卿恩華,唐彬鋮,牛 添,王珺琦,陳朝顏,胡繼偉,何 樺,李 亮,王繼文*,胡深強(qiáng)*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) “畜禽遺傳資源發(fā)掘與創(chuàng)新利用”四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,成都 611130;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳育種研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜禽生物組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,成都 611130)

研究表明,所有鳥類繁殖都通過(guò)體內(nèi)受精完成,但僅有約3%雄鳥保留了外生殖器,在家禽上僅包括鴨和鵝,外生殖器發(fā)育狀況如尺寸大小、結(jié)構(gòu)特征等與公禽交配行為和授精能力密切相關(guān)。公鵝生殖系統(tǒng)由雙側(cè)睪丸、附睪和輸精管以及一個(gè)外生殖器構(gòu)成[1]。一般認(rèn)為,公鵝配種能力主要取決于外生殖器和睪丸發(fā)育狀況與精液品質(zhì),其中外生殖器正常發(fā)育是自然交配發(fā)生的前提條件,而睪丸正常發(fā)育是精子發(fā)生的基礎(chǔ)。與同為家禽的雞、鴨等相比,公鵝繁殖性能較差,主要體現(xiàn)為公鵝繁殖具有明顯的季節(jié)性和擇偶性,出現(xiàn)外生殖器發(fā)育異常、性欲不振、無(wú)精、弱精等繁殖障礙比例高,且自然交配下種蛋受精率和孵化率均較低,這成為制約鵝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的瓶頸因素[2-3]。

近些年,在畜禽種業(yè)振興、食品安全、環(huán)保壓力等新形勢(shì)下,我國(guó)水禽產(chǎn)業(yè)正逐步從傳統(tǒng)水邊粗放散養(yǎng)向現(xiàn)代規(guī)?；s化旱地養(yǎng)殖模式轉(zhuǎn)型升級(jí),為適應(yīng)新的養(yǎng)殖方式及滿足現(xiàn)代育種和生產(chǎn)要求,鵝的交配方式也將從自然交配向人工授精轉(zhuǎn)變,因此提高旱地養(yǎng)殖模式下公鵝的繁殖性能已成為當(dāng)前鵝育種和生產(chǎn)者的主要目標(biāo)之一[4]。研究表明,公禽的生殖器官發(fā)育受到日齡[5-7]、營(yíng)養(yǎng)[8-11]、氣候[12-16](如光照、溫濕度等)、飼養(yǎng)方式等多因素的影響,其中飼養(yǎng)方式是重要的影響因素。前人研究發(fā)現(xiàn),飼養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變對(duì)公雞、公鴨繁殖性能均有顯著影響。例如,Du等[17]研究結(jié)果表明,相較于籠養(yǎng),放養(yǎng)條件下公雞的精液量和精子活率更高;Shaheen等[18]研究結(jié)果表明,與地面平養(yǎng)條件下自然交配模式相比,籠養(yǎng)人工授精模式下的公雞繁殖性能損耗較低且繁殖效率更高;Etuk等[19]研究結(jié)果表明,飼養(yǎng)方式對(duì)番鴨精液品質(zhì)如精子濃度、精子活率等有顯著影響;趙小玲等[20]分析了單籠和本交籠對(duì)肉雞睪丸發(fā)育和生殖激素含量的影響,發(fā)現(xiàn)本交籠混養(yǎng)的公雞睪丸重量和曲精小管面積均顯著大于單籠飼養(yǎng)。Alam等[21]有關(guān)肉雞的研究結(jié)果表明,與地面飼養(yǎng)相比,籠養(yǎng)能提高肉雞的產(chǎn)蛋量、生育能力、孵化率,并降低死亡率。Zhang等[22]對(duì)巢湖鴨的研究表明,網(wǎng)上養(yǎng)殖的鴨脂肪含量更高,血清中膽固醇含量更低,健康狀態(tài)更好。ukaszewicz等[23]研究結(jié)果表明,與半放牧方式相比,放牧條件下公鵝血清睪酮含量及精液品質(zhì)更優(yōu)。鵝的旱養(yǎng)方式主要包括地面平養(yǎng)、網(wǎng)上平養(yǎng)、地面網(wǎng)上混合平養(yǎng)、籠養(yǎng)等;相較于地面飼養(yǎng),網(wǎng)上平養(yǎng)和籠養(yǎng)均實(shí)現(xiàn)了糞污分離,且更有利于養(yǎng)殖環(huán)境控制和日常飼養(yǎng)管理,顯著提高了生產(chǎn)效率[24-26]。然而,目前有關(guān)飼養(yǎng)方式尤其是籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)對(duì)公鵝繁殖性能影響的研究報(bào)道還不多見。鑒于此,本研究以繁殖性能優(yōu)秀的四川白鵝公鵝為試驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)比較分析籠養(yǎng)和網(wǎng)上地面混合平養(yǎng)對(duì)鵝睪丸及外生殖器形態(tài)學(xué)、組織學(xué)的影響,旨在為旱養(yǎng)條件下公鵝適宜的飼養(yǎng)方式選擇及提高公鵝繁殖性能提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與樣品采集

