張錚 陳瓊 李璐 蘇哲 王鋼力 涂家生 尚靖 孫春萌

關(guān)鍵詞：納米原料；歐盟消費(fèi)者安全科學(xué)委員會(huì)；安全評(píng)估；法規(guī)；發(fā)展趨勢(shì)

納米原料憑借其獨(dú)特的尺寸、分散性以及抗氧化等各項(xiàng)優(yōu)勢(shì)，目前在化妝品行業(yè)的運(yùn)用日益廣泛[1， 2]。尤其是納米二氧化鈦（TiO2） 和納米氧化鋅（ZnO），它們是如今市面上防曬霜產(chǎn)品中占比最大的兩種物理防曬劑。但正是由于納米原料優(yōu)異的尺寸以及表面性能，導(dǎo)致其在納米尺度下表現(xiàn)出與常規(guī)物料截然不同的性質(zhì)。例如高表面能、制劑穩(wěn)定性、皮膚暴露風(fēng)險(xiǎn)等一系列問(wèn)題。因此納米原料的性質(zhì)及使用安全性始終受到國(guó)際各方面的高度關(guān)注[3， 4]。

其中，歐盟消費(fèi)者安全科學(xué)委員會(huì)（ScientificCommittee on Consumer Cafety，SCCS） 在納米原料安全評(píng)估方面始終保持積極態(tài)度。SCCS 于2019 年發(fā)布一項(xiàng)《化妝品納米原料安全評(píng)價(jià)指南》（SCCS/1611/19）[5]，提出以暴露為導(dǎo)向的安全評(píng)估策略，采用與常規(guī)物質(zhì)（非納米） 相同的原則進(jìn)行。針對(duì)化妝品納米原料，國(guó)際化妝品監(jiān)管合作組織（International Cooperation on CosmeticsRegulation， ICCR） 也持續(xù)成立專(zhuān)項(xiàng)工作組，就相關(guān)問(wèn)題組織多項(xiàng)專(zhuān)題討論與研究，并發(fā)布一系列技術(shù)性文件[6]。

01納米原料的安全性評(píng)估現(xiàn)狀

在2019 年最新發(fā)布的《化妝品納米原料安全性評(píng)價(jià)指南》[5] 中，SCCS 對(duì)化妝品中納米原料的安全性評(píng)估方法進(jìn)行了新階段的討論。它不僅是對(duì)于納米原料相關(guān)領(lǐng)域最新研究成果的更新，還新增了有關(guān)、涂層、載體、免疫毒性等新型風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模式的討論。而ICCR 對(duì)化妝品納米原料的安全性評(píng)估方法也進(jìn)行了相關(guān)討論[7]。與SCCS 類(lèi)似，它也是提出一項(xiàng)以暴露為導(dǎo)向的安全評(píng)估策略，采用與常規(guī)物質(zhì)（非納米） 相同的原則進(jìn)行，逐一討論納米原料的一般安全性、理化特征、暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、危害識(shí)別和特征描述以及風(fēng)險(xiǎn)描述。

1.1 暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)

在所有納米粒子的體內(nèi)/ 外透皮性能研究中報(bào)道最多的要數(shù)物理防曬劑納米TiO2 和ZnO。實(shí)際上，早在2000 年歐盟化妝品和非食品科學(xué)委員會(huì)（ScientificCommittee on Cosmetic and Non-food Products，SCCNFP）就已經(jīng)發(fā)布了一份有關(guān)納米TiO2 的意見(jiàn)書(shū)[8]，其中總結(jié)了100 多項(xiàng)有關(guān)體外（人、豬皮）或體內(nèi)（大鼠、人體皮膚活檢） 研究結(jié)果。絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微米或納米尺寸的TiO2 顆粒僅能滯留在皮膚表面或角質(zhì)層（SC） 外層，并不會(huì)滲透進(jìn)入活性皮膚中，甚至穿透人體皮膚產(chǎn)生全身暴露風(fēng)險(xiǎn)[9]。為此SCCNFP 于同年通過(guò)了有關(guān)納米TiO2 最高可添加25% 作為化妝品中的紫外線過(guò)濾劑的安全性意見(jiàn)。

