余正勇 徐雨生 趙寧東 黃再強 田迎秋 胡展育 李家平 高明菊

摘要：采用不同干燥方式（自然曬干、60 ℃烘干、80 ℃烘干、105 ℃烘干、凍干）對茯苓（Poria cocos）鮮品進行干燥，測定干燥后的茯苓三萜類及茯苓酸含量，比較不同干燥方式對其三萜類及茯苓酸含量的影響。結(jié)果表明，茯苓三萜類及茯苓酸含量均為凍干>105 ℃烘干>80 ℃烘干>60 ℃烘干>自然曬干，凍干工藝下茯苓三萜及茯苓酸含量分別高達8.95%、6.89%，自然曬干下的茯苓三萜類及茯苓酸含量均最低。確定了茯苓藥材的最佳干燥方式，為茯苓藥材后期加工工藝的選用提供參考。

關(guān)鍵詞：茯苓（Poria cocos）；干燥方式；三萜類；茯苓酸；含量測定

中圖分類號：R284.1? ? ? ? ?文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2024）01-0148-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.01.027 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Effects of different drying methods on the contents of triterpenes and

pachymic acid of Poria cocos

YU Zheng-yong1， XU Yu-sheng2，3， ZHAO Ning-dong1， HUANG Zai-qiang1，

TAIN Ying-qiu1， HU Zhan-yu1， LI Jia-ping4， GAO Ming-ju1

（1. College of Notoginseng Medicine and Pharmacy， Wenshan University， Wenshan? 663000，Yunnan，China； 2 College of Agronomy， Hunan Agricultural University， Changsha? 410128，China； 3. State Key Laboratory of Hybrid Rice， Hunan Hybrid Rice Research Center， Changsha? 410125，China； 4.Yunnan Panlong Yunhai Pharmaceutical Co.， Ltd.， Chuxiong? 675000，Yunnan，China）

Abstract：The fresh Poria cocos were dried by different drying methods （natural drying， drying at 60 ℃， drying at 80 ℃， drying at 105 ℃ and freeze drying）. The contents of triterpenes and pachymic acid of dried Poria cocos were determined， and the effects of different drying methods on the contents of triterpenes and pachymic acid were compared. The results showed that the contents of triterpenes and pachymic acid in Poria cocos were freeze drying > drying at 105 ℃ > drying at 80 ℃ > drying at 60 ℃ > natural drying. Under the freeze drying process， the triterpenes and pachymic acid contents of Poria cocos were up to 8.95% and 6.89%， respectively， and the triterpenoids and pachymic acid contents of natural drying Poria cocos were the lowest. The best drying method of Poria cocos was determined to provide reference for the selection of the post-processing technology of Poria cocos.

Key words： Poria cocos； drying method； triterpenes； pachymic acid； content determination

收稿日期：2021-11-08

基金項目：云南省科技廳重大科技專項計劃項目（2018F004）；國家自然科學基金項目（31900300）

作者簡介：余正勇（1992-），男，云南沾益人，助理研究員，碩士，主要從事中藥質(zhì)量控制與產(chǎn)地加工研究，（電話）15912278983（電子信箱）yzy19921123@163.com；通信作者，高明菊（1974-），男，云南文山人，研究員，碩士，主要從事中藥質(zhì)量控制與產(chǎn)地加工研究，（電話）13769627696（電子信箱）gaomingju@163.com。

茯苓（Poria cocos）是一種真菌類的中藥材［1］。宋代醫(yī)書《本草衍義》中將茯苓稱為茯神，茯苓的行水功能好，不僅能健脾，而且能浸潤濕氣，是補肺健脾、治療氣虛化痰濕的佐藥，同時可用于治療煩躁、焦慮、高血脂等病癥［2，3］。隨著藥學研究的發(fā)展，茯苓的藥理作用得到了進一步的認識，其臨床應用也越來越受到重視。茯苓三萜類和茯苓酸對人們的身體有益，主要有延緩衰老［4］、增強身體免疫力［5］、消除炎癥、抑制癌癥等作用。且相比其他的中藥材而言，茯苓容易種植，所以人們可以根據(jù)中藥材市場的需求對茯苓進行種植、加工、生產(chǎn)，同時茯苓還是一種副作用少、療效好、品種多種多樣、價格實惠且食用方便的中藥材。學者除了研究茯苓三萜類及茯苓酸藥理方面［6］，還對其他方面有研究，比如：茯苓三萜類及茯苓酸的分離純化［7］、活性研究［8，9］等。除此之外，茯苓還是藥食兩用的中藥材，可以做成藥膳，也可以用作保健品，有美容養(yǎng)顏、健脾益腎的功效［10，11］，頗受人們的喜愛。