本研究所用的100只四川白鵝公鵝均由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)水禽育種場(chǎng)(雅安,四川)提供,用于飼養(yǎng)試驗(yàn)鵝的圈舍、籠具、料槽等設(shè)施設(shè)備在飼養(yǎng)前都進(jìn)行了徹底的清洗和消毒。所有試驗(yàn)鵝只均來(lái)自同批孵化的種蛋,并在相同的環(huán)境條件下進(jìn)行育雛和上籠飼養(yǎng),具體飼養(yǎng)管理制度為:第0～28日齡進(jìn)行室內(nèi)網(wǎng)上育雛,第29～120日齡進(jìn)行室內(nèi)網(wǎng)上地面混合平養(yǎng),于第120日齡時(shí)挑選60只精神狀態(tài)良好、健康和體重相近的公鵝等分為2組(每組30只),分別進(jìn)行籠養(yǎng)和網(wǎng)上地面混合平養(yǎng),兩組均飼喂相同的飼料,具體飼料成分及含量列于表1;其中,籠養(yǎng)采用單籠飼養(yǎng),單籠尺寸為長(zhǎng)(0.55 m)×寬(0.37 m)×高(0.7 m);混合平養(yǎng)圈舍尺寸為長(zhǎng)(13 m)×寬(6 m),由60 m2的網(wǎng)上平養(yǎng)區(qū)域和18 m2的地面平養(yǎng)區(qū)域構(gòu)成。當(dāng)飼養(yǎng)至270日齡(體成熟階段)時(shí),對(duì)所有試驗(yàn)鵝禁食12 h后,從各組隨機(jī)挑選16只活體測(cè)定其體重及外生殖器相關(guān)形態(tài)學(xué)指標(biāo),然后進(jìn)行屠宰并測(cè)定宰后睪丸和外生殖器相關(guān)形態(tài)學(xué)指標(biāo),最后從各組采集8只鵝的左側(cè)睪丸和外生殖器用于組織學(xué)分析。

表1 飼料成分及含量Table 1 The feed ingredients and contents

1.2 形態(tài)學(xué)指標(biāo)測(cè)定

禁食結(jié)束后,首先測(cè)定活體重量,然后對(duì)公鵝進(jìn)行翻肛,使其外生殖器完全露出,記錄外生殖器螺旋數(shù)后,使用游標(biāo)卡尺測(cè)量其基部直徑、自然長(zhǎng)度和拉直長(zhǎng)度。其中,基部直徑指鵝外生殖器基部的橫向長(zhǎng)度;自然長(zhǎng)度指鵝外生殖器完全露出后,其頂部至基部的長(zhǎng)度;拉直長(zhǎng)度指使用外力將鵝外生殖器拉至最長(zhǎng)時(shí),其頂部到基部的長(zhǎng)度。將鵝頸靜脈放血處死后,迅速開膛取出雙側(cè)睪丸和外生殖器,使用電子天平測(cè)定左、右和雙側(cè)睪丸重量以及外生殖器重量,并使用游標(biāo)卡尺測(cè)量各側(cè)睪丸的長(zhǎng)徑、短徑和背腹徑;其中,長(zhǎng)徑指睪丸腹側(cè)縱向長(zhǎng)度,短徑指睪丸腹側(cè)橫向長(zhǎng)度,背腹徑指睪丸背側(cè)至腹側(cè)的長(zhǎng)度。睪丸和外生殖器的器官指數(shù)計(jì)算公示如下:睪丸器官指數(shù)=睪丸重量(g)/活體重量(g);外生殖器器官指數(shù)=外生殖器重量(g)/活體重量(g)。