1.1.1 經(jīng)皮暴露途徑

由于這項(xiàng)科學(xué)意見(jiàn)牽涉化妝品中物理防曬劑的使用，不久后SCCS 就開(kāi)展專(zhuān)項(xiàng)審查工作，考察異常皮膚狀況（如SC 剝離、UVB 損傷、炎癥皮膚） 對(duì)納米TiO2 皮膚滲透性能的影響。Senzui 等[10] 考察了四種不同類(lèi)型的納米TiO2分別對(duì)尤卡坦小型豬完整、SC 剝離和脫毛皮膚的體外滲透性能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在完整和SC 剝離的皮膚中，無(wú)論納米TiO2 是何種類(lèi)型，均未觀察到皮膚滲透現(xiàn)象。

Monteiro 等[11] 利用紫外線對(duì)約克郡豬進(jìn)行照射，從而獲得UVB 損傷皮膚模型。隨后對(duì)自制含納米TiO2、ZnO 的防曬霜進(jìn)行體內(nèi)/ 外經(jīng)皮滲透性能的考察。體外透皮實(shí)驗(yàn)TEM 掃描結(jié)果顯示，TiO2 粒子最多穿透至SC 第17 層，而ZnO 則停留在皮膚的表面。通過(guò)ICP-MS 分析接收液，并未檢測(cè)到有任何Ti、Zn 元素，證明并沒(méi)有納米粒子穿透皮膚屏障。體內(nèi)透皮實(shí)驗(yàn)結(jié)果也與體外保持一致，通過(guò)SEM 電鏡觀察到納米粒子大多以團(tuán)聚物的形式滯留在皮膚表面和毛囊的根部。整體來(lái)說(shuō)，納米TiO2 和ZnO對(duì)于UVB 損傷皮膚的滲透性能略微增強(qiáng)，但是目前還沒(méi)有觀察到有透皮吸收的風(fēng)險(xiǎn)。

諸如上述對(duì)于納米TiO2、ZnO 的透皮性能考察不勝枚舉，幾乎所有在人類(lèi)/ 動(dòng)物中進(jìn)行的體外或體內(nèi)透皮研究均表明，納米TiO2 的滲透強(qiáng)度僅局限于SC，在皮膚中的暴露量十分有限。于是SCCS 在2014 年發(fā)布關(guān)于納米TiO2 的安全性評(píng)估[12] 并得出結(jié)論：目前已有的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，Ti O2 納米顆粒的透皮吸收性能較差，使用濃度高達(dá)25% 的納米TiO2 作為防曬霜中的紫外線過(guò)濾器也不會(huì)對(duì)人類(lèi)（健康、完整或曬傷的皮膚） 造成任何不良影響。

1.1.2 吸入暴露途徑

雖然市面上大部分防曬霜和其他提供紫外線防護(hù)的化妝品都是通過(guò)直接涂抹皮膚來(lái)使用的。但還有部分產(chǎn)品以噴涂方式應(yīng)用，這就可能導(dǎo)致消費(fèi)者肺部發(fā)生納米TiO2 的吸入暴露風(fēng)險(xiǎn)[13]。

Eydner 等[14] 使用納米TiO2 對(duì)雌性Wistar 大鼠進(jìn)行了為期3 周的體內(nèi)吸入研究。通過(guò)組織病理學(xué)檢測(cè)，觀察到大鼠肺部發(fā)生了細(xì)微的炎癥變化。雖然通過(guò)相對(duì)沉積指數(shù)（RDI） 的計(jì)算發(fā)現(xiàn)，在毛細(xì)血管中存在少量的納米顆粒，但是并沒(méi)有觀察到明顯的血液易位行為。在其他幾項(xiàng)有關(guān)吸入暴露納米TiO2 的毒代動(dòng)力學(xué)研究中[15， 16]，納米TiO2 確實(shí)存在穿透肺屏障發(fā)生易位的情況，在肝臟、心臟、腎臟、胰腺、脾臟、腦或血液中均檢測(cè)出了納米顆粒，但是易位程度和易位量十分有限，畢竟易位速率明顯比肺清除速率更慢。

