基金項(xiàng)目：湖南省自然科學(xué)基金（2022JJ90007，2022JJ90029）；國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局科技計(jì)劃項(xiàng)目（2023MK092）。

作者簡(jiǎn)介：文欣（1987—），男，土家族，湖南吉首人，碩士，工程師。研究方向：食品安全質(zhì)量控制。

摘 要：乙二胺四乙酸鹽作為國內(nèi)外廣泛使用的一種食品添加劑，在抑制食品氧化、延長食品的保質(zhì)期方面作用顯著。本文介紹了乙二胺四乙酸鹽的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)情況以及常用的檢測(cè)方法研究進(jìn)展，梳理了目前的監(jiān)測(cè)現(xiàn)狀，并提出了檢測(cè)方法未來的發(fā)展方向。

關(guān)鍵詞：乙二胺四乙酸鹽；檢測(cè)；食品

Research Progress on Detection and Analysis of Ethylenediamine Tetraacetate in Food

WEN Xin， XU Wenyang， LI Zheng

（Hunan Institute of Product and Goods Quality Inspection， Hunan Provincial Key Laboratory of Food Safety Monitoring and Early Warning， Changsha 410017， China）

Abstract： Ethylenediamine tetraacetate， as a food additive widely used at home and abroad. It plays a significant role in inhibiting the oxidation of food and extending the shelf life of food. This paper introduces the determination standards of ethylenediamine tetraacetate and the research progress of commonly used detection methods， and reviews the current monitoring status. The future potential development of determination methods is also presented.

Keywords： ethylenediamine tetraacetate; determination; food

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》

（GB 2760—2014）規(guī)定，乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸二鈉鈣可作為食品添加劑添加到食品中。由于乙二胺四乙酸的配位能力極強(qiáng)，能與金屬離子形成穩(wěn)定的螯合物，而食品中的金屬常作為氧化反應(yīng)中的催化劑，因此乙二胺四乙酸鹽常用作食品抗氧化劑，降低金屬離子參與氧化反應(yīng)的能力，從而起到抗氧化的作用，延長食品的保質(zhì)期。乙二胺四乙酸鹽還能穩(wěn)定某些食品中的色素、維生素等成分，防止它們?cè)趦?chǔ)存和加工過程中發(fā)生分解或變質(zhì)，提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性。在一些乳制品、飲料和調(diào)味品中，乙二胺四乙酸鹽可以防止金屬離子與其他成分結(jié)合形成沉淀或析出，保持產(chǎn)品的均勻性和透明度。

1 乙二胺四乙酸鹽的國內(nèi)外檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

目前，我國用于食品安全監(jiān)督抽檢的乙二胺四乙酸鹽檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙二胺四乙酸鹽的測(cè)定》（GB 5009.278—2016）。目前現(xiàn)行有效的還有《出口食品中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定》（SN/T 3855—2014）的第一法液相色譜法，第二法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定方法，其檢測(cè)原理為乙二胺四乙酸二鈉用水提取，衍生劑仍為三氯化鐵，以三氯甲烷除油脫脂，外標(biāo)法定量?！都徔椘?表面活性劑的測(cè)定 乙二胺四乙酸鹽和二乙烯三胺五乙酸鹽》（GB/T 23323—2009）中的測(cè)定原理為試樣用氫氧化鈉溶液提取，溶液用鹽酸調(diào)成酸性后再經(jīng)氯化鐵絡(luò)合，可選用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀或高效液相色譜儀對(duì)其進(jìn)行測(cè)定。流動(dòng)相中選用離子對(duì)試劑四丁基乙酸銨和四丁基溴化銨以增強(qiáng)配合物的保留，改善峰形?！都徔椚菊鷦?乙二胺四乙酸鹽和二乙烯三胺五乙酸鹽的測(cè)定》（HG/T 5250—2017）中采用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)紡織染整助劑中乙二胺四乙酸及其鹽類和二乙烯三胺五乙酸及其鹽類含量，使用甲酸調(diào)節(jié)加入適量水的試樣pH值，以濃硫酸、乙酸溶于乙醇作酯化劑，在酸性條件下發(fā)生反應(yīng)，所生成的酯化產(chǎn)物以正己烷萃取，選用弱極性毛細(xì)管色譜柱，經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜儀測(cè)定。

許多國家及地區(qū)都允許使用乙二胺四乙酸鹽，并規(guī)定了其在食品中的使用范圍和限量要求，如澳大利亞、新西蘭、印度、菲律賓、加拿大和美國等。國外關(guān)于乙二胺四乙酸鹽的分析方法主要為氣相色譜法[1]和目前使用較為普遍的液相色譜法[2]。YABE等[3]建立了高效液相色譜法測(cè)定蛤罐頭、蔬菜罐頭、沙拉醬、蛋黃醬等食品中乙二胺四乙酸含量的方法，將1，2-二氨基丙烷-N，N，N’，N’-四乙酸作為提取前的內(nèi)標(biāo)添加到食品中，以0.5%硫酸銅溶液提取，采用Zorbax ODS柱，高效液相色譜法分析，乙二胺四乙酸的加樣回收率為98.6%～103.8%。

