沈靜琳，毛坤軍，葉穎俊

（1. 江西醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，江西 上饒 334000； 2. 浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053）

千金藤素于20 世紀(jì)50 年代初在日本上市，目前，有普通片劑和注射劑2 種劑型（我國市售僅有常規(guī)片劑），主要用于白血病、斑禿、毒蛇咬傷等多種急、慢性疾病的治療。在我國，千金藤素片收載于《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》，主要用于腫瘤患者放射治療（簡(jiǎn)稱放療）、化學(xué)藥物治療（簡(jiǎn)稱化療）引起的白細(xì)胞減少癥［1］。近年來，隨著其基礎(chǔ)研究的不斷深入，千金藤素抗腫瘤、抗炎、抗病毒的生物活性不斷被證實(shí)，作用機(jī)制也愈加清晰，臨床應(yīng)用前景廣闊。與此同時(shí)，千金藤素藥用新劑型的研究也大量開展。本研究中檢索了中國知網(wǎng)、PubMed 數(shù)據(jù)庫2002 年1 月至2022 年12 月發(fā)表的千金藤素藥理作用和制劑相關(guān)研究，并進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為千金藤素的進(jìn)一步深入研究提供參考。

1 藥理作用

1.1 抗腫瘤作用

鄧應(yīng)彬［2］研究發(fā)現(xiàn)，千金藤素可通過下調(diào)miR -29a 的表達(dá)發(fā)揮抗膽管癌作用。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)還證實(shí)，千金藤素可通過抑制miR-150 和miR-182 的表達(dá)促進(jìn)人肺癌細(xì)胞A549 的凋亡［3］，也可通過上調(diào)miR - 34a 和miR-34b的表達(dá)而發(fā)揮抑制人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2生長(zhǎng)的作用［4］。周用等［5］研究表明，千金藤素通過升高miR-34a 的表達(dá)水平而抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480 增殖，并誘導(dǎo)其凋亡。在婦科腫瘤方面，千金藤素可通過上調(diào)miR - 215 的表達(dá)而抑制人宮頸癌細(xì)胞RL - 952 的生長(zhǎng)，并促進(jìn)其凋亡［6］。

自噬途徑參與免疫細(xì)胞亞群向腫瘤的轉(zhuǎn)運(yùn)，同時(shí)，腫瘤自噬可通過調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)抑制腫瘤生長(zhǎng)。千金藤素能通過激活P53 介導(dǎo)的自噬逆轉(zhuǎn)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的?？颂婺崮退幮裕?］。千金藤素還可通過抑制PI3K/AKT/mTOR 信號(hào)通路誘導(dǎo)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3 自噬，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞活力［8］。LI 等［9］的實(shí)驗(yàn)證明，千金藤素通過激活P38 信號(hào)通路調(diào)控自噬，發(fā)揮抑制A549 細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的作用。WANG 等［10］的肝細(xì)胞癌（HCC）原代細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)和異種移植模型小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，千金藤素與G蛋白耦聯(lián)受體30（GPR30）結(jié)合可引發(fā)線粒體自噬，且與自噬抑制劑聯(lián)用對(duì)HCC 移植模型小鼠有顯著的抗癌作用。

此外，千金藤素對(duì)多種癌癥有廣泛的治療作用，且作用機(jī)制復(fù)雜、多效。ZHOU 等［11］研究表明，千金藤素通過激活TLR4和MYD88天然免疫信號(hào)，改善順鉑治療食管鱗狀細(xì)胞癌的效果及化療引起的腸道菌群失衡。LYU 等［12］研究表明，千金藤素可通過阻斷膽固醇在內(nèi)皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)抑制血管生成，進(jìn)而抑制體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)，并增強(qiáng)了順鉑在模型小鼠肺癌和乳腺癌移植瘤中的抗癌活性。千金藤素還可通過抑制翼狀螺旋/叉頭轉(zhuǎn)錄因子（FOXL2）和細(xì)胞增殖抗原Ki67的表達(dá)，誘導(dǎo)口腔鱗癌細(xì)胞TSCCA的凋亡［13］。沈鋒等［14］發(fā)現(xiàn)，千金藤素能抑制天門冬氨酰β-羥化酶（ASPH），而ASPH的過度表達(dá)與肝癌、肝內(nèi)膽管癌、惡性膠質(zhì)瘤、小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、肝纖維化、肝硬化等系列疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