近年來中藥飲片的發(fā)展趨勢好，越來越多的人開始從事中藥飲片的生產(chǎn)，中藥飲片的生產(chǎn)有一條完整的生產(chǎn)鏈，其中加工對中藥飲片的質(zhì)量控制十分重要。在中藥飲片的加工過程中，干燥是不可缺少的一個重要步驟，選擇適合的干燥方式可以最大限度地節(jié)約生產(chǎn)成本，更重要的是可以保留人體所需要的有效成分，使中藥飲片的價值得到更好的發(fā)揮。茯苓的干燥方式繁多，有自然曬干法、陰干法、烘干法、噴霧干燥、凍干法等。隨著科學技術(shù)的不斷發(fā)展，茯苓的加工工藝越來越受到重視，加工方式也變得多種多樣。

目前研究較多的是茯苓飲片中多糖［12-14］、氨基酸［15］、礦質(zhì)元素［16］、三萜酸類［17-19］、總蛋白［20］等方面，而采用不同的干燥方式進行茯苓三萜類及茯苓酸含量分析這一方面的研究較少，特別是對茯苓凍干片的研究，所以本試驗采用紫外-可見分光光度法及高效液相色譜法對5種不同干燥方式（自然曬干、60 ℃烘干、80 ℃烘干、105 ℃烘干、凍干）的茯苓三萜類及茯苓酸進行含量分析，進而建立一種方便快捷、準確且可信度高的含量測定方式，同時為茯苓的干燥方式提供科學依據(jù)，利于人們選擇最適合的方法進行茯苓大規(guī)模的生產(chǎn)，使茯苓干燥能夠規(guī)范化、標準化，為云南中藥飲片發(fā)展奠定良好的技術(shù)基礎，積極推動云南中藥飲片行業(yè)、道地中藥材行業(yè)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

儀器與設備：UV-8000S型紫外可見分光光度計，寧波愛發(fā)科真空技術(shù)有限公司；LC-2011型高效液相色譜儀，天津奧特賽恩斯儀器有限公司；GLD-N280型真空冷凍干燥機，寧波愛發(fā)科真空技術(shù)有限公司；800Y型粉碎機，永康市鉑歐五金儀器有限公司；DZKW-S-6型電熱恒溫水浴鍋，濟南艾肯環(huán)保科技有限公司；FA224型電子分析天平，泰安市潤宏化工科技有限公司；AS7240型超聲波清洗機，天津奧特賽恩斯儀器有限公司；DHG-1918A型電熱恒溫鼓風干燥箱，山東檉碩化工有限公司。

材料與試劑：茯苓（批號：20190606），云南怒江；茯苓酸（批號：MUST-18072910）、茯苓新酸A（批號：MUST-18112002）、松苓新酸（批號：MUST-19032005）均購于常州中勝偉業(yè)化工有限公司；乙腈（色譜純，批號：20180601），山東檉碩化工有限公司；甲醇（分析純，批號：20180721）、高氯酸（分析純，批號：20180702）均購于泰安市潤宏化工科技有限公司；香草醛（分析純，批號：20180610），北京科益恒達科技有限公司；冰醋酸（分析純，批號：20180903）、乙酸乙酯（分析純，批號：20180805）均購于淄博安豪化工有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 茯苓干燥方法 隨機挑選茯苓鮮品，將其清洗擦干后橫向切成長度為2 cm，厚度為0.5 cm的薄片，進行干燥，具體步驟如下。自然曬干：取適量的茯苓薄片，將其均勻地鋪在薄板上，在太陽照射下曬干；60 ℃烘干：取適量的茯苓薄片，放入溫度為60 ℃的烘箱中烘干；80 ℃烘干：取適量的茯苓薄片，放入溫度為80 ℃的烘箱中烘干；105 ℃烘干：取適量的茯苓薄片，放入溫度為105 ℃的烘箱中烘干；凍干：取適量的茯苓薄片，將其放在冷凍干燥機中，制成茯苓凍干片。

1.2.2 三萜類含量測定方法 精密稱取減壓至恒重的茯苓酸對照品2.10 mg，置于5 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度線，搖勻，超聲（功率100 W，溫度50 ℃）至完全溶解，用0.45 μm微孔濾膜過濾，得到對照品溶液濃度為0.420 mg/mL；精密稱取5種不同干燥方式的茯苓樣品粉末（過5號篩）各0.5 g，將樣品置于具塞錐形瓶中，加入20 mL乙酸乙酯，精密稱定重量，超聲波提取30 min，冷卻后用乙酸乙酯補足失重，過濾，濾液即為供試品溶液。

精密吸取50、100、200、300、400、450 μL的對照品溶液，將其分別置于10 mL具塞試管中，在最大波長546 nm下測定吸光度，以濃度（C）為橫坐標，吸光度（A）為縱坐標，繪制標準曲線，整理試驗數(shù)據(jù)，得到相應的線性回歸方程為：y=5.504 5x-0.061 7，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6。