由于SCCS 的意見(jiàn)只涉及納米TiO2 的皮膚應(yīng)用，于是又另外發(fā)布了一則聲明：不建議將納米TiO2 以噴霧制劑的形式應(yīng)用到化妝品中，它可能會(huì)導(dǎo)致肺部發(fā)生吸入暴露風(fēng)險(xiǎn)[13]。根據(jù)這一意見(jiàn)，歐盟化妝品法規(guī)規(guī)定最高添加25% 的納米TiO2 作為紫外線過(guò)濾器，噴霧產(chǎn)品除外。

1.2 毒理學(xué)評(píng)價(jià)

通常情況下，傳統(tǒng)尺寸的納米TiO2 和ZnO 被認(rèn)為是無(wú)害的。但是當(dāng)它們的尺寸縮小到納米級(jí)別時(shí)，由于理化性質(zhì)、化學(xué)反應(yīng)性和光催化活性的改變，納米顆粒與生物分子之間的相互作用可能會(huì)大幅增強(qiáng)[17]。大量實(shí)驗(yàn)研究表明，Ti O2 納米顆粒固有細(xì)胞毒性的增加，主要是由氧化應(yīng)激和細(xì)胞膜破壞所導(dǎo)致的[18]。另外，Watson[19] 通過(guò)彗星實(shí)驗(yàn)考察了ZnO 納米顆粒對(duì)TK6/H9T3 的細(xì)胞毒性影響。研究結(jié)果表明，ZnO 粒子對(duì)兩種細(xì)胞系存在明顯的DNA 損傷和細(xì)胞毒性作用，并且呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性。其他有關(guān)納米TiO2 通過(guò)不同途徑發(fā)生暴露的毒性研究發(fā)現(xiàn)，暴露部位均產(chǎn)生了不同程度的病理?yè)p傷。如吸入暴露，肺部便會(huì)出現(xiàn)類(lèi)似石棉引起間皮瘤樣的細(xì)胞損傷，進(jìn)而可能導(dǎo)致肺部腫瘤[17]。

為此，歐洲化學(xué)品管理局（European ChemicalsAgency， ECHA） 于2017 年6 月9 日宣布：“現(xiàn)有科學(xué)證據(jù)符合分類(lèi)、標(biāo)簽和包裝法規(guī)（Classification Labeling andPackaging， CLP） 的標(biāo)準(zhǔn)，將鈦白粉（二氧化鈦或TiO2）列入懷疑通過(guò)吸入可能引起癌癥的物質(zhì)?！?同一時(shí)間段，美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)（American Chemical Society， ACS） 也于同年3 月宣布[20]：“根據(jù)人類(lèi)和動(dòng)物的科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，納米顆?？梢詮姆尾窟M(jìn)入血液，到達(dá)心血管系統(tǒng)的易感區(qū)域，在那里它們可能會(huì)增加心臟病發(fā)作或中風(fēng)的可能性?！?澳大利亞政府與工業(yè)、創(chuàng)新、氣候變化、科學(xué)、研究和高等教育部均一致認(rèn)為，納米顆粒的毒性可能比其他材料更大。

1.3 光毒理學(xué)評(píng)價(jià)

對(duì)于納米TiO2 和ZnO 這類(lèi)紫外屏蔽劑來(lái)說(shuō)，還存在另一個(gè)不容忽略的問(wèn)題，即當(dāng)暴露于紫外線輻射時(shí)，他們有可能會(huì)產(chǎn)生一類(lèi)被稱(chēng)為活性氧（ROS） 的自由基，包括羥基自由基、超氧化物陰離子和單線態(tài)氧等。眾所周知，這類(lèi)自由基會(huì)導(dǎo)致各種各樣的氧化損傷[21]。Rampaul等[22] 通過(guò)亞甲基藍(lán)探究不同涂層的納米TiO2 和ZnO的光催化活性。研究表明，表面經(jīng)過(guò)有機(jī)硅烷或聚二甲基硅氧烷處理的TiO2 納米粒（銳鈦礦/ 金紅石混合晶型）具有極強(qiáng)的光催化活性，對(duì)MDCK-（1 犬腎上皮）、Pt K2（袋鼠腎上皮） 和HaCaT（人皮膚上皮） 細(xì)胞都變現(xiàn)出非常嚴(yán)重的細(xì)胞毒性。與空白組比較，死亡率增加了2 ～ 4.9 倍。相比之下，帶有氧化鋁或錳涂層的純金紅石型TiO2 顆粒要顯得更為安全，幾乎沒(méi)有發(fā)生光降解。另外值得注意的是，納米ZnO 自身也會(huì)產(chǎn)生一定的自由基，甚至在某些條件下，由于ZnO 的存在，TiO2 的光催化活性還會(huì)進(jìn)一步提高。后來(lái)Tiano[23] 通過(guò)考察經(jīng)過(guò)表面修飾的TiO2顆粒在UVA 照射條件下對(duì)人體成纖維細(xì)胞的影響，進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)論。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，純銳鈦礦型或與金紅石型混合的TiO2 顆粒，無(wú)論表面是否涂覆涂層，都具有高度的光催化活性?；蛟S這就是包括防曬霜在內(nèi)的化妝品大多采用金紅石型的納米TiO2 的原因。

