李筱玲，鄧寒霜，霍鴻飛，張亦琳

（1. 商洛學院 生物醫(yī)藥與食品工程學院，陜西 商洛 726000；2. 陜西秦嶺特色生物資源產(chǎn)業(yè)技術研究院，陜西 商洛 726000）

菊楂決明飲為民間驗方，具有平肝疏風、活血化瘀、潤腸通便、降血壓等功效，由菊花、生山楂片、決明子三味中藥組成，其制備方法為取菊花10 g，生山楂片、決明子各15 g，用水煎煮2次后，合并煎煮液即得。現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，菊楂決明飲對于高血壓和高血脂患者具有較好的療效，對陰虛陽亢、大便秘結等癥更有效，有預防動脈粥樣硬化（AS）和心腦血管病作用[1]。菊楂決明飲可藥食兩用，民間多作為茶飲，是用來治療心腦血管疾病常用的中醫(yī)食療方，長期服用可降血壓、降血脂、減肥，特別適用于中老年人。處方中的決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，主要有效成分是蒽醌類和萘并吡喃酮類[2]。橙黃決明素是決明子中重要的蒽醌類成分，能明顯降低高血脂癥大鼠體內的膽固醇、甘油三脂和低密度脂蛋白膽固醇的含量[3]，主要副作用為腸蠕動增加、大便松軟、排便次數(shù)增加等[4]。本文擬通過探究生決明和不同炮制工藝炒決明對菊楂決明飲中有效成分溶出及其瀉下作用的影響情況，為臨床依據(jù)患者實際選用不同決明子炮制品制備菊楂決明飲提供幫助。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

TB-215D電子天平[丹佛儀器（北京）]；TDL-40C離心機（上海安亭科學儀器廠）；RE-52旋轉蒸發(fā)儀（北京科技永興儀器公司）；KH5200E超聲波清洗儀（昆山市科學儀器公司）；LC-20A高效液相色譜儀[日本島津（中國）]。

1.2 試藥和動物

菊花（批號：20180424）、山楂（批號：20180607）、決明子（批號：20180738）（國藥控股商洛大藥房）；橙黃決明素對照品（批號：B W B 5 0 1 7 9）、大黃酚對照品（批號：BWB50252）（北京世紀奧科）；復方地芬諾酯片（批號：20191102，長春長江制藥）；麻仁丸（批號：200606，湖北諾得勝制藥）。SPF級昆明小鼠，體重20～30 g，共70只[西安交通大學實驗動物中心，許可證：SCXK（陜）2008-001]。

2 方法與結果

2.1 不同炮制規(guī)格決明子的制備

生決明：取決明子凈制去雜，即得。

炒決明：取9份生決明，每份約200 g，分3組。分別于160，180，210 ℃下炒制12 min，取出，放涼，即得。

2.2 菊楂決明飲中有效成分含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Hypersil Gold十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：乙腈（A）-0.1 %磷酸溶液（B），梯度洗脫（0～15 min，40 %A；15～30 min，40 %～90 %A；30～40 min，90 % A）；檢測波長：284 nm。進樣量：10 μl；流速：1.0 ml/min[5]。

2.2.2 混合對照品溶液的制備 精密稱取大黃酚8.4 mg、橙黃決明素5.33 mg，用乙酸乙酯-無水乙醇（1:2）混合溶劑溶解、定溶至25 ml，精密量取上述溶液1 ml用相同溶劑定溶至10 ml，即得。

2.2.3 供試品溶液制備 取菊花、山楂、決明子藥材適量，粉碎后過50目篩。分別精密稱取上述藥材粉末，菊花1.0 g 、山楂1.5 g、決明子1.5 g，置入具塞三角瓶中，精密加入80 %乙醇100 ml，塞密，稱定重量，于65 ℃超聲提取50 min，再次稱定重量，以80 %乙醇補足失重，過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 線性關系考察 分別精密吸取2.2.2項下混合對照品溶液2，4，8，10，16，20 μl注入液相色譜儀，按2.2.1項下條件進樣分析。以峰面積為縱坐標（Y），以濃度（μg/ml）為橫坐標（X），繪制標準曲線，計算回歸方程。得大黃酚標準曲線方程為：Y=1×106X+19387，R2=0.9991，表明大黃酚在濃度4.26～42.6 μg/ml范圍內線性關系良好。橙黃決明素的標準曲線方程為：Y=7×106X+6170.7，R2=0.9999；表明橙黃決明素在濃度為6.72～67.2 μg/ml范圍內線性關系良好。

2.2.5 含量測定及結果分析 按照2.2.3項下方法，分別用生決明、炒決明制備菊楂決明飲供試品溶液，照2.2.1項下條件進樣分析，結果見表1。

表1 不同處理菊楂決明飲中有效成分含量

由表1可見，炒決明中橙黃決明素及大黃酚含量明顯比生品高，其中180 ℃炒決明樣品的橙黃決明素含量最高，210 ℃炒決明的大黃酚含量最高。分析原因可能是決明子中所含蒽醌苷在炒制過程中受熱分解為苷元所致。