精密吸取0.5 mL的對照品溶液及供試品溶液，將其分別置于10 mL具塞試管中，水浴揮去溶劑，放置冷卻，往其中加入0.4 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液和1.8 mL高氯酸溶液，混勻，密塞，置于70 ℃恒溫水浴中加熱20 min，取出，冰浴10 min，加入5 mL冰醋酸，搖勻，隨行試劑作為空白對照，進行掃描（400～800 nm），選擇最大波長［21］，測定最大波長為546 nm，每批平行測定3次，得到茯苓供試品溶液中三萜類含量。

1.2.3 茯苓酸含量測定方法 精密稱取對照品茯苓酸1.90 mg、茯苓新酸A 1.82 mg、松苓新酸2.21 mg，置于2 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度線，超聲直至完全溶解，搖勻，以0.45 μm微孔濾膜過濾，得到對照品溶液濃度：茯苓酸為0.95 mg/mL、茯苓新酸A為0.91 mg/mL、松苓新酸為1.10 mg/mL；精密稱取5種不同干燥方式的茯苓樣品粉末（過7號篩）各2 g，將其置于50 mL具塞錐形瓶中，往其中加入20 mL的甲醇，精密稱定重量，超聲（功率100 W，溫度60 ℃）40 min，冷卻后用甲醇補足失重，用0.45 μm微孔濾膜過濾，濾液即為供試品溶液。

精密吸取供試品溶液各20 μL，采用Diamonsil-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），乙腈和去離子水溶液作為流動相，進行梯度洗脫（表1）。色譜條件：柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；進樣量：20 μL；檢測波長［21］：203 nm。每組平行測試3次，得到相應色譜圖數(shù)據(jù)。根據(jù)色譜圖分別計算出茯苓酸、茯苓新酸A、松苓新酸的平均含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 干燥茯苓薄片的觀察

觀察茯苓干燥后的薄片發(fā)現(xiàn)，就茯苓干燥后外觀而言，采用不同的干燥方式對茯苓進行加工，茯苓凍干片的外觀保存是最完整的，在極大程度上還原了中藥材的本來面目，干燥時間最短，但是成本相對較高。其次是60 ℃烘干的茯苓薄片外觀較好，操作步驟簡單方便，最后是80 ℃烘干、自然曬干的茯苓薄片，而105 ℃烘干的茯苓薄片外觀最差，并且在干燥過程中對時間的把握比較嚴格，溫度較高，容易發(fā)生烤焦的情況。

2.2 茯苓三萜類含量測定

不同的干燥方式會對茯苓中三萜類的含量產(chǎn)生影響，凍干工藝下的茯苓三萜類含量最高，達8.95%。自然曬干的茯苓中三萜類含量最低（7.14%）（表2）。原因推測為干燥的時間較長，雜質(zhì)多，茯苓中的水分沒有達到標準，有效成分出現(xiàn)部分損失的情況，從而導致自然曬干的茯苓中藥用成分含量減少。

2.3 茯苓酸含量測定

2.3.1 色譜條件 吸取混合對照品溶液和供試品溶液進樣檢測，經(jīng)過試驗證明混合標準品溶液和供試品溶液中各峰的分離度及對稱性良好，色譜條件適宜，具體色譜圖如圖1所示。

2.3.2 線性關(guān)系考察 精密吸取已經(jīng)配制好的混合對照品溶液，分別進樣2、4、6、8、10、12 μL進行測定，以混合對照品濃度（C）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，繪制相應的標準曲線，整理數(shù)據(jù)，計算茯苓酸、茯苓新酸A、松苓新酸的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)，具體數(shù)據(jù)見表3。

2.3.3 穩(wěn)定性試驗 精密吸取茯苓（云南怒江）供試品溶液1 mL，設置6個時間梯度，即0、2、4、8、12、? 24 h，按照時間順序依次進樣分析，得到相應色譜圖，記錄峰面積及相對保留時間。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)茯苓酸相應峰面積RSD為0.95%、茯苓新酸A相應峰面積RSD為0.88%、松苓新酸相應峰面積RSD為0.73%，相應峰相對保留時間RSD分別為1.62%、2.01%、2.12% ，故從RSD的變化可知，在24 h內(nèi)供試品溶液比較穩(wěn)定。

2.3.4 精密度試驗 精密吸取茯苓（云南怒江）供試品溶液1 mL，每次進樣20 μL，連續(xù)進樣6次，獲得相應數(shù)據(jù)。計算出茯苓酸、茯苓新酸A、松苓新酸相應峰面積RSD分別為2.15%、2.18%、1.99%，茯苓酸、苓新酸A、松苓新酸相應峰相對保留時間RSD分別為1.66%、1.89%、1.56%，可知精密度相對較好，試驗數(shù)據(jù)比較準確。

