郭 勇, 王生艷, 易靜靜, 崔 森

（1.青海大學(xué)研究生院，青海 西寧 810000；2.青海衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系，青海 西寧 810000；3.青海大學(xué)附屬醫(yī)院血液科，青海 西寧 810000）

高 原 紅 細(xì) 胞 增 多 癥 （high altitude polycythemia，HAPC）是長(zhǎng)期生活在海拔2 500 m以上的人群在適應(yīng)高原低氧環(huán)境失敗而導(dǎo)致紅細(xì)胞過度積累的疾病，以頭暈、頭痛、呼吸困難、乏力和睡眠障礙等為特征，主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞（red blood cells，RBC） 數(shù)、血 紅 蛋 白（hemoglobin，Hb）水平和紅細(xì)胞比容（hematokrit，HCT）水平升高［1-2］。HAPC 患者主要為高原移居人群，隨著越來越多的人群移居高原，HAPC 發(fā)病率也逐漸升高，但其具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前其預(yù)防和治療也無針對(duì)性的方法。目前國內(nèi)外關(guān)于HAPC患者細(xì)胞凋亡和增殖失衡方面的相關(guān)報(bào)道仍較少，對(duì)其機(jī)制的研究也不夠深入。

紅景天苷是從紅景天類植物中提取的主要成分，其具有廣泛的藥用價(jià)值，不僅在抗炎、抗毒、抗衰老、抗疲勞、抗氧化、減少自由基和抗凋亡等方面發(fā)揮重要作用，還可以治療多種慢性疾?。?］。有研究［4］顯示：紅景天苷可能通過抑制HAPC 大鼠體內(nèi)促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）的分泌，降低HAPC 大鼠的RBC 數(shù)、Hb 水平、HCT水平和血漿黏滯度，從而改善缺氧。紅景天苷還可以使HAPC 大鼠紅細(xì)胞膜的流動(dòng)性增強(qiáng)，提高紅細(xì)胞的變形能力，加快血流速度，同時(shí)通過改變紅細(xì)胞膜的成分來調(diào)節(jié)RBC 的功能，從而緩解HAPC 癥 狀［5］。目 前 紅 景 天 苷 防 治HAPC 和 抑 制骨髓象紅細(xì)胞（紅系細(xì)胞）過度代償性增生的機(jī)制尚未完全明確，而紅景天苷對(duì)HAPC 骨髓紅系細(xì)胞凋亡作用機(jī)制方面也暫無相關(guān)報(bào)道。

轉(zhuǎn)鐵蛋白CD71 在紅系細(xì)胞的各個(gè)分化階段均有表達(dá)，是確定的紅系細(xì)胞的特異性標(biāo)志物，常被用以標(biāo)記紅系細(xì)胞在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)成熟過程。采用被CD71+標(biāo)記過的有核RBC 可以更加直觀地觀察骨髓紅系細(xì)胞造血功能的動(dòng)態(tài)變化。本研究以HAPC模型大鼠骨髓CD71+有核RBC 為材料，檢測(cè)紅景天苷對(duì)HAPC 模型大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率、細(xì)胞凋亡率、線粒體膜電位（mitochondrial membrane potential，MMP）、含半胱氨酸的天冬氨酸 蛋 白 水 解 酶 3 （cysteinyl aspartate specific proteinase-3，Caspase-3）、B 細(xì)胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2 相 關(guān)X 蛋 白（Bcl-2 associated X protein，Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸 蛋 白 水 解 酶 9 （cysteinyl aspartate specific proteinase-9，Caspase-9）等蛋白表達(dá)水平的影響，探討紅景天苷對(duì)HAPC 患者RBC 過度積累的保護(hù)效應(yīng)的機(jī)制，為紅景天苷的臨床應(yīng)用研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、藥物、主要試劑和儀器本研究獲青海大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理批號(hào)：PSL-2022-044），遵循國際疼痛研究協(xié)會(huì)的倫理指南。45 只健康SD 雄性大鼠，6 周齡，體質(zhì)量為180～220 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京） 2021-0006，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：110011210109392813。紅景天苷（純度>95%，美國麥克林試劑公司）。BCA 蛋白定量試劑盒（賽默飛世爾科技有限公司），Caspase-9、Bcl-2 和Bax 及HRP-羊抗兔/小鼠二抗（武漢博士德生物工程有限公司）。流式細(xì)胞儀（美國艾森生物有限公司），低溫高速離心機(jī)（德國 Eppendorf 公司），Nano Drop 微量分光光度計(jì)（賽默飛世爾科技有限公司），蛋白電泳儀和全自動(dòng)凝膠成像分析系統(tǒng)（美國Bio-Rad 公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、模型制備和給藥處理45 只SD 雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和藥物組，每組15 只。對(duì)照組大鼠在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)以普通環(huán)境飼養(yǎng)，參考文獻(xiàn)［6-7］建立HAPC 大鼠模型，實(shí)驗(yàn)室海拔1 500 m 藥物組和模型組大鼠在低壓氧艙內(nèi)模擬海拔5 000 m 條件，溫度為20 ℃～26 ℃，相對(duì)濕度為40%～70%，自由進(jìn)食飲水，連續(xù)飼養(yǎng)28 d。3 組大鼠均采用灌胃給藥的方式，藥物組大鼠給予0.15 g·kg－1·d－1紅景天苷，對(duì)照組和模型組大鼠均給予0.9%等體積NaCl 溶液，每日1 次，連續(xù)28 d。

