劉新橋，胡貝，袁橋玉，宋煒，楊中正，吳婭

（1 中南民族大學(xué) a. 藥學(xué)院， b. 湖北省中藥活性物質(zhì)合作基地 武漢430074；2 武漢職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物工程學(xué)院，武漢 430074；3 三峽大學(xué) a. 第三臨床醫(yī)學(xué)院，b. 國(guó)藥葛洲壩中心醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 宜昌 443002；4 武漢生物技術(shù)研究院 a. 技術(shù)平臺(tái)部，b. 武漢生物樣本庫(kù)有限公司， 武漢 430075）

川黨參（Codonopsis tangshenOliv.，C. tangshen）為常用中藥黨參的來(lái)源植物之一，是多年生草本植物，生長(zhǎng)于海拔800～2300 m 處，主要分布于四川、湖北、貴州、陜西和湖南等地［1］.具有補(bǔ)中益氣、生津和胃之功效，用于治療內(nèi)熱消渴、食少便溏、氣短心悸等癥.目前，國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道已經(jīng)從川黨參中分離得到了炔烯類(lèi)、三萜類(lèi)、生物堿及含氮類(lèi)、木脂素類(lèi)及黃酮類(lèi)等多種化合物.現(xiàn)代藥理研究表明川黨參具有較好的抗炎活性，可用于治療胃潰瘍、腸道炎癥等疾?。?］.

磷酸二酯酶（phosphodiesterase 4，PDE4）為細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的環(huán)磷酸腺苷（cAMP）的降解酶，由4 種亞型（PDE4A～PDE4D）組成.PDE4 抑制劑選擇性抑制PDE4后，可增加細(xì)胞內(nèi)cAMP 的含量而激活蛋白激酶A（protein kinase A，PKA），從而加強(qiáng)PKA下游蛋白的磷酸化來(lái)抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生.但由于4 種亞型的催化結(jié)構(gòu)域具有較高的序列同源性，因此大多數(shù)PDE4抑制劑常被設(shè)計(jì)為占據(jù)PDE4D的催化結(jié)構(gòu)域，尤其是PDE4D2.PDE4抑制劑藥物可用于治療多種炎癥性疾病，如特異性皮炎、牛皮癬、慢性阻塞性肺病、炎癥性腸病等.目前已上市的PDE4抑制劑藥物如羅氟司特（roflumilast）、阿普司特（apremilast）等雖療效較好，但具有腹瀉、惡心、頭痛等副作用. 因此，從植物中尋找抗炎活性好且副作用小的PDE4抑制劑具有良好的研究前景［3-4］.

為了進(jìn)一步闡明川黨參中具有抗炎活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)川黨參的乙酸乙酯和石油醚部分進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，從中分離并鑒定了12個(gè)化合物（圖1），并對(duì)主要特征化合物與炎癥相關(guān)的靶點(diǎn)PDE4 進(jìn)行分子對(duì)接研究，為后續(xù)研究提供理論參考依據(jù).

圖1 化合物1～12的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structures of compounds 1-12

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

川黨參采自湖北神農(nóng)架，由中南民族大學(xué)藥學(xué)院劉新橋教授鑒定為川黨參（C. tangshen）的干燥根. 柱色譜硅膠（200～300目）和薄層色譜硅膠（青島海洋化工）；Sephadex LH-20（GE，美國(guó)）；50 μm 反相硅膠（YMC，日本）；分析純二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、石油醚、正丁醇（國(guó)藥集團(tuán)）；色譜純乙腈（賽默飛，美國(guó)）；色譜純甲醇（弗頓生化）；核磁共振波譜儀（600 MHz 和500 MHz，Bruker，瑞士）；高效液相色譜儀（Dionex UltiMate 3000，美國(guó)）；C18半制備型色譜柱（250 mm×20 mm，YMC，日本）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE2000A型，上海亞榮）.