2.3.5 重復性試驗 吸取茯苓（云南怒江）樣品，精密稱定6份，供試品溶液的配制按“1.2.3”項的操作進行，并按“1.2.3”項的色譜條件依次進樣20 μL，得到相應的數(shù)據(jù)。將峰面積代入表3回歸方程中計算樣品中的平均含量，得到茯苓酸2.03 mg/g、茯苓新酸A 2.11 mg/g、松苓新酸1.87 mg/g，相應峰面積RSD分別為1.73%、1.61%、1.44%，相應峰相對保留時間RSD分別為2.22%、2.58%、1.92%，根據(jù)RSD的數(shù)據(jù)可知該試驗的重復性好。

2.3.6 加樣回收試驗 精密吸取茯苓（云南怒江）樣品，稱量6份，加入對照品溶液，按“1.2.3”項配制供試品溶液，測定茯苓酸、茯苓新酸A、松苓新酸的含量，計算平均加樣回收率。結(jié)果顯示茯苓酸、茯苓新酸A、松苓新酸的平均加樣回收率分別為99.71%、99.15%、99.63%，RSD分別為0.95%、1.33%、1.67%，符合相關(guān)規(guī)定。

2.3.7 含量測定 根據(jù)上述標準回歸方程，計算不同干燥方式下的茯苓中茯苓酸、茯苓新酸A和松苓新酸的平均含量（表4）。其中采用凍干法干燥的茯苓中茯苓酸、茯苓新酸A和松苓新酸的平均含量均最高，分別達6.89%、7.11%和6.75%。采用自然曬干含量均最低，分別為2.23%、2.49%和2.13%。

3 結(jié)論與討論

不同干燥方式會對茯苓中三萜類及茯苓酸的含量產(chǎn)生影響，凍干工藝下的茯苓三萜類含量最高，達8.95%，自然曬干的茯苓中三萜類含量最低。不同干燥方式下茯苓三萜類含量為凍干>105 ℃烘干>80 ℃烘干>60 ℃烘干>自然曬干。凍干茯苓飲片中茯苓酸含量高達6.89%，自然曬干的茯苓中茯苓酸含量為2.23%，含量最低，即不同干燥方式下茯苓酸含量為凍干>105 ℃烘干>80 ℃烘干>60 ℃烘干>自然曬干。

目前中藥飲片的前景一片光明，中藥飲片不僅是中藥材行業(yè)的重要支柱，也是人們生活的必需品之一，其與眾不同的加工規(guī)則以及炮制方法吸引了許多的研究學者。近年來，學者將西藥與中藥材進行對比后發(fā)現(xiàn)中藥材療效雖然相對緩慢，治療時間較長，但是對人們的身體傷害小，副作用低，在治療疾病的同時還可以起到強身健體、延年益壽的功效，是標本兼治的首選藥材。因此，中藥飲片行業(yè)得到了迅速發(fā)展，人們也加深了對中藥飲片的相關(guān)加工工藝的研究與開發(fā)。中藥飲片主要制作工序有挑選、洗、切、干燥、炮制和包裝，而干燥是中藥材加工生產(chǎn)流程中十分重要的一個環(huán)節(jié)。中藥飲片的干燥方法有很多，不同藥材有不同的干燥方式，即使是同一藥材干燥方式也會有所不同，人們在選擇加工方式時不僅要考慮加工成本，還要盡可能地使中藥材的藥用價值發(fā)揮到最大化。現(xiàn)代研究表明［2］，不同的干燥方式可能會引起藥物中成分的變化，因此選擇適合的干燥方式對中藥飲片的加工工藝意義重大。茯苓藥材中茯苓三萜類占有的比重大，療效好，研究意義深遠。測定5種不同干燥方式（自然曬干、60 ℃烘干、80 ℃烘干、105 ℃烘干、凍干）下茯苓三萜類和茯苓酸含量發(fā)現(xiàn)，同一批樣品中凍干工藝下茯苓三萜類和茯苓酸的含量最高，因此，凍干工藝是最優(yōu)選擇。為了確保最大程度地利用有效成分，使中藥材的藥用價值最大化，同時降低加工成本，增加經(jīng)濟效益，在藥材的加工過程中要注意干燥方式，確保藥材能物盡其用。中藥材中的有效成分會受到干燥方式的影響，選擇一種干燥效率高、雜質(zhì)少、有效成分高、經(jīng)濟效益好的干燥方式以及對中藥材的加工工藝進行完善可以作為廣大學者的一個研究方向，從而使中藥材逐漸大眾化，加快中藥材行業(yè)的發(fā)展。

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