易建華， 王 欽#， 王 輝， 宋慶洋，敖慧玲， 曹詩宜， 別漢晴， 張 彥， 戴晉軍

（1.農(nóng)業(yè)微生物資源發(fā)掘與利用全國重點實驗室，湖北宜昌 443003；2.湖北省酵母功能湖北省重點實驗室，湖北宜昌 443003）

近年來，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖密度的增加，魚類病害不斷增多，限制了漁獲產(chǎn)量的提升，嚴重威脅了魚類健康，制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的發(fā)展。酵母培養(yǎng)物（Yeast Culture）是由發(fā)酵底物、酵母細胞及其代謝物組成的復合發(fā)酵產(chǎn)物，含有核苷酸、肽、β-葡聚糖、 甘露糖低聚糖和其他免疫調節(jié)成分（Jensen等，2008），因此，其常被用作免疫增強劑。 酵母細胞壁中甘露聚糖（MOS）和β-葡聚糖的結構成分有助于促進免疫力。酵母培養(yǎng)物中的β-葡聚糖可以有效降低膽固醇（CHO）并激活巨噬細胞釋放各種免疫球蛋白，例如細胞因子和白細胞介素（Jayachandran 等，2018）。酵母培養(yǎng)物在提高動物生長性能，增強動物消化酶活性、機體免疫力和腸道健康方面具有積極作用（冷向軍，2023）。 研究表明，酵母培養(yǎng)物可以顯著提高草魚、南美白對蝦、和大鱗副泥鰍等的生長性能、消化酶活性、抗氧化能力和免疫力（李佑杰等，2021；李軍濤等，2018；劉明等，2017）。本試驗以鯽魚為試驗對象，在鯽魚基礎飼料中添加不同濃度的酵母培養(yǎng)物， 探討酵母培養(yǎng)物對鯽魚生長性能、血清生化、消化酶、抗氧化和免疫指標的影響， 為其在水產(chǎn)飼料中的應用及水產(chǎn)行業(yè)健康發(fā)展提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料 酵母培養(yǎng)物為安琪酵母股份有限公司提供（湖北，宜昌）。按照配方設計將飼料分為4 個組， 在基礎飼料中添加不同含量的酵母培養(yǎng)物，分別為對照組（CK）、0.1%酵母培養(yǎng)物添加組（S1）、0.3%酵母培養(yǎng)物添加組（S3）和0.5%酵母培養(yǎng)物添加組（S5）。 將原料粉碎過60 目篩，經(jīng)混合制粒膨化成3.0 mm 粒徑的顆粒飼料，冷藏儲存?zhèn)溆谩?飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）%

1.2 養(yǎng)殖試驗和樣品采集 試驗魚購自湖北省當陽市某養(yǎng)殖場。 在分組前，進行投喂2 周的商品料來馴化鯽魚。 挑選出300 尾健康活潑、規(guī)格均一且初始均質量為（13.00±0.50）g 的試驗鯽魚，設置4個處理，每個處理3 個重復，每個重復25 尾鯽魚。

試驗地點為安琪生物農(nóng)業(yè)科技有限公司水產(chǎn)養(yǎng)殖基地。 在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)進行養(yǎng)殖試驗，試驗鯽魚養(yǎng)殖容器的規(guī)格為200 cm×200 cm×100 cm。 養(yǎng)殖用水為經(jīng)過曝氣處理的自來水，水體24 h不間斷增氧，配有加熱裝置以維持鯽魚生長較適宜的水溫。 養(yǎng)殖周期為8 周，每天投喂2 次（08：00~09：00 和17：00 ~ 18：00），并且定期對養(yǎng)殖用水進行更換。 投餌量為鯽魚體重的1%~3%，之后依據(jù)每個試驗組前一天的實際攝食量進行適當調整。每天察看鯽魚攝食狀況和死亡狀況并記錄，同時記錄每天的水溫。 飼養(yǎng)期間水溫 （26.00±2.00）℃，pH（7.05±0.52），溶解氧（7.78±0.13）mg/L。

攝食生長試驗結束后， 所有試驗魚空腹24 h，經(jīng)120 mg/L MS-222 麻醉后進行稱重及計數(shù)。 每桶選5 尾魚，用ACD 抗凝劑浸潤過的一次性注射器從尾靜脈中抽血，在4 ℃，用離心機以3500 r/min離心10 min 獲得血清，-70 ℃保存， 用于血清生化指標檢測；取血后的5 尾魚被解剖獲取腸道，用于消化酶活性檢測； 取血后的5 尾魚被解剖獲取肝臟，稱重并計算肝體比，肝臟用于抗氧化酶活性及免疫應答指標檢測。

1.3 生化分析 血清生化指標由宜昌市第一人民醫(yī)院測定：包括血清谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、總蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C） 、堿性磷酸酶（ALP）。腸道脂肪酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶測定采用商業(yè)試劑盒（南京建成生物工程研究所，南京）。肝臟組織勻漿液蛋白含量（TP）、總超氧化物歧化酶（TSOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）、過氧化氫酶（CAT）、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）及溶菌酶（LZM）等抗氧化及免疫指標，相關試劑盒均來源于南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計分析 采用Minitab21.3.1.0 軟件對數(shù)據(jù)進行Tukey 檢驗， 結果以 “平均值±標準誤”（mean±SE）表示，P < 0.05 代表顯著差異。 生長性能相關計算公式如下：

