張欣 崔敏 楊雷 趙立偉 王云龍 尉成鑫

摘? 要：本文針對(duì)豬群中豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）不同感染狀態(tài)，通過(guò)不同防控措施（接種疫苗、藥物保健和生產(chǎn)組織優(yōu)化），探討了豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）的防控經(jīng)驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果：PRRSV陽(yáng)性不穩(wěn)定豬群，接種PRRS滅活疫苗連續(xù)2次，1個(gè)月可實(shí)現(xiàn)豬群抗原陰性，陰性維持時(shí)間大約100 d；PRRSV陰性豬群采用PRRS弱毒活疫苗半數(shù)低劑量免疫，排毒時(shí)間約28 d，免疫豬群100％轉(zhuǎn)陽(yáng)，而未免疫豬轉(zhuǎn)陽(yáng)率為30％～40％。

關(guān)鍵詞：PRRSV；疫苗；半數(shù)低劑量

中圖分類(lèi)號(hào)：S851.33 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2024）01-0028-04

豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是影響?zhàn)B豬業(yè)的重要經(jīng)濟(jì)性疾病，按照豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）感染狀態(tài)可將豬群分為4類(lèi)：陰性群、假定陰性群、陽(yáng)性穩(wěn)定群、陽(yáng)性不穩(wěn)定群^[1]。針對(duì)不同感染狀態(tài)的豬群，采取的防控措施亦不相同，主要防控措施有：閉群生產(chǎn)、清群和重新組群、血清馴化、接種疫苗、藥物保健等，結(jié)合管理變革以減少風(fēng)險(xiǎn)從而消除損失（mangement changes to reduce exposure to eliminate losses，McREBEL）管理模式，降低PRRSV感染導(dǎo)致的損失。PRRSV是RNA病毒，其病毒重組和變異速度較快，優(yōu)勢(shì)毒株P(guān)RRSV NADC30株及NADC34株^[2]，為疾病的防控帶來(lái)更大的挑戰(zhàn)。本文通過(guò)臨床實(shí)踐案例，旨在提供不同感染狀態(tài)下的PRRS防控思路。

1? 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣本

某規(guī)模化豬場(chǎng)母豬存欄10 000頭，分為? ?4條生產(chǎn)線(xiàn)，一胎線(xiàn)2 000頭，實(shí)施周批次生產(chǎn)，斷奶后轉(zhuǎn)入經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)；三條經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)，每條經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)分為3棟豬舍，每棟豬舍存欄800頭，經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)實(shí)施3周批次生產(chǎn)；獨(dú)立公豬站。生產(chǎn)線(xiàn)中的一胎線(xiàn)和經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)母豬分別于2022年5月19日、6月18日檢測(cè)到PRRSV抗原陽(yáng)性，立即接種PRRS（CH-1a株）滅活疫苗，間隔3周進(jìn)行二次免疫，母豬群PRRS疫情不穩(wěn)定階段飼料中添加500 mg/kg泰萬(wàn)菌素，連續(xù)使用1周，生產(chǎn)組織上暫停豬群流動(dòng)，實(shí)施相對(duì)閉群管理。接種疫苗后采集母豬口腔液，持續(xù)監(jiān)測(cè)PRRSV抗原。

對(duì)于4 510頭PRRSV抗原和抗體陰性的斷奶仔豬，為降低PRRSV抗體突然轉(zhuǎn)陽(yáng)的風(fēng)險(xiǎn)，啟動(dòng)PRRS弱毒活疫苗（modified-live virus vaccine，MLV疫苗）接種干預(yù)，按照每欄50％的仔豬接種，接種劑量為0.25頭份/頭。仔豬接種疫苗后采集其口腔液，監(jiān)控PRRSV抗原，連續(xù)監(jiān)控5周，第6周每棟豬舍各采集30頭免疫和未免疫仔豬血清，檢測(cè)PRRSV抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)情況。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 RNA的提取

取母豬口腔液200 μL，按照MagaBio Plus病毒DNA/RNA純化試劑盒提取總樣本RNA，凍存于－80 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 Real-Time PCR法檢測(cè)PRRSV抗原

反應(yīng)體系：上/下游引物各0.4 μL；探針0.8 μL；2×One step RT-PCR Buffer Ⅱ 10 μL；Ex Taq Hs熱啟動(dòng)酶0.4 μL；Prime Script RT Enzyme Mix Ⅱ 0.4 μL；模板RNA 2.5 μL；ddH2O 5.2 μL。反應(yīng)條件：45 ℃ 5 min，95 ℃ 30 s，95 ℃10 s，55 ℃ 31 s，72 ℃ 20 s，40個(gè)循環(huán)。

