邱正 張紅 劉超 張志山

摘 要：在水溫24 ℃下進行了不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚麻醉效果研究。結(jié)果表明，不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚都有較好的麻醉以及復(fù)蘇效果，10～70 mg/L的丁香酚都能在6 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚進入麻醉期，在10 min中內(nèi)完成麻醉魚的復(fù)蘇，復(fù)蘇率以及72 h成活率均達到100%。麻醉時間隨著丁香酚的濃度上升而縮短，與濃度呈負相關(guān)。麻醉后復(fù)蘇所需要的時間隨濃度上升依次增加，與濃度呈正相關(guān)。其中30～40 mg/L濃度的丁香酚能達到3 min麻醉5 min蘇醒，效果最佳。同時進行了20～28 ℃水溫對（30 mg/L濃度的丁香酚）鳳尾鵝頭紅金魚麻醉及復(fù)蘇時間的研究。結(jié)果表明，20～28 ℃水溫都能在5 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚進入麻醉期，在7 min中內(nèi)完成麻醉魚的復(fù)蘇，復(fù)蘇率以及72 h成活率均達到100%。隨著溫度的升高，達到M3麻醉期及M5完全復(fù)蘇期所需時間呈縮短趨勢，與水溫呈負相關(guān)。其中在30 mg/L濃度的丁香酚濃度下，控制水溫在24～28 ℃，均能使試驗魚3 min麻醉5 min蘇醒，效果最佳。

關(guān)鍵詞：丁香酚；鳳尾鵝頭紅金魚；麻醉；復(fù)蘇

鳳尾鵝頭紅金魚屬鯉形目（Cypriniforms），鯉科（Cyprinidae），鯽屬（Carassius）蛋種魚的一種，具有很高的觀賞價值[1-2]。鳳尾鵝頭紅金魚為鵝頭紅與丹鳳金魚經(jīng)過多代雜交后選育出的兼具鵝頭紅的紅頂白身和丹鳳的長薄尾鰭等優(yōu)良性狀于一身的新品系，民間有“極品中的極品”之說。鳳尾鵝頭紅金魚魚體潔白無雜色，頭如鵝頭，頭瘤紅彩鮮艷，頭部紅色不過鰓，背部光滑平整，無背鰭，無刺尾，雙尾長薄鰭（圖1）。由于鳳尾鵝頭紅金魚極高的經(jīng)濟價值，在進行人工繁殖[3]、運輸、測量時很容易擦傷，影響其觀賞性，因此選擇一種安全、高效的魚用麻醉劑，對鳳尾鵝頭紅金魚的日常人工操作十分必要。

丁香酚（Eugenol） ，化學(xué)名為2－甲氧－4－丙烯基酚，又稱丁子香酚，是一種無色或淡黃色的油狀液體，有強烈的丁香的香氣。近幾年來，丁香酚已經(jīng)被很多國家和地區(qū)認定為沒有藥物殘留的合法水產(chǎn)麻醉劑[4-6]，并且被廣泛應(yīng)用在親魚的人工繁殖、活魚采血、運輸?shù)嚷樽碇小?/p>

1 材料與方法

1.1 材料

本試驗樣本鳳尾鵝頭紅金魚取自濟南馮氏觀賞魚養(yǎng)殖有限公司。試驗所用丁香酚為吉安市萬億香料油有限公司產(chǎn)品，含丁香酚99%以上，相對濃度為1.063～1.068 g/mL，使用前按丁香酚與無水乙醇1∶10的體積比配制成母液。