PDB 數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.rcsb.org/）；PubChem 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）；SYBYL X 2.1.1（Tripos，美國(guó)）；Discovery Studio 2017 R2 Client（Accelrys，美國(guó)）；Pymol；Chemoffice 2014（PerkinElmer，美國(guó)）.

1.2 提取和分離

干燥的川黨參根（16 kg）粉碎后，用95%和60%乙醇進(jìn)行滲漉提取，將合并的總提取液濃縮后得總浸膏6 kg，用水混懸分散均勻后，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇溶液進(jìn)行萃取，得到石油醚萃取物169 g，乙酸乙酯萃取物98 g，正丁醇萃取物691 g.

取石油醚和乙酸乙酯合并部位267g，通過(guò)硅膠柱色譜技術(shù)，采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇（20∶1∶0，10∶1∶0，8∶1∶0，6∶1∶0，4∶1∶0，3∶1∶0，2∶1∶0，1∶1∶0，1∶2∶0，1∶3∶0，0∶1∶0，0∶95∶5，0∶9∶1，0∶8∶2）進(jìn)行梯度洗脫，共得到11 個(gè)組分（Fr.1～Fr.11）. Fr.7 經(jīng)硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-甲醇（500∶1～9∶1）洗脫，得到6個(gè)組分（Fr.7.1～7.6）. Fr.7.2經(jīng)Sephadex LH-20分離，用氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，得到5個(gè)組分（Fr.7.2.1～Fr.7.2.5）.Fr.7.2.1 用ODS-HPLC 純化（30%甲醇）得到化合物3（5.2 mg，tR=36.6 min）. Fr.7.2.4 用ODS-HPLC 純化（45%甲醇）得到化合物2（2.3 mg，tR=27.2 min）；（37%乙腈）得到化合物1（24.8 mg，tR=7.5 min）和化合物4（6.3 mg，tR=10.1 min）. Fr.7.4 經(jīng)Sephadex LH-20 分離，用氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，得到5 個(gè)組分（Fr.7.4.1～Fr.7.4.5）. Fr.7.4.3 經(jīng)反相硅膠柱分離，依次用30%、50%、70%以及90%甲醇洗脫得到4 個(gè)部分（Fr.7.4.3.1～Fr.7.4.3.4）. Fr.7.4.3.2 用ODS-HPLC 純化（48%甲醇）得到化合物7（6.7 mg，tR=33.7 min）；（44%甲醇）得到化合物8（6.7 mg，tR=40.3 min）；（35%甲醇）得到化合物5（2.5 mg，tR=59.9 min）. Fr.7.4.5 用ODS-HPLC 純化（30%甲醇）得到化合物6（17.6 mg，tR=25.2 min）；Fr.6經(jīng)硅膠柱柱色譜法分離，用二氯甲烷-甲醇（200∶1～95∶5）洗脫，得到6 個(gè)組分（Fr.6.1～6.6）. Fr.6.3經(jīng)Sephadex LH-20分離，用氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，得到4個(gè)組分（Fr.6.3.1～Fr.6.3.4）. Fr.6.3.3用ODS-HPLC 純化（90%甲醇）得到化合物9（75.8 mg，tR=19.9 min）和化合物10（42.5 mg，tR=15.8 min）. Fr.4經(jīng)硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-乙酸乙酯（500∶1～6∶1）洗脫，得到7 個(gè)組分（Fr.4.1～4.7）. Fr.4.4 經(jīng)Sephadex LH-20 分離，用氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，得到3 個(gè)組分（Fr.4.4.1～Fr.4.4.3）. Fr.4.4.2 用ODS-HPLC純化（48%甲醇）得到化合物11（2 mg，tR=14.8 min）.Fr.4.3 經(jīng)Sephadex LH-20 分離，用氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，得到3 個(gè)組分（Fr.4.3.1～Fr.4.3.3）. Fr.4.3.3 用ODS-HPLC 純化（40%甲醇）得到化合物12（2.1 mg，tR=24.3 min）.

