覃曉琳, 陳洋, 薛耀華, 徐青青, 歐江麗, 許巧珍, 吳興中,陳文韜, 尹笑納, 周涵, 張自巖, 劉丹, 黃進(jìn)梅, 鄭和平

1.南方醫(yī)科大學(xué)皮膚病醫(yī)院, 2.廣州市性傳播疾病精準(zhǔn)防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510091

沙眼衣原體(Chlamydiatrachomatis,Ct)感染是全球流行率最高的細(xì)菌性性傳播感染,每年估計(jì)有1.3億新增病例,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)[1-2]。其中超過(guò)70%的女性泌尿生殖道感染者、80%的男性泌尿生殖道感染者和90%的直腸和咽部感染者為無(wú)癥狀感染[3-4]。如果不及時(shí)篩查與治療,不僅會(huì)加劇Ct的傳播和流行[3],還可導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥,如男性可引起非淋球菌性尿道炎、附睪炎和直腸炎,女性可導(dǎo)致宮頸炎、盆腔炎、不孕和宮外孕等,同時(shí)Ct感染還可促進(jìn)HIV的感染和傳播[4-6]。

我國(guó)生殖道Ct感染發(fā)病率從2015年的37.18/10萬(wàn)增至2019年的55.32/10萬(wàn),年均增長(zhǎng)10.44%[7]。近年來(lái),廣東省生殖道Ct感染率呈快速上升趨勢(shì),位居我省5種法定性病(生殖道Ct、梅毒、淋病、尖銳濕疣和生殖器皰疹感染)報(bào)病之首[8]。室間質(zhì)評(píng)是多家不同實(shí)驗(yàn)室對(duì)相同樣本進(jìn)行檢測(cè),評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,可客觀反映各實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力,同時(shí)可以評(píng)價(jià)不同實(shí)驗(yàn)方法和試劑品牌的檢測(cè)性能,提高識(shí)別檢測(cè)誤差的能力[9-11],對(duì)于提高Ct檢出率和實(shí)驗(yàn)室診斷質(zhì)量非常重要。南方醫(yī)科大學(xué)皮膚病醫(yī)院作為廣東省皮膚性病防治中心,自2003年起開(kāi)展性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化建設(shè)工作與質(zhì)量控制體系建設(shè)[12]。為了提高廣東省性病實(shí)驗(yàn)室Ct檢測(cè)質(zhì)量和能力,2021年本中心組織全省694家醫(yī)療機(jī)構(gòu)開(kāi)展了Ct檢測(cè)室間質(zhì)評(píng)活動(dòng),現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 質(zhì)評(píng)對(duì)象

廣東省21個(gè)地市共694家實(shí)驗(yàn)室參與沙眼衣原體室間質(zhì)評(píng),包括二級(jí)及以上級(jí)別醫(yī)療機(jī)構(gòu)388家,婦幼機(jī)構(gòu)82家,皮防慢病機(jī)構(gòu)79家,一級(jí)或其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)145家。其中規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室537家,普通性病實(shí)驗(yàn)室157家[9]。

1.2 質(zhì)控樣本

質(zhì)控樣本由廣東省皮膚性病防治中心省性病中心實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)制備。使用的Ct D型由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病防治中心尹躍平教授提供,并在HeLa細(xì)胞中培養(yǎng)。收集Ct感染細(xì)胞上清液中的原體和細(xì)胞中的網(wǎng)狀體,56 ℃水浴滅活30 min。對(duì)樣品進(jìn)行超聲處理并經(jīng)0.45 μm濾器過(guò)濾去除碎片。為了更好地模擬臨床樣本,本次質(zhì)控品使用臨床不含有Ct但含有其他病原體(淋球菌、念珠菌、生殖支原體、HPV和解脲脲原體等)的宮頸/陰道或尿道分泌物制備成混懸稀釋液,梯度稀釋Ct陽(yáng)性培養(yǎng)物制備成3份陽(yáng)性質(zhì)評(píng)樣品,包括強(qiáng)陽(yáng)、中等和弱陽(yáng)性樣本;另2份陰性樣品為上述不含Ct的宮頸/陰道或尿道分泌物稀釋液。采用羅氏和上海科華2種不同品牌核酸檢測(cè)試劑盒及凱創(chuàng)和艾博2種不同品牌快速檢測(cè)試劑盒對(duì)質(zhì)控品進(jìn)行靶值檢測(cè)。調(diào)試好的質(zhì)控品經(jīng)過(guò)分裝、冷凍干燥后由公司密封包裝貼標(biāo)簽。使用廣東省性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)評(píng)信息系統(tǒng)對(duì)每個(gè)樣品進(jìn)行隨機(jī)唯一編號(hào)。凍干樣品可在4 ℃或-20 ℃下穩(wěn)定3年以上,并定期監(jiān)測(cè)確保樣品的有效性和穩(wěn)定性。

