蔣奎瑩 齊莉莉 康富標(biāo) 閆聰藝 王 玲

（河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科，石家莊 050051）

Siglecs 家族分子可在人巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞中特異性表達(dá)，參與免疫細(xì)胞活化、增殖及凋亡等多個(gè)重要的生理過(guò)程［1］。Siglecs 可通過(guò)識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的單糖唾液酸（Sialic acid，Sia）介導(dǎo)細(xì)胞間或病原體與細(xì)胞間相互作用，在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的調(diào)控作用，但由于腫瘤生長(zhǎng)和增殖過(guò)程中細(xì)胞表面抗原Sia 易發(fā)生糖基化，Siglecs 與其結(jié)合后可傳遞抑制信號(hào)并調(diào)控免疫應(yīng)答，進(jìn)而影響腫瘤免疫微環(huán)境形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸。此外，Sia-Siglec 結(jié)合后還可參與抗原提呈細(xì)胞對(duì)抗原的捕獲和提呈，影響抗原提呈細(xì)胞功能；同時(shí)腫瘤微環(huán)境（tumor microenvironment，TME）也促進(jìn)腫瘤細(xì)胞異常分泌Sia，進(jìn)而刺激浸潤(rùn)免疫細(xì)胞Siglecs表達(dá)上調(diào)。Siglecs可通過(guò)誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞極化、改變T細(xì)胞分化方向和抑制NK 細(xì)胞殺傷活性促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。因此，腫瘤中Sia-Siglec 軸失調(diào)有助于傳遞免疫抑制信號(hào)，促進(jìn)腫瘤免疫負(fù)性微環(huán)境形成，協(xié)助腫瘤細(xì)胞免疫逃逸［2］。此外，部分Siglecs分子還可傳遞激活信號(hào)，促進(jìn)抗腫瘤免疫應(yīng)答，增強(qiáng)宿主抗腫瘤功能。近年越來(lái)越多靶向Siglecs 及其配體的治療藥物已被相繼開(kāi)發(fā)并進(jìn)入臨床試驗(yàn)，可能成為腫瘤免疫治療的新方向，本文就此進(jìn)行綜述。

1 Siglecs的結(jié)構(gòu)與分類

Siglecs 是一類Ⅰ型免疫球蛋白樣跨膜蛋白，由1 個(gè)胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和1 個(gè)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成，胞內(nèi)部分為含有賴氨酸的短尾，胞外結(jié)構(gòu)域由1個(gè)與N端結(jié)合的Ig結(jié)構(gòu)域和不定數(shù)量的C2型結(jié)構(gòu)域組成［3］。

根據(jù)Siglecs 攜帶的基序可將其分為抑制性與激活性兩種類型［4］。抑制性Siglecs分子包括Siglec-3、Siglec-5、Siglec-7、Siglec-9 和Siglec-10，其胞內(nèi)區(qū)域攜帶ITIM（immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif）和ITIM 樣基序，并通過(guò)招募酪氨酸磷酸酶（SH2 domain-containing protein tyrosine phosphatase，SHP）如SHP-1和SHP-2，使其去磷酸化，傳導(dǎo)抑制性信號(hào)［5-6］。部分Siglecs 家族分子不含有ITIM 和ITIM樣基序，在跨膜區(qū)域攜帶1個(gè)帶正電荷的殘基，可與攜帶ITAM（immunoreceptor tyrosine-based activation motif）的DAP12 相互作用產(chǎn)生激活胞內(nèi)的信號(hào)，包括小鼠Siglec-H 及人類Siglec-4、Siglec-14、Siglec-15、Siglec-16［5，7］。