1.3 分子對(duì)接

在PubChem 數(shù)據(jù)庫(kù)中根據(jù)化合物名稱(chēng)下載3D結(jié)構(gòu)，對(duì)于搜索不到的化合物則用ChemDraw 軟件畫(huà)出結(jié)構(gòu)式，用Chem 3D 轉(zhuǎn)換為3D 結(jié)構(gòu)；在PDB 數(shù)據(jù)庫(kù)中下載PDE4D2 的晶體結(jié)構(gòu)（1XOQ）；將靶蛋白和化合物導(dǎo)入到SYBYL X 2.1.1 中進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化和處理后，在Surflex-dock模式下進(jìn)行對(duì)接.

靶蛋白與配體之間的相互作用力用Total score值來(lái)表示，一般認(rèn)為T(mén)otal score 值越大，表明小分子配體與受體之間結(jié)合越好，相互作用力越強(qiáng). 當(dāng)Total score≥7時(shí)，表明小分子與配體結(jié)合較好［5］.

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色膠狀固體；1H NMR （500 MHz，CDCl3）δH：6.86 （2H， m， H-2′， 5′）， 6.84 （1H， d，J=8.5 Hz， H-5）， 6.80 （1H， dd，J=8.0， 2.1 Hz， H-6′），6.69 （2H， m， H-2， 6）， 4.79 （1H， d，J=6.6 Hz， H-7′），4.05 （1H， dd，J=8.6， 6.6 Hz， H-9a）， 3.91 （1H， dd，J=10.7， 3.6 Hz， H-9a′）， 3.88 （3H， s， 3-OCH3）， 3.87 （3H，s， 3′-OCH3）， 3.77（1H， m， H-9b′）， 3.75（1H， m，H-9b）， 2.91 （1H， dd，J=13.6， 5.2 Hz， H-7a）， 2.73（1H， m， H-8）， 2.55 （1H， dd，J=13.6， 10.7 Hz， H-7b）， 2.41 （1H， m， H-8′）；13C NMR （125 MHz， CDCl3）δC： 146.6 （C-3）， 146.5 （C-3′）， 145.0 （C-4′）， 144.0（C-4）， 134.8 （C-1′）， 132.3 （C-1）， 121.2 （C-6）， 118.7（C-6′）， 114.4 （C-5）， 114.2 （C-5′）， 111.2 （C-2）， 108.3（C-2′）， 82.8 （C-7′）， 72.9 （C-9）， 60.9 （C-9′）， 55.9（3′-OCH3）， 55.9 （3-OCH3）， 52.6 （C-8′）， 42.4 （C-8）， 33.3 （C-7）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］基本一致，因此鑒定化合物1為mangnostellin D.

化合物2：淡黃色膠狀固體；1H NMR （500 MHz，CDCl3）δH： 6.95 （2H， m， H-5， 6）， 6.93 （1H， d，J=2.6 Hz， H-2）， 6.89 （1H， d，J=8.2 Hz， H-5′）， 6.82（1H， d，J=2.0 Hz， H-2′）， 6.73 （1H， dd，J=8.2， 2.0 Hz，H-6′）， 4.92 （1H， d，J=8.3 Hz， H-7）， 4.01 （1H， m， H-8）， 3.92（3H， s， 3-OCH3）， 3.77（1H， dd，J=12.4，2.8 Hz， H-9a）， 3.68 （2H， t，J=6.4 Hz， H-9′）， 3.54（1H， dd，J=12.4， 4.1 Hz， H-9b）， 2.63 （2H， t，J=7.6 Hz， H-7′）， 1.87 （2H， m， H-8′）；13C NMR （125 MHz，CDCl3）δC： 146.9 （C-3）， 146.3 （C-4）， 143.6 （C-3′），141.3 （C-4′）， 135.3 （C-1′）， 128.1 （C-1）， 121.5 （C-6′），120.8 （C-6）， 117.0 （C-2′）， 116.8 （C-5′）， 114.6 （C-5），109.5 （C-2）， 78.1 （C-8）， 76.4 （C-7）， 62.3 （C-9′）， 61.8（C-9）， 56.0 （3-OCH3）， 34.2 （C-8′）， 31.3 （C-7′）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］基本一致，因此鑒定化合物2為（7S，8S）-3-methoxy-3′，7-epoxy-8，4′-oxyneoligna-4，9，9′-triol.