1.2 試驗用丁香酚溶液的配制

在20 L的水體中一次加入2、4、6、8、10、12、14 mL的母液配制成濃度為10、20、30、40、50、60、70 mg/L的試驗用麻醉濃度，設(shè)置編號為A-G。于4 ℃冰箱中避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗前的準備 試驗所用的鳳尾鵝頭紅金魚暫養(yǎng)于濟南馮氏觀賞魚養(yǎng)殖有限公司養(yǎng)殖池中，挑選健康、體表無傷病的試驗用魚65尾，平均體質(zhì)量（38.74±4.5）g。試驗前24 h停止投喂，曝氣保證水體中充足的溶氧量。試驗組的麻醉以及復(fù)蘇均在周轉(zhuǎn)箱中進行，麻醉及復(fù)蘇水體均為20 L。試驗后將鳳尾鵝頭紅金魚按照不同試驗組分別放入4 m3水泥暫養(yǎng)池中靜養(yǎng)，繼續(xù)觀察72 h，統(tǒng)計試驗用魚的存活率。

1.3.2 不同濃度丁香酚的麻醉及復(fù)蘇效果試驗 將已經(jīng)配好的10、20、30、40、50、60、70 mg/L濃度（編號A-G）的丁香酚母液從冰箱中取出，倒入試驗用麻醉水體中，充分攪拌30 s（水溫24 ℃，總樣本35尾，每組試驗樣本5尾）。當(dāng)魚體麻醉程度達到M3麻醉期時，記錄秒表顯示的麻醉時間（T1）。并立即將試驗魚轉(zhuǎn)移到清水中進行復(fù)蘇，記錄秒表顯示的試驗魚達到M5完全復(fù)蘇期秒表時間（T2）。

1.3.3 不同溫度對丁香酚麻醉及復(fù)蘇效果試驗 通過加熱棒加溫和冰塊降溫的方法，將麻醉和復(fù)蘇水體的水溫控制在20、22、24、26、28 ℃（編號a-e）。將已經(jīng)配好30 mg/L濃度的丁香酚母液倒入的麻醉水體中，充分攪拌30 s（總樣本25尾，每組試驗樣本5尾）。當(dāng)魚體麻醉程度達到M3麻醉期時，記錄秒表顯示的時間（t1），并立即將試驗樣本轉(zhuǎn)移到清水中復(fù)蘇，記錄秒表顯示的試驗樣本達到M5完全復(fù)蘇期秒表時間（t2）。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理 試驗所得的數(shù)據(jù)以平均值±標準差的形式表示，使用SPSS27.0軟件進行單因素方差分析，當(dāng)顯著性水平P＜0.05，使用LSD多重比較法檢驗組間差異，分析各試驗組顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 鳳尾鵝頭紅金魚麻醉程度的分期

參照孟慶磊等[7]的麻醉分期，根據(jù)麻醉過程中試驗樣本表現(xiàn)出的行為特征，將整個麻醉過程拆分為M0（正常期）、M1（鎮(zhèn)靜期）、M2（輕度麻醉期）、M3（麻醉期）、M4（部分復(fù)蘇期）、M5（完全復(fù)蘇期）6個不同時期。詳情見表1。

2.2 不同濃度丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚麻醉效果的影響

不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚都有比較好的麻醉效果，10～70 mg/L濃度的丁香酚都能在6 min中內(nèi)使鳳尾鵝頭紅金魚進入麻醉期。其中10 mg/L（編號A）達到M3麻醉期的時間最長，70 mg/L（編號G）時間最短。隨著丁香酚濃度上升，麻醉時間呈縮短趨勢。多重比較顯示，不同的濃度組之間鳳尾鵝頭紅金魚需要的麻醉時間，C與D組、D與E組、E與F組、F與G組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚復(fù)蘇時間的影響

10～70 mg/L的丁香酚（編號A-G）在10 min中內(nèi)都能完成試驗組的復(fù)蘇，暫養(yǎng)池靜養(yǎng)72 h后觀察復(fù)蘇率達到100%。其中10 mg/L（編號A）試驗組所需的復(fù)蘇時間最短，隨著丁香酚濃度的上升，復(fù)蘇時間呈增長趨勢。多重比較顯示，A與B組、B與C組、C與D組、E與F組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間差異顯著（P＜0.05）。不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚的麻醉及復(fù)蘇時間影響詳情見表2。

