張秋，王如玉，范慧芬，孫凱麗，劉元浪，夏云翔，徐秀麗，盧佳，李新國(guó)

武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司，湖北 武漢 430207

冠狀病毒屬于冠狀病毒科，為包膜陽(yáng)性單鏈RNA病毒，在人類和動(dòng)物中可引起輕度至重度的呼吸道、腸道和神經(jīng)系統(tǒng)疾?。?］。嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）是一種β 冠狀病毒，也是引起2019年新型冠狀病毒肺炎（Coronavirus Disease 2019，COVID-19）的病原體［2-3］。自2019 年12 月COVID-19大流行暴發(fā)以來(lái)，SARS-CoV-2 的變種反復(fù)出現(xiàn)。一些變異已在世界范圍內(nèi)傳播，并對(duì)不同地區(qū)發(fā)生周期性的感染傳播具有重大影響。在2020 年10—12月期間，全球出現(xiàn)了高關(guān)注變異株（variant of concern，VOC），這些VOC（Alpha、Beta、Delta）表現(xiàn)出更強(qiáng)的傳播能力或免疫逃逸特性，并在許多國(guó)家推動(dòng)了疫情的復(fù)蘇，增加了全球大流行的控制難度，其中高傳染性的Delta 變異株隨后取代了世界大多數(shù)地區(qū)的所有其他VOC［4］。直至2021 年11 月，世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）報(bào)告了新的突變株Omicron，Omicron 變異株與原型株比較，發(fā)生了53個(gè)突變點(diǎn)，僅刺突糖蛋白（spike glycoprotein，簡(jiǎn)稱S 蛋白）編輯基因序列上即有30 個(gè)突變位點(diǎn)，且其中13個(gè)在其他VOC 中很少見(jiàn)，這些突變點(diǎn)聚集在刺突基因的3 個(gè)功能上重要的區(qū)域，這些區(qū)域可能會(huì)影響S蛋白三聚體亞基之間的相互作用以及亞基從下向上轉(zhuǎn)變的傾向，S 蛋白與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（angiotensin-converting enzyme 2，ACE2）受體的相互作用，以及S 蛋白啟動(dòng)膜融合，這些位點(diǎn)的突變可能彼此相互作用，這些相互作用的綜合效應(yīng)可能是適應(yīng)性的，鑒于Omicron相對(duì)于所有先前已知的SARS-CoV-2變異株具有明顯的流行上升優(yōu)勢(shì)，繼而在全球SARSCoV-2 感染中占據(jù)主導(dǎo)地位［5-7］。截至2022 年10 月，全球已向WHO 報(bào)告了超過(guò)6.17 億例確診病例和653萬(wàn)例死亡病例（https：／／covid19.who.int／）。

迄今為止，雖然相繼報(bào)道了幾種動(dòng)物模型（小鼠、金黃地鼠、雪貂、狗和貓、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物等）易感SARS-CoV-2，其中金黃地鼠、雪貂和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物感染后會(huì)發(fā)展為輕度至中度病毒性疾病，并會(huì)自發(fā)恢復(fù)，但無(wú)一種動(dòng)物模型能完整地概括COVID-19 所有病理特征［8-13］。SARS-CoV-2 通過(guò)病毒S 蛋白與ACE2 之間的相互作用與靶細(xì)胞結(jié)合，ACE2 被認(rèn)為是主要的宿主進(jìn)入受體［14-16］。ACE2與S蛋白的相互作用對(duì)于宿主趨向性至關(guān)重要，ACE2的小鼠同源物與SARS-CoV-2 的S 蛋白不相容，因此，典型的野生型小鼠品系對(duì)SARS-CoV-2 不敏感，需在小鼠體內(nèi)異源表達(dá)人ACE2（hACE2）。K18-hACE2 小鼠是在人細(xì)胞角蛋白18（keratin 18，K18）啟動(dòng)子調(diào)控下在上皮細(xì)胞中表達(dá)hACE2［17］，不同于其他動(dòng)物模型感染后只產(chǎn)生短暫的、輕度或中度肺部感染等非致死性特征［13］，K18-hACE2小鼠通過(guò)鼻內(nèi)接種感染SARSCoV-2 后會(huì)致死，與人類嚴(yán)重COVID-19 具有許多共同特征，感染后除肺部能檢測(cè)到高病毒載量，其他器官（如大腦、鼻甲等）也能檢測(cè)到不同水平的病毒［8，18-19］，早期報(bào)告顯示，致死率主要與重度肺部炎癥和呼吸功能受損有關(guān)［13，20］。但神經(jīng)侵入和神經(jīng)傳播的混雜影響及其在SARS-CoV-2 感染K18-hACE2 小鼠臨床衰退中的作用也逐漸得到進(jìn)一步認(rèn)可［21-22］。因此，K18-hACE2 小鼠感染SARS-CoV-2 后觀察到的疾病嚴(yán)重程度為研究疾病和評(píng)價(jià)抗病毒藥物提供了有效的模型。