查詢國外乙二胺四乙酸鹽在食品中的限量要求可知，乙二胺四乙酸鹽作為抗氧化劑被廣泛應(yīng)用在不同的食品基質(zhì)中，主要包括水產(chǎn)制品、豆制品、飲料、蛋制品、調(diào)味品、蔬菜制品、水果制品和罐裝食品。在部分國家，乙二胺四乙酸二鈉和乙二胺四乙酸二鈉鈣的食品基質(zhì)可通用，且大部分的限量范圍中均標(biāo)注了以二鈉或二鈉鈣計(jì)。

2 乙二胺四乙酸鹽檢測(cè)方法技術(shù)路線的選擇

乙二胺四乙酸具有較強(qiáng)的極性，不能產(chǎn)生有強(qiáng)烈紫外吸收的共軛結(jié)構(gòu)，因此需經(jīng)衍生來增強(qiáng)紫外吸收，一般常用的方法為與過渡金屬離子絡(luò)合產(chǎn)生有較強(qiáng)紫外吸收的絡(luò)合物進(jìn)行測(cè)定。

EDTA螯合金屬離子穩(wěn)定性排序?yàn)镸o6+＞Bi3+＞Fe3+＞Cu2+＞Zn2+＞Fe2+＞Mn2+＞K+＞Ca2+＞Mg2+。通常采用Fe3+與EDTA-2Na螯合產(chǎn)物進(jìn)行定量，得到的產(chǎn)物也更穩(wěn)定，相比于采用CuCl2作為衍生化試劑要穩(wěn)定得多。乙二胺四乙酸二鈉鈣直接進(jìn)樣的響應(yīng)較低，峰形拖尾，因此需要與乙二胺四乙酸二鈉一樣絡(luò)合之后才能定量。

3 乙二胺四乙酸鹽的液相色譜方法研究進(jìn)展

近年來，對(duì)乙二胺四乙酸鹽的含量測(cè)定多選用衍生后經(jīng)液相色譜儀和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定。何樹坤[4]研究了地瓜干中EDTA-2Na的超高效液相色譜檢測(cè)方法，采取的提取試劑為酸化后的氯化銅溶液；羅祎等[5]采用反相高效液相色譜法測(cè)定了食品中EDTA的含量。李卓等[6]、劉四磊等[7]均采用液相色譜法測(cè)定八寶粥罐頭中的乙二胺四乙酸鹽的含量，并研究了不同技術(shù)參數(shù)對(duì)結(jié)果的影響。張曉華等[8]、呂曉華等[9]分別建立了罐頭中乙二胺四乙酸二鈉含量的液相色譜-串聯(lián)譜法和高效液相色譜測(cè)定法。鄭睿行等[10]用高效液相色譜法測(cè)定了醬腌菜制品中的EDTA殘留量，田芳潔等[11]用三氯甲烷凈化，并發(fā)現(xiàn)腌漬食用菌中的乙二胺四乙酸二鈉在波長257 nm處有最大吸收波長，考察了提取方式、提取溶劑及凈化溶劑體積、超聲衍生化時(shí)間對(duì)回收率的影響。韓秋珍等[12]對(duì)蜜餞中乙二胺四乙酸二鈉的前處理方法進(jìn)行了簡(jiǎn)化，僅以水提取后衍生，也取得了較為理想的效果。陳果[13]的研究基質(zhì)為掛面，采用的固相萃取小柱為PXA小柱。郭平等[14]用高效液相色譜法測(cè)定了調(diào)味料中乙二胺四乙酸二鈉鈣的含量，去油的試劑選取了三氯甲烷，外標(biāo)法定量。魏冬旭[15]建立了酒類、飲料、罐頭中乙二胺四乙酸二鈉的高效液相色譜測(cè)定方法，優(yōu)化了衍生條件，如溫度、時(shí)間、試劑濃度。乙二胺四乙酸二鈉的定量限達(dá)到了0.025 g·kg-1，選用的SAX陰離子色譜柱區(qū)別于常見的C18色譜柱，也能達(dá)到較好的分離和定量效果。此方法與《出口食品中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定》（SN/T 3855—2014）原理類似。

4 乙二胺四乙酸鹽的監(jiān)測(cè)現(xiàn)狀

現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.278—2016已驗(yàn)證的基質(zhì)為果醬、果脯、腌漬的蔬菜罐頭、除番茄沙司外的蔬菜泥（醬）、堅(jiān)果與籽類罐頭、八寶粥罐頭、復(fù)合調(diào)味料和飲料等。通過查閱文獻(xiàn)和國內(nèi)外風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警信息，醬腌菜等食品中存在檢出乙二胺四乙酸鹽的情況，食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)項(xiàng)目中也覆蓋了糧食加工品、蜜餞、腌漬食用菌等基質(zhì)。顏姜瑜等[16]抽取了近600件在深圳市場(chǎng)在售的蜜餞食品，除去地瓜果脯類的其他類蜜餞覆蓋了90%以上。檢測(cè)結(jié)果顯示，除去地瓜果脯外的其他蜜餞中乙二胺四乙酸二鈉檢出率為3.07%，檢出平均值超過了0.2 g·kg-1，

