲得的序列在NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行BLAST同源性比對(duì)，比對(duì)結(jié)果表明，病原菌Y2序列與登錄號(hào)為MN756011.1的Alternaria alternate同源性最高，根據(jù)MEGA7.0中鄰接法構(gòu)建病原菌Y2的系統(tǒng)發(fā)育樹（圖3）。系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果表明，病原菌Y2與鏈格孢菌（Alternaria alternate） MN756011.1菌株的親緣關(guān)系最近，結(jié)合病原菌的形態(tài)特征和ITS序列特征，故最終將病原菌Y2鑒定為鏈格孢菌（Alternaria alternate）。

2.2 藍(lán)莓葉斑病病原菌Y致病性的測(cè)定

將病原菌Y2的菌餅接種到針刺傷的藍(lán)莓葉片傷口處，以無菌PDA培養(yǎng)基的菌餅作為對(duì)照，培養(yǎng) 3 d 時(shí)取下菌塊，5 d后觀察到：接種病原菌Y2的葉片在接種處有少量的氣生菌絲，葉片傷口處呈褐色且呈較規(guī)則的圓形，菌絲呈白色（圖4-A），與采集的田間病葉發(fā)病癥狀相似（圖4-C），未接種的葉片未出現(xiàn)發(fā)病癥狀（圖4-B），根據(jù)科赫氏法則，從發(fā)病的葉片病健交界部位組織分離得到一種分離物，和Y2為同一菌株。

[FK（W10][TPLQX44.tif][FK）]

2.3 不同碳源對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

病原菌Y2在7種不同碳源培養(yǎng)基中的菌落形態(tài)都呈較規(guī)則的圓形，菌絲密集，有少量氣生菌絲；在甘露醇作碳源時(shí)產(chǎn)生較多的黃色色素，其次，D-果糖、麥芽糖2種碳源培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)有少量黃色色素，其余不同碳源培養(yǎng)基均有微量黃色色素產(chǎn)生（圖5-A）。病原菌Y2在7種不同碳源培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)速率存在顯著差異（P<0.05，下同），在葡萄糖、可溶性淀粉作為碳源時(shí)的菌落狀態(tài)最好，菌絲的繁殖速度最快，生長(zhǎng)速率為11.1、11.0 mm/d；顯著高于其他碳源的生長(zhǎng)速率；生長(zhǎng)速率最慢的是碳源為甘露醇，為7.2 mm/d（圖5-B）。30 d后，測(cè)定其孢子濃度（圖5-C）。病原菌Y2在麥芽糖、乳糖和D-果糖為碳源時(shí)產(chǎn)孢量顯著高于其他碳源，麥芽糖作為碳源的培養(yǎng)皿中產(chǎn)孢子數(shù)量最多，為 2.003×107個(gè)/mL，以可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖和甘露醇為碳源時(shí)病原菌Y2的產(chǎn)孢量無顯著差異，以可溶性淀粉為碳源時(shí)最少，為0.022×107個(gè)/mL，以葡萄糖、蔗糖和甘露醇為碳源時(shí)分別為0.202×107、0.138×107、0.119×107個(gè)/mL。

