關(guān)鍵詞：大型真菌；多樣性；生態(tài)分布特性；應(yīng)用價值

中圖分類號：Q949.32 文獻標(biāo)志碼：A

海南以生態(tài)立省，又是全國生態(tài)文明試驗區(qū)之一。?？谑惺呛Ｄ鲜∈呛Ｄ鲜≌?、經(jīng)濟、文化和科技的中心，在全省經(jīng)濟和社會發(fā)展中具有重要地位，其生態(tài)環(huán)境的穩(wěn)定和改善，不僅直接影響到海南全島的可持續(xù)發(fā)展，對于整個華南地區(qū)，乃至全國的生態(tài)安全都具有重要意義。生物多樣性豐富程度是反映一個地區(qū)生態(tài)好壞的重要指標(biāo)，大型真菌多樣性是其重要組成部分。

海南關(guān)于大型真菌的調(diào)查和報道主要在各大自然保護區(qū)和植物園進行，包括五指山、尖峰嶺、吊羅山、霸王嶺、黎母山、鸚歌嶺等[1-11]，然而，?？诘貐^(qū)卻只有零星學(xué)者進行了部分區(qū)域的調(diào)查。鄧春英等[12]對海南大學(xué)（包括儋州、?？诤５楹统俏? 個校區(qū)）進行大型真菌調(diào)查，獲得200余份標(biāo)本鑒定出23 科60 屬88 種，但未明確?？诖笮驼婢N類和數(shù)量。陳禮浪[13]報道了?？谑心韭辄S上木腐大型真菌50 種，程樂樂[14]報道了?？谑凶貦翱浦参锷系拇笮湍靖?4 種。盡管對海口地區(qū)大型真菌有過一些報道，但所涉及的調(diào)查區(qū)域極其有限，同時也缺乏對整個地區(qū)大型真菌多樣性的系統(tǒng)分析和綜合評價。因此，系統(tǒng)調(diào)查研究工作還需要系統(tǒng)深入開展。

本研究以中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院菌物標(biāo)本館（FCATAS）保存的標(biāo)本和于2022 年在海口地區(qū)調(diào)查采集的標(biāo)本為基礎(chǔ)，對?？诘貐^(qū)大型真菌多樣性進行分析。以期探明該區(qū)域大型真菌物種多樣性以及資源情況，發(fā)現(xiàn)潛在的新物種、中國新記錄種，掌握其物種分布格局，發(fā)掘該區(qū)域的重要經(jīng)濟價值菌類和新特有資源， 為其后續(xù)菌物資源保護和合理開發(fā)利用提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)域概況

?？谑械靥幒Ｄ蠉u北部，位于19°31N～2004N，110°07E～110°42E 之間，總面積達3126.83 km2。?？谑械靥幍途暥葻釒П本?，屬于典型的熱帶海洋性氣候。年平均氣溫為24.4 ℃，年平均降水量為1696.6 mm，常年以東北風(fēng)和東南風(fēng)為主。區(qū)域內(nèi)地形略呈長心形，地勢平緩。海口市有野生植物1980 種，海南特有種40 多種，藥用植物1200 多種。本次采集區(qū)域海拔在100 m 以下。?？谑凶罡吆０卧?22.8 m，另外除部分山丘海拔高100 m以上，其他絕大部分海拔為100 m 米以下的臺地和平原，整個區(qū)域內(nèi)海拔高差小。本次采集區(qū)域海拔在100 m 以下。

1.2 調(diào)查范圍

綜合考慮交通可達性、植被類型覆蓋度以及大型真菌分布地點，本次大型真菌調(diào)查區(qū)域主要設(shè)置在1 個國家級自然保護區(qū)、1 個植物園、5 個以植物為主的公園和5 個植被覆蓋度較好的區(qū)域，共12 個調(diào)查點。具體調(diào)查點為：金牛嶺公園、萬綠園、觀瀾湖中央公園、中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院院區(qū)植物園、白沙門生態(tài)公園、東寨港國家級自然保護區(qū)、海南熱帶野生動植物園、?？诨鹕饺簢业刭|(zhì)公園、五源河國家濕地公園、馮塘綠園、嶺腳林場和南渡江公園（圖1）。

