姜東平

摘 要 為了研究出能防治仔豬腹瀉、提高仔豬生產(chǎn)性能、替代抗生素的混合飼料添加劑，試驗(yàn)選取150頭平均日齡為21 d的健康斷奶仔豬，按公母各半、體重相近的原則平均分成5組（每組10頭，設(shè)3次重復(fù)），在飼料中拌入自配添加劑“新三仙”，分別于試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)（28日齡）和結(jié)束時(shí)（70日齡）對(duì)空腹仔豬稱重，計(jì)算每頭仔豬的平均日增重、平均日采食量、料重比（F/G）和腹瀉率；并在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采集腸道樣本測(cè)定大腸中菌群數(shù)量。試驗(yàn)結(jié)果表明：日糧中添加“新三仙”能顯著提高斷奶仔豬的日增重，降低料重比和降低腹瀉率，能提升仔豬大腸中益生菌的數(shù)量，增強(qiáng)腸道健康，且“新三仙Ⅲ”效果最好。

關(guān)鍵詞 新三仙；仔豬；生長(zhǎng)性能；腸道菌群

中圖分類號(hào)：S821.5；S828.9 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2023.09.045

自20世紀(jì)人們發(fā)現(xiàn)抗生素具有促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)作用以來(lái)，便被廣泛地用作豬雞飼料添加劑，這對(duì)促進(jìn)豬雞生長(zhǎng)和預(yù)防疾病發(fā)揮了重要作用，但隨著抗生素的長(zhǎng)期大劑量濫用，它的弊端也越來(lái)越明顯，引發(fā)動(dòng)物腸道菌群失調(diào)、機(jī)體產(chǎn)生耐藥性、抗病力降低和藥物殘留等問(wèn)題。2018年，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部決定開(kāi)展獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)，組織制定了《獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)試點(diǎn)工作方案（2018—2021年）》，確定了各地獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)試點(diǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)數(shù)量。2017年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，發(fā)布了《藥物飼料添加劑品種目錄及使用規(guī)范》的公告，明確禁止抗病促生長(zhǎng)的抗生素在飼料中長(zhǎng)期添加。本研究受傳統(tǒng)中藥“焦三仙”啟發(fā)，通過(guò)研究，篩選出幾種添加劑，并對(duì)其進(jìn)行了比較，以期探尋促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)腸道菌群平衡和增強(qiáng)腸道健康的最佳組方，對(duì)替代傳統(tǒng)抗生素添加劑，促進(jìn)生態(tài)健康養(yǎng)豬，具有十分重要的理論與現(xiàn)實(shí)意義。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗(yàn)材料

1.1.1 ?試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)仔豬150頭，平均體重為6.98±0.45 kg，品種為杜×長(zhǎng)×大三元豬，由河北省高陽(yáng)某養(yǎng)殖場(chǎng)提供。試驗(yàn)仔豬于哺乳期（14 d）進(jìn)行公豬去勢(shì)，平均日齡21 d時(shí)斷奶，28日齡對(duì)豬群用豬瘟疫苗常規(guī)免疫，常規(guī)飼養(yǎng)管理。

1.1.2 ?試驗(yàn)原料

“新腸泰”購(gòu)自四川達(dá)邦生物技術(shù)有限公司；酸化劑、乳豬酶、枯草芽孢、酵母、果寡糖購(gòu)自石家莊牧豐飼料原料貿(mào)易有限公司；飼料購(gòu)自大北農(nóng)飼料有限公司。

1.2 ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ?試驗(yàn)分組及處理

按體重、性別和胎次基本一致原則分為A、B、C、D和E組，每組10頭，設(shè)3次重復(fù)。飼養(yǎng)7 d適應(yīng)環(huán)境后，試驗(yàn)組（A組、B組、C組、D組）于平均28日齡開(kāi)始，依次按0.1%拌料添加新三仙Ⅰ、新三仙Ⅱ、新三仙Ⅲ、焦三仙；對(duì)照組（E組）不添加任何藥物。分組及處理詳見(jiàn)表1。

1.2.2 ?檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.2.2.1 ? ?仔豬生長(zhǎng)性能的測(cè)定