2.4 不同水溫對丁香酚麻醉效果的影響

在30 mg/L丁香酚母液濃度下，通過秒表記錄試驗組達到M3麻醉期的秒表時間t1。隨著水溫的升高，達到M3麻醉期階段的時間呈縮短趨勢，與水溫呈負相關(guān)。水溫20～28 ℃都能使試驗魚在5 min內(nèi)達到M3麻醉期。多重比較顯示，c與d組、d與e組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間的差異顯著（P＜0.05）。

2.5 不同水溫對丁香酚復(fù)蘇時間的影響

將麻醉的試驗組轉(zhuǎn)移到清水中進行復(fù)蘇，秒表記錄試驗組達到M5完全復(fù)蘇期秒表時間（t2）。隨著水溫的升高，試驗組復(fù)蘇時間（t2-t1）呈縮短趨勢，與水溫呈負相關(guān)。水溫20～28 ℃都能使試驗魚在7 min內(nèi)復(fù)蘇率達100%，暫養(yǎng)池中靜養(yǎng)觀察72 h成活率100%。多重比較顯示，b與c組、b與d組、c與d組、c與e組、d與e組之間差異不顯著（P＞0.05），而其他各組之間的差異顯著（P＜0.05）。不同水溫對試驗組麻醉及復(fù)蘇時間詳情見表3。

2.6 乙醇對丁香酚麻醉效果的影響

由于丁香酚屬于油性液體，水溶性差，因此考慮到實際生產(chǎn)操作的方便，需要無水乙醇作為媒介，制成丁香酚母液使用?？紤]到乙醇本身具有一定的麻醉作用，可能對試驗組麻醉效果有一定程度的影響。因此，本次試驗設(shè)立了0.7 mg/L的無水乙醇溶液（約70 mg/L的丁香酚試驗組中的無水乙醇含量）進行對比試驗。結(jié)果顯示，加入0.7 mg/L的無水乙醇溶液組中的鳳尾鵝頭紅金魚（試驗樣本5尾）均未出現(xiàn)麻醉分期的行為特征，由此可見母液中無水乙醇的存在對丁香酚的麻醉效果并無明顯的影響。

3 討論

3.1 丁香酚對試驗組麻醉效果可行性研究

丁香酚廣泛應(yīng)用在優(yōu)鱸3號[8]、加州鱸[9]、條紋小鲃[10]、黃尾鲴[11]、松江鱸[12]、花鱸[13]、異齒裂腹魚[14]、錦鯉[15]、翹嘴鲌[16]等麻醉研究，是一種安全、高效[17]的魚用麻醉劑，可廣泛應(yīng)用于日常試驗生產(chǎn)等操作。

3.2 不同濃度的丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚麻醉效果分析

除澳洲長鰭鰻[18]等個別魚類之外，絕大多數(shù)的魚類麻醉時間都是隨著麻醉劑濃度上升而逐漸縮短。本研究中，當(dāng)丁香酚的濃度在10 mg/L時，鳳尾鵝頭紅金魚的麻醉時間最長達到359 s，當(dāng)丁香酚濃度升至30 mg/L時，試驗魚所需要的麻醉時間大幅減少。當(dāng)濃度達到70 mg/L，最短僅需37 s即可達到M3麻醉期。由此可見，丁香酚的濃度對鳳尾鵝頭紅金魚麻醉時間影響顯著。但實際試驗生產(chǎn)中，過高的丁香酚麻醉濃度容易造成魚體表脫黏，感染細菌性疾病，應(yīng)根據(jù)試驗組的體長體重，酌情選擇麻醉濃度。

3.3 不同濃度丁香酚對鳳尾鵝頭紅金魚復(fù)蘇所需時間分析

在已有的魚類麻醉實驗資料報道中，絕大多數(shù)魚類麻醉后復(fù)蘇所需要的時間隨著麻醉劑濃度的升高而逐漸增長。本試驗中，隨著丁香酚濃度的上升，麻醉后的復(fù)蘇所需要的時間依次增加，與濃度呈正相關(guān)，當(dāng)丁香酚母液濃度大于50 mg/L時，復(fù)蘇時間大幅增加。在實際生產(chǎn)實踐中，過高的復(fù)蘇時間會影響工作效率，在5 min內(nèi)復(fù)蘇是比較理想的麻醉濃度。

