摘 要：【目的】研究放牧條件下泌乳母馬補(bǔ)飼賴氨酸和蘇氨酸對(duì)其血液中和乳中激素濃度的影響，為氨基酸調(diào)控泌乳期母馬的泌乳性能及機(jī)體健康提供參考依據(jù)。

【方法】選擇產(chǎn)駒日期相近（5月），年齡7～9歲、胎次4～5胎、平均體重（428±33.42） kg和泌乳30 d的伊犁馬母馬12匹。按照產(chǎn)奶量相近的原則將12匹母馬隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組。于相同放牧條件下（放牧?xí)r間、飲水時(shí)間、擠奶時(shí)間和放牧草場完全相同），對(duì)照組不補(bǔ)喂任何氨基酸，試驗(yàn)組補(bǔ)喂賴氨酸60+蘇氨酸40（g/（d·匹））。整個(gè)補(bǔ)飼期為120 d，定期采集母馬乳樣及血液，測(cè)定激素指標(biāo)。

【結(jié)果】

在血液中，母馬試驗(yàn)組的催乳素濃度呈持續(xù)上升趨勢(shì)，且在試驗(yàn)的第60 d高于對(duì)照組（P＞0.05），此外，試驗(yàn)組血液中的雌二醇、孕酮和生長激素濃度均呈先下降后上升的趨勢(shì)，而對(duì)照組血液中雌二醇、孕酮和促黃體素濃度均呈先上升后下降的趨勢(shì)；試驗(yàn)第120 d試驗(yàn)組乳中促黃體素和生長激素濃度均極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），雌二醇、催乳素和促黃體素濃度均呈持續(xù)升高趨勢(shì)，孕酮和生長激素濃度呈先下降后上升趨勢(shì)。

但對(duì)照組雌二醇和催乳素濃度呈先下降后上升趨勢(shì)，且孕酮和生長激素濃度呈持續(xù)下降趨勢(shì)。

【結(jié)論】母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸可以增加母馬血液中孕酮及催乳素含量，提高乳中雌二醇、催乳素和促黃體素濃度，使母馬血液及乳中激素保持正常的生理規(guī)律，保證了泌乳期母馬的機(jī)體健康。

關(guān)鍵詞：泌乳母馬；賴氨酸；蘇氨酸；激素

中圖分類號(hào)：S821"" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A"" 文章編號(hào)：1001-4330（2024）12-3113-08

0 引 言

【研究意義】內(nèi)分泌系統(tǒng)在泌乳的許多方面均起著重要作用，包括乳腺發(fā)育、乳的生成以及維持乳汁分泌等。內(nèi)分泌系統(tǒng)中的許多激素直接或間接地調(diào)節(jié)泌乳過程^［1］。泌乳期母馬同時(shí)處于妊娠期，此階段母馬因受生理、健康、飼養(yǎng)管理和養(yǎng)分?jǐn)z入量等相關(guān)因素的影響，機(jī)體代謝極易出現(xiàn)紊亂，影響母馬泌乳性能、妊娠及內(nèi)分泌的平衡^［2］。放牧條件下母馬可以通過牧草獲得機(jī)體所需的養(yǎng)分，但限制性氨基酸的不足已是影響母馬泌乳性能及健康狀況的關(guān)鍵因素^［3］。賴氨酸和蘇氨酸對(duì)馬匹生長發(fā)育、營養(yǎng)成分、泌乳性能和繁殖性能等均有促進(jìn)作用，同時(shí)也是馬匹的限制性氨基酸^［3-4］。因此，監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)泌乳期母馬血液和乳中激素水平的變化，通過給泌乳母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸，均衡其養(yǎng)分?jǐn)z入，對(duì)泌乳母馬健康生產(chǎn)有重要意義。【前人研究進(jìn)展】賴氨酸可以作為信號(hào)分子翻譯過程，調(diào)控激素分泌和影響氮相關(guān)代謝基因的表達(dá)^［5］。蘇氨酸可以轉(zhuǎn)化為絲氨酸、甘氨酸等調(diào)節(jié)機(jī)體氨基酸的平衡，同時(shí)作為機(jī)體免疫系統(tǒng)重要的構(gòu)成部分參與機(jī)體的免疫應(yīng)答^［6］。Yang等^［7］研究表明，妊娠后期和泌乳期母豬飼喂2種賴氨酸（低水平：0.6%；高水平：0.8%）的飼糧，隨著賴氨酸攝入量的增加，胰島素、卵泡刺激素和黃體生成素的分泌量增加（Plt; 0.05），母豬產(chǎn)后和斷奶當(dāng)天卵泡刺激素和黃體生成素濃度增加（Plt; 0.05）。崔斌^［8］研究表明，在妊娠母兔日糧中添加不同劑量的蘇氨酸，妊娠母兔血清中孕酮、催乳素和雌二醇濃度隨著蘇氨酸含量的增加呈先降低后升高的趨勢(shì)，同時(shí)顯著影響促卵泡素和催乳素的含量?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前有關(guān)補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸對(duì)泌乳母馬血液和乳中激素的影響文獻(xiàn)較少，需進(jìn)一步研究?！緮M解決的關(guān)鍵問題】以泌乳母馬為研究對(duì)象，在放牧條件下給泌乳母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸的組合，測(cè)定不同階段血液和乳中激素濃度的變化，綜合分析和評(píng)價(jià)補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸對(duì)放牧泌乳母馬正常泌乳及內(nèi)分泌平衡的影響，為氨基酸調(diào)控泌乳期母馬的泌乳機(jī)能及身體健康提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