2.4 不同氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

病原菌Y2在7種不同氮源培養(yǎng)基中菌落形態(tài)較規(guī)則，均為圓形，氣生菌絲較密集，在以蛋白胨、甘氨酸、硫酸銨、尿素為培養(yǎng)條件下，菌落圓心部位菌絲高于周圍菌絲，形成圓形凸起，其中氮源為蛋白胨時(shí)凸起較明顯；菌落在以酵母粉、甘氨酸、尿素、牛肉膏為氮源培養(yǎng)時(shí)均產(chǎn)生黃色色素，其余條件下無色素產(chǎn)生，以酵母粉培養(yǎng)時(shí)產(chǎn)生較大量的黃色色素與褐色色素（圖6-A）。不同氮源處理下菌絲生長(zhǎng)速率存在顯著差異，在以蛋白胨為氮源時(shí)菌絲生長(zhǎng)速率顯著高于其他氮源，其菌落狀況最好，繁殖最快，生長(zhǎng)速率為13.3 mm/d，生長(zhǎng)速率最小的是以尿素為氮源時(shí)，其生長(zhǎng)速率為7.7 mm/d，以硝酸鈉、甘氨酸為氮源時(shí)菌絲生長(zhǎng)速率無顯著差異，均為 10.5 mm/d （圖6-B）。不同氮源處理下病原菌Y2產(chǎn)孢量有顯著差異（圖6-C），在以硫酸銨作為氮源時(shí)的病原菌Y2所產(chǎn)孢子量顯著高于其他氮源，為21.667×107個(gè)/mL，說明硫酸銨能誘導(dǎo)病原菌Y2萌發(fā)孢子，是病原菌Y2產(chǎn)孢的最佳的氮源。

2.5 不同pH值對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

病原菌Y2在pH 值為 5、7、9、11的環(huán)境下都能形成較規(guī)則的圓形、菌絲較為密集的菌落，但以在pH值=7環(huán)境中的菌落直徑最大，生長(zhǎng)狀態(tài)最佳，當(dāng)pH值從5到11變化時(shí)，菌絲逐漸密集，且都有黃色素產(chǎn)生（圖7-A）。病原菌Y2在pH值=7時(shí)生長(zhǎng)速率顯著高于其他pH值梯度，為10.5 mm/d；生長(zhǎng)速率最小的是在pH值=11時(shí)，為8.7 mm/d；在pH值=5、pH值=9時(shí)，其菌絲生長(zhǎng)速率分別為9.9、9.8 mm/d，二者間無顯著差異（圖7-B），病原菌Y2在酸性條件下更適宜生長(zhǎng)。過酸、過堿的環(huán)境均不利于病原菌Y2產(chǎn)孢， 而pH值=7時(shí)酸堿適中，可以促進(jìn)Y2產(chǎn)孢，產(chǎn)孢量顯著高于其他pH值，為2.573×107個(gè)/mL，pH值=11時(shí)產(chǎn)孢量最少，只有0.074×107個(gè)/mL（圖7-C）。

2.6 不同溫度對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

病原菌Y2在5個(gè)溫度值下培養(yǎng)5 d后均有菌絲長(zhǎng)出，且菌落均呈規(guī)則圓形，氣生菌絲密集，均有黃色素產(chǎn)生（圖8-A）。當(dāng)溫度降至 5 ℃，菌株幾乎停止生長(zhǎng)，在25 ℃下最適宜病原菌Y2生長(zhǎng)，生長(zhǎng)速率顯著高于其他溫度，為8.9 mm/d；在5 ℃下最不適宜生長(zhǎng)，生長(zhǎng)速率為2.0 mm/d；在15、28、35 ℃ 下菌落生長(zhǎng)速率分別為5.4、7.4、3.4 mm/d （圖8-B）。低溫可以促進(jìn)病原菌Y2產(chǎn)孢，5 ℃時(shí)產(chǎn)孢量顯著高于其他溫度，為4.067×107個(gè)/mL，在溫度為15 ℃和35 ℃時(shí)產(chǎn)孢量無顯著差異，產(chǎn)孢量很少或幾乎不產(chǎn)孢，當(dāng)溫度為25 ℃和28 ℃時(shí)產(chǎn)孢量較多，分別為2.077×107個(gè)/mL和0.435×107個(gè)/mL（圖8-C）。