化合物3：淡黃色膠狀固體；1H NMR （500 MHz，CDCl3）δH： 6.84 （1H， d，J=8.0 Hz， H-5′）， 6.65 （1H，dd，J=8.0， 2.0 Hz， H-6′）， 6.59（1H， d，J=2.0 Hz，H-2′）， 6.57 （1H， s， H-6）， 6.28 （1H， s， H-3）， 3.88（1H， m， H-9b）， 3.85 （3H， s， 3′-OCH3）， 3.82 （3H，s， 5-OCH3）， 3.77 （1H， dd，J=11.1， 2.7 Hz， H-9a），3. 73 （1H， m， H-7′）， 3.71 （1H， m， H-9b′）， 3.51（1H， dd，J=11.2， 5.5 Hz， H-9a′）， 2.82 （1H， dd，J=15.8， 11.6 Hz， H-7a）， 2.72（1H， dd，J=15.9， 4.7 Hz，H-7b）， 2.02 （1H， m， H-8）， 1.85 （1H， m， H-8′）；13C NMR （125 MHz， CDCl3）δC： 146.7 （C-5）， 144.8 （C-3′）， 144.2 （C-4）， 143.5 （C-4′）， 137.0 （C-1′）， 132.8（C-2）， 127.5 （C-1）， 122.3 （C-6′）， 115.5 （C-3）， 114.2（C-5′）， 111.4 （C-2′）， 110.1 （C-6）， 66.4 （C-9）， 63.0（C-9′）， 56.0（3′-OCH3）， 55.9（5-OCH3）， 48.0 （C-8′）， 47.9 （C-7′）， 40.1 （C-8）， 33.3 （C-7）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］基本一致，因此鑒定化合物3 為isolariciresinol.

化合物4：淡黃色膠狀固體；1H NMR （500 MHz，CDCl3）δH： 9.85 （1H， s， H-7′）， 7.44 （1H， s， H-6′），7.41 （1H， d，J=1.5 Hz， H-2′）， 6.90 （3H， s， H-2， 4，6）， 5.70 （1H， d，J=7.1 Hz， H-7）， 4.01 （2H， m， H-9），3.96 （3H， s， 3′-OCH3）， 3.88 （3H， s， 3-OCH3）， 3.72（1H， q，J=6.1 Hz， H-8）；13C NMR （125 MHz， CDCl3）δC： 190.5 （C-7′）， 154.1 （C-4′）， 146.8 （C-3）， 146.0 （C-5）， 145.1 （C-3′）， 131.9 （C-1）， 131.4 （C-1′）， 128.6 （C-5′）， 120.9 （C-6′）， 119.5 （C-2）， 114.5 （C-4）， 112.1（C-2′）， 108.7 （C-6）， 89.5 （C-7）， 63.9 （C-9）， 56.1（3′-OCH3）， 56.0 （3-OCH3）， 52.7（C-8）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，因此鑒定化合物4 為curcasinlignan B.