02納米原料的風(fēng)險(xiǎn)考量

2016 年，按照《歐盟化妝品法規(guī)1223/2009》[24]要求，歐盟公布了一項(xiàng)較為完整的市場(chǎng)上化妝品所用納米原料的目錄。由于存在大量不確定數(shù)據(jù)，因此不斷修訂，目前最新版本發(fā)布于2019 年11 月。該目錄中主要收錄了4 種納米原料用作化妝品中的防曬劑組分，分別是三聯(lián)苯基三嗪[25]、氧化鋅[26]、二氧化鈦[27] 和亞甲基雙- 苯并三唑基四甲基丁基酚[28]。

2.1 三聯(lián)苯基三嗪

根據(jù)SCCS 最新修訂的意見(jiàn)書(shū)（EU No.886/2014），將10% 的納米三聯(lián)苯基三嗪（初始粒徑≥ 80 nm，純度≥ 98%，無(wú)涂層） 作為化妝品中的防曬劑使用時(shí)，可認(rèn)為其經(jīng)皮使用不存在風(fēng)險(xiǎn)性。但在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)，考慮到存在吸入性暴露，且存在較多的不確定性導(dǎo)致無(wú)法得出10% 三聯(lián)苯基三嗪是否可以在噴霧產(chǎn)品安全使用。因此，SCCS 認(rèn)為如果不能提供更多關(guān)于反復(fù)吸入后的安全性信息，則禁止將三聯(lián)苯基三嗪應(yīng)用于噴霧類(lèi)產(chǎn)品中。

2.2 氧化鋅

早在2003 年，化妝品及非食品類(lèi)產(chǎn)品消費(fèi)者科學(xué)委員會(huì)（Scientific Committee on Cosmetic Products andNon-food Products intended for Consumers， SCCPNP）就發(fā)表了關(guān)于ZnO 安全性的觀點(diǎn)。SCCPNP 認(rèn)為：通常情況下，ZnO 被認(rèn)為是一種非毒性物質(zhì)，包括用于化妝品時(shí)。但是，由于并沒(méi)有考慮ZnO 潛在的吸入暴露風(fēng)險(xiǎn)，后來(lái)的消費(fèi)產(chǎn)品科學(xué)委員會(huì)（Scientific Committee forConsumer Products， SCCP） 又對(duì)微?；痁nO 的安全性提出擔(dān)憂(yōu)。在SCCP 后續(xù)發(fā)表的觀點(diǎn)中，SCCP 認(rèn)為非納米型ZnO 以25% 的最大濃度用于化妝品時(shí)是安全的，但對(duì)于納米型ZnO 的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，仍需要提供進(jìn)一步的數(shù)據(jù)支持。

因此，SCCS 又分別于2012 年、2013 年發(fā)表了關(guān)于納米ZnO 的安全評(píng)估觀點(diǎn)。SCCS 認(rèn)為，基于現(xiàn)有的證據(jù)，特定條件的納米ZnO 以25% 的最大濃度、作為防曬劑施用于人體皮膚時(shí)，并不會(huì)引起不良反應(yīng)。此外，SCCS 還認(rèn)為沒(méi)有證據(jù)表明ZnO 納米顆粒能夠通過(guò)皮膚或口腔途徑吸收，且通過(guò)安全邊際（MoS） 計(jì)算所得的結(jié)果也是可以接受的。但是，根據(jù)現(xiàn)有信息，SCCS 認(rèn)為ZnO 納米顆粒用于噴霧型產(chǎn)品是不安全的，其主要原因是潛在的吸入風(fēng)險(xiǎn)。

