◎ 劉貴州，丘東蔚

（廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，廣東 廣州 510000)

肉類是我國(guó)居民飲食中的重要食品，肉類食品中含有人體所需要的營(yíng)養(yǎng)元素。多年來(lái)，我國(guó)肉類食品需求量和產(chǎn)量不斷增加，其中豬、牛、羊成為最主要的肉類食品。肉類食品需求和產(chǎn)量增加，代表我國(guó)居民生活水平提高，同時(shí)伴隨而來(lái)的是肉類食品安全的問(wèn)題。肉類食品中的激素問(wèn)題頻繁出現(xiàn)，造成民眾食肉恐慌情緒，民眾對(duì)肉類食品質(zhì)量管理產(chǎn)生質(zhì)疑，也造成了肉類消費(fèi)市場(chǎng)波動(dòng)等問(wèn)題。因此，在現(xiàn)代肉類食品中增加激素殘留檢測(cè)項(xiàng)目非常必要。

1 肉類食品激素殘留檢測(cè)的重要性

肉類食品激素殘留檢測(cè)的重要性在于食品安全。在肉類食品中之所以存在較多的激素，主要是畜禽類在飼養(yǎng)過(guò)程中添加較多的激素類飼料，促使動(dòng)物快速生長(zhǎng)。但是，養(yǎng)殖者僅看到了激素的“利”，卻忽略了激素的“弊”。研究發(fā)現(xiàn)，激素對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生較大影響。例如，畜禽以及水產(chǎn)品中，使用性激素、生長(zhǎng)激素、甲狀腺素、β-興奮劑等能夠提高動(dòng)物增重速度，飼料轉(zhuǎn)化利用率高，繼而提升了經(jīng)濟(jì)效益。但是，這樣的畜禽以及水產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值低，食用危害極大。

2 肉類食品激素殘留檢測(cè)的技術(shù)分析

2.1 殘留激素分離技術(shù)

①液-液萃取（LLE）技術(shù)。該技術(shù)利用分離萃取原理，三氯甲烷作為萃取劑進(jìn)行分離萃取，具有技術(shù)應(yīng)用簡(jiǎn)單，設(shè)備條件較低的優(yōu)勢(shì)。常規(guī)情況下，激素是穩(wěn)兩性基團(tuán)，在堿性條件下提取后，調(diào)節(jié)溶液為中性或酸性萃取至有機(jī)相，樣品中激素提取率可達(dá)90% 以上。

②固相萃取（SPE）技術(shù)。這是一種較為常見(jiàn)的分離技術(shù)。固相萃?。⊿PE）技術(shù)分離效率相對(duì)比較高。該項(xiàng)技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中，有機(jī)溶劑使用比較少，能夠減少對(duì)環(huán)境的污染。研究發(fā)現(xiàn)采用雙三甲基硅基三氟乙酰氨基作為萃取物進(jìn)行萃取，回收率能夠達(dá)到75%~95%。

2.2 殘留激素檢測(cè)技術(shù)

在實(shí)際檢測(cè)工作過(guò)程中，由于在肉類食品中激素的含量非常低，所以，對(duì)檢測(cè)技術(shù)的精度、檢測(cè)技術(shù)的效率要求非常高。通過(guò)相關(guān)專家的不懈努力，已經(jīng)研究出多種激素殘留檢測(cè)方法，常見(jiàn)檢測(cè)技術(shù)主要有氣相色譜檢測(cè)法、高效液相色譜檢測(cè)法、免疫分析檢測(cè)法、毛細(xì)管電泳檢測(cè)法、氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)法等。

①氣相色譜檢測(cè)法。氣相色譜檢測(cè)法是一種常見(jiàn)的技術(shù)，在檢測(cè)領(lǐng)域中的應(yīng)用較為廣泛，同時(shí)具有檢測(cè)精度高、效率高的優(yōu)勢(shì)。在利用氣相色譜檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，需要先將激素樣品甲基硅烷化，利用火焰檢測(cè)器配合氣相色譜儀實(shí)施激素含量檢測(cè)。在具體檢測(cè)實(shí)施的過(guò)程中，采用2% OV-17作為填充物，有利于檢測(cè)能夠良好開(kāi)展。

