龔粵寧,林 敏,何淑嫻,,宋 斌**,劉志發(fā),莫美華
(1.廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理局,廣東 韶關(guān) 512727;2.廣東省科學(xué)院微生物研究所/華南應(yīng)用微生物國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省菌種保藏與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省微生物應(yīng)用新技術(shù)公共實(shí)驗(yàn)室,廣東 廣州 510070;3.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,廣東廣州 510642)
廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)于1994 年成立,地處南嶺山脈中段南麓,東鄰韶關(guān)市乳源縣,南接清遠(yuǎn)市陽(yáng)山縣嶺背鎮(zhèn),西靠連州市,北部與湖南省宜章縣莽山森林公園接壤,坐標(biāo)為112°30′~113°04′E、24°37′~24°57′N,保護(hù)區(qū)總面積5.84×104hm2,是廣東省陸地森林面積最大的國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū),保存著中國(guó)東南部特色亞熱帶常綠闊葉林和中國(guó)珍稀瀕危動(dòng)植物及其棲息地,是世界同緯度地區(qū)的寶貴自然遺產(chǎn)[1-2]。保護(hù)區(qū)優(yōu)越的地理?xiàng)l件和氣候環(huán)境孕育了豐富的動(dòng)植物資源,為紅菇科(Russulaceae) 真菌的生長(zhǎng)發(fā)育提供了良好的基礎(chǔ)[3-9]。紅菇科真菌隸屬于真菌界(Fungi) 擔(dān)子菌門(Basidiomycota) 蘑菇綱(Agaricomycetes) 紅菇目(Russulales),其子實(shí)體肉質(zhì)、易脆、多數(shù)傘形、色澤艷麗、具乳汁或不具乳汁,主要包含乳菇屬(Lactarius)、多汁乳菇屬(Lactifluus)、叉褶菇屬(Multifurca)、紅菇屬(Russula) 等4 個(gè)屬,通常廣泛分布,常生于林中地面,并與植物形成外生菌根[10-11]。
1.1.1 研究標(biāo)本
2019 年至2022 年在廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)調(diào)查采集標(biāo)本材料,所有研究標(biāo)本保藏在廣東省科學(xué)院微生物研究所真菌標(biāo)本館(GDGM)。
1.1.2 主要試劑
硅膠,廣州化學(xué)試劑廠;真菌DNA 小量提取試劑盒,廣州美基生物科技有限公司;PCR 擴(kuò)增試劑,北京全式金科技有限公司。
1.1.3 主要設(shè)備
水浴鍋,托普儀器有限公司;研磨儀,上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司;離心機(jī),賽默飛世爾科技(中國(guó)) 有限公司;Y-TV55 正置熒光顯微鏡,日本尼康公司;RX100Ⅲ相機(jī),日本索尼公司。
野外調(diào)查采用傳統(tǒng)的踏查法。使用相機(jī)拍攝記錄宏觀特征,包括菌蓋、菌褶、菌肉、菌柄特征及其顏色、大小等。使用熒光顯微鏡進(jìn)行顯微觀察,包括擔(dān)孢子、擔(dān)子、褶側(cè)囊體、褶緣囊體等。隨機(jī)選取20個(gè)孢子測(cè)量孢子大小,擔(dān)子等其他特征以10~20 個(gè)測(cè)量數(shù)據(jù)為準(zhǔn)。以5%的KOH 溶液作為浮載劑,1%的剛果紅試劑進(jìn)行染色觀察,以Melzer 試劑判斷菌絲、菌髓等的淀粉質(zhì)反應(yīng)或類糊精反應(yīng)。同時(shí)進(jìn)行ITS 和LSU 序列的測(cè)序、比對(duì)分析,并綜合形態(tài)特征和分子比對(duì)結(jié)果,結(jié)合文獻(xiàn)進(jìn)行鑒定和分類[12-15]。
根據(jù)調(diào)查結(jié)果及文獻(xiàn)查詢,總結(jié)具體名錄見(jiàn)表1,菌類生境照片見(jiàn)圖1。
表1 廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)紅菇科物種資源Tab.1 The resources of Russulaceae in Guangdong Nanling National Nature Reserve
圖1 廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)部分紅菇科真菌生境照片F(xiàn)ig.1 Photographs of some species of Russulaceae habitats in Guangdong Nanling National Nature Reserve
如表1 和圖1 所示,廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)紅菇科真菌已知種類有45 種,分別是乳菇屬(Lactarius) 16 種、多汁乳菇屬(Lactifluus) 3 種、紅菇屬(Russula) 26 種[3-9,16]。所有菌類均為外生菌根菌。
至今為止,世界上紅菇科真菌已知種類已經(jīng)超過(guò)3 000 種,中國(guó)報(bào)道的種類已超過(guò)了250 種(約占世界已知種類的8.3%)。南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)的紅菇科種類至今也有45 種,約占中國(guó)已知紅菇科種類的18%,保護(hù)區(qū)新記錄種有19 種,中國(guó)特有種10 種[11-24]。迷你乳菇Lactarius minimus W.G. Sm.[=Lactarius minimus var. macrosporus C.Z. Bi & G.Y.Zheng] 屬于瀕危(EN) 級(jí)別[15]。據(jù)此,南嶺自然保護(hù)區(qū)紅菇科資源比較豐富,迫切需要深入調(diào)查,資源保護(hù)利用研究也需要進(jìn)一步加強(qiáng)。南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)的45 種紅菇科真菌資源均屬外生菌根菌,與植物生長(zhǎng)密切相關(guān),作為南嶺自然生態(tài)系統(tǒng)中的重要組成部分具有重要的作用[25]。其中,具有食用價(jià)值的有25 種,藥用價(jià)值的有20 種,對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生危害或毒性的有3 種[26-31]。紅菇科中可食菌類較多,在世界范圍被廣泛采食。如南嶺地區(qū)主要的食用或食藥兼用品種有雞足山乳菇、松乳菇、紅汁乳菇、鮮艷乳菇、多汁乳菇、煙色紅菇、銅綠紅菇等,但其資源量及生態(tài)分布特征還需要調(diào)查。南嶺地區(qū)已知紅菇科真菌中有毒品種僅有黑乳菇、脆紅菇和點(diǎn)柄黃紅菇。
紅菇科真菌是廣東南嶺國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)生物多樣性的重要組成部分,對(duì)保護(hù)區(qū)生態(tài)平衡的維持具有重要意義,也是重要的野生真菌資源。