本研究通過(guò)滴鼻途徑探討SARS-CoV-2 不同毒株（Prototype、Delta、Beta、Omicron BA.1）對(duì)K18-hACE2小鼠的感染效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 病毒株 SARS-CoV-2 原型株（Prototype）及VOC株Delta（B.1.617.2）、Beta（B.1.351）、Omicron BA.1（B.1.1.529）均由武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF 級(jí)K18-hACE2 小鼠，雄性，6~8周齡，體質(zhì)量22~25 g，由江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK（蘇）20180008。動(dòng)物飼養(yǎng)于武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司生物安全三級(jí)實(shí)驗(yàn)室ABSL-3小動(dòng)物室，動(dòng)物使用許可證：SYXK（鄂）2021-0117，并獲得武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)文號(hào)：WIBP-AⅡ442021007）開(kāi)展相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

1.3 主要試劑及儀器 4%多聚甲醛固定液購(gòu)自武漢塞維爾生物科技有限公司；異氟烷購(gòu)自深圳瑞沃德生命科技有限公司；新型冠狀病毒2019-nCoV 核酸檢測(cè)試劑盒和全自動(dòng)核酸提取儀均購(gòu)自廣州達(dá)安基因股份有限公司；冷凍型高通量組織研磨器購(gòu)自寧波新芝生物科技股份有限公司。

1.4 動(dòng)物分組及處理 共選取112 只K18-hACE2 小鼠，隨機(jī)分為4 組：SARS-CoV-2 原型株P(guān)rototype 組（攻毒劑量分別為1、5、25、125 CCID50）、變異株Delta組（攻毒劑量分別為1、5、25 CCID50）、變異株Beta 組（攻毒劑量分別為1、5、25、125 CCID50）和變異株Omicron BA.1組（攻毒劑量分別為1、5、25、125、625 CCID50），每組每個(gè)劑量均6只，未感染小鼠每組4只。小鼠用異氟烷麻醉后，采用滴鼻方式進(jìn)行攻毒，每日監(jiān)測(cè)體質(zhì)量，并觀察感染后小鼠的狀態(tài)，觀察周期變異株Beta組為6 d，其他3組為14 d。

1.5 半數(shù)致死量（LD50）的計(jì)算 利用IBM SPSS Statistics 26 軟件［19］，采用機(jī)率單位加權(quán)回歸法（Bliss 法）計(jì)算LD50。

1.6 組織病毒核酸載量檢測(cè) 小鼠死亡或感染后第14天進(jìn)行解剖，取肺和腦組織各50 mg、鼻甲100 mg，加入1 mL PBS 和適量鋼珠，通過(guò)冷凍型高通量組織研磨器充分勻漿（4 ℃，50 Hz），勻漿后的組織在4 ℃條件下，11 292×g離心10 min，取上清，-80 ℃保存。按照核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書提取組織勻漿上清RNA，通過(guò)全自動(dòng)核酸提取儀對(duì)組織病毒RNA 載量進(jìn)行檢測(cè)。

1.7 肺組織病理檢測(cè) 組織用4%多聚甲醛固定液充分固定后，進(jìn)行石蠟包埋和切片，切片用蘇木精和伊紅染色（HE 染色），顯微鏡下觀察，對(duì)組織切片進(jìn)行病理評(píng)分，評(píng)價(jià)其組織病理?yè)p傷及病毒感染致病情況。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用GraphPad Prism 8.4.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，體質(zhì)量和病毒載量組間比較采用單因素方差分析、雙因素方差分析、t tests檢驗(yàn)等方法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同毒株感染小鼠的體質(zhì)量變化及存活情況