1.3 采血和骨髓收集采用1% 戊巴比妥鈉（0.04 g·kg－1）腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠無角膜反射和收縮反應(yīng)后，經(jīng)腹主動(dòng)脈于EDTA 抗凝管采血2 mL，采用全自動(dòng)獸血細(xì)胞儀檢測(cè)大鼠血常規(guī)。記錄大鼠外周血中RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT水平，采用1×PBS 溶液沖洗大鼠雙后肢股骨和脛骨中骨髓液，過濾備用。

1.4 密度梯度離心法分離各組大鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）和免疫磁珠法分選骨髓CD71+有核RBC將骨髓液以1 500 r·min－1室溫離心5 min 后棄去上清液，沉淀中加入2～3 mL 1×PBS 溶液混勻稀釋，再加入等體積大鼠骨髓淋巴細(xì)胞分離液，以2 000 r·min－1室溫離心20 min 后吸取單個(gè)核細(xì)胞，反復(fù)洗滌后離心備用。將BMMNCs 重懸于100 μL buffer 液中，加入FITCCD71 兔抗鼠單克隆抗體，4 ℃避光孵育10 min；加入5 mL buffer 液，1 500 r·min－1室溫離心10 min 后棄上清；加入180 μL buffer 液和20 μL抗FITC 免疫磁珠，混勻后4 ℃避光孵育10 min；洗滌后將細(xì)胞懸液加入MS 分選柱，待液體通過分選柱后采用1 mL buffer 液沖洗后在柱中加入3 mL buffer 液，采用分選柱活塞快速將其沖入15 mL 離心管中，得到大鼠骨髓CD71+細(xì)胞。

1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率和細(xì)胞凋亡率調(diào)整BMMNCs 濃度至1×106mL－1，取100 μL BMMNCs 置于流式管中，分別加入CD71 單克隆抗體和Annexin Ⅴ- FITC，室溫下避光孵育15 min，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)20 000 個(gè)BMMNCs 中CD71+細(xì)胞數(shù)、CD71+細(xì)胞百分率和CD71+有核RBC 凋亡率。

1.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中MMP 水平按照J(rèn)C-1MMP 檢測(cè)試劑盒配制工作液，將1×106mL－1BMMNCs 懸液加入工作液混勻，37 ℃孵育15 min 后加入1×Assay buffer，室溫2 000 r·min－1、離心5 min 棄上清后上機(jī)檢測(cè)。參考其他熒光設(shè)置，在MMP 水平升高時(shí)，JC-1 以聚集體的形式分布于線粒體基質(zhì)中，發(fā)出紅色熒光；當(dāng)MMP 水平降低時(shí)，JC-1 聚集體從線粒體中釋放出來，形成單體，產(chǎn)生綠色熒光。

1.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Caspase-3 蛋白表達(dá)水平調(diào)整BMMNCs濃度至1×106mL－1，取100 μL 置于流式管中，加入CD71 抗體，室溫下避光孵育15 min 后加入1×PBS 溶液，以1 500 r·min－1、離心5 min，共2 次，加入500 μL fixed/permeabilized 液 避 光 4 ℃孵 育20 min；加 入500 μL Perm/WashTM buffer，離 心后棄上清，加入Caspase-3 抗體室溫避光孵育30 min；清洗后加入500 μL Perm/WashTM buffer重懸上機(jī)檢測(cè)。