式中：Nt為試驗末魚數(shù)量，尾；N0為魚初始數(shù)量， 尾；Wt為試驗終末均體質量，g；Wd為試驗期間死亡魚均體質量，g；W0為試驗初始均體質量，g；t 為試驗天數(shù)，d；F 為總攝食量，g；L 為終末平均體長，cm；Wz 為試驗終末平均肝胰臟質量，g；Wv 為試驗終末平均內(nèi)臟團質量，g。

2 結果與分析

2.1 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚生長性能的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗結束后，在基礎飼料中添加酵母培養(yǎng)物組鯽魚幼魚的終末體質量、 增重率和特定生長率顯著提高（P ＜0.05），其中S3 組終末體質量、增重率和特定生長率最高，分別提高了16.77%、34.67%和23.93%；三個處理組均能降低鯽魚幼魚的飼料系數(shù)（P ＜0.05），其中S3 組飼料系數(shù)最低，降低了34.72%；與CK 組相比，S5 組鯽魚幼魚的肝體比和肥滿度顯著增加（P ＜0.05），分別增加31.58%和24.10%，S3 組鯽魚幼魚的肥滿度顯著增加20.51%（P ＜0.05）。 但各組間存活率和臟體比等差異不顯著（表2）。

表2 酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚生長性能的影響

2.2 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚血清生化的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗結束后， 血清中尿素、總蛋白、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、血糖含量無顯著性差異。 與對照組相比，S1 組鯽魚的血清谷草轉氨酶顯著升高38.45%（P ＜0.05） 和堿性磷酸酶顯著升高47.87%（P ＜0.05），S3 組鯽魚的血清甘油三酯顯著降低24.40%（P ＜0.05） 和堿性磷酸酶顯著升高90.06%（P ＜0.05），S5 組鯽魚的血清白蛋白、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶和堿性磷酸酶顯著升高（P ＜0.05），分別升高19.17%、56.23%、267.42%和58.48%，S5 組鯽魚的血清低密度脂蛋白膽固醇顯著降低35.25%（P ＜0.05）；S3 組鯽魚的血清甘油三酯也顯著低于S1 組（P ＜0.05）（表3）。

表3 酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚血清生化的影響

2.3 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚腸道消化酶活性的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗結束后，與對照組相比，S3 組鯽魚幼魚的腸道脂肪酶和胰蛋白酶顯 著 升 高 （P ＜0.05）， 分 別 提 高398.46%和307.40%， 并具有提高鯽魚幼魚腸道α-淀粉酶的趨勢，但差異不顯著（P ＞0.05），S5 組鯽魚腸道脂肪酶顯著升高267.70%（P ＜0.05）；S3 組鯽魚幼魚的腸道脂肪酶和胰蛋白酶顯著高于S1 組和S2組（P ＜0.05）；S5 組鯽魚的腸道脂肪酶顯著高于S1 組（P ＜0.05）（表4）。

表4 酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚腸道消化酶活性的影響

2.4 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚肝臟抗氧化能力及免疫力的影響 56 d 養(yǎng)殖試驗結束后，丙二醛含量無顯著性差異。 與對照組相比，S3組鯽魚幼魚的肝臟總抗氧化能力、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化酶顯著升高（P ＜0.05）， 分別提高12.5%、35.77%和11.92%，并具有提高鯽魚幼魚肝臟溶菌酶含量的趨勢 （P ＞0.05），S1 組鯽魚的肝臟過氧化氫酶顯著升高17.06%（P ＜0.05）； S3 組鯽魚的肝臟過氧化氫酶顯著高于S1 組 （P ＜0.05），S5 組肝臟谷胱甘肽過氧化物酶顯著低于S1 組（P ＜0.05）（表5）。

表5 酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚肝臟抗氧化能力及免疫力的影響

3 討論

3.1 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚生長性能的影響 在飼料中添加酵母培養(yǎng)物可促進水產(chǎn)動物生長，在建鯉、虹鱒、團頭魴和南美白對蝦等魚類上均證明谷胱甘肽的促生長作用（周婷婷等，2013；Barnes 等，2007； 劉 哲 等，2003）。 劉 哲 等（2003）報道，在飼料中添加0.5%的酵母培養(yǎng)物能使建鯉的增重率提高32.8%， 餌料系數(shù)降低19.34%。 Barnes 等（2007） 研究發(fā)現(xiàn)，添加0.025%的酵母培養(yǎng)物能顯著提高虹鱒的生長性能， 增重率提高45.76%。 李高鋒等（2009）發(fā)現(xiàn)，在團頭魴飼料中添加0.2%的酵母培養(yǎng)物團頭魴特定生長率提高12.95%， 餌料系數(shù)降低9.87%。 劉明等（2017）研究表明，在南美白對蝦飼料中添加0.5%酵母培養(yǎng)物能顯著提高南美白對蝦的生長性能，增重率提高了16.74%， 飼料系數(shù)降低了9.79%。李佑杰等（2021）報道，添加1%的酵母培養(yǎng)物能對大鱗副泥鰍的生長有促進作用， 飼料系數(shù)降低了19.29%。 在本研究中，飼料中添加0.1%、0.3%和0.5%酵母培養(yǎng)物均能促進鯽魚生長，增重率分別提高了16.56%、34.67%和19.98%， 餌料系數(shù)分別降低了15.09%、34.72%和19.25%，最佳添加量為0.3%。酵母培養(yǎng)物能提高水產(chǎn)動物的生長性能和飼料利用率， 可能與其含有豐富的B 族維生素、小肽、核苷酸等活性成分有關。