1.3 組織學(xué)指標(biāo)測(cè)定

首先將新鮮采集的鵝左側(cè)睪丸及外生殖器組織固定于4%多聚甲醛24 h以上,接著取出組織在通風(fēng)櫥內(nèi)用手術(shù)刀將切片部位修剪平整,然后將修剪好的組織放于脫水盒內(nèi),并采用不同濃度酒精、醇苯、二甲苯和蠟進(jìn)行梯度脫水與浸蠟,最后置于切片機(jī)上進(jìn)行切片,單張切片厚度約4～6 μm,每只鵝的睪丸和外生殖器組織均至少制作3張切片。將制作好的石蠟切片烘干、脫蠟后,采用蘇木精和伊紅進(jìn)行H&E染色,隨后將染色后的鵝睪丸和外生殖器切片置于顯微鏡(BX53,OLYMPUS,美國(guó))下觀察和拍照。每張切片至少選取3個(gè)不同視野進(jìn)行組織學(xué)指標(biāo)測(cè)量,采用 Image-Pro Plus 6.0軟件對(duì)每個(gè)視野內(nèi)睪丸(曲徑細(xì)管直徑、實(shí)質(zhì)面積、間質(zhì)面積、生精上皮厚度等)或外生殖器(角化上皮厚度、外層膠原蛋白厚度、內(nèi)層膠原蛋白厚度、淋巴管腔直徑等)組織學(xué)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量,并對(duì)睪丸切片視野中曲精細(xì)管、支持細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、精原細(xì)胞、生殖細(xì)胞等進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)質(zhì)間質(zhì)比計(jì)算公示如下:實(shí)質(zhì)間質(zhì)比=實(shí)質(zhì)面積/間質(zhì)面積。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

所有試驗(yàn)結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”的形式表示。應(yīng)用SAS 9.4軟件對(duì)鵝生殖器官形態(tài)學(xué)和組織學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用單因素方差分析(ANOVA)比較兩組之間是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,采用Pearson系數(shù)分析不同指標(biāo)之間的相關(guān)性。P<0.01表示組間差異極顯著或不同指標(biāo)間極顯著相關(guān),P<0.05表示組間差異顯著或不同指標(biāo)間顯著相關(guān)。采用GraphPad Prism 8.0軟件用于可視化統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析。

2 結(jié) 果

2.1 籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)方式下鵝睪丸及外生殖器形態(tài)學(xué)的比較分析

如圖1所示,在睪丸形態(tài)學(xué)層面,相較于混合平養(yǎng)組,籠養(yǎng)組鵝的左、右側(cè)睪丸尺寸和體積均相對(duì)較大。進(jìn)一步統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),籠養(yǎng)組鵝左側(cè)、右側(cè)和雙側(cè)睪丸重量均極顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.01),且籠養(yǎng)組鵝左側(cè)、右側(cè)和雙側(cè)睪丸器官指數(shù)均極顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.01);與此同時(shí),籠養(yǎng)組鵝右側(cè)睪丸長(zhǎng)徑以及左側(cè)、右側(cè)睪丸短徑均顯著高于混合平養(yǎng)(P<0.05),但兩組之間左側(cè)睪丸長(zhǎng)徑、背腹徑以及右側(cè)睪丸背腹徑差異不顯著(P>0.05)。

a. 籠養(yǎng)組代表公鵝的睪丸照片。R1～R3分別為各組代表個(gè)體1～3,L代表左側(cè)睪丸,R代表右側(cè)睪丸,下同。b. 混合平養(yǎng)組代表公鵝的睪丸照片。c. 睪丸重量。d. 睪丸器官指數(shù)。e. 睪丸形態(tài)學(xué)指標(biāo)。“*”表示兩組間差異顯著(P<0.05),“**”表示差異極顯著(P<0.01),下同a. The pictures of testes from representative male geese in CRS. R1-R3 represent individual 1-3. L represents the left testis, while R represents the right testis. Below is the same. b. The pictures of testes of male geese in MRS. c. The testicular weight. d. The testicular organ index. e. The testicular morphological parameters. "*" indicates a significant difference between the two groups (P<0.05), while "**" indicates an extremely significant difference between the two groups (P<0.01). Below is the same圖1 籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)組鵝睪丸的形態(tài)學(xué)差異Fig.1 Morphological difference of the geese testis between the CRS and MRS groups