試驗(yàn)于2022年6～9月在新疆伊犁哈薩克自治州昭蘇縣庫德爾草場進(jìn)行。

L-賴氨酸（L-Lys）含量（以干物質(zhì)為基礎(chǔ)）≥98.5％、L-蘇氨酸（L-Thr）含量（以干物質(zhì)為基礎(chǔ)）≥98.5％，均購自新疆芝麻貿(mào)易有限公司。

選擇產(chǎn)駒日期相近（5月），年齡7～9歲，胎次4～5胎，平均體重（428±33.42） kg，泌乳30 d的伊犁馬母馬12匹。

1.2 方 法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按照產(chǎn)奶量相近的原則將12匹母馬隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組。對(duì)照組不進(jìn)行任何氨基酸補(bǔ)喂，在相同的放牧條件下（放牧?xí)r間、飲水時(shí)間、擠奶時(shí)間和放牧草場完全相同），試驗(yàn)組補(bǔ)喂賴氨酸60 g+蘇氨酸40 g/（d·匹）。補(bǔ)喂劑量參考NRC（2007）400 kg成熟體重泌乳母馬氨基酸的需要量范圍以及馬匹氨基酸需求^［9］。試驗(yàn)期為120 d。定期采集母馬乳樣及血液，測(cè)定激素指標(biāo)。

每天08：30將母馬與馬駒由放牧草場趕至擠奶草場；09：00試驗(yàn)組母馬使用料兜補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸。同時(shí)將母馬與馬駒分開，期間為擠奶時(shí)間。17：00即最后1次擠奶結(jié)束，母馬和馬駒合群一起趕回放牧草場。母馬擠奶期間可自由采食牧草，自由飲水。

1.2.2 樣品采集

1.2.2.1 乳樣采集及處理

分別于試驗(yàn)0、60和120 d在每次擠奶時(shí)（于11：00、13：00、15：00和17：00擠奶）取樣25 mL，共100 mL，均勻混合后分別裝入2個(gè)50 mL采樣管中，-20℃保存待測(cè)。

1.2.2.2 血液樣品

分別于試驗(yàn)第0、60和120 d早晨飼前空腹于頸靜脈使用肝素鈉采血管采集血樣2管，各5 mL，3 500 r/min離心15 min后制取血漿，-20℃冷凍保存待測(cè)。

1.2.2.3 激素指標(biāo)

雌二醇（E2）、孕酮（P）、催乳素（PRL）、促黃體生成素（LH）、生長激素（GH）指標(biāo)均使用酶標(biāo)儀（南京華東電子集團(tuán)醫(yī)療裝備有限責(zé)任公司，型號(hào)：DG5033A）檢測(cè)，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所（參考試劑盒提供方法）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

在Excel中先預(yù)處理數(shù)據(jù)，再使用SPSS 18.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，并使用GraphPad Prism 8.0.2繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸后泌乳母馬血液中激素的濃度

研究表明，試驗(yàn)第0 d試驗(yàn)組泌乳母馬血液中孕酮濃度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；血液中催乳素濃度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），試驗(yàn)第120 d試驗(yàn)組催乳素濃度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），但試驗(yàn)組催乳素濃度呈持續(xù)上升趨勢(shì)，且試驗(yàn)第60 d高于對(duì)照組（P＞0.05），此外，試驗(yàn)組血液中的雌二醇、孕酮和生長激素濃度均呈先下降后上升的趨勢(shì)，而對(duì)照組血液中雌二醇、孕酮和促黃體素濃度均呈先上升后下降的趨勢(shì)。圖1

2.2 補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸后泌乳母馬乳中激素的濃度

研究表明，試驗(yàn)第0 d試驗(yàn)組馬乳中催乳素濃度顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），試驗(yàn)第120 d試驗(yàn)組馬乳中促黃體素和生長激素濃度均極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)組馬乳中雌二醇、催乳素和促黃體素濃度均呈持續(xù)升高趨勢(shì)，馬乳中孕酮和生長激素濃度呈先下降后上升趨勢(shì)。但對(duì)照組乳中雌二醇和催乳素濃度呈先下降后上升趨勢(shì)，且乳中孕酮和生長激素濃度呈持續(xù)下降趨勢(shì)。圖2

