近年來(lái)，隨著中國(guó)養(yǎng)鴨產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展，規(guī)?；唸?chǎng)也逐漸增多，由于部分鴨養(yǎng)殖場(chǎng)管理不當(dāng)、養(yǎng)殖技術(shù)水平有限、疫苗使用不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致鴨容易感染鴨病毒性肝炎；該病由鴨肝炎病毒引起，屬于高度致病性的傳染性疾病，發(fā)病沒(méi)有季節(jié)特征，隨著鴨的年齡增加死亡率逐漸降低，主要導(dǎo)致20日齡內(nèi)的雛鴨死亡，給鴨業(yè)養(yǎng)殖造成重大經(jīng)濟(jì)損失，目前，對(duì)于該病的防治主要采用疫苗免疫；對(duì)于疫苗的免疫劑量和次數(shù)對(duì)該病的母源抗體的影響研究較少，本研究通過(guò)注射不同劑量和次數(shù)鴨病毒性肝炎弱毒苗，探討對(duì)患有鴨病毒性肝炎母源抗體的影響，旨在為鴨病毒性肝炎防治提供參考。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)鴨選自某規(guī)模翻鴨養(yǎng)殖場(chǎng)，2月齡150只鴨作為試驗(yàn)組，1日齡無(wú)母源抗體雛翻鴨120只作為對(duì)照組。

1.2 試驗(yàn)藥物及試劑

CH60 株鴨病毒性肝炎弱毒疫苗購(gòu)于某生物疫苗有限公司；鴨病毒性肝炎抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)于上海雅吉生物科技有限公司；AV2111 株鴨肝炎病毒購(gòu)于中國(guó)獸藥監(jiān)察所。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 疫苗免疫

將購(gòu)買(mǎi)的2月齡150 只翻鴨進(jìn)行隨機(jī)分組，分為免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組，每組各50只；各組按不同的免疫程序免疫鴨病毒性肝炎弱毒疫苗；免疫1 組在留種蛋的21 d 前腿部注射0.5 mL 疫苗免疫；免疫2 組在留種蛋的35 d和21 d 腿部注射0.5 mL 疫苗免疫；免疫3 組在留種蛋的35 d 和21 d 前免疫0.5 mL 和1 mL 疫苗。免疫完后收獲的第1 周和第4 周種產(chǎn)的種蛋進(jìn)行孵化。

1.3.2 試驗(yàn)分組

將上述免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組免疫后第1 周種蛋孵出的雛鴨隨機(jī)挑選150 只，分為A 組，然后在隨機(jī)分為A1 組、A2 組和A3 組，每組50 只；然后購(gòu)買(mǎi)50 只沒(méi)有母源抗體的雛翻鴨為對(duì)照組。對(duì)照組和試驗(yàn)組的雛鴨分別在1、3、6、9 d 時(shí)心臟采血，采集的血液進(jìn)行血清分離后按ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作；同時(shí)于1、3、6、9 d 在每組隨機(jī)挑選25 只，皮下注射鴨肝炎病毒進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，注射劑量0.1 mL，剩余的25 只雛鴨和對(duì)照組則皮下注射同劑量的生理鹽水。隔離飼養(yǎng)并做好觀察記錄雛鴨發(fā)病和死亡只數(shù)。

免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組免疫后收獲的第4 周種蛋孵出的雛鴨隨機(jī)挑選150 只，分為B 組，然后在B1 組、B2 組和B3 組，每組50 只；試驗(yàn)方法同上。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用試驗(yàn)記錄的攻毒后死亡只數(shù)計(jì)算保護(hù)率，保護(hù)率=（試驗(yàn)只數(shù)-死亡只數(shù)）/試驗(yàn)只數(shù)*100%。

2 結(jié)果

2.1 A 組的抗體水平檢測(cè)和攻毒保護(hù)結(jié)果

由表1 可以看出對(duì)照組沒(méi)有母源抗體的保護(hù)，所取的1 周種蛋孵出的雛鴨肝炎病毒的抗體效價(jià)為0，攻毒后的保護(hù)率幾乎為0；A3 組的抗體效價(jià)和保護(hù)率水平均高于A1、A2 組，說(shuō)明A3 組獲得的母源抗體較高，與起始免疫3 組的疫苗免疫劑量增加有關(guān)。

表1 A 組的抗體水平檢測(cè)和攻毒保護(hù)結(jié)果

2.2 B 組的抗體水平檢測(cè)和攻毒保護(hù)結(jié)果

由表2 可以看出所取的4 周種蛋孵出的雛鴨肝炎病毒的抗體效價(jià)B1 組、B2 組和B3 組的抗體效價(jià)低于1 周種蛋孵出的雛鴨，符合母源抗體的消失規(guī)律；B3 組的母源抗體效價(jià)高于B1和B2 組，攻毒后的保護(hù)率也高于B1 和B2 組，與起始免疫3 組的疫苗免疫劑量增加有關(guān)。

表2 B 組的抗體水平檢測(cè)和攻毒保護(hù)結(jié)果

3 結(jié)論

鴨肝炎病毒主要感染20日齡尤其是10日齡內(nèi)的雛鴨，因此，對(duì)于做好20日齡以內(nèi)雛鴨的鴨肝炎病毒的防疫工作非常重要。目前，用于該病的疫苗為滅活苗和弱毒苗。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)孵出的雛鴨進(jìn)行免疫，雛鴨在產(chǎn)生保護(hù)抗體的過(guò)程中還易感染鴨肝炎病毒；對(duì)于雛鴨來(lái)說(shuō)，越多的母源抗體雛鴨獲得保護(hù)的可能性越高。本試驗(yàn)說(shuō)明種鴨在留種前采用合理免疫方法，可以提高雛鴨的母源抗體含量。