如圖2所示,在外生殖器形態(tài)學(xué)層面,相較于混合平養(yǎng)組,籠養(yǎng)組鵝的外生殖器尺寸相對(duì)較大、螺旋結(jié)構(gòu)更明顯。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,籠養(yǎng)組鵝外生殖器的自然長(zhǎng)度和基部直徑顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.05),拉直長(zhǎng)度極顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.01),但兩組之間鵝外生殖器重量及其器官指數(shù)和螺旋數(shù)差異不顯著(P>0.05)。

a. 籠養(yǎng)組代表公鵝的外生殖器照片;b. 混合平養(yǎng)組代表公鵝的外生殖器照片;c. 外生殖器重量;d. 外生殖器器官指數(shù);e. 外生殖器螺旋數(shù);f. 外生殖器形態(tài)學(xué)指標(biāo)a. The pictures of the external genitalia from representative male geese in CRS; b. The pictures of the external genitalia from representative male geese in MRS; c. The external genital weight; d. The external genital organ index; e. The external genital helical number; f. The morphological parameters of the external genitalia圖2 籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)組鵝外生殖器的形態(tài)學(xué)差異Fig.2 Morphological difference of the geese external genitalia between the CRS and MRS groups

2.2 籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)方式下鵝睪丸及外生殖器組織學(xué)的比較分析

如圖3所示,在睪丸組織學(xué)層面,從兩種飼養(yǎng)方式下鵝睪丸切片中均能觀察到相似的曲精細(xì)管、生精上皮、間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞、精原細(xì)胞等組織學(xué)構(gòu)成,但兩組之間部分組織學(xué)結(jié)構(gòu)在數(shù)量和直徑上存在差異。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,籠養(yǎng)組鵝睪丸精原細(xì)胞數(shù)量顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.05),睪丸實(shí)質(zhì)間質(zhì)比、生精上皮厚度、支持細(xì)胞數(shù)量和生殖細(xì)胞數(shù)量均極顯著高于混合平養(yǎng)組(P<0.01),且籠養(yǎng)組鵝睪丸間質(zhì)細(xì)胞密度和曲精細(xì)管數(shù)量極顯著低于混合平養(yǎng)組(P<0.01),但籠養(yǎng)組與混合平養(yǎng)組鵝睪丸曲精細(xì)管直徑之間差異不顯著(P>0.05)。

如圖4所示,在外生殖器組織學(xué)層面,從兩種飼養(yǎng)方式下鵝外生殖器切片中均能觀察到角化上皮、外層膠原蛋白、內(nèi)層膠原蛋白和淋巴管腔等組織學(xué)構(gòu)成,但兩組之間部分組織學(xué)結(jié)構(gòu)在厚度上存在差異。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示,籠養(yǎng)組鵝外生殖器的角化上皮厚度顯著低于混合平養(yǎng)組(P<0.05),但兩組之間外生殖器的外層膠原蛋白厚度、內(nèi)層膠原蛋白厚度和淋巴管腔直徑差異均不顯著(P>0.05)。

a. 籠養(yǎng)組鵝外生殖器組織學(xué)結(jié)構(gòu).b. 混合平養(yǎng)組鵝外生殖器組織學(xué)結(jié)構(gòu)。Ke. 角化上皮;Oc. 外層膠原蛋白;Ce. 內(nèi)層膠原蛋白;Ll. 淋巴管腔。c. 外生殖器組織學(xué)指標(biāo)a. Histological structure of the geese external genitalia in CRS. b. Histological structure of the geese external genitalia in MRS. Ke. Keratinized epithelium; Oc. Outer collagen; Ce. Inner collagen; Ll. Lymphatic lumen. c. The external genital histological parameters圖4 籠養(yǎng)和混合平養(yǎng)組鵝外生殖器的組織學(xué)差異Fig.4 Histological difference of the goose external genitalia between the CRS and MRS groups