1.8 Western blotting 法檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平將保存于液氮中的大鼠骨髓CD71+有核RBC，采用預(yù)冷裂解液裂解，12 000 r·min－1、4 ℃離心10 min 后取上清。按照BCA 蛋白定量試劑盒方法檢測(cè)吸光度（A）值，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線公式計(jì)算樣品濃度，根據(jù)不同濃度計(jì)算上樣體積。30 μg 蛋白上樣，80 ～130 V 電壓進(jìn)行電泳，200 mA 恒流轉(zhuǎn)膜；1×TBST 溶液搖床清洗5 min，共3 次，5%脫脂奶粉中室溫封閉2 h，1×TBST 溶液清洗3 次，4 ℃一抗（1∶1 000 稀釋） 孵育過夜，洗膜3 次，每次10 min；室溫孵育二抗（1∶10 000 稀釋）1 h，洗膜3 次，每次10 min。將PVDF 膜與ECL 發(fā)光液反應(yīng)2 min，采用化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)曝光并拍照記錄，采用Image J 軟件分析條帶灰度值，計(jì)算目的蛋白表達(dá)水平。目的蛋白表達(dá)水平＝目的蛋白條帶灰度值/內(nèi)參β-actin 條帶灰度值。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組大鼠外周血RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT 水平，大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率，CD71+有核RBC 凋亡率，CD71+有核RBC 中MMP 水平，CD71+有核RBC中Caspase-3、Bcl-2、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平為計(jì)量資料，服從正態(tài)分布，以-±s表示，多組間樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠外周血中RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT水平與對(duì)照組比較，模型組大鼠外周血中RBC數(shù)、Hb 水平和HCT 水平均明顯升高（P<0.01）；與模型組比較，藥物組大鼠外周血中RBC數(shù)、Hb 水平和HCT水平均明顯降低（P<0.01）。見表1。

表1 各組大鼠外周血中RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT 水平Tab.1 Counts of RBC, levels of Hb and HCT in peripheral blood of rats in various groups (n=15，-±s）

表1 各組大鼠外周血中RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT 水平Tab.1 Counts of RBC, levels of Hb and HCT in peripheral blood of rats in various groups (n=15，-±s）

*P<0.01 compared with control group；△P<0.01 compared with model group.

Level of HCT（η/%）35.99±2.71 59.53±5.31*52.59±3.66△134.50<0.001 Group Control Model Drug F P Count of RBC（×1012 L－1）5.24±0.37 8.79±0.52*7.22±0.60△187.08<0.001 Level of Hb[ρB/（g·L－1）]131.93±10.19 218.33±17.49*190.73±10.73△166.98<0.001

2.2 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率和CD71+有核RBC凋亡率與對(duì)照組比較，模型組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率和CD71+有核RBC 凋亡率均升高（P<0.01）；與模型組比較，藥物組大鼠骨髓CD71+ 有核RBC 百分率和CD71+有核RBC 凋亡率均降低（P<0.01）。見表2 和圖1。

圖1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率、細(xì)胞 凋 亡 率 和CD71+ 有 核RBC 中MMP 水平及Caspase-3 蛋白表達(dá)水平Fig.1 Pecentages and apoptotic rates of CD71+ nucleated RBC, levels of MMP,and expression levels of Caspase-3 protein in CD71+ nucleated RBC detected by flow cytometry

表2 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率、CD71+有核RBC 凋亡率和CD71+有核RBC 中MMP 水平及Caspase-3 蛋白表達(dá)水平Tab.2 Pecentages and apoptotic rates of CD71+ nucleated RBC, levels of MMP and expression levels of Caspase-3 protein in CD71+ nucleated erythrocytes of rats in various groups (n=6，-±s）

表2 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 百分率、CD71+有核RBC 凋亡率和CD71+有核RBC 中MMP 水平及Caspase-3 蛋白表達(dá)水平Tab.2 Pecentages and apoptotic rates of CD71+ nucleated RBC, levels of MMP and expression levels of Caspase-3 protein in CD71+ nucleated erythrocytes of rats in various groups (n=6，-±s）

*P<0.01 compared with control group；△P<0.05，△△P<0.01 compared with model group.

Group Apoptotic rate（η/%）MMP（η/%）Caspase-3 protein Control Model Drug F P Pecentage of nucleated RBC（η/%）15.98±3.58 27.12±2.64*22.73±1.06△28.10<0.001 32.91±1.38 50.52±2.28*3.28±2.13△△830.58<0.001 28.50±5.00 40.65±5.15*1.17±0.55△△7.46<0.001 82.01±2.78 80.32±4.44 91.24±10.95△7.39 0.20

2.3 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中MMP 水平和Caspase-3 蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組比較，模型組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中MMP 水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），Caspase-3 蛋白表達(dá)水平升高（P<0.01）；與模型組比較，藥物組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中MMP 水平升高（P<0.05），Caspase-3 蛋白表達(dá)水平降低（P<0.01）。見表2 和圖1。