3 討 論

3.1 補(bǔ)喂賴氨酸與蘇氨酸對(duì)泌乳母馬血液中激素的濃度的影響

在乳腺的發(fā)育過程中激素使乳房發(fā)育并發(fā)揮功能，滿足動(dòng)物生殖狀態(tài)乳汁的需求^［10］。對(duì)母畜泌乳產(chǎn)生作用的激素主要包括生殖激素如雌激素（E）、孕激素（P）、催乳素（PRL）和催產(chǎn)素（OXT）等對(duì)乳腺的發(fā)育有直接作用；代謝激素如生長激素（GH）、甲狀腺激素（TH）和糖皮質(zhì)激素（GC），其主要協(xié)調(diào)機(jī)體代謝變化和應(yīng)激反應(yīng)，間接改變生殖激素和營養(yǎng)流入乳腺的情況^［11］。此外，一些其他的激素也可以在許多組織中起到作用，從而促進(jìn)母畜生理學(xué)的適應(yīng)性變化，以促進(jìn)泌乳。目前越來越多的研究也證實(shí)了通過改變母畜的日糧營養(yǎng)和代謝狀態(tài)，進(jìn)一步改變代謝物和相關(guān)激素（胰島素、FSH和LH濃度等）的水平影響生殖，從而改善母畜泌乳^［12-13］。蔣亞東等^［14］研究表明，給妊娠期母豬飼喂不同賴氨酸水平的飼糧，影響了母豬血清中胰島素、類胰島素樣生長因子-I、孕酮和催乳素的濃度。

雌二醇是動(dòng)物中常見和有效的雌激素存在形式，其產(chǎn)生和作用的部位眾多，包括腎上腺、腦、脂肪組織、皮膚、胰腺以及其他尚未確定的部位^［15］。母馬體內(nèi)的雌激素主要由卵巢中卵泡在促黃體素的作用下產(chǎn)生睪酮^［16］，進(jìn)入顆粒細(xì)胞中，促卵泡生成素刺激顆粒細(xì)胞芳香化酶活性，在該酶的催化下睪酮轉(zhuǎn)化為雌二醇。孕酮是活性最高的孕激素，對(duì)維持妊娠有著重要作用。Blasiak等^［17］研究表明，

當(dāng)雌激素與孕激素的比例高時(shí)，產(chǎn)奶量下降。妊娠期間高水平的孕激素抑制了雌激素對(duì)催乳素功能的刺激作用。試驗(yàn)研究中，試驗(yàn)組母馬血液中雌二醇與孕酮濃度均呈先下降后上升的趨勢(shì)，而對(duì)照組則相反。原因是研究中的馬匹正在處于妊娠初期到妊娠中后期的轉(zhuǎn)變，在正常馬匹妊娠過程中雌二醇和孕酮濃度也會(huì)呈先下降后上升。在妊娠初期后期母畜由于體內(nèi)子宮發(fā)育、受精卵著床和保證正常的分娩的需求，血液中雌二醇和孕酮濃度濃度會(huì)達(dá)到峰值^［18］，也是在試驗(yàn)第0 d，兩組間孕酮濃度產(chǎn)生顯著差異的主要原因。由于在試驗(yàn)第60 d時(shí)正處于泌乳高峰期，由于泌乳需求的增加，雌激素與孕激素的比例也會(huì)相應(yīng)改變，雌二醇與孕酮在乳汁的生產(chǎn)過程中有著共同作用^［19］。此外，試驗(yàn)研究中雌二醇和孕酮濃度分別在50～70和3～5 ng/mL。周媛等^［20］測(cè)定了母馬妊娠初期血清中雌二醇濃度為31.56 pg/mL，未妊娠母馬血清中雌二醇平均濃度為52.64 pg/ mL。盧亞賓^［21］研究結(jié)果顯示，伊犁馬在妊娠初期到妊娠后期血清中雌二醇和孕酮濃度為32.221～73.743 pg/mL和0.987～3.158 ng/mL。與試驗(yàn)研究結(jié)果基本相似，但研究結(jié)果略微偏高，可能是由于馬匹處于的生理時(shí)期以及環(huán)境因素不同的影響。

