黎 昆,楊 雪,李 龍,王明霞,劉紅萍,支 嵐,高 燦,王 潔

遂寧市中心醫(yī)院檢驗科,四川遂寧 629000

社區(qū)獲得性呼吸道感染(CARTI)是導(dǎo)致重大疾病和死亡的最常見感染之一,引起CARTI最常見的病原體是流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌,有研究表明,全國范圍內(nèi)肺炎鏈球菌的青霉素耐藥性、流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶比例呈逐年上升趨勢,影響臨床初始抗菌藥物的經(jīng)驗治療[1-3]。本研究回顧性分析了2018-2020年本院呼吸道分離常見的3種病原菌,即流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌體外藥敏試驗結(jié)果,以期為臨床經(jīng)驗用藥提供參考依據(jù),現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2018年1月1日至2020年12月31日本院臨床送檢呼吸道標本分離獲得的流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌(剔除重復(fù)菌株)773株。其中肺炎鏈球菌355株,流感嗜血桿菌357株,卡他莫拉菌61株。本研究經(jīng)本院倫理委員會審核批準。

1.2儀器與試劑 流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌的藥敏培養(yǎng)基均使用HTM瓊脂,肺炎鏈球菌的藥敏培養(yǎng)基使用含有5%脫纖維羊血的MH瓊脂[4],上述培養(yǎng)基均購自廣州迪景微生物科技有限公司。K-B法藥敏試驗紙片和青霉素E試驗(E-test)條均購自溫州市康泰生物科技有限公司。嗜血桿菌和布蘭漢球菌藥敏試劑盒(比色法ATB HAEMO)購自法國生物梅里埃公司。

1.3方法 參照2020年美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)[4]推薦的藥敏試驗方法進行檢測,卡他莫拉菌藥敏折點判讀參考CLSI-M45,質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247。采用頭孢硝噻吩紙片(購自重慶龐通醫(yī)療器械有限公司)檢測流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β內(nèi)酰胺酶。采用E-test條測定不敏感肺炎鏈球菌最低抑菌濃度[4]。年齡組分類標準[5]:未成年人為<18歲,成年人為≥18歲。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 采用WHONET5.6軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌來源分布情況 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌門診分離株分別占同種總分離菌株的84.9%、67.6%、85.2%;住院分離株分別占同種總分離菌株的15.1%、32.4%、14.8%。見表1。

2.2流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌人口學(xué)分布情況 女性流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌檢出率分別為58.5%、57.4%,男性流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌檢出率分別為41.5%、42.6%,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);女性肺炎鏈球菌檢出率(64.8%)高于男性的35.2%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。未成年人流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌檢出率均高于成年人,卡他莫拉菌檢出率低于成年人,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌的人口學(xué)分布情況[n(%)]

2.3流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌季節(jié)分布情況 流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌春季分布比例分別為25.5%和31.1%、冬季為63.6%和37.7%,均高于夏季的5.6%和4.9%、秋季的5.3%和26.2%,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。肺炎鏈球菌秋季分布比例為27.0%、冬季分布比例為37.7%,均高于春季的23.1%和夏季的12.1%,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌季節(jié)分布情況[n(%)]

2.4未成年人和成年人對3種細菌的耐藥率及敏感率比較 355株肺炎鏈球菌中未成年人分離出208株,成年人分離出147株;青霉素耐藥肺炎鏈球菌(PRSP)檢測出16株,青霉素中介肺炎鏈球菌(PISP)檢測出13株,青霉素敏感肺炎鏈球菌(PSSP)檢測出326株。肺炎鏈球菌對紅霉素、克林霉素、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑均具有較高的耐藥性,未分離出對萬古霉素和利奈唑胺具有耐藥性的肺炎鏈球菌。見表4。357株流感嗜血桿菌中未成年人分離出319株,成年人分離出38株。流感嗜血桿菌對氯霉素、四環(huán)素耐藥率均低于10%,未分離出對頭孢噻肟、美羅培南、左氧氟沙星具有耐藥性的流感嗜血桿菌。見表5。61株卡他莫拉菌中未成年人分離出23株,成年人分離出38株,且卡他莫拉菌對所測抗菌藥物均保持較高敏感性。見表6。

表4 分離自未成年人和成年人肺炎鏈球菌對抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

表5 分離自未成年人和成年人流感嗜血桿菌對抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

表6 分離自未成年人和成年人卡他莫拉菌對抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

2.5流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β內(nèi)酰胺酶檢出情況 357株流感嗜血桿菌中未成年人、成年人分別檢測出β內(nèi)酰胺酶陽性株171、18株,陽性率分別為53.6%(171/319)、47.4%(18/38)。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分別檢測出β內(nèi)酰胺酶陽性株17株、30株,陽性率分別為73.9%(17/23)、78.9%(30/38)。

3 討 論

本研究結(jié)果顯示,2018年1月1日至2020年12月31日本院分離的流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌大部分來自門診患者,提示本院呼吸道感染患者以社區(qū)感染為主。