試驗(yàn)全程以欄為單位記錄采食量，分別于試驗(yàn)開(kāi)始前（28日齡）和結(jié)束時(shí)（70日齡）對(duì)空腹斷奶仔豬稱重，計(jì)算每頭斷奶仔豬的平均日增重和料重比。

1.2.2.2 ? ?仔豬腹瀉率的測(cè)定

試驗(yàn)期間每天早上9：30觀察仔豬糞便情況，并做好記錄。腹瀉率計(jì)算見(jiàn)公式（1）。

腹瀉率（%）=（每欄仔豬腹瀉頭數(shù)×腹瀉天數(shù)）/（每欄仔豬總數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100% （1）

1.2.2.3 ? ?仔豬大腸中腸道菌群的測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)（70日齡），每組隨機(jī)選4頭仔豬進(jìn)行屠宰，立即剖腹并結(jié)扎結(jié)腸、盲腸和直腸的兩頭，用酒精棉球?qū)⒚總€(gè)結(jié)扎口消毒后，放入已滅菌的塑料袋中，將樣品運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，立即在超凈工作臺(tái)上稱取1.0 g左右腸內(nèi)容物放到無(wú)菌試管中，進(jìn)行1/103至1/106倍稀釋后，分別涂布接種于麥康凱、Rogosa瓊脂和雙歧桿菌分離選擇性培養(yǎng)基平皿上，分別對(duì)大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，并進(jìn)一步生化鑒定。

1.3 ?數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的測(cè)定結(jié)果

仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表2。試驗(yàn)仔豬的末重和平均日增重，A組和C組高于其他各組，B組和D組高于E組，差異極顯著（p<0.01）；試驗(yàn)仔豬的料重比，C組低于其他各組，A組、B組和D組低于E組，差異顯著（p<0.05）；仔豬的腹瀉率，A組和C組的腹瀉率低于其他組，B組和D組低于E組，差異顯著（p<0.05）。試驗(yàn)表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著促進(jìn)仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育和提高飼料利用率，顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率。

2.2 ?仔豬大腸中菌群數(shù)的測(cè)定結(jié)果

2.2.1 ?仔豬大腸中大腸桿菌數(shù)測(cè)定結(jié)果

大腸桿菌數(shù)測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表3。A、C組大腸中的大腸桿菌數(shù)量低于B組，差異極顯著（p＜0.01）；B組大腸中的大腸桿菌數(shù)量低于D、E組，差異極顯著（p＜0.01）。試驗(yàn)結(jié)果表明，添加益生菌“新腸泰”、酸化劑和枯草芽孢桿菌對(duì)大腸桿菌有較強(qiáng)的抑制作用。

2.2.2 ?仔豬腸道中雙歧桿菌數(shù)測(cè)定結(jié)果

腸道中雙歧桿菌數(shù)測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表4。大腸中雙歧桿菌的數(shù)量，B組高于其他各組，A組、C組和D組高于E組，差異顯著（p＜0.05）。

2.2.3 ?仔豬大腸中乳酸糞腸球菌數(shù)測(cè)定結(jié)果

大腸中乳酸糞腸球菌數(shù)測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表5。對(duì)比大腸中乳酸桿菌數(shù)量可知，A組、C組數(shù)量高于B組，差異顯著（p＜0.05），B組數(shù)量高于D組和E組，差異顯著（p＜0.05）。

本次試驗(yàn)測(cè)定了結(jié)腸、盲腸和直腸中大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌的濃度，以對(duì)比添加不同組方的添加劑對(duì)斷奶仔豬大腸中菌群數(shù)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，A組、B組和C組對(duì)斷奶仔豬大腸中有害菌起到了抑制作用，對(duì)雙歧桿菌和乳酸糞腸球菌起到了增值的作用，且C組效果最好。

3 ?小結(jié)與討論

3.1 ?新三仙對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

“新三仙”根據(jù)“焦三仙”組方原理結(jié)合仔豬的生理特點(diǎn)，采用包被益生菌“新腸泰”、酶制劑、酸化劑等組合而成。試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著促進(jìn)仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育和提高飼料利用率，顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率，這可能與添加的“新腸泰”、寡糖、酶制劑和酸化劑等有關(guān)。

飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，70%～80%在小腸段消化吸收，20%～30%進(jìn)入大腸，其中大部分排出體外，形成糞便和氨氣等排泄物。本試驗(yàn)通過(guò)在飼料中添加“新腸泰”挖掘利用大腸中20%～30%的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高飼料消化率，提高仔豬生產(chǎn)性能?！靶氯伞敝邪坏娜樗峒S腸球菌，能耐高溫、耐胃酸，能順利地在大腸中定植、快速繁殖，維持腸道微生態(tài)平衡，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，使動(dòng)物消化道處于最佳健康狀態(tài)，提高飼料消化率。前人研究充分證實(shí)益生菌可以通過(guò)調(diào)節(jié)構(gòu)建大腸高效微生態(tài)系統(tǒng)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在大腸段的消化和吸收，提高飼料利用率。史自濤等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼料中添加糞腸球菌可提高平均日增重和平均日采食量，降低仔豬腹瀉率，提高仔豬的生產(chǎn)性能[1]。李興華研究發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加酵母細(xì)胞壁多糖和枯草芽孢桿菌，能顯著提高哺乳和斷奶仔豬免疫功能和腸道消化酶活性，二者合用更能顯著促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育和提高其免疫功能[2]。彭小蘭等[3]、馬秋剛等[4]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加果寡糖能提高斷奶仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率和日增重，降低仔豬腹瀉率，其效果與添加量關(guān)系密切。王向榮等研究發(fā)現(xiàn)，4種不同的復(fù)合酶制劑均能提高仔豬的日增重，降低料重比，降低仔豬腹瀉率[5]。賀琴等試驗(yàn)表明，添加酶制劑可以補(bǔ)充仔豬機(jī)體內(nèi)源酶，促進(jìn)仔豬健康生長(zhǎng)[6]。酸化劑是仔豬常用的另一類添加劑，它可以降低仔豬胃酸pH值，提高仔豬消化力。岳增華等在仔豬日糧中添加1.2%的檸檬酸或者0.5%復(fù)合酸化劑，發(fā)現(xiàn)都能顯著提高仔豬的日增重[7]。彭宏剛等[8]、李春鳳[9]、朱輝[10]、許靜波等[11]研究表明，在仔豬飼料中添加黃芪多糖能提高仔豬采食量和日增重等生產(chǎn)性能，但對(duì)料重比無(wú)顯著影響，這與本試驗(yàn)的提高日增重結(jié)果一致，與日采食量和料重比結(jié)果有差別，這可能與本試驗(yàn)添加了其他有效成分有關(guān)。

3.2 ?新三仙對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

腹瀉是仔豬最常見(jiàn)疾病之一，防治仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)的重要任務(wù)。此次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，仔豬的腹瀉率，A組和C組的腹瀉率低于其他組，B組和D組低于E組，差異顯著（p<0.05）。試驗(yàn)表明，日糧中添加新三仙和焦三仙能顯著降低仔豬的腹瀉發(fā)生率。這可能與添加的“新腸泰”和酸化劑等有關(guān)。

“新腸泰”是一種特殊工藝包被的乳酸糞腸球菌，相對(duì)于嚴(yán)格厭氧、培養(yǎng)和保存條件苛刻的雙歧桿菌、乳桿菌而言，糞腸球菌兼性厭氧，適宜pH值為5.0～7.5，生長(zhǎng)溫度為35～38 ℃，對(duì)腸道上皮細(xì)胞的粘附能力強(qiáng)，能迅速繁殖（19 min繁殖一代）并產(chǎn)生大量乳酸和有益代謝產(chǎn)物，生物活性強(qiáng)。乳酸糞腸球菌通過(guò)產(chǎn)生揮發(fā)性短鏈脂肪酸（如丙酸、乙酸、乳酸等）降低腸腔pH值，促進(jìn)腸蠕動(dòng)，從而使外源菌未能與胃腸道黏膜表面接觸黏附就被排出體外；在厭氧環(huán)境下產(chǎn)生過(guò)氧化氫和天然抗生素類物質(zhì)，減少腸道內(nèi)毒性物質(zhì)的產(chǎn)生，形成抑制或殺死有害菌的環(huán)境。Mallo J J等[12]、史自濤等[1]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加糞腸球菌除改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能外也可以降低仔豬腹瀉率，這與本試驗(yàn)的結(jié)果A組和C組的腹瀉率低于其他組的結(jié)果相一致。Burnell T W等在仔豬飼料中添加延胡氏羧酸、檸檬酸、甲酸等有機(jī)酸，試驗(yàn)結(jié)果表明能降低胃腸道的pH值，減少斷奶仔豬腹瀉的發(fā)生[13]。