1.2 抗炎作用

炎性反應(yīng)是很多疾病進(jìn)展中的關(guān)鍵傳導(dǎo)性要素。千金藤素能影響多種炎性因子表達(dá)，從而發(fā)揮抗炎作用。千金藤素可能通過抑制NLRP3、白細(xì)胞介素1β（IL-1β），下調(diào)p38 MAPK、JNK 和細(xì)胞核核因子（NF）- κB蛋白的表達(dá)，發(fā)揮其抗炎作用，最終實(shí)現(xiàn)其對(duì)局灶性腦缺血小鼠的腦保護(hù)作用［15］。有研究表明，千金藤素通過抑制12/15-LOX 信號(hào)而減輕NLRP3 炎癥小體誘導(dǎo)的炎癥和氧化應(yīng)激［16］。PAUDEL 等［17］研究表明，千金藤素能抑制巨噬細(xì)胞（RAW264.7）中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）、環(huán)氧合酶2（COX-2）、前列腺素E2等炎性因子的表達(dá)，通過減輕炎性反應(yīng)和血管平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。WU 等［18］研究顯示，千金藤素能通過減少β-淀粉樣蛋白沉積和NLRP3 炎癥小體改善模型大鼠的老年癡呆程度。

在骨科領(lǐng)域，千金藤素能抑制NF-κB 配體受體激活劑誘導(dǎo)的活化NF-κB 和活化T 細(xì)胞的核因子，從而抑制破骨細(xì)胞形成［19］。ZHOU 等［20］的研究結(jié)果表明，千金藤素可通過抑制破骨細(xì)胞生成阻止雌激素缺乏所致的骨丟失。ZHAO 等［21］通過分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，千金藤素通過調(diào)節(jié)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型大鼠Wnt/ PI3K/TLR-3通路，從而減弱軟骨細(xì)胞的自噬和凋亡程度。

1.3 抗病毒作用

千金藤素在體外能有效抑制拉米夫定耐藥的乙型肝炎病毒的產(chǎn)生和復(fù)制［22］。自噬在病毒感染過程中也有重要作用。細(xì)胞一旦檢測(cè)到病毒入侵，相應(yīng)受體可上調(diào)自噬，并能進(jìn)一步加強(qiáng)受體依賴的天然免疫信號(hào)。千金藤素能通過干擾素刺激因子（STING）介導(dǎo)的信號(hào)通路，促進(jìn)干擾素非依賴性自噬，抑制單純皰疹病毒1［23］。楊潔等［24］研究發(fā)現(xiàn)，千金藤素能特異性地破壞流感病毒核糖核蛋白復(fù)合物vRNP 活性，影響流感病毒的復(fù)制，進(jìn)而發(fā)揮抗病毒（尤其是甲型流感病毒）活性。