2.7 不同光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

在全光照、全黑暗和光暗交替3種光照條件下，病原菌Y2都能正常生長(zhǎng)，菌落均呈規(guī)則圓形，且均有黃色色素產(chǎn)生，全黑暗培養(yǎng)下產(chǎn)生較大量的黃色、褐色色素；菌落氣生菌絲均致密（圖9-A）。病原菌Y2在全光照條件下生長(zhǎng)速率顯著高于全黑暗和光暗交替條件下，為12.4 mm/d；生長(zhǎng)速率最小是在光暗交替條件下，為10.2 mm/d；在全黑暗條件下菌絲生長(zhǎng)速率為10.9 mm/d （圖9-B）。計(jì)算不同光照處理下致病菌Y2所產(chǎn)孢子量，不同光照對(duì)病原菌Y2產(chǎn)孢有顯著影響。全黑暗處理的病原菌Y2所產(chǎn)孢子數(shù)量是3個(gè)處理組中最高的，為1.62×107個(gè)/mL，光暗交替處理下的Y2孢子數(shù)目最少，為0.012×107個(gè)/mL（圖9-C）。

2.8 不同培養(yǎng)基對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

病原菌Y2在6種不同培養(yǎng)基中，28 ℃下培養(yǎng)5 d 后，觀察到病原菌Y2在6種不同培養(yǎng)基中均呈較規(guī)則圓形，氣生菌絲在PDA、PSA、察氏（C）培養(yǎng)條件下致密，在WA、藍(lán)莓煎汁培養(yǎng)基、燕麥瓊脂培養(yǎng)基中菌絲較稀薄；菌落在PDA、PSA、WA和燕麥瓊脂培養(yǎng)基中有黑色色素產(chǎn)生，在察氏培養(yǎng)基中有黃色色素產(chǎn)生，藍(lán)莓煎汁瓊脂培養(yǎng)基中無色素產(chǎn)生（圖10-A）。病原菌Y2在察氏培養(yǎng)基中生長(zhǎng)速率顯著高于其他培養(yǎng)基，為17.0 mm/d；生長(zhǎng)速率最小的是在WA培養(yǎng)條件下，生長(zhǎng)速率為7.0 mm/d；在PDA、PSA、藍(lán)莓煎汁瓊脂和燕麥瓊脂培養(yǎng)條件下菌絲生長(zhǎng)速率分別為10.6、11.1、8.9、11.9 mm/d （圖10-B）。統(tǒng)計(jì)病原菌Y2在不同培養(yǎng)基中所產(chǎn)孢子量，發(fā)現(xiàn)WA和燕麥培養(yǎng)基中的孢子數(shù)顯著高于PDA、PSA、察氏和藍(lán)莓煎汁培養(yǎng)基，其中WA中孢子數(shù)最多， 為4.495×107個(gè)/mL，在察氏中Y2孢子數(shù)目最少，僅僅為0.014×107個(gè)/mL，在燕麥中產(chǎn)孢量較多，為4.233×107個(gè)/mL，在其他基質(zhì)下孢子數(shù)量差異不顯著（圖10-C）。

3 討論與結(jié)論

本研究從貴州省人工栽培藍(lán)莓園內(nèi)發(fā)現(xiàn)典型藍(lán)莓葉斑病植株，通過組織分離法進(jìn)行病原分離，科赫法則證明其致病性，根據(jù)菌落形態(tài)特征及現(xiàn)代分子生物技術(shù)，最終鑒定藍(lán)莓葉斑病病原菌Y2為鏈格孢菌，病原菌Y2侵染離體葉片形成的病斑為紅褐色圓形病斑，與鏈格孢菌侵染藍(lán)莓葉片形成的病斑形似；鏈格孢菌作為主要的藍(lán)莓葉斑病病原菌，在藍(lán)莓葉部病害中較為常見。鏈格孢菌還可引起多種植物病害，如煙草赤星?。?6］、高粱葉斑?。?7］、梨黑斑?。?8］、花椒穗枯?。?9］、番茄黑斑病［20］、棗果黑斑病［21］、蕎麥葉枯病［22］和玉米葉斑?。?3］等。