不同種類脊椎動(dòng)物（如魚(yú)類、兩棲動(dòng)物、鳥(niǎo)類、爬行動(dòng)物和哺乳動(dòng)物）體內(nèi)均可檢出Siglecs 分子表達(dá)，根據(jù)序列保守程度，Siglecs家族又可分為經(jīng)典的保守型Siglecs 分子和CD33 相關(guān)Siglecs 分子。保守型Siglecs 分子在4 億多年前就存在于古脊椎動(dòng)物中，包括Siglec-1（CD169）、Siglec-2（CD22）、Siglec-4和Siglec-15，而CD33相關(guān)Siglecs分子由于基因中外顯子丟失和基因轉(zhuǎn)換等遺傳突變，形成了哺乳動(dòng)物物種間分子差異［8］。因此對(duì)人和小鼠CD33 相關(guān)Siglecs 分子使用不同編號(hào)系統(tǒng)，人類CD33 相關(guān)Siglecs 包括Siglec-3（CD33）、Siglec-5 至Siglec-12、Siglec-14 和Siglec-16。小鼠表達(dá)的CD33 相關(guān)Siglecs分子較少，包括Siglec-3、Siglec-E、Siglec-F、Siglec-G以及Siglec-H，其中Siglec-E與Siglec-9同源，Siglec-G與Siglec-10 同源，常用于代替其同源物研究其功能［5］。

2 Siglecs在腫瘤組織中的表達(dá)

腫瘤細(xì)胞與其所處的TME 是一個(gè)功能整體，相互影響，共同進(jìn)化［9］。TME主要由腫瘤細(xì)胞、各種免疫細(xì)胞、腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞以及附近的間質(zhì)細(xì)胞及各種細(xì)胞因子、趨化因子構(gòu)成［10］。其中，腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞作為T(mén)ME 的主要組成，參與抗腫瘤免疫應(yīng)答，影響TME 免疫穩(wěn)態(tài)，調(diào)控腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移，促進(jìn)腫瘤發(fā)展［11］。Siglecs家族中有很多分子表達(dá)于不同腫瘤細(xì)胞表面或TME 中的免疫細(xì)胞表面，參與TME 形成與調(diào)節(jié)［12］。Siglecs 在不同腫瘤免疫細(xì)胞類型顯示出不同的表達(dá)模式，如Siglec-1 通常在單核/巨噬細(xì)胞表面表達(dá)，Siglec-9 主要表達(dá)于腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和NK細(xì)胞表面；Siglec-7和Siglec-9 的氨基酸序列相似性高達(dá)98%，并主要在NK 細(xì)胞表達(dá)；TME 中Siglec-10 主要在B 細(xì)胞、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor associated macrophages，TAMs）表達(dá)，Siglec-15也主要在TAMs表達(dá)［2］。

Siglecs家族成員在多種腫瘤中均具有異常表達(dá)現(xiàn)象，如Siglec-1 分子在惡性黑色素瘤、結(jié)直腸癌、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌、乳腺癌等多種腫瘤的淋巴結(jié)巨噬細(xì)胞呈高表達(dá)［13-17］。Siglec-3 分子表達(dá)于急性髓系白血?。╝cute myelocytic leukemia，AML）細(xì)胞表面，而在正常造血干細(xì)胞不表達(dá)，因此Siglec-3 可作為AML 治療的靶點(diǎn)［18］。在其他髓系細(xì)胞疾病如骨髓增生異常綜合征的異常細(xì)胞表面、急性淋巴細(xì)胞白血病的B細(xì)胞和T細(xì)胞亞群中也可檢出Siglec-3表達(dá)［19-20］。

研究發(fā)現(xiàn)，非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）、結(jié)直腸癌、黑色素瘤患者腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8+T 細(xì)胞表面均高表達(dá)Siglec-9 分子，Siglec-9 與其配體相互作用后可抑制CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子產(chǎn)生［21-22］。NSCLC 患者中，Siglec-9+T 細(xì)胞分泌細(xì)胞因子和趨化因子的能力顯著降低，導(dǎo)致患者生存率下降，阻斷Sia-Siglec-9 相互作用可增強(qiáng)腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞活性，成為NSCLC 的治療靶點(diǎn)。此外，Siglec-9的基因多態(tài)性也與肺癌和結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)［21］。