在抗新型冠狀病毒（SARS-CoV-2，簡(jiǎn)稱新冠病毒）方面，F(xiàn)AN 團(tuán)隊(duì)［25］分離得到了穿山甲冠狀病毒xCoV，發(fā)現(xiàn)該病毒與SARS-CoV-2 的全基因組DNA 序列同源性達(dá)86.0%，S 蛋白同源性達(dá)92.2%，二者進(jìn)入細(xì)胞的受體均為ACE2。千金藤素在阻止此病毒的進(jìn)入和復(fù)制方面表現(xiàn)出了強(qiáng)大的活性。LI 等［26］研究證實(shí)，在SARS - CoV - 2 相關(guān)病毒GX - P2V 的細(xì)胞培養(yǎng)模型中，千金藤素能有效逆轉(zhuǎn)感染細(xì)胞中包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激/未折疊蛋白反應(yīng)和熱休克轉(zhuǎn)錄因子1（HSF1）介導(dǎo)的熱休克反應(yīng)在內(nèi)的大多數(shù)失調(diào)的基因和通路，為千金藤素有效治療SARS-CoV-2 感染提供了證據(jù)。OHASHI團(tuán)隊(duì)［27］使用新冠病毒感染細(xì)胞VeroE6/ TMPRSS2，確定千金藤素靶向病毒入胞階段，并通過結(jié)合病毒S蛋白干擾其與ACE2 的結(jié)合，且發(fā)現(xiàn)其與奈非那韋在抑制新冠病毒感染方面有協(xié)同作用。有研究發(fā)現(xiàn)，千金藤素在3 種不同細(xì)胞系（293T - ACE2，Calu - 3，A549 - ACE2細(xì)胞）中對(duì)新冠病毒假病毒S - G614 均有顯著的抑制作用［28］。千金藤素在體外可有效抑制新冠病毒突變體及不同冠狀病毒的感染［29］。清華大學(xué)和北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院研究團(tuán)隊(duì)的研究表明，千金藤素對(duì)新冠病毒突變株感染的細(xì)胞和新冠病毒感染的人源化ACE2（hACE2）模型小鼠均表現(xiàn)出很強(qiáng)的病毒抑制作用［30］。另外，肺纖維化被公認(rèn)為新冠病毒感染的后遺癥。LI 等［31］的研究結(jié)果顯示，千金藤素可明顯減輕博來霉素誘導(dǎo)的膠原堆積和炎癥，從而防止肺纖維化。

2 藥物制劑

2.1 已上市劑型

普通片劑：目前，我國市售劑型僅有普通片劑，其標(biāo)準(zhǔn)收載于《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》。在該標(biāo)準(zhǔn)中，千金藤素加上填充劑淀粉、糊精，以硬脂酸鎂為助流劑，濕法制粒壓片制得千金藤素片劑，但其藥物溶出慢，生物利用度低。

注射劑：高春生等［32］的一項(xiàng)鹽酸千金藤素注射液發(fā)明專利顯示，其特征在于制備工藝處方中不含防腐劑苯甲醇，對(duì)機(jī)體刺激性小；藥液的pH 在3.7～3.9 范圍內(nèi)，長(zhǎng)期貯存穩(wěn)定性好；能經(jīng)受過度殺滅法（121 ℃，15 min）滅菌，確保了藥品的質(zhì)量。

2.2 新劑型

2.2.1 其他口服制劑

彭紅等［33］運(yùn)用自制的滴丸制備儀，以聚乙二醇（PEG）4000/PEG 6000 為基質(zhì)，二甲基硅油為冷凝液，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)化處方和工藝參數(shù)，制備了千金藤素滴丸。千金藤素滴丸相較于傳統(tǒng)的千金藤素片，提高了溶出度和生物利用度。千金藤素軟膠囊的溶出度和生物利用度也有所提高。以PEG 400和植物油混合物熱溶千金藤素作為藥液，以甘油、明膠、二氧化鈦、水為囊材，在制丸機(jī)中壓丸成型，適于工業(yè)化生產(chǎn)［34］。但這2種劑型均存在載藥量低的缺點(diǎn)。

口腔崩解片無需水或僅需少量水，且無需咀嚼，片劑置舌面，遇唾液迅速崩碎，反射性隨吞咽動(dòng)作進(jìn)入體內(nèi)，減少了癌癥患者放療、化療期間服藥嘔吐的發(fā)生，減輕了其服藥痛苦。蔣海松等［35］的千金藤素口崩片專利以微晶纖維素、甘露醇、木糖醇、山梨醇等為填充劑，以交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等為崩解劑，通過混合直接壓片法或空白丸芯噴霧制含藥微丸后再壓片的方法制得。