3.2 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚血清生化的影響 血清生化指標一般可以反饋出水產(chǎn)動物的健康狀況，血清中的白蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇可以反映機體對蛋白的利用率及脂類代謝； 谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性可以反映肝功能狀態(tài)；堿性磷酸酶可以反映機體免疫力。本試驗中，在鯽魚飼料中添加0.5%酵母培養(yǎng)物可以顯著提高血清中白蛋白含量， 表明酵母培養(yǎng)物提高了機體對蛋白質的利用率。 與陳坤海（2023）在加州鱸上的研究結果相似。 本試驗中， 添加0.5%酵母培養(yǎng)物鯽魚血清LDL-C 含量降低35.25%，添加0.3%酵母培養(yǎng)物鯽魚血清TG 含量降低24.40%，表明酵母培養(yǎng)物對機體脂質代謝起到重要作用。 與桂良超等（2019）在凡納濱對蝦的研究結果類似。 可能是酵母培養(yǎng)物使脂肪酶活性的提高，加速了脂質代謝（Castillo 等，2014）。 本試驗中， 添加0.1%、0.5%酵母培養(yǎng)物增加了血清AST 含量， 添加0.5%酵母培養(yǎng)物增加了ALT 含量， 但0.3%酵母培養(yǎng)物對AST 和ALT 卻沒有影響，表明在飼料中0.3%酵母培養(yǎng)物對肝臟健康無影響。 Liu 等（2018）在草魚上也有類似的研究結果。 本試驗中，添加0.1%、0.3%、0.5%酵母培養(yǎng)物可以顯著提高血清中堿性磷酸酶含量， 分別提高47.87%、90.56%和58.48%， 表明酵母培養(yǎng)物可以提高機體免疫力。 與劉泓宇等（2021）在珍珠龍膽石斑魚的結果類似。

3.3 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚腸道消化酶活性的影響 水產(chǎn)動物中腸道脂肪酶、蛋白酶活性能夠影響機體對營養(yǎng)物質的吸收利用，從而影響水產(chǎn)動物的生長（唐黎等，2007）。 本研究中，添加0.3%酵母培養(yǎng)物能顯著提高鯽魚脂肪酶活性（398.46%）和胰蛋白酶活性（307.40%），添加0.5%酵母培養(yǎng)物能顯著提高鯽魚脂肪酶活性（267.69%），這與Wang 等（2022）在南美白對蝦上的研究結果相似。酵母培養(yǎng)物提高了鯽魚腸道消化酶活性，可能是與其含有豐富的小肽和氨基酸等強化了消化酶，同時含有的乳酸等酸性物質也降低了消化道的pH 有關，相關機理有待進一步研究。

3.4 飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚肝臟抗氧化能力和免疫力的影響 研究表明，酵母培養(yǎng)物可調節(jié)人類（Possemiers 等，2013）、豬（Shen 等，2009）和魚類（Berto 等，2016）的免疫反應，通過減少病原菌和改善腸道健康來維持健康和改善生長性能。TAOC、CAT、GSH-PX 和LZM 等指標常用來表征水產(chǎn)動物的抗氧化能力和免疫力。 本試驗中， 添加0.1%酵母培養(yǎng)物可提高鯽魚肝臟CAT 活力（17.06%）； 添加0.3%酵母培養(yǎng)物可顯著提高鯽魚肝臟T-AOC、CAT 和GSH-PX 活力， 分別提高了12.5%、35.77%和11.92%， 具有提高鯽魚幼魚肝臟溶菌酶含量的趨勢； 添加0.5%酵母培養(yǎng)物可提高鯽魚肝臟GSH-PX 活力（12.59%），這與雷宇杰等（2020）在斑點叉尾鮰和陳潯等（2024）在加州鱸上的研究結果相似。本研究表明酵母培養(yǎng)物可以增強鯽魚抗氧化和免疫力， 可能與其含有的甘露寡糖、β-葡聚糖、小肽、核苷酸等多種活性成分有關。

4 小結

綜上所述， 在飼料中添加酵母培養(yǎng)物對鯽魚幼魚的生長性能有促進作用， 并且提高了鯽魚消化酶活性、抗氧化能力及免疫力，其中0.3%酵母培養(yǎng)物添加組效果最佳。