2.3 鵝睪丸和外生殖器形態(tài)學(xué)與組織學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析

本研究進(jìn)一步對(duì)兩種飼養(yǎng)方式下鵝睪丸、外生殖器的組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)進(jìn)行了相關(guān)性分析。睪丸指標(biāo)之間的相關(guān)性分析結(jié)果如圖5a所示,鵝睪丸重量、長(zhǎng)徑、短徑及其器官指數(shù)均與生精上皮厚度、曲精細(xì)管直徑、生殖細(xì)胞數(shù)量呈顯著(P<0.05)或極顯著正相關(guān)(P<0.01),與曲精細(xì)管個(gè)數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01);睪丸長(zhǎng)徑、短徑及其器官指數(shù)與實(shí)質(zhì)間質(zhì)比呈顯著正相關(guān)(P<0.05);睪丸重量、長(zhǎng)徑、短徑及其器官指數(shù)與間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量均不顯著相關(guān)(P>0.05)。

外生殖器指標(biāo)之間的相關(guān)性分析結(jié)果如圖5b所示,鵝外生殖器內(nèi)層膠原蛋白厚度與其自然長(zhǎng)度、螺旋數(shù)均呈極顯著正相關(guān)(P<0.01);外生殖器重量與其拉直長(zhǎng)度、基部直徑呈顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)正相關(guān);外生殖器基部直徑與其自然長(zhǎng)度、拉直長(zhǎng)度、螺旋數(shù)均呈顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)正相關(guān);外生殖器角化上皮厚度、外層膠原蛋白厚度和淋巴管腔直徑與其自然長(zhǎng)度、拉直長(zhǎng)度、基部直徑和螺旋數(shù)均不顯著相關(guān)(P>0.05)。

2.4 不同飼養(yǎng)方式下鵝睪丸與外生殖器組織形態(tài)學(xué)的相關(guān)性分析

本研究進(jìn)一步分別對(duì)籠養(yǎng)、混合平養(yǎng)方式下的鵝睪丸與外生殖器組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)進(jìn)行了相關(guān)性分析?；\養(yǎng)組的相關(guān)性分析結(jié)果如圖6a所示,鵝睪丸重量、器官指數(shù)、長(zhǎng)徑和短徑與外生殖器重量和器官指數(shù)呈極顯著正相關(guān)(P<0.01);睪丸器官指數(shù)與外生殖器拉直長(zhǎng)度呈顯著正相關(guān)(P<0.05);睪丸實(shí)質(zhì)間質(zhì)比與外生殖器基部直徑呈顯著正相關(guān)(P<0.05),與外生殖器外層膠原蛋白厚度呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸生精上皮厚度與外生殖器拉直長(zhǎng)度和螺旋數(shù)呈顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)正相關(guān);睪丸曲精細(xì)管數(shù)量與外生殖器重量、器官指數(shù)、拉直長(zhǎng)度和基部直徑呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸支持細(xì)胞數(shù)量與淋巴管腔直徑呈顯著正相關(guān)(P<0.05);睪丸間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量與外生殖器基部直徑呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),與外層膠原蛋白厚度呈極顯著正相關(guān)(P<0.01);睪丸生殖細(xì)胞數(shù)量與外生殖器重量和器官指數(shù)呈極顯著正相關(guān)(P<0.01)。

圖6 籠養(yǎng)組(a)和混合平養(yǎng)組(b)鵝睪丸與外生殖器組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性熱圖Fig.6 Heatmap of the correlation analyses in the histomorphological parameters between the geese testis and external genitalia in CRS (a) and MRS (b) groups, respectively

混合平養(yǎng)組的相關(guān)性分析結(jié)果如圖6b所示,鵝睪丸短徑與外生殖器外層膠原蛋白厚度呈顯著正相關(guān)(P<0.05),與內(nèi)層膠原蛋白厚度呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸器官指數(shù)與外生殖器螺旋數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸曲精細(xì)管直徑與外生殖器膠原蛋白內(nèi)層厚度呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸曲精細(xì)管數(shù)量與外生殖器重量和淋巴管腔直徑呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05);睪丸精原細(xì)胞數(shù)量和外生殖器拉直長(zhǎng)度呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。