流感嗜血桿菌是一種革蘭陰性細菌,可導(dǎo)致各種氣道黏膜感染和侵襲性疾病,如細菌性腦膜炎[6]。有研究表明,流感嗜血桿菌可通過黏附侵入呼吸道上皮細胞,從而長期定植于呼吸道內(nèi)[7]。本研究結(jié)果顯示,未成年人流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌檢出率高于成年人,卡他莫拉菌檢出率低于成年人,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與劉策等[8]、呂志勇等[9]研究結(jié)果一致。幼兒鼻腔內(nèi)無鼻毛,鼻黏膜弱而富于血管,易受感染,且氣管和支氣管的管腔狹窄,黏液分泌少,纖毛運動差,肺彈力組織發(fā)育差,易引起致病菌的蔓延[10]。老年人免疫系統(tǒng)功能下降,且患有基礎(chǔ)性疾病,因此這兩類易感人群需要重點關(guān)注。本研究中,流感嗜血桿菌季節(jié)分布比例分別為春季25.5%、冬季63.6%,均高于夏季的5.6%、秋季的5.3%,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與蔣小麗等[11]報道的四川簡陽地區(qū)流感嗜血桿菌分布以春季、冬季檢出為主相符。β內(nèi)酰胺類抗生素目前常用于流感嗜血桿菌的臨床治療,在多個國家,這些經(jīng)驗性藥物已被發(fā)現(xiàn)具有耐藥性[12]。本研究結(jié)果顯示,未成年人流感嗜血桿菌對氨芐西林的耐藥率為53.6%,與中國細菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)(CHINET)報告的59.7%相似,而成年人的50.0%低于CHINET報告的70.2%[13]。流感嗜血桿菌氨芐西林耐藥率在一些地區(qū)為5%～67.9%[14]。其對氨芐西林的耐藥性主要通過兩種機制產(chǎn)生。一種涉及在流感嗜血桿菌中產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶水解β內(nèi)酰胺抗生素獲得β內(nèi)酰胺酶基因的菌株,另一種機制涉及β內(nèi)酰胺酶陰性的氨芐西林耐藥菌株,是ftsI基因突變引起青霉素結(jié)合蛋白3(PBP3)改變,導(dǎo)致β內(nèi)酰胺酶抗生素對PBP3的親和力降低,獲得β內(nèi)酰胺酶基因的菌株[15]。本研究中,流感嗜血桿菌對氨芐西林的耐藥率與其β內(nèi)酰胺酶陽性率相近,提示本地區(qū)流感嗜血桿菌對氨芐西林的耐藥作用機制為β內(nèi)酰胺酶水解抗菌藥物作用。同時成年人和未成年人流感嗜血桿菌對甲氧芐啶-磺胺甲噁唑的耐藥率分別為57.5%和74.2%,與其他研究結(jié)果的64.9%相似[16],提示磺胺類藥物不適合作為治療感染流感嗜血桿菌的經(jīng)驗用藥。成年人株對頭孢呋辛耐藥率為36.8%,而未成年人株耐藥率為36.1%,因此在選擇第2代頭孢菌素時要根據(jù)藥敏試驗結(jié)果,有針對性地進行治療。未檢出對頭孢噻肟、美羅培南、左氧氟沙星的耐藥菌株,提示本地區(qū)經(jīng)驗用藥仍可選用第3代頭孢菌素。

本研究結(jié)果顯示,355株肺炎鏈球菌中未成年人檢出208株,高于成年人的147株,這與既往流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)一致[17]。β內(nèi)酰胺類抗生素是治療肺炎鏈球菌疾病的一線選擇,但來自不同地區(qū)和國家的肺炎鏈球菌的β內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥率存在較大差異[18]。本研究結(jié)果顯示,PRSP占4.5%,肺炎鏈球菌對紅霉素、克林霉素、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑均具有較高的耐藥性,未分離出對萬古霉素和利奈唑胺具有耐藥性的肺炎鏈球菌。提示本地區(qū)治療肺炎鏈球菌引起的感染時可以首選青霉素,不宜選用紅霉素與甲氧芐啶-磺胺甲噁唑。同時女性檢出率(64.8%)高于成年男性的35.2%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示本地區(qū)女性較男性易感肺炎鏈球菌。但對男、女性肺炎鏈球菌疾病發(fā)病率差異尚有待于進一步研究。

本研究中,61株卡他莫拉菌對阿莫西林/克拉維酸敏感率為100%,提示本地區(qū)臨床治療卡他莫拉菌感染可首選阿莫西林/克拉維酸。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分別檢測出β內(nèi)酰胺酶陽性株17、30株,陽性率分別為73.9%、78.9%。低于龔萍等[19]報道的86.8%。提示卡他莫拉菌產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶存在地區(qū)差異。

綜上所述,目前尚不能將氨芐西林作為本地區(qū)流感嗜血桿菌感染的首選藥物,青霉素仍對肺炎鏈球菌非腦脊液分離株保持較高的敏感性,治療卡他莫拉菌可將阿莫西林/克拉維酸作為首選藥物。在經(jīng)驗性抗感染治療時需要考慮本地區(qū)病原菌的特殊性,要繼續(xù)做好細菌耐藥性的監(jiān)測工作,有助于科學(xué)管理和合理應(yīng)用臨床抗菌藥物,減少耐藥菌的產(chǎn)生。