化合物5：無(wú)色油狀液體；1H NMR （500 MHz，CD3OD）δH： 6.39 （1H， dt，J=16.0， 4.7 Hz， H-13）， 5.80（1H， m， H-4）， 5.77 （1H， m， H-12）， 5.55 （1H， ddt，J=15.4， 7.0， 1.5 Hz， H-5）， 4.21 （1H， dd，J=6.7，0.9 Hz， H-7）， 4.12 （2H， dd，J=4.7， 2.1Hz， H-14），3.97 （1H， td，J=6.8， 1.0 Hz， H-6）， 3.56 （2H， t，J=6.5 Hz， H-1）， 2.14（2H， q，J=7.6 Hz， H-3）， 1.63（2H， m， H-2）；13C NMR （125 MHz， CD3OD）δC：148.3 （C-13）， 135.2 （C-4）， 129.7 （C-5）， 108.5 （C-12），82.3 （C-8）， 77.4 （C-11）， 76.6 （C-6）， 74.3 （C-10），71.0 （C-9）， 67.8（C-7）， 62.7（C-14）， 62.3（C-1），33.1 （C-2）， 29.8 （C-3）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］基本一致，因此鑒定化合物5 為（4E，12Z）-threotetradeca-4，12-diene-8，10-diyne-1，6，7，14-tetraol.

化合物6：淡黃色膠狀固體；1H NMR （500 MHz，CD3OD）δH： 7.01 （1H， d，J=1.9 Hz， H-2）， 6.88 （1H，d，J=1.9 Hz， H-2′）， 6.84 （1H， dd，J=8.1， 1.9 Hz， H-6′）， 6.74 （3H， m， H-5， 5′， 6）， 6.45 （1H， m， H-7′），6.18 （1H， m， H-8′）， 4.21 （1H， m， H-8）， 4.18 （1H，d，J=1.5 Hz， H-9b）， 4.17 （1H， d，J=1.5 Hz， H-9a），3.85 （1H， dd，J=11.8， 6.5 Hz， H-9b′）， 3.80 （3H， s，3-OCH3）， 3.75 （1H， m， H-9a′）；13C NMR （125 MHz，CD3OD）δC： 149.0 （C-4）， 147.5 （C-3）， 147.3 （C-3′），133.9 （C-4′）， 133.8 （C-1）， 131.7 （C-1′）， 131.7 （C-7′），128.5 （C-8′）， 120.9 （C-6）， 119.6 （C-6′）， 116.0 （C-5）， 114.8 （C-5′）， 114.8 （C-2′）， 111.8 （C-2）， 87.4（C-8）， 74.1（C-7）， 63.9（C-9）， 62.1（C-9′）， 56.5（3-OCH3）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，因此鑒定化合物6 為（-）-（7R，8S，7′E）-3′，4-dihydroxy-3-methoxy-8，4′-oxyneoligna-7′-ene-7，9，9′-triol.

化合物7：無(wú)色油狀液體；1H NMR （600 MHz，CD3OD）δH： 6.09 （1H， dq，J=15.8， 6.8 Hz， H-13），6.04 （1H， dd，J=15.9， 5.9 Hz， H-8）， 5.81 （1H， m， H-4）， 5.72 （1H， m， H-9）， 5.61 （1H， dp，J=15.8， 1.9 Hz，H-12）， 5.48（1H， m， H-5）， 3.98 （1H， td，J=6.1，1.5 Hz， H-6）， 3.89 （1H， m， H-7）， 3.56 （2H， t，J=6.5 Hz， H-1）， 2.13 （2H， m， H-3）， 1.78 （3H， dd，J=6.8， 1.9 Hz， H-14）， 1.62（2H， m， H-2）；13C NMR（150 MHz， CD3OD）δC： 142.7 （C-8）， 140.3 （C-13），134.5 （C-5）， 130.6 （C-4）， 112.4 （C-12）， 112.1 （C-9），89.7 （C-10）， 86.9 （C-11）， 76.8 （C-6）， 76.3 （C-7），62.3 （C-1）， 33.1 （C-2）， 29.8 （C-3）， 18.7 （C-14）.以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，因此鑒定化合物7 為tetradeca-4E，8E，12E-triene-10-yne-1，6，7-triol.