3.4 不同水溫對丁香酚麻醉效果分析

水溫是影響麻醉劑作用效果的一個重要環(huán)境因素。隨著水溫升高，試驗魚新陳代謝加速，心跳和呼吸頻率加快，體內(nèi)血液流動加速，使丁香酚有更好的麻醉效果，當(dāng)水溫達到22 ℃時，麻醉時間大幅縮短。水溫24～28 ℃都能使試驗組在3 min內(nèi)達到M3麻醉期，在實際生產(chǎn)實踐中可以極大地提升工作效率。

3.5 不同水溫對丁香酚復(fù)蘇效果分析

與麻醉效果相似，隨著水溫升高，試驗魚新陳代謝加速，心跳和呼吸頻率加快，體內(nèi)血液流動加速。當(dāng)水溫達到22 ℃時，復(fù)蘇所需時間大幅減少，22～28 ℃之間復(fù)蘇時間小幅減少，試驗組b—試驗組e中水溫對復(fù)蘇時間影響不顯著。

3.6 丁香酚麻醉鳳尾鵝頭紅金魚的最佳濃度

李元等[19]、劉長琳[20]等認為，理想的麻醉濃度需要同時滿足2個條件：（1）3 min之內(nèi)麻醉；（2）5 min之內(nèi)蘇醒。本研究結(jié)果表明丁香酚是一種安全、高效的對鳳尾鵝頭紅金魚的麻醉劑，10～70? mg/L的丁香酚都可以使鳳尾鵝頭紅金魚達到M3麻醉期，并且可以達到100%復(fù)蘇。其中在水溫24 ℃下，30～40 mg/L濃度的丁香酚滿足3 min內(nèi)麻醉，5 min之內(nèi)蘇醒，是鳳尾鵝頭紅金魚最佳的麻醉濃度。在30 mg/L濃度的丁香酚母液濃度下，24～28 ℃的水溫對鳳尾鵝頭紅金魚都有較好的麻醉及復(fù)蘇效果，可極大地提升生產(chǎn)試驗效率。

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The anesthetic effect of eugenol on red goldfish

QIU Zheng1，ZHANG Hong2，LIU Chao1，ZHANG Zhishan1

（1.Shandong Freshwater Fisheries Research Institute 2. Jinan Agricultural Technology Extension Service Center， Jinan 250013，China）

Abstract：The effects of different concentrations of eugenol on the anesthesia of goldfish were studied at water temperature of 24 °C. The results showed that different concentrations of eugenol had good anesthetic and resuscitation effects on red goose-head with phoenix tail goldfish， and 10～70 mg/L eugenol could induce the goldfish to enter the anesthetic period within 6 minutes， the recovery rate and the survival rate of the anesthetized fish reached 100% within 10 min and 72 h. The anesthesia time was shortened with the increase of eugenol concentration， which was negatively correlated with the concentration. The time needed for resuscitation increased with the increase of concentration， which was positively correlated with the concentration. Among them， eugenol （30～40 mg/L） can achieve 3 min anesthesia and 5 min recovery， and the effect was the best. At the same time， the effects of water temperature （20～28 ℃） on anesthesia and resuscitation time for the eugenol concentration of 70 mg/L were studied. The results showed that the water temperature of 20～28 ℃ could make the goldfish enter the anaesthesia period within 5 minutes， and the resuscitation rate and the survival rate of 72 hours reached 100% within 7 minutes. With the increase of temperature， the time needed to reach M3 anesthesia stage and M5 full recovery stage was shortened， and negatively correlated with water temperature. Under the concentration of eugenol 30 mg/L and the water temperature 24～28 ℃， the experimental fish were anesthetized for 3 min and resuscitated for 5 min.

Key words：eugenol; red goose-head with phoenix tail goldfish; anesthesia; resuscitation

（收稿日期：2024-05-21）