王茜 新鄉(xiāng)學(xué)院3d打印學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程（河南 新鄉(xiāng) 453003）

內(nèi)容提要 目的探討全自動(dòng)血培養(yǎng)儀與全自動(dòng)微生物鑒定儀在血液感染細(xì)菌中鑒別診斷的差異。方法將本院2021年1月～2021年12月檢驗(yàn)科的101份血液為研究對(duì)象并將其分為兩份，一份采用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行檢測(cè)并納入對(duì)照組，另一份采用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行檢測(cè)并納入觀察組，比較兩組血標(biāo)本的細(xì)菌檢出率、檢出時(shí)間以及藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果觀察組與對(duì)照組兩種檢驗(yàn)方法下血液標(biāo)本細(xì)菌的陽(yáng)性菌與陰性菌檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。觀察組細(xì)菌檢出時(shí)間短于對(duì)照組（P＜0.05）。觀察組與對(duì)照組的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論于血液感染細(xì)菌的鑒別診斷方法上，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀與全自動(dòng)微生物鑒定儀均能有效準(zhǔn)確地檢出病原菌并提高確診率，但全自動(dòng)血培養(yǎng)儀在檢查效率上更具有優(yōu)勢(shì)。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展和更新，近年來(lái)各類新型抗菌藥物也得以現(xiàn)世并應(yīng)用于臨床治療，使得各類細(xì)菌的耐藥性不斷提高進(jìn)而誘發(fā)全身感染[1]，尤其是菌血癥，其感染發(fā)生率隨著多重耐藥菌的大量出現(xiàn)而不斷上升[2]。因此，為了有效降低這一現(xiàn)象的出現(xiàn)，選擇科學(xué)合適的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)確掌握細(xì)菌的耐藥情況，提高用藥的精確性至關(guān)重要。全自動(dòng)血培養(yǎng)儀同時(shí)具有培養(yǎng)和檢測(cè)兩種效用，不僅能夠有效降低血液標(biāo)本的污染，還能夠排除人為的干預(yù)[3]。全自動(dòng)微生物鑒定儀是一種結(jié)合計(jì)算機(jī)技術(shù)和微生物檢測(cè)技術(shù)，并利用傳統(tǒng)生化反應(yīng)實(shí)施自動(dòng)微生物檢測(cè)的技術(shù)[4,5]，近年來(lái)也在細(xì)菌檢測(cè)上被廣泛應(yīng)用。本文運(yùn)用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀和全自動(dòng)微生物鑒定儀檢測(cè)血液標(biāo)本并分析兩者的細(xì)菌鑒別診斷價(jià)值的差異，具體如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

將本院2021年1月～2021年12月檢驗(yàn)科的101份血液為研究對(duì)象并將其分為兩份，一份采用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行檢測(cè)并納入對(duì)照組，另一份采用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行檢測(cè)并納入觀察組。其中血液標(biāo)本患者資料，男61例，女40例；年齡18～54歲，平均（35.24±4.28）歲。本研究在醫(yī)學(xué)倫理會(huì)的批準(zhǔn)下進(jìn)行。

納入標(biāo)準(zhǔn)①年齡18～55歲；②血液標(biāo)本采集前48h內(nèi)未使用抗生素治療；③患者及家屬均簽署知情同意書；④血液標(biāo)本均來(lái)自發(fā)熱或感染的患者。

排除標(biāo)準(zhǔn)①患者合并其他凝血功能異?；蜓合到y(tǒng)疾病；②合并嚴(yán)重的心、肺功能疾病。

1.2 方法

標(biāo)本采集在患者晨起空腹時(shí)科室護(hù)士嚴(yán)格按照無(wú)菌操作步驟采集兩份20mL的外周靜脈血標(biāo)本并于0.5h內(nèi)送至檢驗(yàn)科，檢驗(yàn)科對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。