1.3 調(diào)查方法

野外調(diào)查采用踏查法。海口市屬于熱帶季風(fēng)氣候，大型真菌子實體多發(fā)生在雨水豐富的5—10 月，特別是7—8 月。在大型真菌子實體生長季的起始至末期，每個調(diào)查點每月組織1 次調(diào)查采集，以獲取較為豐富的標(biāo)本和全面詳實的數(shù)據(jù)。

采集時拍攝標(biāo)本的生境照片，注意保持標(biāo)本的完整性，可附帶一部分基質(zhì)，并詳細記錄標(biāo)本的生境及宏觀特征，如宿主，菌蓋的顏色、形狀、直徑，菌肉的顏色、氣味、傷變色情況，菌褶的顏色、密度、是否等長，是否有菌環(huán)及菌環(huán)生長的位置，菌柄長度、粗度、顏色、基部情況等?；氐绞覂?nèi)后挑選生長健壯的子實體進行菌種分離。水分含量大的標(biāo)本先截取活體組織保存后將剩余標(biāo)本烘干，水分含量少的標(biāo)本自然條件下晾干。后裝入密封袋，置于?20 ℃冷凍2 周備用。

1.4 鑒定方法

采用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法進行分類鑒定。根據(jù)大型真菌宏觀形態(tài)和顯微形態(tài)特征，參考其生態(tài)習(xí)性、產(chǎn)地環(huán)境、寄主等，結(jié)合相關(guān)文獻、著作等進行鑒定[5，7，15]。在宏觀方面，主要依據(jù)野外拍攝的原生態(tài)照片及記錄的宏觀特征，同時用超景深三維系統(tǒng)觀察標(biāo)本的顏色、形態(tài)、質(zhì)地、子囊殼結(jié)構(gòu)、孔口突起狀況、子囊殼排列方式等宏觀形態(tài)。在微觀方面，將干標(biāo)本置于ddHO、5%或10%KOH 溶液、Melzer 試劑、5%SDS、墨水等，利用激光捕獲顯微分離系統(tǒng)，觀察孢子的顏色、形狀、大小等，在Melzer 試劑中觀察孢子壁是否為淀粉質(zhì)或糊精質(zhì)等特征。

用CTAB 基因組提取試劑盒（北京艾德萊生物科技公司）提取標(biāo)本的總DNA，針對不同目的片段（ITS 和LSU）選擇相應(yīng)引物進行PCR擴增[16-17]，產(chǎn)物送基因公司測序，獲得的序列在GenBank 數(shù)據(jù)庫進行比對。最后，綜合形態(tài)學(xué)和分子序列進行種類鑒定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

根據(jù)材料數(shù)據(jù)進行科、屬、種統(tǒng)計分析，統(tǒng)計物種數(shù)目，計算其所占比例。食用菌、藥用菌、有毒菌鑒定參考卯曉嵐[18]、戴玉成等[19-20]、圖力古爾等[21]及WU 等[22]的方法。

2 結(jié)果與分析

本研究于2022年在?？诘貐^(qū)共采集大型真菌標(biāo)本378 份，目前鑒定至種級分類單元的有110種，隸屬于2 門10 目32 科69 屬。本次調(diào)查增新種2 個，中國新記錄種10 個，海南省新記錄種33 個，豐富了該地區(qū)大型真菌物種多樣性。

2.1 ?？谑写笮驼婢骺品治?/p>

?？谑写笮驼婢骺品植记闆r見表1。海口地區(qū)大型真菌優(yōu)勢科屬明顯，優(yōu)勢科有多孔菌科（Polyporaceae）、炭團菌科（Hypoxylaceae）、蘑菇科（Agaricaceae）、炭角菌科（Xylariaceae）和蕉孢殼科（Diatrypaceae）。