因此，基于上述SCCS 的觀點(diǎn)，歐盟委員會(huì)于2016年4 月21 日發(fā)布修訂法規(guī)（EU No.621/2016），認(rèn)為納米ZnO 可以在化妝品中作為防曬劑使用，最大使用濃度為25%，但不得應(yīng)用于吸入類(lèi)型的產(chǎn)品中，以防消費(fèi)者因吸入而導(dǎo)致肺部暴露風(fēng)險(xiǎn)。

2.3 二氧化鈦

2013 年7 月，SCCS 發(fā)布一項(xiàng)科學(xué)說(shuō)明。當(dāng)符合指定規(guī)格且使用濃度不超過(guò)25% 時(shí)，納米TiO2 作為防曬劑用于健康、完整或曬后皮膚時(shí)，并不會(huì)產(chǎn)生健康風(fēng)險(xiǎn)或不良反應(yīng)。此外，考慮到并無(wú)系統(tǒng)性暴露，SCCS 認(rèn)為通過(guò)皮膚使用納米TiO2 并不會(huì)給消費(fèi)者帶來(lái)顯著風(fēng)險(xiǎn)。但是，SCCS 對(duì)于納米TiO2用于噴霧型產(chǎn)品的安全性感到擔(dān)憂(yōu)，主要集中于可能通過(guò)吸入產(chǎn)生肺部暴露。

另外，SCCS 注意到納米原料顯著的光催化活性不僅會(huì)對(duì)暴露的皮膚產(chǎn)生局部影響，而且沉積在毛囊或汗腺中的光活性納米顆?？赡軙?huì)帶來(lái)長(zhǎng)期威脅。因此SCCS 明確指出“化妝品中使用的納米材料理想情況下應(yīng)為非光催化材料”，并于2015 年發(fā)布了關(guān)于納米Ti O2 防曬霜配方的新指南[29]。六項(xiàng)關(guān)鍵性建議中有三項(xiàng)是針對(duì)TiO2 的材料本身：納米TiO2 主要由金紅石型或不超過(guò)5% 銳鈦礦的金紅石型組成；納米TiO2 在最終制劑中對(duì)光照穩(wěn)定；納米TiO2 不具有光催化活性。

根據(jù)上述SCCS 的意見(jiàn)，歐盟委員會(huì)于2016 年7 月13 日發(fā)布修訂法規(guī)（EU No.1143/2016）。在歐盟化妝品法規(guī)附錄Ⅵ（防曬劑列表） 中添加了納米級(jí)二氧化鈦，且規(guī)定其最大使用濃度為25%，并對(duì)其理化特性（如純度≥ 99%；金紅石型或不超過(guò)5% 銳鈦礦的金紅石型；中位粒徑≥ 30nm 等） 進(jìn)行了限制。該項(xiàng)納米級(jí)二氧化鈦，不得用于可能吸入肺部的產(chǎn)品。

2.4 亞甲基雙- 苯并三唑基四甲基丁基酚（MBBT）

SCCS 于2015 年3 月25 日發(fā)表一項(xiàng)研究說(shuō)明：對(duì)于符合一定規(guī)格的MBBT 納米顆粒，當(dāng)以最高10% 的濃度用作防曬劑，以涂抹于皮膚的方式，施用于健康的、完整的皮膚以及受損的皮膚時(shí)，均不會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生威脅。與另外三種防曬劑一樣，納米形式的MBBT 并不適用于可能通過(guò)吸入而增加肺部暴露量的使用形式。

根據(jù)SCCS 的觀點(diǎn)，同時(shí)考慮到科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，歐盟委員會(huì)于2018 年6 月20 日發(fā)布法規(guī)修訂案（EUNo.885/2018），在《化妝品法規(guī)1223/2009》附錄Ⅵ中添加了納米級(jí)MBBT，并規(guī)定其最高使用濃度為10%，不得用于可能導(dǎo)致消費(fèi)者發(fā)生肺部吸入風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品形式。

03安全研究相關(guān)技術(shù)手段

3.1 暴露風(fēng)險(xiǎn)