2.1.1 Prototype 株感染小鼠 感染第4~5 天小鼠體質(zhì)量開(kāi)始下降，出現(xiàn)弓背，顫抖等臨床癥狀。攻毒劑量≥5 CCID50的小鼠感染后第5 ~ 8 天全部死亡，死亡率為100%，小鼠死亡時(shí)體質(zhì)量下降范圍為7.25%~20.06%；1 CCID50劑量組小鼠存活1只，存活小鼠的體質(zhì)量在感染14 d 后恢復(fù)至感染前，且增加2.68%，同組內(nèi)死亡小鼠體質(zhì)量下降范圍為14.03%~ 16.13%。各攻毒劑量組與空白對(duì)照組體質(zhì)量變化比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.010 6~0.045 5）。見(jiàn)圖1A、圖2A 和表1。經(jīng)計(jì)算，感染SARS-CoV-2 Prototype 株的LD50為0.60 CCID50。

圖1 SARS-CoV-2不同毒株感染后小鼠體質(zhì)量的變化Fig.1 Change of body mass of mice infected with different strains of SARS-CoV-2

圖2 SARS-CoV-2不同毒株感染后小鼠的存活情況Fig.2 Survival of mice infected with different strains of SARS-CoV-2

表1 小鼠攻毒后SARS-CoV-2不同毒株的LD50Tab.1 LD50 of different strains of SARS-CoV-2 after challenge in mice

2.1.2 Delta株感染小鼠 感染第5天小鼠體質(zhì)量下降，出現(xiàn)弓背，顫抖等臨床癥狀。感染后第7天，25 CCID50劑量組小鼠全部死亡，死亡率為100%，體質(zhì)量平均下降13.0%；感染后第14 天，5 CCID50劑量組小鼠只有1只存活，死亡率為83.33%，存活小鼠的體質(zhì)量在感染14 d 后恢復(fù)至感染前，且增加5.72%，同組內(nèi)死亡小鼠體質(zhì)量下降范圍為2.08%~8.83%；1 CCID50劑量組小鼠在感染后第14 天有2 只存活，死亡率為66.67%，存活小鼠的體質(zhì)量在感染14 d 后恢復(fù)至感染前，且增加（7.56±2.11）%，同組內(nèi)死亡小鼠體質(zhì)量下降范圍為5.55%~13.92%。各攻毒劑量組未死亡的小鼠在感染后第8 天體質(zhì)量恢復(fù)至感染前。5和25 CCID50劑量組與空白對(duì)照組體質(zhì)量變化比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P分別為0.033 2 和<0.000 1）。見(jiàn)圖1B、圖2B和表1。經(jīng)計(jì)算，感染SARS-CoV-2 Delta株的LD50為0.52 CCID50。

2.1.3 Beta株感染小鼠 感染第3天小鼠體質(zhì)量開(kāi)始下降，出現(xiàn)弓背，顫抖等臨床癥狀。攻毒劑量≥1 CCID50的小鼠感染后第4~6 天全部死亡，死亡率為100%，小鼠死亡時(shí)體質(zhì)量下降范圍為8.58%~21.65%。各攻毒劑量組與空白對(duì)照組體質(zhì)量變化比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.000 1）。見(jiàn)圖1C、圖2C和表1。經(jīng)計(jì)算，感染SARS-CoV-2 Beta株的LD50為<1 CCID50。

2.1.4 Omicron BA.1 株感染小鼠 感染第4~6 天小鼠體質(zhì)量開(kāi)始下降。625 CCID50劑量組小鼠感染后第5~8 天全部死亡，死亡率為100%，小鼠死亡時(shí)體質(zhì)量下降范圍為7.81% ~ 20.65%；125 CCID50劑量組小鼠感染后第6~9天死亡4只，死亡率為67%，體質(zhì)量下降范圍為11.57%~21.00%，存活的2只小鼠感染14 d 后體質(zhì)量恢復(fù)至感染前，且增加（6.06 ±0.91）%；5 和25 CCID50劑量組小鼠分別在感染后第7、8天死亡，且體質(zhì)量分別下降18.03%和14.93%，存活的小鼠在感染14 d后體質(zhì)量恢復(fù)至感染前，且分別增加（5.16 ± 3.57）%和（4.47 ± 2.08）%；625 CCID50劑量組與空白對(duì)照組體質(zhì)量變化比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.000 1）。見(jiàn)圖1D、圖2D 和表1。經(jīng)計(jì)算，感染SARS-CoV-2 Omicron BA.1 株的LD50為52.92 CCID50。