為解決千金藤素片服用次數(shù)多、血藥濃度難以維持的問題，王兵等［36］申請(qǐng)了千金藤素緩釋制劑專利，通過羥丙基甲基纖維素或乙基纖維素為骨架材料達(dá)到緩釋效果，也可用醋酸纖維素、丙烯酸樹脂Ⅱ號(hào)配制包衣液、包衣片芯達(dá)到緩釋效果，且每日僅服用1次。體外釋放度實(shí)驗(yàn)顯示，該制劑能在12 h 內(nèi)逐步釋放藥物，達(dá)到治療所需的血藥濃度。

2.2.2 吸入制劑

肺臟中肺泡的表面積巨大，分布有豐富的毛細(xì)血管。肺部吸入藥物制劑不僅可使藥物在肺部集中分布，迅速發(fā)揮藥效，還能避免首過效應(yīng)，提高生物利用度，被世界衛(wèi)生組織推薦為呼吸道疾病的首選制劑，尤其適用于急性肺部疾病的快速救治。顧若蘭等［37］的研究顯示，千金藤素有抗穿山甲冠狀病毒xCoV（與新型冠狀病毒2019 - nCoV 高度同源）的作用。為提高藥物在病灶的濃度，該團(tuán)隊(duì)研發(fā)了千金藤素吸入制劑，包括干粉吸入藥劑和霧化吸入制劑。其中，干粉吸入藥劑是先制得千金藤素微粉（粒徑0.1～25 μm），再與載體形成膠囊、泡囊或以多劑量貯庫形式置干粉吸入裝置中，在患者自主呼吸時(shí)將霧化的藥物吸至肺部。制備千金藤素微粉的方法：將千金藤素-聚山梨酯微乳滴入2 ℃冷水中得千金藤素微球，再噴霧干燥，得微粉；將千金藤素、泊洛沙姆（F127）、檸檬酸溶于乙醇旋蒸后加入碳酸氫鈉和水得納米混懸液，再噴霧干燥得微粉；使用氣流粉碎機(jī)或轉(zhuǎn)子定子膠體磨將千金藤素粉碎成微粉（粒徑0.1～25μm）。霧化吸入制劑是利用千金藤素的堿性與醋酸或硫酸成鹽，制備溶液，裝入吸入裝置，即得。藥物代謝動(dòng)力學(xué)（簡(jiǎn)稱藥動(dòng)學(xué)）實(shí)驗(yàn)顯示，模型小鼠肺部吸入千金藤素后，各時(shí)間點(diǎn)血漿中均可檢測(cè)到千金藤素，且第一時(shí)間點(diǎn)（即給藥后15 min）血藥濃度最高，說明肺部局部給藥可發(fā)揮全身治療作用。模型大鼠肺部吸入千金藤素（1 mg/ kg）后，各時(shí)間點(diǎn)肺組織中均可檢測(cè)到，且吸入給藥后肺局部藥物濃度迅速達(dá)峰，5 min時(shí)藥物濃度為（17.02±2.32）μg/g，且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。該結(jié)果表明肺吸入給藥后藥物可直接作用于靶器官，肺局部藥物濃度高且能維持較長(zhǎng)時(shí)間，適用于肺部疾病的治療。

