郭 正，李羽翡，吳霞明，蘇阿龍，芮文君

（甘肅省食品檢驗研究院，甘肅蘭州 730300）

食品安全作為民生問題，直接關(guān)系到人們的生命財產(chǎn)安全和公共安全，備受關(guān)注[1]。食品安全抽檢作為保障食品安全最有力的措施，是食品監(jiān)管中不可或缺的一部分，農(nóng)產(chǎn)品抽檢占食品抽檢的比重也逐年增加[2]。我國作為農(nóng)業(yè)大國，是世界范圍內(nèi)使用農(nóng)藥量最大的國家[3]。蔬菜、水果是餐桌上不可或缺的食物，通常種植者為防止病蟲害侵害，會在果蔬種植過程中使用農(nóng)藥。目前，果蔬方面取得登記在冊的農(nóng)藥制劑有9 000 余種，農(nóng)藥的濫用、過度使用會造成環(huán)境和果蔬農(nóng)藥殘留超標，嚴重危害人體健康。隨著社會的進步、人們生活水平的不斷提高，食品安全問題備受關(guān)注，蔬菜、水果中的農(nóng)藥殘留問題也成為人們最關(guān)注的問題之一[4-5]。

根據(jù)《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細則》，目前果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測方法主要有氣相色譜法[6]、液相色譜法[7]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[8-9]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[10]。其中，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法可以克服結(jié)構(gòu)干擾，有效分離復雜樣品中的農(nóng)藥，檢測多殘留農(nóng)藥及其代謝物，還可同時對其進行定量、定性分析，在農(nóng)產(chǎn)品抽檢中廣泛應(yīng)用[11]。農(nóng)產(chǎn)品抽檢活動中，經(jīng)常會有被抽樣者提出復檢，由于農(nóng)產(chǎn)品的貯存條件和農(nóng)藥本身的性質(zhì)，會產(chǎn)生復檢結(jié)論和初檢結(jié)論不一致的情況[12-13]。

本文以市面上常見的蘋果、皇冠梨、西蘭花、甜椒、西紅柿這5 種水果蔬菜為研究對象，選用啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷和肟菌酯這幾種種植中常用的農(nóng)藥，分別在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下研究農(nóng)藥的衰減程度，從而為農(nóng)產(chǎn)品備份樣品貯存提供一定的技術(shù)支撐，降低復檢結(jié)論被推翻的風險。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

蘋果、皇冠梨、西蘭花、甜椒、西紅柿來源于蘭州新區(qū)國源批發(fā)市場；甲酸、乙腈、甲醇（色譜純，德國默克）；甲酸銨（上海安譜）；氯化鈉（分析純）；提取鹽包（含4 g 無水硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉二水合物、0.5 g 檸檬酸二鈉鹽倍半水合物）（深圳逗點）；實驗室用水為一級水；啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯來源于皋蘭縣市售農(nóng)藥。

1.2 儀器與設(shè)備

超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（AB Sciex）；渦旋混勻儀（逗點生物）；Milli-Q 超純水系統(tǒng)（德國默克）；超聲波清洗器（德國Elma）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品的儲存

設(shè)置4 種貯存條件分別為化學貯存、冰溫（0 ℃）貯存、冷藏（5 ℃）貯存、冷凍（-18 ℃）貯存。

1.3.2 樣品的制備

從農(nóng)資店購買啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯6 種乳液或粉劑型農(nóng)藥，原農(nóng)藥含量為15%～30%。模擬農(nóng)產(chǎn)品種植者噴灑農(nóng)藥的方式，采用噴霧方式，將6 種農(nóng)藥均勻噴灑于待測水果和蔬菜，取樣品分別封存于4 種不同環(huán)境下，在第1 天、第25 天、第50 天分別取部分樣品進行搗碎勻漿。

稱取10 g（精確至0.01 g）試樣于50 mL 塑料離心管中加入10 mL 乙腈及1 顆陶瓷均質(zhì)子，劇烈振蕩1 min，加入提取鹽包（含4 g 無水硫酸鎂、1 g 氯化鈉、1 g 檸檬酸鈉二水合物、0.5 g 檸檬酸二鈉鹽倍半水合物），劇烈振蕩1 min 后4 200 r·min-1離心5 min。定量吸取6 mL 上清液至內(nèi)含除水劑和凈化材料的塑料離心管中（每毫升提取液使用150 mg 無水硫酸鎂、25 mg PSA），渦旋混勻1 min，4 200 r·min-1離心5 min，吸取上清液過微孔濾膜，待測定。