小鼠體質(zhì)量及存活情況顯示，在相同攻毒劑量條件下，SARS-CoV-2 Beta 株感染后第4 天小鼠即出現(xiàn)死亡，表明與其他毒株相比病毒毒力強(qiáng)，且1 CCID50的攻毒劑量感染小鼠死亡率即達(dá)100%，致死率高。病毒毒力強(qiáng)弱其次是Delta株、Prototype株和Omicron BA.1株。感染后未死亡的小鼠在觀察周期末期體質(zhì)量基本均恢復(fù)至攻毒前。

2.2 不同毒株感染小鼠的組織病毒核酸載量

2.2.1 Prototype株感染小鼠 各攻毒劑量組小鼠組織（肺、腦、鼻甲）病毒拷貝數(shù)與對(duì)應(yīng)空白對(duì)照組組織相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.000 1~0.037 2）。且攻毒后肺組織和鼻甲組織中病毒拷貝數(shù)隨著攻毒劑量的增加而遞增，攻毒后腦組織中病毒拷貝數(shù)平均值均在108copies／mL以上。見(jiàn)圖3和表2。

圖3 SARS-CoV-2 Prototype株感染小鼠的肺（A）、腦（B）、鼻甲（C）組織病毒核酸拷貝數(shù)Fig.3 Viral nucleic acid copy number in lung（A），brain（B）and turbinate（C）tissues of mice infected with Prototype strain of SARS-CoV-2

表2 SARS-CoV-2不同毒株攻毒后小鼠組織中的病毒核酸拷貝數(shù)（Log10 copies／mL，Mean±SD，n=6）Tab.2 Viral nucleic acid copy number in tissues of mice challenged with different strains of SARS-CoV-2（Log10 copies／mL，Mean ±SD，n=6）

2.2.2 Delta 株感染小鼠 各攻毒劑量組小鼠組織（肺、腦、鼻甲）病毒拷貝數(shù)與對(duì)應(yīng)空白對(duì)照組組織相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P< 0.000 1 ~ 0.039 6）。腦組織病毒核酸拷貝數(shù)隨著攻毒劑量的增加呈正相關(guān)，相同攻毒劑量組死亡小鼠的腦組織病毒核酸拷貝數(shù)高于存活小鼠。見(jiàn)圖4和表2。

圖4 SARS-CoV-2 Delta株感染小鼠的肺（A）、腦（B）、鼻甲（C）組織病毒核酸拷貝數(shù)Fig.4 Viral nucleic acid copy number in lung（A），brain（B）and turbinate（C）tissues of mice infected with Delta strain of SARSCoV-2

2.2.3 Beta 株感染小鼠 各攻毒劑量組小鼠組織（肺、腦、鼻甲）病毒拷貝數(shù)與對(duì)應(yīng)空白對(duì)照組組織相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.000 1~0.000 7）。攻毒后肺組織中病毒拷貝數(shù)隨著攻毒劑量的增加而遞增，攻毒后死亡小鼠腦組織中病毒拷貝數(shù)平均值可達(dá)1011copies／mL以上，攻毒后鼻甲組織中病毒拷貝數(shù)平均值均在106copies／mL以上。見(jiàn)圖5和表2。

圖5 SARS-CoV-2 Beta株感染小鼠的肺（A）、腦（B）、鼻甲（C）組織病毒核酸拷貝數(shù)Fig.5 Viral nucleic acid copy number in lung（A），brain（B）and turbinate（C）tissues of mice infected with Beta strain of SARSCoV-2