3 討 論

在當(dāng)前鵝養(yǎng)殖模式轉(zhuǎn)型升級(jí)背景下,提高公鵝的配種能力已成為鵝育種和生產(chǎn)者的主要目標(biāo)之一。公鵝生殖系統(tǒng)主要由睪丸和外生殖器組成,前者決定其生精能力,后者影響其交配行為。公鵝睪丸和外生殖器發(fā)育過(guò)程受到品種、營(yíng)養(yǎng)、光照、溫度、飼養(yǎng)方式等因素影響,但目前有關(guān)飼養(yǎng)方式尤其是旱養(yǎng)方式對(duì)公鵝繁殖性能影響的研究報(bào)道十分匱乏。本研究以四川白鵝為試驗(yàn)對(duì)象,比較分析了籠養(yǎng)和網(wǎng)上地面混合平養(yǎng)對(duì)公鵝睪丸、外生殖器形態(tài)學(xué)及組織學(xué)的影響。在形態(tài)學(xué)層面的研究結(jié)果顯示,籠養(yǎng)組鵝睪丸重量、器官指數(shù)、長(zhǎng)徑和短徑均顯著高于混合平養(yǎng)組,且籠養(yǎng)組鵝外生殖器自然長(zhǎng)度、拉直長(zhǎng)度和基部直徑均顯著高于混合平養(yǎng)組,表明不同旱養(yǎng)方式顯著影響了鵝睪丸和外生殖器的發(fā)育過(guò)程,籠養(yǎng)較混合平養(yǎng)更利于公鵝生殖系統(tǒng)的發(fā)育。一般認(rèn)為,雄性鳥類的射精次數(shù)、射精量和精子濃度均隨睪丸重量的增加而增加[27]。在一些雄性哺乳動(dòng)物上,外生殖器自然長(zhǎng)度更長(zhǎng)、基部直徑更粗的個(gè)體精子密度更大[28]。在鵝上的研究結(jié)果顯示,自然交配條件下外生殖器螺旋數(shù)更多的公鵝授精成功率更高[29]。以上研究結(jié)果提示,相較于混合平養(yǎng),籠養(yǎng)條件下公鵝的精液品質(zhì)及配種能力可能更好。在組織學(xué)層面的研究結(jié)果顯示,與混合平養(yǎng)組相比,籠養(yǎng)方式下鵝睪丸實(shí)質(zhì)間質(zhì)比、生精上皮厚度和曲精細(xì)管面積更大,且精原細(xì)胞、支持細(xì)胞和生殖細(xì)胞數(shù)量更多;籠養(yǎng)方式下鵝外生殖器的角化上皮厚度更薄,表明不同旱養(yǎng)方式顯著影響了鵝睪丸和外生殖器的組織學(xué)結(jié)構(gòu)。睪丸曲精細(xì)管是精子發(fā)生的重要場(chǎng)所[30],睪丸間質(zhì)細(xì)胞和支持細(xì)胞負(fù)責(zé)合成并分泌調(diào)控生殖系統(tǒng)發(fā)育的生殖激素,且睪丸支持細(xì)胞還能為精子的生成過(guò)程提供穩(wěn)定的環(huán)境[31-32]。外生殖器的角化上皮層起著屏障作用,能夠防止內(nèi)部水分的流失[33-34]。由此推測(cè),籠養(yǎng)組鵝睪丸的組織學(xué)結(jié)構(gòu)可能更有利于精子生成,而混合平養(yǎng)組外生殖器的組織學(xué)結(jié)構(gòu)可能更有利于抵抗環(huán)境中的有害物質(zhì)。在網(wǎng)上地面混合平養(yǎng)方式下,公鵝群體內(nèi)會(huì)出現(xiàn)采食不均、打架等現(xiàn)象,且不同個(gè)體在群體中的社會(huì)地位也不同,而單籠飼養(yǎng)方式下則不會(huì)出現(xiàn)這些問題且環(huán)境衛(wèi)生條件更好,這可能是造成籠養(yǎng)組鵝睪丸和外生殖器發(fā)育更好的主要原因。