催乳素在乳腺發(fā)育、泌乳的啟動(dòng)以及半乳糖生成中過程中起著重要作用，其可以通過與乳腺上皮細(xì)胞中的催乳素受體結(jié)合或通過調(diào)節(jié)全身激素環(huán)境間接地或直接地影響乳腺發(fā)育、泌乳的發(fā)生和乳汁的分泌^［22］。促黃體素在母馬體內(nèi)的主要功能包括，與促卵泡素協(xié)同促進(jìn)卵泡的生長發(fā)育、參與雌激素的合成、促進(jìn)黃體的產(chǎn)生以及增加血流量^［23］。張榮飛^［24］研究發(fā)現(xiàn)，母豬在妊娠后期和哺乳期血液中催乳素含量均呈逐漸增加趨勢(shì)。在妊娠期母畜血液中的促卵泡素和促黃體素呈下降趨勢(shì)^［25］，在試驗(yàn)研究中試驗(yàn)組的催乳素和促黃體素濃度均呈逐漸上升趨勢(shì)，而對(duì)照組催乳素濃度呈先上升后下降趨勢(shì)。說明補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸后使母馬血液中的催乳素濃度在此期間保持了馬匹的正常生理規(guī)律，在母馬日糧中增加鈣磷有增加催乳素的趨勢(shì)，賴氨酸又能夠與礦物質(zhì)元素形成可溶性螯合物，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體對(duì)鈣磷的吸收^［26-27］，可能是試驗(yàn)組血液中催乳素持續(xù)上升的原因之一。此外，促黃體素濃度的上升可能與其參與雌激素的合成有關(guān)，哺乳期血漿促卵泡素濃度和促黃體素脈沖釋放增加，二者協(xié)同作用，刺激卵巢卵泡發(fā)育和分泌雌激素^［28］。石長青等^［29］研究結(jié)果顯示，蒙古利亞矮種母馬在妊娠期間血漿中促黃體生成素濃度為0.31 mIU/mL。而袁寧^［30］研究結(jié)果顯示，在母馬妊娠期間血漿中促黃體生成素濃度為15.95～17.30 mIU/mL。試驗(yàn)研究中母馬血液中的促黃體生成素濃度在1～3 mIU/mL，與前人研究各有不同，可能與馬匹的品種、年齡和環(huán)境等原因有關(guān)。通過營造適當(dāng)?shù)臏囟拳h(huán)境、提高飼養(yǎng)管理水平等方式可以改善母馬的生殖激素水平^［31］。

生長激素是由腦垂體分泌的一種蛋白質(zhì)，其主要作用包括調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體物質(zhì)代謝過程，促進(jìn)葡萄糖吸收和蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而提高飼料轉(zhuǎn)化率，提高產(chǎn)奶量^［32］。生長激素在反芻動(dòng)物泌乳過程和乳腺生長發(fā)育中起重要作用^［33］。生長激素誘導(dǎo)乳房中的上皮細(xì)胞增長，并維持乳房中的細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)產(chǎn)奶量和乳腺生長的進(jìn)一步提升，但其在泌乳期并不是單獨(dú)發(fā)生作用，而是通過誘導(dǎo)與泌乳相關(guān)得其他因素發(fā)揮作用，而其中最主要的影響因素為胰島素樣生長因子（IGF-Ⅰ）^［34］。IGF-I在乳腺中的直接作用是由胰島素受體底物（IRS）蛋白的胰島素樣生長因子受體（IGF-IR）依賴性磷酸化介導(dǎo)的，隨后是絲氨酸/蘇氨酸激酶MAPK3/1（ERK1/2）和蛋白激酶B（AKT）的磷酸化^［35］。趙曉娥等^［36］研究表明，從泌乳初期到泌乳后期，母羊血液中的生殖激素呈先降低后升高趨勢(shì)，隨后保持在一定水平。王玲玲等^［37］研究表明，3個(gè)品種的母羊從妊娠后期到泌乳30 d血液中的生長激素呈降低趨勢(shì)。試驗(yàn)研究中，給泌乳母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸后血液中的生長激素呈先下降后上升的趨勢(shì)，而對(duì)照組呈上升趨勢(shì)，可能由于在試驗(yàn)60 d時(shí)處于泌乳高峰期，由于泌乳的需求過大，大量的生長激素由血液轉(zhuǎn)移到乳腺中，通過與生長激素受體相結(jié)合調(diào)節(jié)乳腺的代謝和分布，以及刺激肝臟（或其他器官）產(chǎn)生胰島素樣生長因子，其作用于乳腺上皮細(xì)胞的胰島素樣生長因子受體，從而促進(jìn)泌乳^［38］。蘇氨酸通過胰島素樣生長因子激活磷脂酰肌醇-３-羥基酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)促進(jìn)了蛋白質(zhì)的合成，也是試驗(yàn)第0和120 d生殖激素呈高含量的原因之一^［39］。