該檢測(cè)技術(shù)在應(yīng)用過(guò)程中，主要利用激素的物理特性，因?yàn)榧に乇旧砭哂蟹悬c(diǎn)高、揮發(fā)性差的性質(zhì)，不太適用于氣相色譜檢測(cè)。但是，經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，在實(shí)施檢測(cè)的過(guò)程中，可以利用氣相色譜檢測(cè)方法對(duì)鹽酸克侖特羅進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)樣品均質(zhì)，并利用超聲萃取進(jìn)行凈化，凈化時(shí)要求采用C18小柱、利用HP-1石英毛細(xì)管柱程序升溫，完成以上兩項(xiàng)檢測(cè)。利用該方法進(jìn)行檢測(cè)，平均回收率能夠達(dá)到86%，相關(guān)系數(shù)為0.999 3，線性范圍為0.1~40 mg·L-1。

②高效液相色譜法。高效液相色譜檢測(cè)方法在殘留激素檢測(cè)中具有良好的效果。該檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用比較廣泛，最早應(yīng)用于20世紀(jì)70年代，具有高效分離的優(yōu)勢(shì)，能夠?qū)Ψ悬c(diǎn)高、摩爾質(zhì)量相對(duì)比較大的有機(jī)物進(jìn)行檢測(cè)，效果良好，效率高。

相關(guān)專家在技術(shù)研究中提出，利用SB-C18 柱為固定相，甲醇-水（70∶30）為流動(dòng)相，對(duì)殘留激素進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)效果最佳。通過(guò)對(duì)該技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)，該技術(shù)方法回收效率超過(guò)85%。在檢測(cè)過(guò)程中，如果己烯雌酚濃度在 0~200 μg/kg 之內(nèi)，檢測(cè)值相關(guān)系數(shù)超過(guò)0.999、靈敏度達(dá)到0.15 mg/kg。

在高效液相色譜檢測(cè)方法應(yīng)用過(guò)程中，相關(guān)專家提出以60% 甲醇超聲提取，用Dianon sil C18 柱為固定相，甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氫鈉(33∶67)為流動(dòng)相進(jìn)行檢測(cè)。在實(shí)施檢測(cè)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，該檢測(cè)方法要求檢測(cè)回收率超過(guò)86%、固相萃取檢測(cè)實(shí)施過(guò)程中，可以采用雌雄性激素進(jìn)行殘留檢測(cè)。

高效液相色譜檢測(cè)對(duì)激素檢測(cè)具有良好的適應(yīng)性。因此，相關(guān)專家一直都在針對(duì)不同液相和固相進(jìn)行更換，探討最佳檢測(cè)方法。例如，我國(guó)化學(xué)研究專家已經(jīng)提出甲醇為洗脫液，SUPELCO Discovery C18 5 μm 250 × 4.6 mm 柱為固定相，流動(dòng)相為甲醇 - 水（85∶15）的相關(guān)檢測(cè)方法。測(cè)算該檢測(cè)方法的相關(guān)系數(shù)能夠達(dá)到0.999、檢出限為9.55 μg/kg、回收效率能夠達(dá)到92%~98%，通過(guò)回收效率就能確認(rèn)現(xiàn)代高效液相色譜檢測(cè)方法較傳統(tǒng)方法已經(jīng)有非常大的進(jìn)步，對(duì)于激素檢測(cè)實(shí)施也有重要的影響[1]。

目前，高效液相色譜檢測(cè)方法在檢測(cè)中應(yīng)用，已經(jīng)開(kāi)始提出多激素檢測(cè)技術(shù)。傳統(tǒng)檢測(cè)方法在應(yīng)用的過(guò)程中，單一激素需要置換固相和液相流動(dòng)相，從而導(dǎo)致檢測(cè)效率下降。因此，為解決該問(wèn)題，相關(guān)專家在檢測(cè)技術(shù)研究過(guò)程中針對(duì)該技術(shù)問(wèn)題進(jìn)行深入分析，并提出處理方法。例如，林奕芝等專家在對(duì)高效液相色譜檢測(cè)方法進(jìn)行研究的過(guò)程中提出HPLC 法，該方法主要流程包括甲醇超聲萃取、離心、濃縮等多項(xiàng)技術(shù)，在技術(shù)應(yīng)用過(guò)程中，使用0.45 μm FH 膜進(jìn)行過(guò)濾效果更好，從而提升了檢測(cè)效率，同時(shí)也能夠達(dá)到多種元素檢測(cè)效果。該檢測(cè)方法能夠?qū)Πㄉ扯〈荚趦?nèi)的8種雌性激素進(jìn)行檢測(cè)。最終測(cè)定該檢測(cè)方法在應(yīng)用過(guò)程中，相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.999，回收率在 84.5%~101%之間，更加滿足現(xiàn)代檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用條件，有利于檢測(cè)工作良好實(shí)施，提升檢測(cè)工作質(zhì)量[2]。