2.4 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2、Bax和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組比較，模型組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bax 和Caspase-9蛋白表達(dá)水平升高（P<0.05）；與模型組比較，藥物組大鼠骨髓CD71+有核紅細(xì)胞中Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平降低（P<0.01）。各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2 蛋白表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3 和圖2。

圖2 Western blotting 法檢測(cè)各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)電泳圖Fig.2 Electrophoregram of expressions of Bcl-2，Bax，and Caspase-9 proteins in CD71+ nucleated RBC of rats in various groups detected by Western blotting method

表3 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平Tab.3 Expression levels of Bcl-2，Bax，and Caspase-9 proteins in CD71+ nucleated RBC of rats in various groups(n=9，-±s）

表3 各組大鼠骨髓CD71+有核RBC 中Bcl-2、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平Tab.3 Expression levels of Bcl-2，Bax，and Caspase-9 proteins in CD71+ nucleated RBC of rats in various groups(n=9，-±s）

*P<0.05 compared with control group；△P<0.01 compared with model group.

Caspase-9 protein 1.45±0.38 1.85±0.20*0.94±0.47△12.696<0.001 Group Control Model Drug FP Bcl-2 protein 0.93±0.37 0.92±0.36 0.53±0.27 3.27 0.06 Bax protein 0.59±0.11 1.05±0.53*0.32±0.17△10.109 0.01

3 討 論

HAPC 是一種常見的慢性高原病，會(huì)導(dǎo)致慢性肺源性心臟病（簡(jiǎn)稱肺心?。┖托牧λソ?，危及患者生命，但其致病機(jī)制至今尚未完全明確。本研究結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，模型組HAPC 大鼠的RBC 數(shù)、Hb 水平、HCT 水平和骨髓CD71+有核RBC 百分率明顯升高，HAPC 大鼠CD71+有核RBC 凋亡率、CD71+有核RBC 中Caspase-3、Bax和Caspase-9 表達(dá)水平升高，MMP 水平降低，提示成功制備HAPC 模型，表明大鼠為了適應(yīng)低壓低氧環(huán)境，骨髓紅系細(xì)胞增殖增多，從而生成更多的RBC 及Hb 以 提 高 攜 氧 能 力， 本 研 究 結(jié) 果 與董旭等［8］報(bào)道結(jié)果一致。有研究［9］也同樣證明了上述觀點(diǎn)。HAPC 大鼠CD71+有核RBC 凋亡率與CD71+有核RBC 中促凋亡蛋白的表達(dá)均升高，提示骨髓RBC 凋亡升高在HAPC 中RBC 過度積累機(jī)制中具有一定作用，與RBC 增殖增強(qiáng)發(fā)揮協(xié)同作用，與MA 等［10］研究結(jié)果一致。廖瑜等［11］通過檢測(cè)12 只低氧干預(yù)小鼠BMMNCs 中CD71+ 和Ter119+細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示：低氧組小鼠CD71+和Ter119+細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組，表明在低氧條件下，骨髓RBC 凋亡的增加在HAPC 的疾病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。線粒體在細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重要作用，作為提供能量的場(chǎng)所，其參與體內(nèi)的多種氧化應(yīng)激反應(yīng)。線粒體結(jié)構(gòu)和形態(tài)會(huì)隨著環(huán)境的變化而改變，故而對(duì)各種損傷較敏感，特別是低氧導(dǎo)致的損傷，常表現(xiàn)為線粒體腫脹［12-13］。當(dāng)線粒體受到外界低氧刺激時(shí)，線粒體膜通透性增加，MMP 水平升高［14］。細(xì)胞色素c（cytochrome c，Cyt-c） 是由線粒體釋放的一種促凋亡蛋白，在由線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑中發(fā)揮重要作用。Bcl-2 家族成員形成的通道是Cyt-c 釋放的主要途徑。Bcl-2 家族成員主要是代表抗細(xì)胞凋亡的Bcl-2 蛋白和促細(xì)胞凋亡的Bax 蛋白。細(xì)胞質(zhì)中Bax 蛋白受到凋亡刺激時(shí)會(huì)引起線粒體膜的通透性增加，釋放線粒體內(nèi)膜上的Cyt-c 到細(xì)胞質(zhì)中，然后與同樣存在于細(xì)胞質(zhì)中的凋亡酶激活因子1（apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1） 結(jié)合，誘導(dǎo)并催化Caspase-9 活化，再進(jìn)一步激活凋亡效應(yīng)蛋白酶Caspase-3，促進(jìn)細(xì)胞凋亡［15］。Bcl-2家族成員在線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑中起雙向調(diào)控的作用。Bcl-2 可以與B 細(xì)胞淋巴瘤xl（B-cell lymphoma-xl， Bcl-xl）、 凋 亡 蛋 白 激 活 因 子1（apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1） 及Caspase-9 結(jié)合形成復(fù)合物，使Apaf-1 構(gòu)型發(fā)生改變，從而使Cyt-c 釋放減少，抑制細(xì)胞凋亡［16］。Bcl-2 相關(guān)啟動(dòng)子（Bcl-2 asociated death promoter，Bad） 可以通過去磷酸化后改變構(gòu)型與Bax-Bcl-xl二聚體的Bcl-xl結(jié)合而釋放出Bax，隨后釋放Cyt-c，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［17］。Bid 在JNK 信號(hào)通路作用下形成jBid，促進(jìn)線粒體釋放促凋亡因子（second mitochondria -derived activator of Caspases，Smac），激活Caspase-8，隨后直接激活Caspase-3 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；被激活的Caspase-8 還可以裂解Bid 形成tBid，促進(jìn)線粒體釋放Cyt-c，激活Caspase-9 或Caspase-3 后 誘 導(dǎo) 細(xì) 胞 凋 亡［18］。Bim 蛋 白 是 一 種BH3-only 蛋白，BH3 結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞凋亡起始過程中起關(guān)鍵作用，Bim 可以通過促進(jìn)Cyt-c 和Smac 等的釋放導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［19］。