標(biāo)本檢測(cè)①觀察組采用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀器檢測(cè)。將需要檢測(cè)的血液標(biāo)本置入血培養(yǎng)瓶，接著將血培養(yǎng)瓶嚴(yán)格按照儀器操作步驟放入全自動(dòng)血培養(yǎng)儀（生產(chǎn)廠家珠海美華醫(yī)療科技有限公司；產(chǎn)品型號(hào)BC32），血培養(yǎng)儀以自傳的形式對(duì)血培養(yǎng)瓶進(jìn)行培養(yǎng)，其中設(shè)置儀器培養(yǎng)溫度為（35±1.5）?C，轉(zhuǎn)盤以26轉(zhuǎn)/min的速度勻速旋轉(zhuǎn)，以10min為周期對(duì)培養(yǎng)瓶進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)。利用血培養(yǎng)瓶激發(fā)產(chǎn)生的熒光通過(guò)光電檢測(cè)器和A/D轉(zhuǎn)換系統(tǒng)傳送給系統(tǒng)計(jì)算機(jī)分析程序。系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性瓶?jī)x器發(fā)出陽(yáng)性警報(bào)，并在主程序界面上的培養(yǎng)瓶位置號(hào)上顯示為紅色，可以取出培養(yǎng)瓶，轉(zhuǎn)接種培養(yǎng)皿后做細(xì)菌鑒定和直接藥敏實(shí)驗(yàn)。持續(xù)培養(yǎng)5d后未發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的血培養(yǎng)瓶，報(bào)告為陰性瓶，且主程序界面上的培養(yǎng)瓶位置號(hào)上顯示為草綠色，取出培養(yǎng)瓶。當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)抽取樣品并注入無(wú)菌試管中，在離心處理后收取沉淀，再用生理鹽水洗滌兩次得到細(xì)菌懸液，接著進(jìn)行涂片并開(kāi)始鏡檢，當(dāng)鏡檢結(jié)果顯示陽(yáng)性，使用羊血板進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。除此之外，根據(jù)鏡檢結(jié)果選用合適的氧化酶并調(diào)整菌液濃度，將其接種到PC11綜合板上，最后用微生物分析儀實(shí)施鑒定；②對(duì)照組采用全自動(dòng)微生物鑒定儀檢測(cè)。將得到的血液標(biāo)本接種到提前準(zhǔn)備好的血瓊脂平板和瓊脂平板上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)環(huán)境保持溫度32?C，時(shí)間13～23h，CO2濃度保持5%。培養(yǎng)結(jié)束后，分離菌株，并按要求配置出一定細(xì)菌濃度的菌懸液，接著實(shí)施鏡檢和常規(guī)藥敏試驗(yàn)。同時(shí)將其置全自動(dòng)微生物鑒定儀的鑒定卡架上，連接菌液管和鑒定卡，采用比色比濁法，并于全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)內(nèi)輸入相關(guān)信息，全自動(dòng)微生物鑒定儀（生產(chǎn)廠家上海梅里埃生物制品有限公司；產(chǎn)品型號(hào)VitekCompact型）實(shí)施自動(dòng)培養(yǎng)和檢測(cè)，15～18h后得到結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

比較實(shí)施兩組檢驗(yàn)方法的血液檢驗(yàn)結(jié)果，藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及檢驗(yàn)時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用%表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用±s表示，行t檢驗(yàn)，等級(jí)資料用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 兩組實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較

觀察組與對(duì)照組兩種檢驗(yàn)方法下血液標(biāo)本陰性菌、陽(yáng)性菌檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1.兩組試驗(yàn)結(jié)果比較[n(%)]

2.2 兩組藥敏試驗(yàn)結(jié)果比較

觀察組與對(duì)照組的藥敏結(jié)果符合率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2.兩組藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 兩組檢驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)比較

觀察組對(duì)血液感染中細(xì)菌的所需鑒別診斷時(shí)間為（14.66±3.24）h，對(duì)照組所需時(shí)間為（26.16±4.71）h，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=20.248，P＜0.001）。

3.討論

血液感染常常指敗血癥，是指細(xì)菌已經(jīng)進(jìn)入到血液循環(huán)，并且在血液當(dāng)中進(jìn)行繁殖[6]。細(xì)菌隨著血液循環(huán)可以累及身體的各個(gè)器官，嚴(yán)重的患者可以引起多臟器的功能衰竭，感染中毒性休克，且該病具有較高的死亡率[7]。所以對(duì)于血液感染的患者，應(yīng)該盡早到醫(yī)院就診，通過(guò)抗感染治療，幫助患者有效地控制病情，降低患者的病死率。但是由于臨床上治療該病時(shí)常會(huì)在病原菌不明確的情況下經(jīng)驗(yàn)性的使用一些抗生素，使得病原菌的耐藥性不斷加強(qiáng)[8]，嚴(yán)重影響其治愈。因此，為了了解病原菌的種類以及耐藥特點(diǎn)，對(duì)血液感染中的細(xì)菌進(jìn)行檢驗(yàn)成為有效治療血液感染的關(guān)鍵步驟。傳統(tǒng)的方式進(jìn)行血液檢驗(yàn)難度大且耗時(shí)長(zhǎng)，極易延誤病情，錯(cuò)失治療最佳時(shí)機(jī)。全自動(dòng)血培養(yǎng)儀與全自動(dòng)微生物鑒定儀作為兩種先進(jìn)的醫(yī)療設(shè)備，在血液感染的檢測(cè)上具有操作簡(jiǎn)單檢測(cè)速度快等優(yōu)勢(shì)。