2.3 決明子炮制規(guī)格對菊楂決明飲瀉下作用的影響

2.3.1 受試藥物的制備

2.3.1.1 稱取菊花10 g、山楂15 g、決明子（搗碎）15 g置入容器，加水煎煮3次。前兩次液料比為8:1，煎煮時間30 min；最后1次為液料比為6:1，煎煮時間20 min。過濾，合并3次濾液，減壓濃縮至含決明子原藥0.375 g/ml的藥液，即得菊楂決明飲藥液，冷藏備用。

2.3.1.2 取復方地芬諾（每片含鹽酸地芬諾酯2.5 mg）研磨成粉后加水配制成混懸液。

2.3.1.3 麻仁丸研磨粉碎加水制得所需濃度的混懸液。給藥前先將藥液配成含2 %墨汁的受試藥物。

2.3.2 實驗動物及分組給藥方案 取SPF級昆明小鼠70只，適應性飼養(yǎng)1周后，隨機分為7組，每組10只。第一組為復方地芬諾酯模型組（10 mg/kg灌胃）；第2組為麻仁丸陽性對照組（4 g/kg灌胃）；第3～6組分別為生決明組、160 ℃炒決明組、180 ℃炒決明組、210 ℃炒決明組，給藥量為相當于原藥7.5 g/kg；第7組為生理鹽水組，給藥與生決明組等量，苦味酸標記。

2.3.3 小鼠便秘模型的制備 各組小鼠禁食不禁水24 h后，除生理鹽水組給予生理鹽水（0.02 ml/g體重），其他各組灌胃10 mg/kg的復方地芬諾酯，計時30 min后建立便秘模型。模型組與生理鹽水組小鼠的首次排黑便時間和黑便數(shù)量差異有統(tǒng)計學意義，則說明小鼠便秘模型建立成功[6]。

2.3.4 瀉下排便實驗方法 造模成功后，實驗當天小鼠禁食4 h，各給藥組分別灌胃含2 %墨汁的受試藥液，生理鹽水對照組和模型組灌胃含2 %墨汁的生理鹽水，給藥體積為0.2 ml/10g體重。灌胃后小鼠均單籠飼養(yǎng)，并恢復正常飼料和飲水，然后觀察瀉下情況。連續(xù)記錄6 h內每只小鼠開始排出黑便的時間及6 h黑便總數(shù)量。比較生決明與炒決明子的菊楂決明飲對便秘型小鼠排便的影響差異性[7]。

2.3.5 菊楂決明飲瀉下作用實驗結果分析 觀察、記錄首次排黑便時間和黑便數(shù)至給藥6 h后。采用SPSS19.0（中文版）軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和均值分析，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)（±s）表示，各組間比較采用t檢驗，P＜0.05具有顯著統(tǒng)計意義，P＜0.01表示差異具有極顯著統(tǒng)計學意義。結果見表2～4。

表2 不同處理菊楂決明飲對小鼠排便的影響

表3 不同處理組實驗小鼠首次排黑便時間對照表

表4 炮制前后不同組6 h黑便點數(shù)對照表

由表2可見，模型組首次排黑便時間最晚，6 h后黑便點數(shù)最少；麻仁丸組明顯比模型組的首次排黑便時間最早，6 h后黑便點數(shù)最多；由表3和表4可見，模型組與生理鹽水對照組比較，黑便總點數(shù)和開始排黑便時間有明顯差異（P＜0.01），表明便秘模型建立成功。炒決明組與生決明組比較，首次排黑便時間明顯更晚、6 h黑便點數(shù)明顯更少（P＜0.01），且炒制溫度越高，實驗小鼠首次排便時間越晚、排便量越少，表明以炒制決明子制備菊楂決明飲，可顯著降低其瀉下作用。分析原因可能是炒制高溫時，決明子中的瀉下成分蒽醌苷受熱分解，同時決明子中油脂也會部分破壞，造成瀉下作用減弱。

3 結論與討論

本文研究發(fā)現(xiàn)，以炒決明子制備的菊楂決明飲中大黃酚、橙黃決明素含量較生決明有明顯增加，同時其瀉下的作用也得到明顯緩和，表明炒制有助于具有瀉下作用的蒽醌苷類成分分解為游離蒽醌，有助于降血壓、降血脂類有效成分的溶出。有鑒于此，臨床應用菊楂決明飲時，應視患者辨證情況選用不同炮制規(guī)格的決明子組方。辨證論治是中醫(yī)獨有特色，中藥藥味不變時，可通過中藥炮制來調整或者糾正藥物的偏性、緩和藥性[8-9]。決明子經(jīng)過炒制后瀉下作用緩和，用于菊楂決明飲中，使該方的瀉下作用相應減弱。因此對于高血脂人群，脾虛便溏者，在服用菊楂決明飲時應選用炒決明，以避免出現(xiàn)腹瀉等不良反應。