3.2 補(bǔ)喂賴氨酸與蘇氨酸對(duì)泌乳母馬乳中激素的濃度的影響

Igono等^［40］研究顯示，乳中生長激素和催乳素隨著環(huán)境溫度的變化而變化。袁寧^［30］給泌乳期母馬補(bǔ)喂微生物制劑第28 d后顯著增加了乳中雌二醇的濃度。馬兵強(qiáng)等^［41］給泌乳期母馬補(bǔ)喂30 g/d竹葉提取物可極顯著提高泌乳期乳中雌二醇和孕酮濃度。試驗(yàn)研究中，給母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸120 d后乳中促黃體素和生長激素濃度均極顯著高于對(duì)照組，同時(shí)，乳中雌二醇、催乳素和促黃體素濃度均呈持續(xù)升高趨勢(shì)?？赡芘c賴氨酸可以通過直接參與蛋白質(zhì)的合成，作為信號(hào)分子調(diào)控翻譯過程，調(diào)控激素分泌有關(guān)^［42］。此外，漆雯雯等^［43］研究結(jié)果顯示，馬乳中雌二醇、孕酮、催乳素和生長激素的濃度分別為31.12～48.31 pg/mL、0.38～0.61 ng/mL、147.56～195.40 μIU/mL和2.06～2.91 ng/mL。試驗(yàn)中乳中雌二醇、孕酮、催乳素、促黃體素和生長激素的濃度分別為50～60 ng/L、1.5～2 ng/mL、25～30 ng/mL、3～5 mIU/mL和0.5～1.5 ng/mL，較前人研究相比高低水平各有不同。

4 結(jié) 論

在血液中，母馬試驗(yàn)組的催乳素濃度呈持續(xù)上升趨勢(shì)，且在試驗(yàn)的第60 d高于對(duì)照組（P＞0.05），此外，試驗(yàn)組血液中的雌二醇、孕酮和生長激素濃度均呈先下降后上升的趨勢(shì)，而對(duì)照組血液中雌二醇、孕酮和促黃體素濃度均呈先上升后下降的趨勢(shì)；試驗(yàn)第120 d試驗(yàn)組乳中促黃體素和生長激素濃度均極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），給母馬補(bǔ)喂賴氨酸和蘇氨酸可以增加血液中孕酮及催乳素濃度，提高乳中雌二醇、催乳素和促黃體素濃度，使血液及乳中激素保持正常的生理規(guī)律，保證了泌乳期母馬的機(jī)體健康。

參考文獻(xiàn)（References）

［1］"Akers R M. Major advances associated with hormone and growth factor regulation of mammary growth and lactation in dairy cows［J］. Journal of Dairy Science， 2006， 89（4）： 1222-1234.

［2］ 郭云. 補(bǔ)喂植物雌激素對(duì)泌乳期伊犁馬產(chǎn)奶量、乳成分及血液生化指標(biāo)的影響［D］. 烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2015.

GUO Yun. Effects of phytoestrogen supplementation on milk yield， milk composition and blood biochemical indexes of Ili horse during lactation［D］. Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2015.

［3］ Graham-Thiers P M， Wilson J A， Haught J， et al. Relationships between dietary， plasma， and muscle amino acids in horses［J］. The Professional Animal Scientist， 2012， 28（3）： 351-357.

［4］ 羅鈞秋， 陳代文. 賴氨酸對(duì)蛋白質(zhì)代謝的影響及其可能調(diào)控機(jī)制［J］. 飼料工業(yè)， 2006， 27（16）： 40-43.

LUO Junqiu， CHEN Daiwen. Effect of lysine on metabolism of protein and its possible regulation mechanism［J］. Feed Industry， 2006， 27（16）： 40-43.

［5］ Luo M K. Chemical and biochemical perspectives of protein lysine methylation［J］. Chemical Reviews， 2018， 118（14）： 6656-6705.

［6］ 李耀杰， 王麗， 蔣宗勇， 等. 蘇氨酸在仔豬生產(chǎn)上的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2022， 34（12）： 7518-7528.

LI Yaojie， WANG Li， JIANG Zongyong， et al. Research progress on application of threonine in piglet production［J］. Chinese Journal of Animal Nutrition， 2022， 34（12）： 7518-7528.

［7］ Yang Y X， Heo S， Jin Z， et al. Effects of lysine intake during late gestation and lactation on blood metabolites， hormones， milk composition and reproductive performance in primiparous and multiparous sows［J］. Animal Reproduction Science， 2009， 112（3/4）： 199-214.

［8］ 崔斌. 日糧蘇氨酸水平對(duì)家兔生產(chǎn)性能、氮代謝和血液生化指標(biāo)的影響［D］. 泰安： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

CUI Bin." Effects of dietary threonine levels on performance， nitrogen metabolism and blood biochemical indexes in rabbits［D］. Taian： Shandong Agricultural University， 2013.

［9］ Mok C H， Urschel K L. Amino acid requirements in horses［J］. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences， 2020， 33（5）： 679-695.