Siglec-10、Siglec-15 等在乳腺癌、結(jié)直腸癌、膀胱癌等多種腫瘤中檢測(cè)到表達(dá)，通過(guò)不同方式在TME 中發(fā)揮作用。Siglec-10 是一種抑制性受體，在卵巢癌和乳腺癌患者TME 中的TAMs 表達(dá)，且其配體CD24 在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)也上調(diào)，通過(guò)與CD24 相互作用參與免疫調(diào)節(jié)，抑制免疫應(yīng)答，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展［23］。LI等［24］通過(guò)整合來(lái)自TCGA 的腫瘤樣本和來(lái)自GTEx 數(shù)據(jù)庫(kù)的正常樣本鑒定了Siglec-15 mRNA表達(dá)特征，Siglec-15 mRNA 在多數(shù)癌癥類型中表達(dá)均上調(diào)，如乳腺癌、膽管癌、食管癌、胰腺腺癌、皮膚黑色素瘤、胃腺癌、甲狀腺癌、子宮內(nèi)膜癌等。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，TAMs 相關(guān)Siglec-15 可通過(guò)產(chǎn)生轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）抑制CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)，促進(jìn)免疫抑制性TME 形成，從而促進(jìn)腫瘤免疫逃逸［25］。此外，最近研究顯示Siglec-15 通過(guò)抑制DUSP1 介導(dǎo)的MAPK 途徑抑制促進(jìn)骨肉瘤（osteosarcoma，OS）細(xì)胞惡性進(jìn)展，Siglec-15高表達(dá)與OS 肺轉(zhuǎn)移有關(guān)，并可預(yù)測(cè)OS 患者不良預(yù)后，表明Siglec-15 可能是OS 治療的新靶點(diǎn)［26］?？傊?，越來(lái)越多的證據(jù)表明Siglecs 在腫瘤組織中廣泛存在，多數(shù)通過(guò)負(fù)向調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答促進(jìn)形成免疫抑制微環(huán)境和腫瘤免疫逃逸。因此，鑒于不同Siglecs分子表達(dá)譜及作用機(jī)制不同，深入研究Siglecs 在不同細(xì)胞類型上表達(dá)的不同功能，闡明Siglecs 在各種腫瘤類型中的調(diào)節(jié)機(jī)制，將為更好地開(kāi)發(fā)以Siglecs家族分子為靶點(diǎn)進(jìn)行的腫瘤免疫治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

3 Siglecs家族分子在腫瘤中的作用

3.1 Siglecs非免疫調(diào)控作用

3.1.1 Siglecs誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 CD33相關(guān)Siglecs 的一個(gè)重要功能是通過(guò)抑制增殖或誘導(dǎo)凋亡調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和生存，Siglec-3在99%AML中的髓系細(xì)胞和一些淋巴亞群（包括NK 細(xì)胞）上表達(dá)［5］。VITALE等［27］用抗Siglec-3 mAb 處理AML 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡早期標(biāo)志物Annexin V 表達(dá)增加，與DNA 結(jié)合使雙螺旋斷裂，誘導(dǎo)AML 細(xì)胞凋亡，因此，Siglec-3 可用作AML 的診斷標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。體外研究表明，Siglec-3 還能抑制IL-1β、TNF-α 和IL-8 等促炎細(xì)胞因子分泌，進(jìn)而影響細(xì)胞增殖［28］。一些靶向Siglec-3 的抗體如gemtuzumab、ozogamicin 已被批準(zhǔn)進(jìn)入1 期臨床試驗(yàn)并進(jìn)行評(píng)估，但存在一定臨床毒性，目前正著力減緩其毒性反應(yīng)并致力于與其他形式的免疫治療結(jié)合以增強(qiáng)其療效［29］。