2.3 免疫法檢測(cè)方法應(yīng)用

實(shí)踐研究發(fā)現(xiàn)，該檢測(cè)方法具有良好的檢測(cè)效果，操作簡(jiǎn)單，靈敏度能夠達(dá)到10 ~12 g，其主要確定就是較高的假陽(yáng)性。因此，該檢測(cè)方法經(jīng)常在殘留分析初篩時(shí)應(yīng)用。

①酶聯(lián)免疫分析方法。該檢測(cè)方法應(yīng)用相對(duì)廣泛，主要是利用酶聯(lián)競(jìng)爭(zhēng)的原理進(jìn)行檢測(cè)。相關(guān)專家已經(jīng)研究應(yīng)用丁胺醇?xì)埩裘嘎?lián)免疫試劑盒，該試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，確認(rèn)檢測(cè)下限為0.1 ng/g、回收檢測(cè)率能夠達(dá)到75%~105%。另外，相關(guān)專家對(duì)該方法進(jìn)行檢測(cè)創(chuàng)新，設(shè)計(jì)應(yīng)用鹽酸克侖特羅酶聯(lián)免疫試劑盒，該檢測(cè)方法能夠?qū)崿F(xiàn)12.5~0.1 ng/mL范圍檢測(cè)，相關(guān)系數(shù)能夠達(dá)到0.998 0、靈敏度也達(dá)到0.1 ng/g[3]。

②放射免疫分析法（RIA）是一種比較常見(jiàn)的檢測(cè)方法，可以利用生物化學(xué)方法進(jìn)行免疫檢測(cè)。微生物活性物質(zhì)具有一定的優(yōu)越性，可以通過(guò)生物化學(xué)試驗(yàn)分析活躍度，繼而實(shí)現(xiàn)對(duì)激素中相關(guān)位置的檢測(cè)，從而保證檢測(cè)達(dá)到最佳效果。最初該檢測(cè)方法在應(yīng)用的過(guò)程中，不能夠滿足超微量分析精度，因此對(duì)激素殘留檢測(cè)的效果也不是很好。基于此，提出RIA試劑盒測(cè)定方法，該方法能夠?qū)ε８沃械柠}酸克侖特羅進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)試驗(yàn)確定，RIA試劑盒測(cè)定方法在檢測(cè)實(shí)施過(guò)程中，能夠提升檢測(cè)工作效率，在進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，當(dāng)鹽酸克侖特羅的量分別為1 ng/g和2.5 ng/g時(shí)，數(shù)據(jù)回收率分別達(dá)到95%± 15% 和 89% ± 9 %，通過(guò)數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，該檢測(cè)工作效率靈敏度比較高。但是，半衰期相對(duì)比較短、輻射比較少，從而導(dǎo)致其應(yīng)用不夠廣泛[4]。

2.4 肉類食品激素殘留檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)研究

通過(guò)本文研究發(fā)現(xiàn)，肉類食品激素殘留檢測(cè)技術(shù)種類非常多，適合應(yīng)用于不同肉類、不同激素檢測(cè)。我國(guó)相關(guān)部門還在推動(dòng)探究新技術(shù)，從而解決技術(shù)問(wèn)題，提升檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用效率。例如，當(dāng)前我國(guó)的肉類食品檢測(cè)包括多種，有牛肉中β-雌二醇?xì)埩袅康臏y(cè)定、等標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)，更有利于提升檢測(cè)精度[5]。

3 結(jié)語(yǔ)

本文針對(duì)肉類食品激素殘留檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行分析，提出多種檢測(cè)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)。為確保我國(guó)肉類食品使用安全，需要繼續(xù)研發(fā)新技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，提升檢測(cè)工作效率。