化合物8：無(wú)色油狀液體；1H NMR （600 MHz，CD3OD）δH： 6.32 （1H， dq，J=15.8， 6.9 Hz， H-2）， 5.80（1H， dtd，J=15.0， 6.8， 1.0 Hz， H-11）， 5.58（1H，m， H-10）， 5.55（1H， m， H-3）， 4.20 （1H， dd，J=6.7， 0.8 Hz， H-8）， 3.97 （1H，td，J=6.8， 1.0 Hz， H-9）， 3.57 （2H， t，J=6.5 Hz， H-14）， 2.14 （2H， m， H-12）， 1.80 （3H， dd，J=6.9， 1.9 Hz， H-1）， 1.63 （2H，m， H-13）；13C NMR （150 MHz， CD3OD）δC： 145.2（C-2）， 135.2（C-11）， 129.7（C-10）， 110.5（C-3），81.6 （C-4）， 78.0 （C-5）， 76.6 （C-9）， 72.5 （C-7），71.2 （C-6）， 67.7 （C-8）， 62.3 （C-14）， 33.1 （C-13），29.8 （C-12）， 18.9 （C-1）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，因此鑒定化合物8為lobetyol.

化合物9：淡黃色油狀液體；1H NMR （600 MHz，CDCl3）δH： 5.36 （4H， m， H-9′， 10′， 12′， 13′）， 4.14（2H， m， H-1′）， 3.92 （1H， m， H-2′）， 3.68 （1H， dd，J=11.6， 3.7 Hz， H-3a′）， 3.58 （1H， dd，J=11.6， 6.1 Hz，H-3b′）， 2.77 （2H， t，J=6.9 Hz， H-11′）， 2.35 （2H， t，J=6.9 Hz， H-2）， 2.05 （4H， q，J=7.7 Hz， H-8′， 14′），1.62 （2H， m， H-3）， 1.32 （14H， m， H-4′， 5′， 6′， 7′，15′， 16′， 17′）， 0.89 （3H， t，J=6.9 Hz， H-18′）；13C NMR （150 MHz， CDCl3）δC： 174.4 （C-1′）， 130.2 （C-10′）， 130.0 （C-12′）， 128.1 （C-13′）， 127.9 （C-9′），70.2（C-2）， 65.1 （C-1）， 63.4（C-3）， 34.2（C-2′），31.5 （C-16′）， 29.6 （C-6′）， 29.4 （C-7′）， 29.2 （C-15′）， 29.1 （C-4′）， 29.1（C-5′），27.2 （C-8′）， 27.2（C-14′）， 25.6 （C-11′）， 24.9 （C-3′）， 22.6 （C-17′），14.1 （C-18′）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］基本一致，因此鑒定化合物9為1-α-linoleoylglycerol.

化合物10：淡黃色油狀液體；1H NMR （600 MHz，CDCl3）δH： 5.37 （6H， m， H-9′， 10′， 12′， 13′， 15′， 16′），4.16 （2H， m， H-3）， 3.92 （1H， m， H-2）， 3.69 （1H，dd，J=11.5， 3.9 Hz， H-1a）， 3.59 （1H， dd，J=11.5，6.0 Hz， H-1b）， 2.80 （4H， m， H-11′， 14′）， 2.35 （2H，t，J=7.6 Hz， H-2′）， 2.06 （4H， m， H-8′， 17′）， 1.63（2H， m， H-3′）， 1.29 （8H， m， H-4′， 5′， 6′， 7′）， 0.98（3H， t，J=7.3 Hz， H-18）；13C NMR （150 MHz， CDCl3）δC： 174.4 （C-1′）， 132.0 （C-9′）， 130.3 （C-16′）， 128.3（C-12′）， 128.2 （C-13′）， 127.8 （C-15′）， 127.1 （C-10′），70.2（C-2）， 65.1（C-3）， 63.3（C-1）， 34.1（C-2′），29.6 （C-7′）， 29.2 （C-5′）， 29.1 （C-4′）， 27.2 （C-8′），25.6（C-14′）， 25.5 （C-11′）， 24.9（C-3′）， 20.6（C-17′）， 14.3 （C-18′）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］基本一致，因此鑒定化合物10 為glycerol 1-（9，12，15-octadecatrienoate）.