［10］ Brisken C， O’Malley B. Hormone action in the mammary gland［J］. Cold Spring Harbor Perspectives in Biology， 2010， 2（12）： a003178.

［11］ Neville M C， McFadden T B， Forsyth I. Hormonal regulation of mammary differentiation and milk secretion［J］. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia， 2002， 7（1）： 49-66.

［12］ Prunier A， Quesnel H. Nutritional influences on the hormonal control of reproduction in female pigs［J］. Livestock Production Science， 2000， 63（1）： 1-16.

［13］ PIRESTANI A， HASANI F， Foruzandeh Shahraki A. Effects of lysine intake during late gestation and lactation period on milk composition in multiparous dairy cattle［J］. Animal Sciences Journal， 2015， 28（107）： 101-118.

［14］ 蔣亞東， 江山， 肖融， 等. 不同飼糧賴氨酸水平對(duì)妊娠期榮昌初產(chǎn)母豬生長性能及血液生化指標(biāo)和激素水平的影響［J］. 中國畜牧雜志， 2016， 52（9）： 37-42.

JIANG Yadong， JIANG Shan， XIAO Rong， et al. Effects of dietary iysine ievels on growth performance， serum biochemistry indices and hormone levels of primiparous Rongchang sows during gestation［J］. Chinese Journal of Animal Science， 2016， 52（9）： 37-42.

［15］ Barakat R， Oakley O， Kim H， et al. Extra-gonadal sites of estrogen biosynthesis and function［J］. BMB Reports， 2016， 49（9）： 488-496.

［16］ 朱士恩. 家畜繁殖學(xué)［M］. 5版. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2009.

ZHU Shien. Livestock Breeding Science ［M］. Beijing： China Agriculture Press， 2009.

［17］ Blasiak M， Molik E. Role of hormones and growth factors in initiating and maintaining the lactation of seasonal animals［J］. Medycyna Weterynaryjna， 2015， 71（8）： 467-471.

［18］ BRIDGES G A. Impact of preovulatory estradiol concentrations on mechanisms affecting fertility in cattle［D］. The Ohio State University， 2007.

［19］ 李佳豪， 李曉斌， 李倩， 等. 兩種日糧組成對(duì)妊娠后期母驢體重增加、血液生化指標(biāo)及生殖激素影響的研究［J］. 中國飼料， 2022，（23）： 62-68.

LI Jiahao， LI Xiaobin， LI Qian， et al. Study on the effects of two dietary compositions on weight gain， blood biochemical indices and reproductive hormones of female donkeys in late pregnancy［J］. China Feed， 2022，（23）： 62-68.

［20］ 周媛， 韓國才， 郭振泉， 等. 血清雌二醇酶聯(lián)免疫檢測(cè)法對(duì)母馬早期妊娠的診斷研究［J］. 中國畜牧雜志， 2008， 44（11）： 52-54.

ZHOU Yuan， HAN Guocai， GUO Zhenquan， et al. Study on serum estradiol ELISA for early pregnacy diagnosis of mares［J］. Chinese Journal of Animal Science， 2008， 44（11）： 52-54.

［21］ 盧亞賓. 生產(chǎn)母馬發(fā)情周期、妊娠期及流產(chǎn)時(shí)生殖激素水平變化的檢測(cè)［D］. 烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2016.

LU Yabin. Detection of changes in reproductive hormone levels during the estrus cycle， pregnancy， and miscarriage of female horses during production［D］. Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2016.

［22］ Oakes S R， Rogers R L， Naylor M J， et al. Prolactin regulation of mammary gland development［J］. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia， 2008， 13（1）： 13-28.

［23］ 牛淑玲， 豐培金， 周虛. 促黃體素受體研究進(jìn)展［J］. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展， 2003， 24（5）： 42-45.

NIU Shuling， FENG Peijin， ZHOU Xu. Advances on the luteinizing hormone receptor［J］. Progress in Veterinary Medicine， 2003， 24（5）： 42-45.

［24］ 張榮飛. 妊娠母豬能量與賴氨酸需要的研究［D］. 北京： 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2011.

ZHANG Rongfei. Research on the Energy and Lysine Requirements of Pregnant Sows［D］. Beijing： China Agricultural University， 2011

［25］ 謝成俠. 家畜繁殖原理［M］. 南京： 江蘇科學(xué)技術(shù)出版社， 1983.

XIE Chengxia. Principles of Livestock Reproduction［M］. Nanjing： Phoenix Science Press， 1983.

［26］ 于全平， 王賢東， 方美煙， 等. 飼糧鈣、磷水平對(duì)泌乳期伊犁母馬營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝和血漿生理生化指標(biāo)的影響［J］. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2017， 29（8）： 2716-2724.