全自動(dòng)血培養(yǎng)儀由轉(zhuǎn)盤、驅(qū)動(dòng)電機(jī)、控制電路、光電檢測(cè)系統(tǒng)以及溫控系統(tǒng)等組成，并設(shè)有自動(dòng)矯正和質(zhì)控檢測(cè)功能，具有自動(dòng)化培養(yǎng)和快速檢測(cè)的特點(diǎn)。其工作原理是采用均質(zhì)熒光增強(qiáng)檢測(cè)技術(shù)。通過(guò)培養(yǎng)瓶底部的熒光傳感器受細(xì)菌產(chǎn)生的代謝物質(zhì)激發(fā)產(chǎn)生熒光，熒光強(qiáng)度隨著細(xì)菌數(shù)量的增加而不斷增強(qiáng)，最后系統(tǒng)根據(jù)熒光變化趨勢(shì)判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)[9]。優(yōu)勢(shì)之處在于①能提供不同細(xì)菌繁殖所必需的增菌液體培養(yǎng)基，還包含適宜的氣體成分，以最大限度檢出所有陽(yáng)性標(biāo)本，防止假陰性；②連續(xù)恒溫震蕩方式培養(yǎng)和自動(dòng)連續(xù)監(jiān)測(cè)，可使微生物生長(zhǎng)更快，易于檢出，并保證陽(yáng)性標(biāo)本能在第一時(shí)間檢出；③采用封閉式非侵入性監(jiān)測(cè)方式，可避免標(biāo)本交叉污染和實(shí)驗(yàn)室人員的院內(nèi)感染，符合生物安全要求；④設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控程序，定時(shí)進(jìn)行溫度、感應(yīng)器等監(jiān)控，以保證儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)；⑤強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理能力，培養(yǎng)瓶采用雙條形碼技術(shù)，所有環(huán)節(jié)均自動(dòng)完成，并可與醫(yī)院LIS系統(tǒng)聯(lián)網(wǎng)，實(shí)現(xiàn)即時(shí)查詢、報(bào)告功能。

全自動(dòng)微生物鑒定儀其工作原理為利用微生物對(duì)不同碳源代謝率的差異，針對(duì)每一類微生物篩選多種不同的碳源，配合顯色物質(zhì)，固定于孔板上，結(jié)合陰性對(duì)照，接種菌懸液后培養(yǎng)一定時(shí)間，通過(guò)檢測(cè)微生物細(xì)胞利用不同碳源進(jìn)行新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致的顏色變化（吸光度）以及由于微生物生長(zhǎng)造成的濁度差異（濁度），與標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，最終得出鑒定結(jié)果。其中提到的碳源是為微生物提供碳素來(lái)源的物質(zhì)，用于合成菌體，碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過(guò)一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的物質(zhì)（如糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等）。對(duì)比傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法，其優(yōu)勢(shì)之處在于較高的可操作性，靈敏度更高，錯(cuò)誤率更低[10,11]，因此已經(jīng)被眾多檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)所認(rèn)可[12]。

根據(jù)本次的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在對(duì)血液感染的細(xì)菌陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果上，使用全自動(dòng)血培養(yǎng)儀和全自動(dòng)微生物鑒定儀兩種檢驗(yàn)方法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，都具有較高的檢測(cè)率。大概是由于兩種檢驗(yàn)儀器都具有完善的檢測(cè)系統(tǒng)，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀通過(guò)自動(dòng)搖勻動(dòng)作促進(jìn)微生物的成長(zhǎng)，并利用其產(chǎn)生的二氧化碳與培養(yǎng)瓶底的染料發(fā)生作用出現(xiàn)熒光，接著通過(guò)熒光強(qiáng)度作出及時(shí)陽(yáng)性判斷；全自動(dòng)微生物鑒定儀則通過(guò)檢測(cè)不同微生物利用碳源新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化，將其與標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，得出相應(yīng)的鑒定結(jié)果。兩種檢驗(yàn)方法均應(yīng)用了生理學(xué)和生物學(xué)的鑒定方法且都具有自動(dòng)完備的檢測(cè)系統(tǒng)，所以兩組都具有完善的較高的陽(yáng)性檢出率。本研究中發(fā)現(xiàn)觀察組與對(duì)照組的革蘭性陽(yáng)性菌與革蘭氏陰性菌的藥物敏感性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？赡苁怯捎谌詣?dòng)血培養(yǎng)儀能夠顯示出陽(yáng)性菌與陰性菌，有利于檢測(cè)人員了解各類菌群的耐藥特點(diǎn)與藥敏情況。全自動(dòng)微生物鑒定儀通過(guò)對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)后得到標(biāo)準(zhǔn)濃度的菌懸液，再進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，促進(jìn)操作的標(biāo)準(zhǔn)化和藥敏結(jié)果的精確性。所以兩種檢驗(yàn)方法在藥敏試驗(yàn)的檢測(cè)性能上都具有較高性能。本研究結(jié)果顯示觀察組檢驗(yàn)時(shí)間低于對(duì)照組。可能是由于全自動(dòng)血培儀相比全自動(dòng)微生物鑒定儀減少了分離培養(yǎng)這一步驟，有效地降低了整體檢驗(yàn)時(shí)間。

綜上所述，全自動(dòng)血培養(yǎng)儀與全自動(dòng)微生物鑒定儀均能有效檢出血液細(xì)菌的陽(yáng)性率，并分析其對(duì)藥物的敏感性，但全自動(dòng)血培養(yǎng)儀有其更高的檢測(cè)效率。