本研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓葉斑病病原菌-鏈格孢菌Y2，菌絲生長(zhǎng)的最適pH值為7，與周銀麗等［24］和盧文潔等［22］研究結(jié)果一致；黎研研等［25］、周銀麗等［24］、盧文潔等［22］和劉曉琳等［21］的研究結(jié)果均表明菌絲生長(zhǎng)的最適溫度為25 ℃，本研究得到最適氮源為蛋白胨與黎研研等［25］、王宏等［18］和劉曉琳等［21］的研究結(jié)論相同，盧文潔等［22］的研究表明，全光照條件下菌絲生長(zhǎng)最快，本研究也得到了相同的結(jié)論。關(guān)于鏈格孢菌的生物學(xué)特性有很多不同的報(bào)道。喬鏡澄等研究了番茄黑斑病樣品中鏈格孢菌的生物學(xué)特性，結(jié)果顯示，該菌株的最適溫度為28 ℃，最適pH值為6，最佳碳源為乳糖，最佳氮源為酵母膏，PDA為其最適宜生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，菌絲在完全黑暗條件下擴(kuò)展最快［20］；楊曉平等報(bào)道了湖北梨黑斑病病原菌鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)的最佳條件是PSA培養(yǎng)基［26］；陳鳳美等報(bào)道了江蘇銀杏內(nèi)生鏈格孢菌最適pH值為5～9，最適氮源為硝酸鈉［27］；鄭肖蘭等報(bào)道了海南省南繁區(qū)玉米鏈格孢葉斑病鏈格孢菌的最適溫度為30 ℃，最適pH值為5，最適培養(yǎng)基是PDA+玉米綠葉煎汁，最適的氮源是纈氨酸和甘氨酸。

本試驗(yàn)研究了不同處理下病原菌Y2的產(chǎn)孢情況，結(jié)果表明，病原菌Y2產(chǎn)孢的最適碳源是麥芽糖、最適氮源是硫酸銨，最適溫度為5 ℃、pH值為7，以WA為營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)有利于病原菌Y2產(chǎn)孢，全黑暗促進(jìn)Y2產(chǎn)孢。胡中會(huì)等報(bào)道了柑橘褐斑病病原菌為鏈格孢菌，其產(chǎn)孢的最適溫度為21 ℃，最適碳源為甘露醇，最適氮源為甘氨酸［28］；鄒鳳蓮等報(bào)道了番紅花鏈格孢菌的最適溫度為28 ℃，最適碳源為蔗糖，最適氮源為牛肉浸膏［29］；袁高慶等報(bào)道了毛葉棗黑斑病病原菌的最適溫度為30 ℃，最適pH值為5，PDA培養(yǎng)基最適宜病菌產(chǎn)孢［30］。說明適宜鏈格孢菌產(chǎn)孢的條件隨著地理環(huán)境、寄主的變化而產(chǎn)生較大差異。本研究對(duì)該菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的生物學(xué)特性的研究結(jié)果可為后續(xù)該菌的致病機(jī)制研究以及科學(xué)有效的防治提供重要參考。

本研究明確了貴州省藍(lán)莓葉斑病的病原菌為鏈格孢菌，并分析了其生物學(xué)特性。中國(guó)藍(lán)莓葉斑病的病原菌種類復(fù)雜多樣，病害防控工作的基礎(chǔ)原則是準(zhǔn)確鑒別病原菌；同一病原菌的生物學(xué)特性在不同環(huán)境、不同寄主中存在差異，因此，研究病原菌Y2的生物學(xué)特性對(duì)進(jìn)一步闡述葉斑病病害的發(fā)病規(guī)律和綜合防治具有的重要指導(dǎo)意義。

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收稿日期：2022-04-12

基金項(xiàng)目：貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：黔科合支撐［2017］2567、黔科合平臺(tái)人才［2018］5781）；貴州大學(xué)SRT計(jì)劃［編號(hào)：貴大SRT（2019）252號(hào)］。

作者簡(jiǎn)介：羅其鑫（1999—），女，貴州貴陽人，碩士研究生，研究方向?yàn)樯植±韺W(xué)。E-mail：452450608@qq.com。

通信作者：侯 瑞，博士，副教授，主要從事森林病理學(xué)等研究工作。E-mail：jiayouhourui123@163.com。