YU Quanping， WANG Xiandong， FANG Meiyan， et al. Effects of dietary calcium and phosphorus levels on nutrient digestion and metabolism， plasma physiological-biochemical indices of Yili mares during lactation period［J］. Chinese Journal of Animal Nutrition， 2017， 29（8）： 2716-2724.

［27］ 葛可佑. 中國營養(yǎng)科學(xué)全書［M］. 北京： 人民衛(wèi)生出版社， 2004： 102， 131.

GE Keyou. An overview of nutrition sciences［M］. Beijing： People’s Medical Publishing House， 2004： 102， 131.

［28］ Anderson E， Clarke R B. Steroid receptors and cell cycle in normal mammary epithelium［J］. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia， 2004， 9（1）： 3-13.

［29］ 石長青， 安鐵洙， 譚建華. 蒙古利亞矮種母馬垂體促性腺激素的血清含量與妊娠狀態(tài)和年齡的相關(guān)性［J］. 中國草食動(dòng)物， 2005， 25（1）： 6-7.

SHI Changqing， AN Tiezhu， TAN Jianhua. Relevance of the serum gonadotropins concentration to breeding season and age in Mongolian pony mares［J］. China Herbivores， 2005， 25（1）： 6-7.

［30］ 袁寧. 補(bǔ)喂微生物制劑對(duì)泌乳期伊犁馬產(chǎn)奶量、乳成分及血液生化指標(biāo)的影響［D］. 烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2015.

YUAN Ning. The effect of supplementing microbial preparations on milk production， milk composition， and blood biochemical indicators in lactating Ili horses［D］. Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2015.

［31］ 任萬路. 年齡、環(huán)境溫度和膘情對(duì)伊犁馬發(fā)情周期卵泡發(fā)育與激素水平的影響［D］. 烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2020.

REN Wanlu. The effects of age， environmental temperature， and body fat on follicular development and hormone levels during the estrus cycle of Ili horses［D］. Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2020.

［32］ 王建榮， 李伯良. 國外牛生長激素使用情況評(píng)述及我國的對(duì)策［J］. 中國畜牧雜志， 1997， 33（4）： 55-57.

WANG Jianrong， LI Boliang. Review of the use of bovine growth hormone in foreign countries and countermeasures in China［J］. Chinese Journal of Animal Science， 1997， 33（4）： 55-57.

［33］ Flint D J， Knight C H. Interactions of prolactin and growth hormone （GH） in the regulation of mammary gland function and epithelial cell survival［J］. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia， 1997， 2（1）： 41-48.

［34］ Boutinaud M， Rousseau C， Keisler D H， et al. Growth hormone and milking frequency act differently on goat mammary gland in late lactation［J］. Journal of Dairy Science， 2003， 86（2）： 509-520.

［35］ Hadsell D L， Bonnette S G， Lee A V. Genetic manipulation of the IGF-I axis to regulate mammary gland development and function［J］. Journal of Dairy Science， 2002， 85（2）： 365-377.

［36］ 趙曉娥， 張靜， 高臻， 等. 不同月份產(chǎn)羔母羊泌乳期生殖激素與生長激素監(jiān)測(cè)［J］. 畜牧與獸醫(yī)， 2021， 53（2）： 56-60.

ZHAO Xiaoe， ZHANG Jing， GAO Zhen， et al. Detection of reproductive hormone and growth hormone of ewes giving births in different months［J］. Animal Husbandry amp; Veterinary Medicine， 2021， 53（2）： 56-60.

［37］ 王玲玲， 雷金龍， 吳樹清. 肉用母羊孕期補(bǔ)硒對(duì)血清中生長激素和肝臟脂質(zhì)代謝的影響［J］. 畜牧獸醫(yī)雜志， 2008， 27（6）： 1-4.

WANG Lingling， LEI Jinlong， WU Shuqing. The study of content of serum GH and the met of liver pipid in different kinds of meat sheep in pregnancy and puerperium before and after Se injection［J］. Journal of Animal Science and Veterinary Medicine， 2008， 27（6）： 1-4.

［38］ Ni Y F， Chen Q Q， Cai J F， et al. Three lactation-related hormones： regulation of hypothalamus-pituitary axis and function on lactation［J］. Molecular and Cellular Endocrinology， 2021， 520： 111084.

［39］ Tang Q， Tan P， Ma N， et al. Physiological functions of threonine in animals： beyond nutrition metabolism［J］. Nutrients， 2021， 13（8）： 2592.

［40］ Igono M O， Johnson H D， Steevens B J， et al. Effect of season on milk temperature， milk growth hormone， prolactin， and somatic cell counts of lactating cattle［J］. International Journal of Biometeorology， 1988， 32（3）： 194-200.

［41］ 馬兵強(qiáng)， 姚新奎， 孟軍， 等. 補(bǔ)喂不同水平竹葉提取物對(duì)泌乳期伊犁馬產(chǎn)奶量及乳成分的影響［J］. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2022， 59（11）： 2786-2792.