1.3.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱：thermoscientific Hypersil GOLD 柱（100 mm×2.1 mm，1.9 μm）；流動相：A 相為甲酸銨-甲酸水溶液，B 相為甲酸銨-甲酸醇溶液，流動相梯度洗脫條件見表1；流速：0.3 mL·min-1；柱溫40 ℃；進樣量2 μL。

表1 流動相梯度洗脫條件

（2）質(zhì)譜條件。電噴霧電離源（Electrospray Ionization，ESI）；電離方式：負模式；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（Multiple Reaction Monitoring，MRM）；氣簾氣壓力：35 psi；離子化電壓：-4 000 V；離子化溫度：500 ℃；噴霧氣壓力：50 psi；輔助加熱氣壓力：55 psi。多反應(yīng)監(jiān)測：每種農(nóng)藥分別選擇至少2 個子離子。所有需要檢測的子離子按照出峰順序，分時段分別檢測。每種農(nóng)藥的保留時間、母離子、子離子及離子對質(zhì)譜參數(shù)見表2。

表2 離子對選擇參數(shù)表及保留時間

1.3.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)通過Excel 進行繪圖分析，實驗結(jié)果均為2次重復實驗的平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘋果在不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

由圖1 可知，蘋果在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下，啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯農(nóng)藥殘留均發(fā)生衰減，但每種條件下農(nóng)藥的衰減程度不一樣，相對而言，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最弱。

圖1 蘋果在不同貯存條件下各類農(nóng)藥的衰減情況

2.2 皇冠梨在不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

由圖2 可知，皇冠梨在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下，啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯農(nóng)藥殘留均發(fā)生衰減，但每種條件下農(nóng)藥的衰減程度不一樣，相對而言，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最弱。

圖2 皇冠梨在不同貯存條件下各類農(nóng)藥的衰減情況

2.3 西蘭花在不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

由圖3 可知，西蘭花在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下，啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯農(nóng)藥殘留均發(fā)生衰減，但每種條件下衰減農(nóng)藥的程度不一樣，相對而言，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最弱。

圖3 西蘭花在不同貯存條件下各類農(nóng)藥的衰減情況

2.4 甜椒在不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

由圖4 可知，甜椒在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下，啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯農(nóng)藥殘留均發(fā)生衰減，但每種條件下農(nóng)藥的衰減程度不一樣，相對而言，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最弱。

圖4 甜椒在不同貯存條件下各類農(nóng)藥的衰減情況

2.5 西紅柿在不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

由圖5 可知，西紅柿在化學、冰溫、冷藏和冷凍貯存條件下，啶蟲脒、烯酰嗎啉、阿維菌素、腐霉利、丙溴磷、肟菌酯農(nóng)藥殘留均發(fā)生衰減，但每種條件下農(nóng)藥的衰減程度不一樣，相對而言，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最弱。

圖5 西紅柿在不同貯存條件下各類農(nóng)藥的衰減情況

2.6 不同貯存條件下農(nóng)藥衰減規(guī)律分析

本文采用《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細則》中規(guī)定的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測果蔬中的農(nóng)藥殘留，圖1 ～圖5 結(jié)果表明，在不同的貯存條件下，農(nóng)藥均有衰減，但衰減程度不一樣，綜合水果蔬菜農(nóng)藥殘留檢測數(shù)據(jù)，衰減程度由高到低排序大致為化學＞冰溫＞冷藏＞冷凍，由此可見，在冷凍貯存條件下農(nóng)藥衰減最慢，也是最適合農(nóng)產(chǎn)品備份樣品貯存的方式。

3 結(jié)論

本研究以5 種水果蔬菜為研究對象，針對性地選擇6 種農(nóng)藥作為研究樣本，實驗模擬水果蔬菜種植者的農(nóng)藥噴灑方式和貯存方式，采用農(nóng)產(chǎn)品抽檢最常用的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法進行檢測，在避光、密閉的條件下研究化學、冷藏、冰溫和冷凍貯存條件下各農(nóng)藥的衰減程度。研究結(jié)果表明，在化學、冷藏、冰溫和冷凍貯存條件下，幾種水果蔬菜中農(nóng)藥殘留均出現(xiàn)不同程度的衰減，但冷凍條件下農(nóng)藥衰減最慢，最有利于農(nóng)產(chǎn)品備份樣品的貯存，復檢中結(jié)論被推翻的風險也最低。