Siglec-10 在B 細(xì)胞激活中起重要免疫調(diào)節(jié)作用，Siglec-10 及其同源物Siglec-G 分別在人和小鼠B細(xì)胞表達(dá)［30］。YIN 等［31］研究發(fā)現(xiàn)Siglec-G 可抑制B1細(xì)胞增殖和鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，并抑制轉(zhuǎn)錄因子NFATc1和NF-κB 活性，與CD24 結(jié)合后，激活絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）相關(guān)通路，誘導(dǎo)B 細(xì)胞凋亡，發(fā)揮免疫抑制作用，Siglec-10 可通過(guò)此通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸。缺失Siglec-G 表達(dá)易引發(fā)B 細(xì)胞淋巴增生性疾病，如B細(xì)胞淋巴瘤/白血?。?2］。Siglec-10/G是B細(xì)胞上重要的抑制性受體，Siglec-G 的抑制功能主要限于B1 細(xì)胞，影響腫瘤發(fā)展，可能成為治療白血病的新一代藥物。

3.1.2 Siglecs 促進(jìn)腫瘤新生血管生成 Siglec-9 作為抑制性受體，在粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、NK 細(xì)胞和T細(xì)胞表達(dá)。Siglec-9可與人類結(jié)腸癌、胰腺癌和乳腺癌等腫瘤細(xì)胞表面的MUC1 黏蛋白結(jié)合，分泌纖溶酶原激活物抑制劑-1（plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1）等腫瘤相關(guān)因子，促進(jìn)腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及新生血管生成［33-35］。此外，Siglec-9 與MUC1 相互作用還可募集細(xì)胞周期相關(guān)蛋白β-catenin 并與之相互作用，使Siglec-9+樹(shù)突狀細(xì)胞表面共刺激分子、抗原提呈分子和成熟表型發(fā)生標(biāo)記丟失，導(dǎo)致其無(wú)法作為抗原提呈細(xì)胞發(fā)揮功能，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞免疫逃逸［36］。Siglec-9+NK細(xì)胞高表達(dá)趨化因子受體CXCR1和CX3CR1，使IL-8 趨化傾向更顯著，而IL-8 對(duì)腫瘤增殖、侵襲及新生血管形成具有顯著促進(jìn)作用［37］。

3.2 Siglecs免疫調(diào)控作用

3.2.1 Siglecs 介導(dǎo)抗原提呈作用 Siglec-1 主要在巨噬細(xì)胞表面表達(dá)，在巨噬細(xì)胞抗原提呈中具有重要作用，表達(dá)Siglec-1 的巨噬細(xì)胞可將死亡的腫瘤細(xì)胞抗原交叉呈遞給CD8+T 細(xì)胞，從而活化細(xì)胞毒性T細(xì)胞，促進(jìn)抗腫瘤免疫應(yīng)答［38］。阻斷Siglec-1會(huì)抑制小鼠CD8+T 細(xì)胞活性，影響免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷清除。DING 等［39］研究顯示，Siglec-G 缺陷小鼠通過(guò)增加樹(shù)突狀細(xì)胞表面MHCⅠ類肽復(fù)合物形成增強(qiáng)樹(shù)突狀細(xì)胞交叉呈遞，從而增強(qiáng)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞反應(yīng)，抑制黑色素瘤生長(zhǎng)。但人Siglec-1+巨噬細(xì)胞能否交叉呈遞抗原并激活T細(xì)胞應(yīng)答尚不清楚。

3.2.2 Siglecs 抑制腫瘤相關(guān)T 細(xì)胞增殖活化 研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌中Siglec-1+巨噬細(xì)胞與腫瘤浸潤(rùn)性CD8+T 細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)，更好應(yīng)答新輔助化療［17］。提示Siglec-1+巨噬細(xì)胞可能是增強(qiáng)抗腫瘤免疫的理想靶點(diǎn)。

黑色素瘤中，HAAS 等［22］發(fā)現(xiàn)多數(shù)腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8+T 細(xì)胞表達(dá)Siglec-9，且Siglec-9 介導(dǎo)的信號(hào)通路優(yōu)先與SHP-1 結(jié)合，抑制CD8+T 細(xì)胞TCR 信號(hào)通路和細(xì)胞毒性等。NSCLC患者中，Siglec-9在浸潤(rùn)性CD8+T 細(xì)胞上的表達(dá)與生存率降低相關(guān)，且其多態(tài)性與癌癥發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，單價(jià)Fab 片段抗體可抑制Siglec-9與其配體相互作用，增強(qiáng)T細(xì)胞活性［21］。