本研究結(jié)果顯示：在紅景天苷的作用下，HAPC 大鼠外周血中RBC 數(shù)、Hb 水平和HCT 水平及骨髓CD71+有核RBC 百分率降低，CD71+有核RBC 凋亡率、CD71+有核RBC 中Caspase-3、Bax 和Caspase-9 蛋白表達(dá)水平均降低，MMP 水平升高，提示紅景天苷可能通過抑制凋亡的方式參與HAPC 的調(diào)控，并改善大鼠在低氧條件下引起的紅細(xì)胞積累。研究［20-21］顯示：紅景天苷能夠降低HAPC 大 鼠 的RBC 數(shù)、Hb 水 平、HCT 水 平 和 血 液黏滯度，同時(shí)降低HAPC 大鼠的EPO 水平，抑制RBC 過度增生，達(dá)到改善或者預(yù)防HAPC 的作用。研究［22］顯示：紅景天苷可以通過抑制Bim 及其下游蛋白（Bax 及裂解的Caspase-3）表達(dá)來抑制近端腎小管細(xì)胞的凋亡；紅景天苷可以通過抑制相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)途徑來緩解缺氧大鼠神經(jīng)干細(xì)胞凋亡［23］；紅景天苷可通過減少Cyt-c 釋放，裂解Caspase-9 或Caspase-3 來抑制股骨頭的骨細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)成骨細(xì)胞的生成［24］。鄔玫竹等［25］研究顯示：紅景天苷能夠通過降低活性氧水平，升高M(jìn)MP 水平，增加Bcl-2 蛋白表達(dá)，減少Bax 和Caspase-3 蛋白表達(dá)來降低心肌細(xì)胞的凋亡水平。張常銀等［26］研究顯示：紅景天苷能夠通過降低Caspase-3 表達(dá)水平來降低不育癥大鼠睪丸生精細(xì)胞的凋亡。魏玉萍等［27］研究顯示：紅景天苷可以通過上調(diào)Bcl-2 基因表達(dá)水平，下調(diào)Bax 基因表達(dá)水平來抑制阿糖胞苷誘導(dǎo)的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡。上述研究結(jié)果均表明：紅景天苷通過抑制細(xì)胞凋亡的方式發(fā)揮作用，與本研究的結(jié)果一致，紅景天苷通過抑制HAPC 大鼠骨髓CD71+有核RBC 凋亡的方式，對(duì)HAPC 大鼠的發(fā)病過程起預(yù)防和保護(hù)作用。

本研究探討了紅景天苷對(duì)HAPC 模型大鼠骨髓CD71+有核RBC 凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)HAPC 大鼠骨髓有核RBC 凋亡增加，提示凋亡途徑在HAPC的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用。紅景天苷可有效抑制低氧條件下大鼠骨髓有核RBC 凋亡增加，提示紅景天苷可能通過抑制凋亡的方式對(duì)HAPC 模型大鼠的發(fā)病過程起預(yù)防和保護(hù)作用。本研究為HAPC 的發(fā)病機(jī)制和臨床干預(yù)提供了科學(xué)依據(jù)。