2.2.4 Omicron BA.1株感染小鼠 625 CCID50攻毒劑量組小鼠組織（肺、腦、鼻甲）病毒拷貝數(shù)與對(duì)應(yīng)空白對(duì)照組組織相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.000 1）。且攻毒后肺和鼻甲組織中病毒拷貝數(shù)隨著攻毒劑量的增加而遞增；攻毒劑量≤25 CCID50腦組織中病毒拷貝數(shù)平均值均低于106copies／mL，攻毒劑量≥125 CCID50組死亡小鼠腦組織中病毒拷貝數(shù)平均值高于108copies／mL。見(jiàn)圖6和表2。

圖6 SARS-CoV-2 Omicron BA.1株感染小鼠的肺（A）、腦（B）、鼻甲（C）組織病毒核酸拷貝數(shù)Fig.6 Viral nucleic acid copy number in lung（A），brain（B）and turbinate（C）tissues of mice infected with Omicron BA.1 strain of SARS-CoV-2

組織病毒核酸拷貝數(shù)分析結(jié)果顯示，在所有死亡小鼠大腦中均可檢測(cè)到很高的病毒核酸拷貝數(shù)，表明受感染小鼠嚴(yán)重疾病的發(fā)作與大腦中的病毒水平相關(guān)，SARS-CoV-2 在鼻內(nèi)感染后通過(guò)某種途徑進(jìn)入大腦。不同病毒株感染后，各劑量組小鼠肺組織病毒核酸拷貝數(shù)整體趨勢(shì)呈隨著攻毒劑量的增加而遞增。但與腦組織比較，肺組織病毒載量相對(duì)較低。除Omicron BA.1 外，其他毒株（Prototype、Delta、Beta）的肺組織病毒拷貝數(shù)比其相應(yīng)鼻甲組織病毒拷貝數(shù)低。

2.3 不同毒株感染小鼠的肺組織病理?yè)p傷情況 感染SARS-CoV-2 不同毒株的各劑量組小鼠肺組織出現(xiàn)不同程度的肺部損傷，攻毒劑量越高，病理?yè)p傷程度越嚴(yán)重。低劑量未死亡小鼠肺組織主要是肺間質(zhì)淤血、部分肺泡呈肺氣腫、部分彌漫性的肺靜脈淤血，肺泡壁淤血伴有少量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等癥狀；死亡小鼠肺組織損傷主要涉及肺泡、間質(zhì)和血管周圍室，以輕度至中度淋巴組織細(xì)胞和輕度中性粒細(xì)胞性間質(zhì)性肺炎為特征；可見(jiàn)局部肺泡壞死，肺泡腔內(nèi)可見(jiàn)紅細(xì)胞淤積及壞死細(xì)胞碎片，肺泡壁充血、水腫，部分血管內(nèi)可見(jiàn)炎癥細(xì)胞團(tuán)。結(jié)合肺組織病理情況分析，病理?yè)p傷嚴(yán)重程度：Beta 株> Delta 株>Prototype 株>Omicron BA.1株，其中Omicron BA.1株肺組織損傷程度相較于其他毒株明顯減輕，表明Omicron BA.1 株病毒感染主要集中于上呼吸道。見(jiàn)表3和圖7。

圖7 SARS-CoV-2不同毒株感染后小鼠肺組織病理?yè)p傷情況（HE染色，×20）Fig.7 Pathological damage of lung tissue in mice infected with different strains of SARS-CoV-2（HE staining，×20）

表3 SARS-CoV-2不同毒株感染小鼠肺組織病理結(jié)果分析Tab.3 Pathological results of lung tissue in mice infected with different strains of SARS-CoV-2