2.2.3 納米混懸液

納米制劑是將藥物顆粒減小至納米級(jí)水平，并采用少量穩(wěn)定劑保持納米級(jí)藥物顆粒處于穩(wěn)定狀態(tài)的一種新型藥物制劑形式。楊建宏等［38］為了提高藥物的生物利用度，結(jié)合臨床用藥劑量的需求，研制了千金藤素納米混懸液。該混懸液是由千金藤素和穩(wěn)定劑水溶液經(jīng)納米化處理所得。其中，穩(wěn)定劑組成：羧甲基纖維素鈉、聚維酮VA64、羥丙基纖維素和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯等空間立體穩(wěn)定劑；十二烷基硫酸鈉、泊洛沙姆188、大豆卵磷脂、海藻酸鈉和殼聚糖等電荷穩(wěn)定劑；交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮、低取代羥丙基纖維素等超級(jí)崩解劑。制備工藝：將穩(wěn)定劑溶于純化水?dāng)噭虻梅€(wěn)定劑溶液，將千金藤素分散于穩(wěn)定劑溶液得粗混懸液，配得的粗混懸液置納米研磨機(jī)的研磨室中（所用研磨珠的粒徑為0.6～0.8 mm）以1 000～5 000 r/min 研磨，即可得到千金藤素納米懸浮液。制得的納米混懸液中，千金藤素納米粒子的粒徑為30～600 nm，在室溫下儲(chǔ)存1個(gè)月后的粒徑增長(zhǎng)量不超過初始粒徑的30%，千金藤素以結(jié)晶態(tài)、無定形態(tài)或二者混合狀態(tài)存在?？臻g立體穩(wěn)定劑和電荷穩(wěn)定劑均以分子狀態(tài)吸附在千金藤素納米顆粒表面發(fā)揮穩(wěn)定作用，超級(jí)崩解劑是以納米顆粒形式通過物理屏障作用而發(fā)揮穩(wěn)定作用。該混懸液可作為制劑成品或制劑中間體制備固體或液體狀態(tài)的千金藤素制劑，具有良好的應(yīng)用前景。

2.2.4 自乳化給藥系統(tǒng)

基于提高生物利用度的考慮，YANG 等［39］研制了一種千金藤素自乳化給藥系統(tǒng)，在溶解度測(cè)定和擬三元相圖試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇棕櫚酸異丙酯為油相、氫化蓖麻油聚烴氧酯40 為乳化劑、PEG 200 為助乳化劑，采用響應(yīng)面法的中心組合設(shè)計(jì)來優(yōu)化處方。制得最大載藥量為36.21 mg/ mL、最小粒徑為36.70 nm 的千金藤素自乳化給藥系統(tǒng)。該給藥系統(tǒng)在磷酸鹽緩沖溶液中30 min 后的溶出度接近100%。模型大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)也表明，與活性藥物成分相比，千金藤素的相對(duì)生物利用度顯著提高。

2.2.5 仿生納米顆粒

強(qiáng)烈的炎性反應(yīng)在急性肺損傷的病理機(jī)制中起重要作用，基于巨噬細(xì)胞向炎癥部位聚集的特點(diǎn)，LU等［40］利用天然巨噬細(xì)胞膜包覆納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體研發(fā)了千金藤素仿生抗炎納米系統(tǒng)。該給藥系統(tǒng)憑借脂質(zhì)載體適宜的理化性質(zhì)和巨噬細(xì)胞膜獨(dú)特的生物學(xué)功能，穩(wěn)定并可持續(xù)釋放藥物，改善生物相容性。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞膜可使藥物靶向炎癥部位并蓄積，達(dá)到治療效果。

3 展望

隨著千金藤素藥理作用研究的不斷擴(kuò)展，其逐步被證實(shí)具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒等藥理作用，特別是具有抗SARS-CoV-2 的良好前景［41］。但因?yàn)槟[瘤、病毒的病理機(jī)制極其復(fù)雜，千金藤素抗腫瘤、抗炎、抗病毒的機(jī)理尚未完全闡明，藥理作用方面的基礎(chǔ)研究和臨床研究需進(jìn)一步深化。除普通制劑外，千金藤素開發(fā)出了多種新劑型（如吸入制劑、自乳化給藥系統(tǒng)、仿生納米顆粒等），改善了溶解性，并能根據(jù)病情需要合理選擇劑型，使患者達(dá)到并維持有效血藥濃度的時(shí)間合適，增加了用藥的靈活性和患者的依從性。考慮到千金藤素抗腫瘤、抗病毒的生物活性，將來還可更多地開發(fā)靶向制劑及相關(guān)新劑型。