SCCS 認(rèn)為，暴露風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估和潛在暴露途徑的確定是納米原料安全性評(píng)估的第一個(gè)關(guān)鍵決策點(diǎn)。這主要是因?yàn)橥ㄟ^(guò)機(jī)體暴露情況可以確定是否存在系統(tǒng)暴露風(fēng)險(xiǎn)。

值得注意的是，納米原料的應(yīng)用形式、劑量和暴露場(chǎng)景都需要最大限度地模擬人體使用的真實(shí)情況。因?yàn)橄M(fèi)者在最終使用時(shí)，納米粒可能并不同于在實(shí)驗(yàn)室中建立的納米特征（例如穩(wěn)定的顆粒尺寸分布）。而對(duì)于給藥劑量，除了基于質(zhì)量的納米顆粒濃度外，還應(yīng)根據(jù)顆粒數(shù)量、尺寸分布和表面積來(lái)計(jì)算濃度。以此來(lái)平衡暴露期間納米粒子因?yàn)榫奂? 降解/ 溶解所產(chǎn)生的影響。

納米原料對(duì)應(yīng)的檢測(cè)方法也得較為成熟，需要有良好的準(zhǔn)確度和重復(fù)性，檢測(cè)限也必須得足夠低，低至足以證明沒(méi)有潛在的暴露風(fēng)險(xiǎn)。而EM 方法正具備這種靈敏度，可直觀確認(rèn)被吸收的納米粒是否以納米顆粒的形式存在于接收液或組織中。

3.2 危害識(shí)別與特征描述（劑量反應(yīng)關(guān)系）

在毒理學(xué)評(píng)價(jià)中，納米粒的某些特性可能會(huì)因與周?chē)橘|(zhì)的相互作用而發(fā)生變化。因此，需要重點(diǎn)考察測(cè)試時(shí)的納米粒是否與處方中的組成形式保持一致[30]。另外在應(yīng)用劑量方面也需要特別注意，因?yàn)榧{米顆粒的濃度在測(cè)試過(guò)程中可能會(huì)由于沉降或與器皿間的黏附而降低。因此，確定納米粒在測(cè)試介質(zhì)中的穩(wěn)定性和均勻性是很重要的，以此確保在測(cè)試期間維持所施加的濃度/ 劑量。

對(duì)于體外遺傳毒性評(píng)估，應(yīng)評(píng)估染色體損傷和基因突變程度。通常使用的細(xì)菌反向突變（Ames） 實(shí)驗(yàn)并不認(rèn)為適合用于納米粒的誘變性評(píng)估。由于細(xì)菌細(xì)胞壁的阻礙，細(xì)菌對(duì)納米粒的吸收非常有限甚至根本無(wú)法攝取[31]。因此納米粒子的內(nèi)化效應(yīng)不太可能像在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中觀察到的那樣發(fā)生，因此該檢測(cè)方法的敏感性較差[32]。SCCS建議對(duì)納米粒進(jìn)行以下體外遺傳毒性試驗(yàn)：哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變/ 致裂性試驗(yàn)（體外染色體畸變?cè)囼?yàn)或微核試驗(yàn)）。微核試驗(yàn)可以使用單核或細(xì)胞分裂阻斷方法進(jìn)行。

04發(fā)展趨勢(shì)

由于歐盟禁止對(duì)化妝品成分/ 產(chǎn)品進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，ICCR 對(duì)于新興納米原料的安全性評(píng)價(jià)變得更加困難，需要使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的替代方法來(lái)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。ICCR 明確規(guī)定，基于已知的納米材料安全評(píng)估信息來(lái)進(jìn)行外推或類(lèi)比，這種方法是不可取的。但是納米材料的總體風(fēng)險(xiǎn)特征是可以參考傳統(tǒng)材料的。這不光是非納米和納米形式之間，也可以是同一納米材料的不同納米形式之間進(jìn)行毒性數(shù)據(jù)的推斷（橋接毒性方法）。例如短期毒性研究中類(lèi)似的毒性特征、遺傳毒性或ADME 的研究結(jié)果。如果納米原料實(shí)際上與傳統(tǒng)材料存在較大出入，那么就有必要對(duì)納米原料的表征方法進(jìn)行開(kāi)發(fā)驗(yàn)證，在最終制劑、局部和系統(tǒng)暴露期間進(jìn)行毒理學(xué)評(píng)估。還需要開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證能夠真實(shí)模擬體內(nèi)情況的體外模型，從而確定關(guān)鍵參數(shù)，完善預(yù)測(cè)機(jī)制，精準(zhǔn)預(yù)判納米原料理化性質(zhì)、生物動(dòng)力學(xué)行為以及毒理學(xué)結(jié)果。