為進(jìn)一步弄清鵝睪丸與外生殖發(fā)育之間的關(guān)聯(lián)性以及飼養(yǎng)方式對(duì)二者共同發(fā)育的影響,本研究對(duì)兩種飼養(yǎng)方式下鵝睪丸、外生殖器的組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性以及不同飼養(yǎng)方式鵝睪丸與外生殖器組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示,鵝睪丸重量及其器官指數(shù)、睪丸長(zhǎng)徑或短徑與其生精上皮厚度、曲精細(xì)管直徑、生殖細(xì)胞數(shù)量和精原細(xì)胞數(shù)量等顯著相關(guān),表明鵝睪丸的形態(tài)學(xué)與組織學(xué)指標(biāo)之間存在較強(qiáng)的相關(guān)性。同時(shí),鵝外生殖器自然長(zhǎng)度和螺旋數(shù)與其內(nèi)層膠原蛋白厚度存在顯著正相關(guān),而與其他組織學(xué)指標(biāo)相關(guān)性不顯著,表明膠原蛋白厚度可能是影響鵝外生殖器發(fā)育的關(guān)鍵因素之一。研究表明,鵝外生殖器的發(fā)育主要受到由睪丸分泌的雄激素的調(diào)控[35],推測(cè)鵝外生殖器的發(fā)育與睪丸發(fā)育密切相關(guān)。與此推論一致,本研究結(jié)果證實(shí)了兩種飼養(yǎng)方式下鵝睪丸與外生殖器的組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間存在顯著相關(guān)性。其中,籠養(yǎng)組鵝睪丸重量及其器官指數(shù)、睪丸長(zhǎng)徑或短徑、生精上皮厚度、曲精細(xì)管數(shù)量、支持細(xì)胞數(shù)量、間質(zhì)細(xì)胞密度、生殖細(xì)胞數(shù)量與外生殖器重量及其器官指數(shù)、外層膠原蛋白厚度、螺旋數(shù)、淋巴管腔直徑呈顯著正或負(fù)相關(guān);而混合平養(yǎng)組僅有睪丸長(zhǎng)徑、短徑、曲精細(xì)管數(shù)量、曲精細(xì)管直徑、睪丸精原細(xì)胞數(shù)量與外生殖器拉直長(zhǎng)度、螺旋數(shù)、外層膠原蛋白、內(nèi)層膠原蛋白、淋巴管腔直徑存在顯著相關(guān)性。由此可知,兩種飼養(yǎng)方式下鵝睪丸與外生殖器的發(fā)育過(guò)程緊密相關(guān),且籠養(yǎng)組鵝睪丸與外生殖器組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性更強(qiáng)。李明陽(yáng)[36]對(duì)籠養(yǎng)蛋鴨舍的環(huán)境參數(shù)進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),籠舍上層空間中粉塵和細(xì)菌濃度較下層更低、風(fēng)速更高,且NH3、CO2和水蒸氣濃度更低,進(jìn)而更有利于降低家禽的應(yīng)激水平,這直接導(dǎo)致上層蛋鴨的健康狀況更好、生產(chǎn)性能更高。在籠養(yǎng)條件下,鵝處于較上層的空間位置,其生活環(huán)境相較于混合平養(yǎng)條件而言更加穩(wěn)定,且接觸到有害物質(zhì)的機(jī)會(huì)更少,促使籠養(yǎng)方式更有利于鵝生殖器官的發(fā)育[37-38]。Du等[39]研究發(fā)現(xiàn),在地面平養(yǎng)模式下公雞會(huì)因采食不均對(duì)其精液質(zhì)量造成負(fù)面影響?？紤]到鵝是具有社會(huì)等級(jí)劃分的動(dòng)物[14],混合平養(yǎng)方式下存在更多影響公鵝生殖系統(tǒng)發(fā)育的因素,如社會(huì)等級(jí)、應(yīng)激、搶食、環(huán)境衛(wèi)生等,這些因素造成了籠養(yǎng)組鵝睪丸與外生殖器發(fā)育更好且相關(guān)性更強(qiáng)。

4 結(jié) 論

綜上,與網(wǎng)上地面混合平養(yǎng)方式相比,120日齡上籠且持續(xù)150 d的單籠飼養(yǎng)方式顯著促進(jìn)了公鵝生殖系統(tǒng)的發(fā)育,改善了睪丸生精能力,且籠養(yǎng)組睪丸與外生殖器發(fā)育的同步性更好。