3.3 ?新三仙對(duì)仔豬腸道菌群的影響

本次試驗(yàn)測(cè)定了仔豬結(jié)腸、盲腸和直腸中大腸桿菌、乳酸糞腸球菌和雙歧桿菌的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明，A組、B組和C組對(duì)腸道有害菌起到了抑制作用，對(duì)雙歧桿菌和乳酸糞腸球菌起到了增殖的作用，且C組效果最好。

益生菌是一類對(duì)宿主有益的活性微生物，是定植于宿主腸道、生殖系統(tǒng)內(nèi)，能產(chǎn)生確切健康功效從而改善宿主微生態(tài)平衡、發(fā)揮有益作用的活性有益微生物的總稱。益生菌是活性微生物，它們只能在相對(duì)受限的環(huán)境中存活，如營(yíng)養(yǎng)條件、厭氧環(huán)境、適宜溫度等。當(dāng)脫離適宜生長(zhǎng)環(huán)境，益生菌活力降低，甚至死亡。然而益生菌的工作場(chǎng)所是動(dòng)物的大腸，只有數(shù)量多、活力強(qiáng)的益生菌到達(dá)大腸，才能發(fā)揮其生物功效。因此，益生菌應(yīng)用有3個(gè)難點(diǎn)：1）益生菌產(chǎn)品是活性微生物，在制劑生產(chǎn)、產(chǎn)品保存、使用過(guò)程中的穩(wěn)定性難題。2）益生菌產(chǎn)品是活性微生物，動(dòng)物飼喂后，需要經(jīng)過(guò)胃、小腸后，到達(dá)適宜生長(zhǎng)環(huán)境——大腸；經(jīng)過(guò)胃中胃酸的作用、小腸前段膽汁的作用，大多數(shù)活菌活力降低，甚至死亡。3）大腸中微生物菌群的競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng)。動(dòng)物大腸天然生長(zhǎng)數(shù)量龐大的微生物菌群，外源益生菌只有數(shù)量多、活力強(qiáng)、繁殖迅速并產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物，才能發(fā)揮其生物功效。

本次試驗(yàn)所選用的“新腸泰”采用多層特定薄膜衣為腸溶包衣，到達(dá)小腸后段后崩解釋放糞腸球菌，避免胃中胃酸和腸中膽鹽的影響，保證數(shù)量多、活力強(qiáng)的糞腸球菌活菌到達(dá)大腸；“新腸泰”優(yōu)選的糞腸球菌菌株，相對(duì)于嚴(yán)格厭氧、培養(yǎng)和保存條件苛刻的乳桿菌、雙歧桿菌而言，糞腸球菌兼性厭氧，能迅速繁殖并產(chǎn)生大量乳酸和有益代謝產(chǎn)物，生物活性強(qiáng)。在大腸適宜環(huán)境中粘附力強(qiáng)，保證了腸道大量益生菌的定植，促進(jìn)了仔豬腸道的健康發(fā)育。前人的研究充分證實(shí)了益生菌的相關(guān)作用[14]。Taras等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加糞腸球菌可排斥腸道內(nèi)有害菌的生存和繁殖，可以減少潛在致病性大腸桿菌的數(shù)量[15]，這與本次試驗(yàn)結(jié)果相一致。

試驗(yàn)結(jié)果表明，新三仙的3個(gè)組方添加劑都有抑制腸道大腸桿菌增殖，促進(jìn)有益菌生長(zhǎng)的作用，“新三仙Ⅰ”“新三仙Ⅲ”在促進(jìn)腸道乳酸菌的增值方面效果要好于“新三仙Ⅱ”。綜合來(lái)看，“新三仙Ⅲ”的組方在維持?jǐn)嗄套胸i腸道菌群平衡方面效果更好。

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（責(zé)任編輯：敬廷桃）