而歐盟自身也積極推進(jìn)符合“3R” 原則（減少、替代和優(yōu)化） 的替代方法的開(kāi)發(fā)與驗(yàn)證，《化妝品納米原料安全性評(píng)價(jià)指南》（SCCS/1611/19） 中，逐項(xiàng)討論了納米原料毒理學(xué)替代方法的建立與運(yùn)用。例如，體外和離體模型、計(jì)算機(jī)建模和分類(lèi)處理方法[33]、基于生理的藥代動(dòng)力學(xué)（PBPK）[34] 或毒性動(dòng)力學(xué)（PBTK） 建模方法[35]。但是目前大部分已通過(guò)證實(shí)的替代方法尚未通過(guò)用于納米原料的相關(guān)驗(yàn)證，無(wú)法取代納米粒的標(biāo)準(zhǔn)化體內(nèi)毒理學(xué)評(píng)估方法[36]。因此這些新興方法的可行性還需要一定的案例研究來(lái)進(jìn)行科學(xué)論證。

05結(jié)語(yǔ)

納米原料因其尺寸的特殊性，與傳統(tǒng)物料相比具有完全不同的理化特征、表面特性和生物學(xué)特征，因此有關(guān)納米原料的安全性一直是世界各國(guó)的重點(diǎn)關(guān)注對(duì)象。其中納米形式的TiO2 和ZnO 已經(jīng)作為最為常用的物理防曬劑在防曬產(chǎn)品中大量使用，這不禁引起了各機(jī)構(gòu)的擔(dān)憂(yōu)。大量有關(guān)人體/ 動(dòng)物的體內(nèi)外透皮研究表明，無(wú)論是在健康的皮膚中還是在受損的皮膚中，納米TiO2 或ZnO 都不會(huì)滲透到SC 以外的活性細(xì)胞中，更不可能進(jìn)入全身血液循環(huán)。ICCR 與SCCS 也一致認(rèn)為納米TiO2 是一種非敏化劑，對(duì)皮膚無(wú)刺激性，并得出結(jié)論：沒(méi)有證據(jù)表明皮膚接觸納米TiO2 后具有致癌性、致突變性或生殖毒性。因此歐盟委員會(huì)規(guī)定納米TiO2 和ZnO 在防曬產(chǎn)品中的最大使用濃度為25%。但是禁止以噴霧形式應(yīng)用于化妝產(chǎn)品中，以防消費(fèi)者因吸入納米顆粒而發(fā)生肺部暴露風(fēng)險(xiǎn)。

2021 年，我國(guó)《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》正式施行，在配套的《化妝品注冊(cè)備案資料管理規(guī)定》《化妝品新原料注冊(cè)備案資料管理規(guī)定》中，首次提出了化妝品納米原料相關(guān)要求。與此同時(shí)，為了規(guī)范化妝品的安全評(píng)估工作，國(guó)家藥監(jiān)局又組織起草了《化妝品安全評(píng)估技術(shù)導(dǎo)則（2021 版）》[37]，其中詳細(xì)描述了化妝品原料的安全評(píng)估細(xì)則。雖然納米形式的原料并沒(méi)有提及，但是這對(duì)于將來(lái)納米原料的安全性評(píng)估也具有一定的奠基作用。

這些都意味著我國(guó)對(duì)于化妝品行業(yè)中納米原料的使用和管理將進(jìn)一步規(guī)范[38]。這也對(duì)行業(yè)內(nèi)部的相關(guān)科研工作者提出新要求，需要對(duì)相關(guān)領(lǐng)域的國(guó)際審查動(dòng)態(tài)和最新研究進(jìn)展進(jìn)行持續(xù)跟進(jìn)，不斷健全和完善屬于中國(guó)自己的化妝品納米原料安全監(jiān)管體系。