1.3 方法

1.3.1 質(zhì)評(píng)方法 質(zhì)控樣本經(jīng)冷鏈運(yùn)輸至各參評(píng)實(shí)驗(yàn)室。各實(shí)驗(yàn)室收到質(zhì)控樣本后,在規(guī)定時(shí)間內(nèi)按照日常Ct檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè),不限方法。通過(guò)我省性病實(shí)驗(yàn)室管理信息系統(tǒng)上報(bào)結(jié)果,上報(bào)前需更新參評(píng)實(shí)驗(yàn)室所在機(jī)構(gòu)的性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)室等級(jí)等基本信息,結(jié)果上報(bào)內(nèi)容包括樣本編號(hào)、檢測(cè)結(jié)果、使用方法和試劑品牌等。由本中心負(fù)責(zé)結(jié)果分析和統(tǒng)計(jì),并形成結(jié)果通報(bào)進(jìn)行反饋。

1.3.2 預(yù)期值確定 本次質(zhì)控品Ct預(yù)期值包括3份陽(yáng)性,2份陰性。 當(dāng)回報(bào)結(jié)果與預(yù)期結(jié)果一致得2分,不一致得0分?？荚u(píng)結(jié)果采用百分制,所有考核項(xiàng)目換算成百分制得分之和除以考核項(xiàng)目數(shù),即為考核總得分,總分60分及以上為合格。符合率=考核項(xiàng)目得分/考核項(xiàng)目總分×100%。合格率=合格數(shù)/參評(píng)機(jī)構(gòu)數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 不同性質(zhì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)Ct檢測(cè)能力比較

694家性病實(shí)驗(yàn)室均回報(bào)結(jié)果,總體符合率為96.11%,合格率98.70%。參與機(jī)構(gòu)中二級(jí)及以上醫(yī)療機(jī)構(gòu)占比最高(55.91%)。比較不同性質(zhì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)Ct實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力發(fā)現(xiàn),皮防系統(tǒng)(或慢病系統(tǒng))結(jié)果符合率最高(98.23%),一級(jí)或其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)符合率則相對(duì)較低(94.90%);婦幼機(jī)構(gòu)合格率(100%)最高(表1)。

表1 不同性質(zhì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)參加Ct實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力分析

2.2 不同類型性病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比較

2.3 不同級(jí)別性病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法比較

表2 不同級(jí)別性病實(shí)驗(yàn)室不同檢測(cè)方法實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力分析

2.4 不同檢測(cè)方法結(jié)果分析

表3 廣東省不同Ct質(zhì)控標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力結(jié)果分析

3 討論

室間質(zhì)評(píng)是第三方機(jī)構(gòu)將質(zhì)控標(biāo)本以盲樣的形式發(fā)到各參評(píng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè),目的是評(píng)價(jià)不同實(shí)驗(yàn)室對(duì)同一樣本檢測(cè)結(jié)果的一致性,從而提高參評(píng)實(shí)驗(yàn)室Ct檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性[9-11]。廣東省性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化建設(shè)自2003年開(kāi)展至今[12],已建成由540家規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室組成的性病實(shí)驗(yàn)室與質(zhì)量控制網(wǎng)絡(luò);Ct室間質(zhì)評(píng)從2004年開(kāi)始在全省范圍開(kāi)展,參評(píng)實(shí)驗(yàn)室從2004年的19家[13]增至2021年的694家,且總體符合率從75.4%提升至96.11%。隨著室間質(zhì)評(píng)的持續(xù)開(kāi)展,廣東省Ct實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力穩(wěn)步提升[14]。