MA Bingqiang， YAO Xinkui， MENG Jun， et al. Effects of different levels of bamboo leaf extract on milk yield and milk composition of Yili horse during lactation［J］. Xinjiang Agricultural Sciences， 2022， 59（11）： 2786-2792.

［42］ Hall C J， Soares da Costa T P. Lysine： biosynthesis， catabolism and roles［J］. WikiJournal of Science， 2018， 1（1）： 4.

［43］ 漆雯雯， 臧長江， 方美煙， 等. 飼糧鈣磷水平對(duì)伊犁馬初乳成分、乳脂脂肪酸組成、產(chǎn)后血液鈣磷及激素的影響［J］. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)， 2020， 51（2）： 311-319.

QI Wenwen， ZANG Changjiang， FANG Meiyan， et al. Effects of dietary calcium and phosphorus levels on colostrum components， milk fatty acids composition， and postpartum plasma calcium， phosphorus and hormones of Yili mares［J］. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences， 2020， 51（2）： 311-319.

Effects of supplementing lysine and threonine on hormones in blood and milk of lactating mares

JING Hongxin^1，2， LI Minghao^1，2，WANG Jianwen^1，2， Abuduwaresi Abulikemu1， LI Xiaobin^1，2

（1. College of Animal Science， Xinjiang Agricultural University， Urumqi 830052， China; 2. Xinjiang Key Laboratory of Horse Breeding and Exercise Physiology， Urumqi 830052， China）

Abstract：【Objective】 Explore the effects of lysine and threonine supplementation on hormone concentrations in blood and milk of lactating mares under grazing conditions in the hope of providing reference for amino acid regulation of lactation performance and body health of lactating mares.

【Methods】" 12 Ili mares with similar foaling dates （May）， ages of 7-9 years， parity of 4-5 fetuses， average weight of 428±33.42 kg and lactation for 30 days were selected.According to the principle of similar milk production， 12 mares were randomly divided into control group and experimental group.Under the same grazing conditions （grazing time， drinking time， milking time and grazing pasture were the same）， set up control group and experimental group，the control group was not given any amino acid supplement， and the experimental group was given lysine 60 g+ threonine 40 g/（d· horses）.The whole supplementary feeding period was 120 days， and milk samples and blood were collected regularly to determine hormone indexes.

【Results】 The concentration of prolactin in the blood of the experimental group showed a continuous increasing trend， and was higher than that of the control group on the 60th day of the experiment （P gt; 0.05）.In addition， the concentrations of estradiol， progesterone and growth hormone in the blood of the experimental group showed a trend of decreasing first and then increasing.The concentrations of estradiol， progesterone and luteinizing hormone in the blood of the control group increased first and then decreased.In milking period， on day 120， the concentrations of luteinizing hormone and growth hormone in milk of experimental group were significantly higher than those of control group （Plt; 0.01）， and the concentrations of estradiol， prolactin and luteinizing hormone showed a trend of continuous increase， while the concentrations of progesterone and growth hormone showed a tendency of decreasing first and then increasing.However， in the control group， the concentrations of estradiol and prolactin decreased first and then increased， and the concentrations of progesterone and growth hormone continued to decrease.

【Conclusion】" In summary， supplementing lysine and threonine can increase the contents of progesterone and prolactin in the mare's blood， increase the concentrations of estradiol， prolactin and luteinizing hormone in milk， and maintain the normal physiological law of hormones in the mare's blood and milk.

Key words：lactating mare；lysine；threonine；hormone

Fund projects：Key Scientific R amp; D Program Project of Xinjiang Uyghur Autonomous Region （2022A02013-2-3）; Project of 2023 Postgraduate Innovation Program of Xinjiang Uyghur Autonomous Region（2023年）; Innovation Environment （Talent， Base） Construction Special Project of Xinjiang Uyghur Autonomous Region（PT2311）.

Correspondence author：LI Xiaobin （1988-）， male， from Tianshui， Gansu， master's supervisor， associate professor，research direction：（E-mail）lxb262819@163.com

基金項(xiàng)目：新疆維吾爾自治區(qū)重大科技專項(xiàng)項(xiàng)目（2022A02013-2-3）；新疆維吾爾自治區(qū)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目（2023年）；新疆維吾爾自治區(qū)創(chuàng)新環(huán)境（人才、基地）建設(shè)專項(xiàng)（PT2311）

作者簡介：經(jīng)宏鑫（2000-），男，吉林四平人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯?dòng)物營養(yǎng)與飼料，（E-mail）309221066@qq.com

通訊作者：李曉斌（1988-），男，甘肅天水人，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)閯?dòng)物營養(yǎng)與飼料，（E-mail）lxb262819@163.com