1.2.3 PRRSV抗體檢測(cè)方法

按照豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自IDEXX。

2? 結(jié)果與分析

母豬流產(chǎn)率按以下公式計(jì)算：

流產(chǎn)率（％）=當(dāng)月流產(chǎn)數(shù)/當(dāng)月配種數(shù)×100％

設(shè)定警戒線(xiàn)為1.5％。一胎線(xiàn)和經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)母豬PRRSV抗原檢測(cè)陽(yáng)性，當(dāng)月流產(chǎn)率分別為3.84％和4.31％（圖1）。

通過(guò)兩次接種疫苗和藥物保健的干預(yù)措施，一胎線(xiàn)母豬30 d后抗原檢測(cè)陰性，陰性維持時(shí)間100 d。經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)母豬27 d后抗原檢測(cè)陰性，陰性維持時(shí)間103 d（圖2）。

接種疫苗前檢測(cè)豬群PRRSV抗原和抗體均為陰性。接種疫苗后1周，豬群排毒量達(dá)到80％，說(shuō)明PRRS MLV疫苗能夠有效實(shí)現(xiàn)陽(yáng)性豬的感染，且通過(guò)口腔液進(jìn)行排毒，通過(guò)持續(xù)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)排毒時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)28 d（表1）。對(duì)于同欄未接種疫苗的豬進(jìn)行抗體檢測(cè)和監(jiān)測(cè)，免疫豬抗體陽(yáng)性率100％，而未免疫豬抗體陽(yáng)性率為30％～40％（不同豬舍存在差異），未達(dá)到100％轉(zhuǎn)陽(yáng)。

3? 討論

滅活疫苗在PRRS的防控上仍存在爭(zhēng)議，本研究采用PRRS滅活疫苗連續(xù)接種2次可以快速穩(wěn)定陽(yáng)性不穩(wěn)定群，歸因于接種滅活疫苗后可以再次激活母豬的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)先前的免疫力^[3]。隨著疫苗抗原含量和佐劑的研究，滅活疫苗的應(yīng)用也日趨廣泛，匈牙利某大型PRRSV抗原陽(yáng)性豬場(chǎng)通過(guò)使用滅活疫苗和隔離飼養(yǎng)后代，成功凈化了PRRS^[4]。

生產(chǎn)不穩(wěn)定期間，應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物可以降低由PRRSV引起的母豬流產(chǎn)所造成的損失，有利于縮短疾病持續(xù)期。生產(chǎn)組織上啟動(dòng)閉群生產(chǎn)，一胎線(xiàn)斷奶母豬不進(jìn)入經(jīng)產(chǎn)線(xiàn)，可以降低不同來(lái)源豬混群引起的生產(chǎn)波動(dòng)。

本研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于PRRSV雙陰性（抗原、抗體均陰性）后備豬群接種PRRS滅活疫苗，不同PRRSV抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)抗體，均為陰性。免疫豬群轉(zhuǎn)入生產(chǎn)群后出現(xiàn)發(fā)燒、厭食和流產(chǎn)癥狀，PRRSV抗原和抗體檢測(cè)均為陽(yáng)性，因此雙陰豬群進(jìn)入陽(yáng)性群不建議使用PRRS滅活疫苗。

PRRSV陰性豬群的風(fēng)險(xiǎn)來(lái)自于外部感染的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于地理位置不佳和豬群密度高的區(qū)域，需要采取活疫苗免疫策略來(lái)實(shí)現(xiàn)人工轉(zhuǎn)陽(yáng)，以降低PRRSV侵入陰性豬群后暴發(fā)疾病的損失。本研究采用同欄半數(shù)豬接種低劑量PRRS MLV疫苗的措施，實(shí)現(xiàn)了至少80％的豬群抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)，通過(guò)連續(xù)跟蹤排毒，PRRS MLV疫苗在陰性豬群免疫后的排毒時(shí)間大約是28 d，此結(jié)果與Linhares等^[5]的研究基本一致。未免疫豬的PRRSV抗體未完全轉(zhuǎn)陽(yáng)，可能與接種劑量和疫苗株相關(guān)。由此可見(jiàn)，PRRSV的水平傳播足以實(shí)現(xiàn)豬群的感染。在非洲豬瘟常態(tài)化的背景下，此研究可為雙陰性豬群的人工轉(zhuǎn)陽(yáng)提供借鑒。

參考文獻(xiàn)

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作者簡(jiǎn)介：張欣（1980－ ），男，博士，主要從事規(guī)?；i場(chǎng)健康管理和疾病防控工作