3 討論

SARS-CoV-2 已發(fā)現(xiàn)多種突變株，給全球公共衛(wèi)生安全帶來(lái)巨大挑戰(zhàn)。SARS-CoV-2 感染后可引起肺炎、急性呼吸窘迫綜合征、急性肺損傷、細(xì)胞因子風(fēng)暴綜合征，甚至死亡［23-24］。動(dòng)物模型的發(fā)展有助于深入了解其發(fā)病機(jī)制以及加快藥物和疫苗的研發(fā)，特別是VOC 的不斷出現(xiàn)，對(duì)于控制COVID-19 疫情蔓延至關(guān)重要。K18-hACE2 小鼠模型已成為一種使用廣泛的實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物模型，適用于研究SARSCoV-2發(fā)病機(jī)制以及評(píng)估針對(duì)COVID-19的醫(yī)學(xué)對(duì)策的有效性［25］。本研究利用K18-hACE2 小鼠，結(jié)合各毒株的流行趨勢(shì)（主要以致死率及傳播感染能力為主），設(shè)置不同滴度的攻毒劑量，通過(guò)滴鼻感染途徑比較SARS-CoV-2 不同毒株（Prototype、Delta、Beta、Omicron BA.1）的感染情況，根據(jù)動(dòng)物存活情況分別計(jì)算SARS-CoV-2 不同毒株的LD50并進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)Beta 株的毒力最強(qiáng)，致死性高，傳播性較其他毒株較弱，這也是Beta 株漸漸被其他傳播感染能力強(qiáng)的毒株取代的原因。本研究表明，K18-hACE2 小鼠感染后，病毒在肺組織中有一定的復(fù)制能力，且在肺組織發(fā)生了輕度至中度肺部病變，同時(shí)在所有死亡小鼠的大腦組織中檢測(cè)到較高水平的病毒復(fù)制，可能神經(jīng)傳播相關(guān)的致命性疾病導(dǎo)致了死亡。其中，在K18-hACE2 小鼠的肺組織病毒核酸復(fù)制相對(duì)較低，表明hACE2 表達(dá)可能不是SARS-CoV-2 易感性的唯一宿主決定因素。雖然之前報(bào)道在K18 調(diào)控下，hACE2基因主要在肺和腸中表達(dá)，在腎臟、肝臟、脾臟和小腸中表達(dá)程度較低，在大腦中的表達(dá)水平相對(duì)較小［26］，但hACE2在K18-hACE2 小鼠組織中的細(xì)胞分布在很大程度上仍未確定，此前相關(guān)報(bào)道表明，K18-hACE2 小鼠模型中疾病的性質(zhì)、嚴(yán)重程度和結(jié)果不僅由hACE2的表達(dá)和組織分布決定，且與神經(jīng)傳播的致死性有關(guān)，部分原因是嗅神經(jīng)上皮中的區(qū)域ACE2過(guò)表達(dá)，通過(guò)嗅神經(jīng)的軸突運(yùn)輸促進(jìn)神經(jīng)侵入，導(dǎo)致神經(jīng)元變性和壞死［27］。本研究進(jìn)一步驗(yàn)證了導(dǎo)致小鼠死亡的原因可能是病毒通過(guò)某種途徑進(jìn)入腦組織中，引起神經(jīng)傳播相關(guān)的致命性疾病。

自疫情暴發(fā)以來(lái)，SARS-CoV-2 就表現(xiàn)出明顯的突變多樣性，病毒突變株不斷出現(xiàn)。2021 年11 月，WHO首次報(bào)道了Omicron變異株，其引發(fā)了新一波感染，迅速席卷全球，并在全球SARS-CoV-2感染中占主導(dǎo)地位。相關(guān)研究評(píng)估了Omicron BA.1 株與包括人類在內(nèi)的27個(gè)物種的ACE2受體的結(jié)合，發(fā)現(xiàn)Omicron BA.1已將其受體結(jié)合譜擴(kuò)展到了果子貍、嚙齒動(dòng)物、多種蝙蝠以及一些刺猬中，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)Omicron BA.1的宿主范圍比SARS-CoV-2 原始毒株更廣［28］。隨著Omicron 變異株的不斷更新，僅Omi-cron BA.2 在全球引起激增的幾周后，BA.4 和BA.5 也在全球出現(xiàn)，是Omicron不斷增長(zhǎng)的冠狀病毒亞型家族最新成員，與Omicron BA.1 株相比，這兩種變體與BA.2 更為相似，但BA.4和BA.5攜帶自己獨(dú)特的突變，包括病毒S蛋白中L452R 和F486V 的突變點(diǎn)，這些突變點(diǎn)可能會(huì)改變其與宿主細(xì)胞結(jié)合的能力，從而繞過(guò)某些免疫反應(yīng)［29］。因此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)Omicron 突變株的監(jiān)測(cè)，以監(jiān)測(cè)其與更廣泛物種的受體結(jié)合，防止其進(jìn)一步向其他潛在宿主的溢出和擴(kuò)張，從而導(dǎo)致SARS-CoV-2的長(zhǎng)期大流行。