Siglec-10 可抑制TCR 介導(dǎo)的T 細(xì)胞活化，研究表明，在T 細(xì)胞表面表達(dá)的Siglec-10 可抑制MHCⅠ類分子和T 細(xì)胞受體相關(guān)激酶ZAP-70 磷酸化，通過(guò)ITIM 基序抑制T 細(xì)胞信號(hào)，從而抑制T 細(xì)胞活化［40-41］。此外，Siglec-10 還可與CD24 或CD52 結(jié)合，抑制TCR 相關(guān)激酶抑制T 細(xì)胞激活，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸［42］。

WANG 等［43］研究證明一些腫瘤細(xì)胞表面可異位高表達(dá)Siglec-15，發(fā)現(xiàn)在體外Siglec-15 可抑制CD8+T細(xì)胞增殖和激活，并在Siglec15缺陷小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)。小鼠黑色素瘤模型中，缺乏Siglec-15 的腫瘤細(xì)胞可促進(jìn)T 細(xì)胞反應(yīng)，減緩腫瘤生長(zhǎng)，提高小鼠總生存率。此外，Siglec-15還可通過(guò)誘導(dǎo)TGF-β 促進(jìn)調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞分化，從而抑制T 細(xì)胞重塑免疫抑制TME［44］。人肺癌組織中，Siglec-15 和PD-L1 表達(dá)相互排斥。提示Siglec15 可能在TME 中發(fā)揮作用，有助于免疫抑制微環(huán)境形成［45］。因此，Siglec-15 可能是PD-1/PD-L1 通路外另一個(gè)免疫正?；男掳悬c(diǎn)。對(duì)PD-1/PD-L1 抗體無(wú)反應(yīng)的患者，靶向Siglec-15 可能是一種有效的替代療法。目前，雖然結(jié)束了Siglec-15 單抗NC318 治療NSCLC 和卵巢癌的1/2 期臨床試驗(yàn)，但對(duì)頭頸癌（HNSCC）及三陰性乳腺癌患者的臨床試驗(yàn)則繼續(xù)進(jìn)行，招募表達(dá)Siglec-15 的患者并啟動(dòng)2 期臨床試驗(yàn)，此外，還將進(jìn)行Siglec15 抑制劑與其他免疫療法聯(lián)合治療研究。

3.2.3 Siglecs 抑制NK 細(xì)胞的殺傷作用 HERNáNDEZ-CASELLES 等［46］證 明Siglec-3 通 過(guò)Vav1 信號(hào)通路導(dǎo)致SHP-1 分子去磷酸化，特異性拮抗DAP10 偶聯(lián)的特異性激活受體NKG2D 或2B4 介導(dǎo)的細(xì)胞毒性反應(yīng)，在NK 細(xì)胞的細(xì)胞毒性和NKG2D/DAP10 通路中均起細(xì)胞內(nèi)介質(zhì)作用，進(jìn)而抑制NK細(xì)胞殺傷作用。因此，Siglec-3 可作為NKG2D/DAP10 通路的抑制性受體，在針對(duì)腫瘤和感染細(xì)胞的持續(xù)免疫應(yīng)答中發(fā)揮作用，保護(hù)自身細(xì)胞，并避免自身免疫。