化合物11：淡黃色粉末；1H NMR （500 MHz，CD3OD）δH： 7.26 （2H， s， H-2′， 6′）， 3.91 （6H， s， 3，5-OCH3）， 2.96 （2H， q，J=7.3 Hz， H-2）， 1.22 （3H， t，J=7.3 Hz， H-3）；13C NMR （125 MHz， CD3OD）δC：199.3 （C-1）， 146.7 （C-3′， 5′）， 139.4 （C-4′）， 128.6 （C-1′）， 105.3 （C-2′， 6′）， 56.5 （3， 5-OCH3）， 31.4 （C-2）， 8.5 （C-3）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］基本一致，因此鑒定化合物11 為3，5-二甲氧基-4-羥基-苯丙酮.

化合物12：淡黃色粉末；1H NMR （500 MHz，CDCl3）δH： 7.33 （2H， s， H-2， 6）， 4.37 （2H， q，J=7.1 Hz， H-8）， 3.95 （6H， s， 3， 5-OCH3）， 1.40 （3H， t，J=7.1 Hz， H-9）；13C NMR （125 MHz， CD3OD）δC：168.3 （C-7）， 149.0 （C-3， 5）， 141.2 （C-4）， 122.2 （C-1）， 108.1 （C-2， 6）， 62.0 （C-8）， 56.8 （3， 5-OCH3），14.7 （C-9）. 以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16］進(jìn)行基本一致，因此鑒定化合物12為syringic acid ethyl ester.

2.2 分子對(duì)接結(jié)果及作用分析

根據(jù)分子對(duì)接結(jié)果可知（表1），有4個(gè)化合物的total score≥7，分別為：mangnostellin D、（7S，8S）-3-methoxy-3′，7-epoxy-8，4′-oxyneoligna-4，9，9，′-triol、（-）-（7R，8S，7′E）-3′，4-dihydroxy-3-meth-oxy-8，4′-oxyneoligna-7′-ene-7，9，9′-triol、（4E，12Z）-threotetradeca-4，12-diene-8，10-diyne-1，6，7，14-tetraol. 選取得分最高的化合物mangnostellin D，用DS 軟件和Pymol 軟件分析二者之間的相互作用力.根據(jù)相互作用力圖可知，mangnostellin D 與氨基酸HIS160、MET273、GLN369 形成氫鍵，與氨基酸HIS164、ILE336、PHE372 形成了疏水相互作用；其中氫鍵和疏水作用為主要作用力（圖2-3）.

表1 川黨參化學(xué)成分與磷酸二酯酶4D2對(duì)接結(jié)果Tab. 1 Docking results of chemical constituents from C. tangshen and PDE4D2

圖2 化合物1與PDE4D2相互作用的2D圖Fig.2 2D diagram of the interaction between compound 1 and PDE4D2

圖3 化合物1與PDE4D2相互作用的3D圖Fig.3 3D diagram of the interaction between compound 1 and PDE4D2

3 結(jié)語(yǔ)

（1）分離得到了12 個(gè)化合物，其中化合物1、4、10、11和12為首次從該植物中分離得到.

（2）將川黨參中的主要特征化合物1～8 與PDE4D2 對(duì)接發(fā)現(xiàn)，mangnostellin D、（7S，8S）-3-methoxy-3′，7-epoxy-8，4′-oxyneoligna-4，9，9，′-triol、（-）-（7R，8S，7′E）-3′，4-dihydroxy-3-methoxy-8，4′-oxyneoligna-7′-ene-7，9，9′-triol、（4E，12Z）-threotetradeca-4，12-diene-8，10-diyne-1，6，7，14-tetraol 與PDE4D2 有較好的結(jié)合活性. 本研究為尋找新型磷酸二酯酶PDE4D2抑制劑提供了參考.