不同醫(yī)療機(jī)構(gòu)Ct檢測(cè)能力有所不同,本次室間質(zhì)評(píng)中皮防系統(tǒng)(或慢病系統(tǒng))總體符合率最高,其次是婦幼機(jī)構(gòu)和二級(jí)及以上醫(yī)療機(jī)構(gòu),而一級(jí)及其他醫(yī)療機(jī)構(gòu)總體符合率最低,提示皮防慢病機(jī)構(gòu)作為廣東省性病防治專業(yè)機(jī)構(gòu),具有更高的Ct檢測(cè)能力,對(duì)推動(dòng)各地市性病防治工作具有重要意義;同時(shí),綜合醫(yī)院隨著等級(jí)的提升,Ct檢測(cè)能力也隨之提升。

規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和完善的實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系是性病實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保障的基礎(chǔ)[9]。廣東省經(jīng)過(guò)多年的性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化建設(shè)及管理實(shí)踐,對(duì)本省性病實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量提高具有重要推動(dòng)作用。本次質(zhì)評(píng)顯示,全省規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室的室間質(zhì)評(píng)得分顯著高于普通性病實(shí)驗(yàn)室,提示性病實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化建設(shè)和質(zhì)量管理的重要性。

有研究表明核酸檢測(cè)方法對(duì)淋病、衣原體、生殖器分枝桿菌、滴蟲病和有癥狀的HSV-1和HSV-2的診斷具有較高的敏感性(86.1%～100%)和特異性(97.1%～100%)[4]。核酸擴(kuò)增方法具有靈敏度和特異性高等優(yōu)點(diǎn),被認(rèn)為是Ct感染檢測(cè)的首選方法和“擴(kuò)大金標(biāo)準(zhǔn)”[14-18]。但由于核酸檢測(cè)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件、環(huán)境、設(shè)備及人員要求較高,我國(guó)Ct核酸檢測(cè)方法尚未廣泛開(kāi)展[14,18]。本次室間質(zhì)評(píng)回報(bào)結(jié)果的694家醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室中,有14.70%的實(shí)驗(yàn)室采用了核酸檢測(cè)方法,相比2015年的7.15%[13]有了顯著提高;一級(jí)中心及以上級(jí)別性病實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)方法使用占比達(dá)到28.37%,顯著高于普通和一級(jí)性病實(shí)驗(yàn)室,提示高級(jí)別規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室Ct檢測(cè)能力更強(qiáng)。本次室間質(zhì)評(píng)結(jié)果顯示Ct核酸檢測(cè)方法相比其他方法顯現(xiàn)出更高的符合率、特異性和敏感性,與Fredlund等[19]研究結(jié)果一致,因此推薦有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)優(yōu)先選擇核酸檢測(cè)方法。

總之,本研究參評(píng)實(shí)驗(yàn)室包括較多基層醫(yī)療機(jī)構(gòu),覆蓋面廣,客觀反映了不同醫(yī)療機(jī)構(gòu)對(duì)Ct檢測(cè)的能力,發(fā)現(xiàn)總體上廣東省Ct檢測(cè)能力較高,而普通性病實(shí)驗(yàn)室、基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)和部分欠發(fā)達(dá)地區(qū)醫(yī)療機(jī)構(gòu)Ct檢測(cè)能力相對(duì)較弱,提示廣東省還需進(jìn)一步加強(qiáng)規(guī)范化性病實(shí)驗(yàn)室建設(shè),加強(qiáng)基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)和不發(fā)達(dá)地區(qū)Ct檢測(cè)能力。