Siglec-7 和Siglec-9 參與抑制NK 細(xì)胞在體外介導(dǎo)的殺傷腫瘤細(xì)胞能力，KAWASAKI 等［47］研究發(fā)現(xiàn)，NK 細(xì)胞的Siglec-7 分子可與腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma，RCC）細(xì)胞表面表達(dá)的神經(jīng)節(jié)苷脂DSGb5結(jié)合，導(dǎo)致NK 細(xì)胞對(duì)RCC 細(xì)胞的毒性降低。此外，Siglec-7 還與腫瘤細(xì)胞表達(dá)的神經(jīng)節(jié)苷脂GD3 相互作用抑制NK 細(xì)胞的殺傷活性［48］。因此，Siglec-7 的信號(hào)傳遞是免疫檢查點(diǎn)之一，可作為靶點(diǎn)增強(qiáng)NK細(xì)胞抗腫瘤活性［6，49］。部分NK 細(xì)胞也表達(dá)抑制性Siglec-9。JANDUS 等［37］發(fā)現(xiàn)黑色素瘤、白血病患者外周血NK 細(xì)胞Siglec-9 表達(dá)上調(diào)主要發(fā)生于CD56dimCD16+亞群，該亞群NK 細(xì)胞表現(xiàn)出更低的細(xì)胞毒性，同時(shí)腫瘤細(xì)胞Siglec-9配體表達(dá)增加，對(duì)NK細(xì)胞殺傷的敏感性降低，阻斷Siglec-9信號(hào)后，NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用明顯增強(qiáng)。目前已發(fā)現(xiàn)唾液酸酶治療后，乳腺、腦、結(jié)腸、肝臟或淋巴組織Siglec-7高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞對(duì)NK細(xì)胞殺傷的敏感性增強(qiáng)。唾液酸酶與靶向HER2抗體的體外融合增強(qiáng)了NK 細(xì)胞對(duì)HER2+腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。阻斷Siglec-7 和Siglec-9 配體可增強(qiáng)NK 細(xì)胞介導(dǎo)的殺傷作用［50］。目前正在開(kāi)展該靶點(diǎn)的藥物開(kāi)發(fā)，尚處于早期研究階段，但具有一定治療潛力。

3.2.4 Siglecs 影 響TAMs 功能Siglec-1具有雙重生物學(xué)作用，在肝細(xì)胞癌體外研究中，Siglec-1+巨噬細(xì)胞可明顯增強(qiáng)CD8+T 細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞因子產(chǎn)生，并與更好的臨床預(yù)后相關(guān)［51］。但在三陰性乳腺癌小鼠中，乳腺癌細(xì)胞可通過(guò)激活JAK2 信號(hào)促進(jìn)Siglec-1+巨噬細(xì)胞PD-L1 表達(dá)，促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。清除Siglec-1+巨噬細(xì)胞后，乳腺腫瘤和肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)微環(huán)境中CD8+T 細(xì)胞浸潤(rùn)增強(qiáng)，抑制原位腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移［52］。因此，需進(jìn)一步研究揭示Siglec-1+巨噬細(xì)胞在不同TME 中的復(fù)雜作用和機(jī)制及其參與調(diào)節(jié)的信號(hào)通路和關(guān)鍵細(xì)胞因子，以闡明巨噬細(xì)胞在不同腫瘤中的作用。

Siglec-9在癌癥進(jìn)展過(guò)程中具有雙重功能，這取決于腫瘤生長(zhǎng)的階段及其微環(huán)境。小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，在腫瘤和新的轉(zhuǎn)移灶形成過(guò)程中，缺乏Siglec-E可導(dǎo)致一過(guò)性短暫的免疫監(jiān)視增強(qiáng)，然而，腫瘤形成后，Siglec-E 缺陷可使TAMs 更易向促腫瘤的M2型巨噬細(xì)胞分化，從而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)，清除巨噬細(xì)胞后則逆轉(zhuǎn)了這種作用，可能由于Siglec-E 配體可直接抑制促腫瘤的M2 巨噬細(xì)胞形成，并將其重新編碼成抗腫瘤表型［53］。RODRIGUEZ 等［54］研究表明，胰腺導(dǎo)管腺癌患者α-2，3 唾液酸表達(dá)增加并分泌TME，通過(guò)上調(diào)CD206、PD-L1 和IL-10 和IL-6 等免疫抑制因子激活Siglec-9 受體驅(qū)動(dòng)單核細(xì)胞極化和分化，產(chǎn)生免疫抑制的TAMs，從而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。