檢測(cè)最高值近0.5 g·kg-1；超標(biāo)率為3.07%。部分穩(wěn)定劑在小麥粉制品中被禁用后，乙二胺四乙酸鹽可能作為理想的替代品起到穩(wěn)定食品性能的作用，因此急需擴(kuò)大液相色譜法檢測(cè)范圍，滿足食品安全監(jiān)管要求。

5 結(jié)語

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中乙二胺四乙酸鹽的測(cè)定》（GB 5009.278—2016）方法自發(fā)布實(shí)施以來，無論是在保障消費(fèi)者健康，還是促進(jìn)食品產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，都發(fā)揮了積極的作用。然而原有的標(biāo)準(zhǔn)適用范圍與GB 2760—2014中對(duì)乙二胺四乙酸二鈉有限量值要求的食品范圍配套，即僅適用于部分水果制品、罐頭、調(diào)味品及飲料，基質(zhì)范圍窄，不能滿足日益增長的食品安全監(jiān)管需求?？稍诮窈蟮难芯恐袛U(kuò)大可檢的樣品基質(zhì)范圍，通過前處理的優(yōu)化試驗(yàn)，結(jié)合已發(fā)布的標(biāo)準(zhǔn)方法的凈化特點(diǎn)，選擇適用于含油脂及蛋白含量較高的肉制品、水產(chǎn)制品、堅(jiān)果與籽類、蛋制品，含淀粉含量較高的淀粉制品、谷物制品以及含鹽量較高的豆豉、醬油等基質(zhì)的前處理步驟，使該檢驗(yàn)方法全面覆蓋可能使用乙二胺四乙酸鹽的食品基質(zhì)，滿足風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)要求。

參考文獻(xiàn)

[1]SILLANP?? M，SORVARI J，SIHVONEN M L.Low-level determination of EDTA and DTPA in natural waters by gas chromatography[J].Chromatographia，1996，42（9）：578-582.

[2]CAGNASSO C E，LóPEZ L B，RODRíGUEZ V G，et al.

Development and validation of a method for the determination of EDTA in non-alcoholic drinks by HPLC[J].Journal of Food Composition amp; Analysis，2007，20（3/4）：248-251.

[3]YABE Y，TAN S，NINOMIYA T，et al.Determination of Ethylenediaminetetraacetic acid in foods by high performance liquid chromatography[J].Journal of the Food Hygienic Society of Japan，2009，24（2）：220-224.

[4]何樹坤.超高效液相色譜法測(cè)定地瓜干中EDTA的研究[J].福建輕紡，2009，12（6）：31-33.

[5]羅祎，趙永彪，李淑娟，等.反相高效液相色譜法測(cè)定食品中EDTA的含量[J].中國食品添加劑，2006，17（4）：156-159.

[6]李卓，王濤，艾蕓，等.高效液相色譜法測(cè)定八寶粥罐頭中乙二胺四乙酸二鈉的不確定度分析[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（1）：123-127.

[7]劉四磊，趙允，戴絢麗，等.高效液相色譜法測(cè)定八寶粥罐頭中乙二胺四乙酸二鈉含量的不確定度評(píng)定[J].糧食與食品工業(yè)，2017，24（3）：65-70.

[8]張曉華，曾繁華，張銳夫.HPLC-MS/MS測(cè)定魚罐頭中乙二胺四乙酸二鈉殘留量[J].化學(xué)工程師，2015，20（6）：39-43.

[9]呂曉華，文紅，許紅琴.高效液相色譜法測(cè)定板栗罐頭中乙二胺四乙酸二鈉的含量[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19（3）：517-518.

[10]鄭睿行，張旭，方芳，等.高效液相色譜法測(cè)定醬腌菜制品中EDTA殘留量[J].中國食品添加劑，2011（2）：

212-219.

[11]田芳潔，康明芹，曹海微，等.高效液相色譜法測(cè)定腌漬食用菌中的乙二胺四乙酸二鈉[J].糧食與油脂，2017，30（4）：90-93.

[12]韓秋珍，周芳梅，張思妹.高效液相色譜法測(cè)定蜜餞中乙二胺四乙酸二鈉的含量[J].現(xiàn)代食品，2016（12）：91-96.

[13]陳果.固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定掛面中乙二胺四乙酸二鈉含量[J].糧食與油脂，2018，31（5）：63-65.

[14]郭平，馬馳遠(yuǎn)，陳林，等.高效液相色譜法測(cè)定調(diào)味料中乙二胺四乙酸二鈉鈣[J].中國食品添加劑，2016，19（6）：168-173.

[15]魏東旭，胡坤，孫瑩，等.高效液相色譜法測(cè)定食品中乙二胺四乙酸二鈉[J].檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2013，23（6）：50-53.

[16]顏姜瑜，董超先.蜜餞食品中乙二胺四乙酸二鈉的檢測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].中國食品添加劑，2018（9）：23-28.