●趙麗君

（河北省張家口市張北縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 河北 張家口 076450）

目前，研發(fā)替抗性藥物或者添加劑（中藥、益生菌及抗菌肽等）成為熱點(diǎn)問(wèn)題，中藥、益生菌等制劑被廣泛應(yīng)用[1]。相關(guān)研究表明，中藥及中藥提取物具有提高免疫水平、抗氧化能力、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、改善肉品質(zhì)及調(diào)整腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)等優(yōu)勢(shì)，被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物健康養(yǎng)殖中[2]。傳統(tǒng)的中藥粉碎方式利用率較低，由于中藥的有效成分多數(shù)存在于細(xì)胞的胞漿中，且中藥的胞漿結(jié)構(gòu)致密，活性成分不能有效釋放，很難被動(dòng)物機(jī)體腸道吸收利用，中藥的超微粉碎技術(shù)可以彌補(bǔ)傳統(tǒng)的中藥粉碎缺點(diǎn)，中藥通過(guò)超微粉碎可將有效成分釋放，提高其在動(dòng)物腸道內(nèi)的生物利用率。以斷乳仔豬為研究對(duì)象，添加不同水平復(fù)方中藥添加劑，研究其對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響，為進(jìn)一步的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)方中藥制劑主要包括黃芪1·5份、當(dāng)歸1·5份、淫羊藿1·5份、巴戟天1份、麥冬1份、甘草1份，購(gòu)自北京同仁堂醫(yī)藥有限公司。

1.2 復(fù)方中草藥超微粉的制備

按照上述復(fù)方中藥制劑中單味中藥的比例進(jìn)行混合烘干，進(jìn)行普通粉碎機(jī)粉碎、過(guò)篩，再用超微粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎，制成復(fù)方中藥超微粉添加劑。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

在張家口市的規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)，選擇體重相近的“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷乳仔豬進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇健康、體重為（25±2）kg“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷乳仔豬100頭，隨機(jī)分成4組，分別為1組（基礎(chǔ)精料）、2組（基礎(chǔ)精料+1%復(fù)方中藥超微粉）、3組（基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉）、3組（基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉），每組25只，預(yù)飼喂10 d，試驗(yàn)期90 d。按照養(yǎng)殖場(chǎng)中斷乳仔豬規(guī)范的飼養(yǎng)管理制度進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)和疫苗免疫及環(huán)境消毒等。基礎(chǔ)飼料配制組成及營(yíng)養(yǎng)水平，見(jiàn)表1。

表1 日糧組成成分與營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 免疫指標(biāo)的測(cè)定

1.4.1 血清中IgG、IgA、IL-2含量測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束（90 d），斷料12 h后每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)選擇體重相近的20只試驗(yàn)斷乳仔豬進(jìn)行保定，從前腔靜脈采集血液樣品，用低速離心方式對(duì)采集的血液樣品進(jìn)行血清分離，-20℃保存。按照哺乳動(dòng)物IgG、IgA、IL-2 ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行含量測(cè)定。

1.4.2 豬5種病毒性疾病抗體水平的測(cè)定 用本文“1·4·1”采集的血液分離血清，采用ELISA試劑盒檢測(cè)仔豬血清中豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒 gB（PR-gB）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）和豬口蹄疫病毒（FMDV）抗體水平。

1.5 數(shù)據(jù)處理及分析

對(duì)每個(gè)試驗(yàn)組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用SPSS 18·0軟件對(duì)每個(gè)重復(fù)組的數(shù)據(jù)比較，用Duncan's 法對(duì)每個(gè)試驗(yàn)組數(shù)據(jù)進(jìn)行多重因素比較，用P＜0·05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

不同處理斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果，見(jiàn)表2。

表2 斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果（）

表2 斷乳仔豬免疫指標(biāo)結(jié)果（）

注：同列肩標(biāo)不同小寫字母表示組間存在顯著性差異（P＜0·05），相同字母表示差異不顯著（P＞0·05）。

FMDV/（pg·mL-1）1組1·12±0·17b1·18±0·22b14·16±0·12b3·62±0·15b2·18±0·18b1·16±0·281·14±0·211·16±0·14 2組1·18±0·11ab1·22±0·13ab15·42±0·48ab3·73±0·23ab2·45±0·24ab1·19±0·241·16±0·151·18±0·12 3組1·21±0·16a1·31±0·15a18·72±0·22a4·42±0·22a2·79±0·12a1·22±0·131·18±0·141·20±0·13 4組1·22±0·22a1·33±0·12a18·76±0·14a4·12±0·32a2·82±0·12a1·23±0·121·19±0·171·21±0·11項(xiàng)目IgA/（g·L-1）IgG /（g·L-1）IL-2/（pg·mL-1）CSFV/（pg·mL-1）PR-gB/（pg·mL-1）PCV-2/（pg·mL-1）PRRS/（pg·mL-1）

由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量顯著高于1組（P＜0·05），試驗(yàn)2組斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異不顯著（P＞0·05）；試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平均高于1組，差異不顯著（P＞0·05）；試驗(yàn)2、3、4組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平均高于1組，其中試驗(yàn)3、4組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平顯著高于1組（P＜0·05），試驗(yàn)2組斷乳仔豬血清中CSFV、PR-gB抗體水平高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0·05）。

3 討論

國(guó)內(nèi)許多研究表明，中藥及中藥提取物中富含有多糖、黃酮、皂苷及有機(jī)酸等生物活性物質(zhì)，同時(shí)含有多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在豬、雞等動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中被廣泛使用。免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM 等）主要作用為介導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體的體液免疫，尤其在動(dòng)物抗感染免疫中起著重要作用。IL-2是由淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，主要作用為介導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞免疫。CSFV、PRV、PCV-2、PRRS、FMDV等相關(guān)病毒性疾病在養(yǎng)豬過(guò)程中危害較大，且臨床中沒(méi)有有效的藥物進(jìn)行治療，主要通過(guò)疫苗接種獲得相應(yīng)的免疫力，疫苗接種后其機(jī)體內(nèi)CSFV、PRV、PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平的高低直接影響著疫苗的免疫效果及豬對(duì)該病的抗感染能力。相關(guān)研究表明，中藥及中藥提取物制劑可以有效提高動(dòng)物免疫機(jī)能。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷乳仔豬血清中PCV-2、PRRS、FMDV抗體水平均高于1組，但差異不顯著（P＞0·05），試驗(yàn)3、4組“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷乳仔豬血清中IgA、IgG、IL-2含量顯著高于1組（P＜0·05），CSFV、PR-gB抗體水平顯著高于1組（P＜0·05）。說(shuō)明復(fù)方中草藥超微粉可以提高斷乳仔豬的免疫機(jī)能，以基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉、基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉添加較適宜。斷乳仔豬產(chǎn)生較好免疫效果，原因可能是由于中藥通過(guò)超微粉碎后使其有效成分更好的釋放，提高其在動(dòng)物體內(nèi)的吸收效果和利用率，進(jìn)而提高仔豬的免疫機(jī)能。

4 結(jié)論

不同劑量的復(fù)方中藥超微粉均可以提高“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交斷乳仔豬的免疫水平，其中以基礎(chǔ)精料+2%復(fù)方中藥超微粉、基礎(chǔ)精料+3%復(fù)方中藥超微粉效果較好。