Siglec-10 在卵巢癌和乳腺癌患者TAMs 上表達(dá)，可與腫瘤細(xì)胞表達(dá)的CD24 特異性結(jié)合。使用單克隆抗體阻斷CD24 或Siglec-10 可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞的能力，減緩腫瘤生長(zhǎng)。當(dāng)CD24 與Siglec-10 結(jié)合時(shí)，Siglec-10 招募并激活含有SH2 結(jié)構(gòu)域的蛋白，尤其是SHP-1 和SHP-2，觸發(fā)信號(hào)級(jí)聯(lián)，使ITIM 區(qū)域磷酸化，從而阻斷Toll 樣受體介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，激活一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路，負(fù)調(diào)控細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，抑制巨噬細(xì)胞吞噬作用，促進(jìn)腫瘤免疫逃逸［23］。CD24-Siglec-10 作為一種天然免疫檢查點(diǎn)，是介導(dǎo)抗腫瘤免疫的關(guān)鍵，可更好地預(yù)測(cè)哪些患者可能對(duì)治療產(chǎn)生反應(yīng)，并為治療提供依據(jù)，目前已研發(fā)出針對(duì)CD24-Siglec-10 的藥物，并有望用于臨床治療。

人Siglec-15 在腫瘤細(xì)胞和/或腫瘤浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞/髓系細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，而在正常組織的巨噬細(xì)胞中表達(dá)降低。Siglec-15 由M-CSF 誘導(dǎo)產(chǎn)生，能識(shí)別人類癌癥中普遍表達(dá)的Sialyl-Tn（sTn）抗原。過(guò)表達(dá)sTn 合酶的肺癌細(xì)胞與過(guò)表達(dá)Siglec-15 的THP-1巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞共培養(yǎng)，M-CSF誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞表達(dá)Siglec-15，而在M1 型巨噬細(xì)胞則不上調(diào)，并通過(guò)DAP12-Syk 途徑產(chǎn)生TGF-β，促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移［25］。除sTn 或相關(guān)抗原序列外，Siglec-15 與唾液酸化聚糖具有更高的親和力，推測(cè)可能在Siglec-15 的信號(hào)功能中發(fā)揮重要作用［55］。

3.2.5 Siglecs 抑制腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞殺傷作用 Siglec-9陽(yáng)性中性粒細(xì)胞可促進(jìn)腫瘤免疫逃逸。結(jié)直腸癌體外研究顯示，Siglec-9 可誘導(dǎo)SHP-1 募集并抑制中性粒細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷，使用抗體阻斷后抑制作用減弱［56］。小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，Siglec-E缺陷小鼠中性粒細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷力增強(qiáng)，對(duì)自體腫瘤的免疫監(jiān)視增強(qiáng)［53］。

4 小結(jié)

Siglecs 家族的作用目前仍在探索，除在腫瘤中促進(jìn)免疫逃逸外，還在骨質(zhì)疏松、感染性疾病、過(guò)敏反應(yīng)中發(fā)揮作用，即Siglecs 與其配體相互作用可能有不同功能，取決于抑制或激活Siglecs 家族成員、其表達(dá)的免疫細(xì)胞亞群、腫瘤類型、物種以及TME中其他激活或抑制信號(hào)提供的背景。目前已逐步開(kāi)展針對(duì)Siglecs 家族的腫瘤靶向免疫治療，如一些特異性抗體和人工合成的糖鏈類似物，由于TME 中的因子可調(diào)節(jié)癌細(xì)胞中唾液酸聚糖表達(dá)以及免疫細(xì)胞亞群Siglecs 表達(dá)，因此，免疫治療使用Siglecs阻斷前需進(jìn)一步研究Siglecs 在多種細(xì)胞類型表達(dá)的不同功能及其促進(jìn)腫瘤免疫逃逸的機(jī)制，以減少腫瘤藥物的不良反應(yīng)；還可與其他方式聯(lián)合治療使其發(fā)揮協(xié)同作用，更高強(qiáng)度地殺死腫瘤細(xì)胞，更有效地治療腫瘤。