2.2 ?？谑写笮驼婢Y源評價

在發(fā)現(xiàn)的110種大型真菌中，食用菌、藥用菌和有毒菌類共計25 種，占總數(shù)的22.73%（圖2）。其中，包括食用菌8種、藥用菌14種和毒菌3種（表2）。

經(jīng)過本次調(diào)查，發(fā)現(xiàn)海口地區(qū)有食用菌8 種，具有較好食用價值的種類包括毛木耳（Auriculariacornea）、巨大口蘑（Macrocybe gigantea）、齒緣竹蓀（Phallus serratus）、金頂側(cè)耳（Pleurotuscitrinopileatus）、紅側(cè)耳（P. djamor）、間型雞?（Termitomyces intermedius）等，其中毛木耳、巨大口蘑、長裙竹蓀、金頂側(cè)耳、紅側(cè)耳均可進行人工栽培馴化，具有很好的開發(fā)利用價值。在發(fā)現(xiàn)的14 種藥用菌中，有抗腫瘤、提高免疫力的重傘靈芝（G. multipileum）和南方靈芝（G. australe）[23-24]；具清熱、消炎和治療肝病的云芝（Trametes versicolor）；具清肺利咽、止血、抗菌、抗腫瘤、治療凍瘡的巨大馬勃（Calvatia gigantea）[25-26]；具利尿、補腎、抗衰老的黑柄炭角菌（Xylaria nigripes）[27-28]；具活血、抗菌、抗腫瘤的紅貝俄氏孔菌（Earliella scabrosa）[29-30]。3種有毒蘑菇，變紅青褶傘（Chlorophyllum hortense）主要引起胃腸嚴重不適，表現(xiàn)為惡心、嘔吐、腹絞痛、腹瀉[31]；熱帶紫褐裸傘（Gymnopilus dilepis）為神經(jīng)精神型毒素，食后2 h 出現(xiàn)頭暈、全身乏力、麻木等癥狀[32]；據(jù)報道白小鬼傘（Coprinellus disseminatus）幼時可食，但老時有毒[15]。

2.3 ?？谑写笮驼婢路N、新記錄種統(tǒng)計分析

在鑒定的110種大型真菌中，發(fā)現(xiàn)的新種、新記錄種總計45種，占總數(shù)的40.91%（圖3）。其中發(fā)現(xiàn)炭角屬（Xylaria）和彎孢殼屬（Eutypa）新種各1 個；中國新記錄種10 種，分別為油斑彎孢殼菌（Eutypa guttulata）、柑橘生近彎孢殼（Paraeutypella citricola）、帚狀彎孢聚殼菌（Peroneutypa scoparia）、海綿蒙塔涅炭團菌（ Hypomontagnella spongiphila ）、紅炭團菌（Hypoxylon haematostroma）、擬芬德勒炭團菌（H.pseudofendleri ）、鮑扎爾束孔殼菌（Lopadosto ma pouzarii）、西西里炭角菌（Xylaria sicula）、發(fā)光小菇（Mycena noctilucens）、熱帶膨瑚菌（Physalacriatropica）；海南省新記錄種33 種，分別為微紅皺裂菌（Rhytidhysteron neorufulum）、三叉狀擬蕉孢殼菌Allodiatrype trigemina）、刺蕉孢殼菌（Diatrype spilomea）、小白蘑菇（Agaricus comtulus） 、古熱帶青褶傘（ Chlorophyllum palaeotropicum ）、布雷白環(huán)菇（ Leucoagaricus bresadolae ）、長角白環(huán)菇（ L. scissus ） 、絲膜小蘑菇（ Micropsalliota cortinata ）、球囊小蘑菇（M. globocystis）、裘氏鵝膏（Amanita chiui）、圓孢靴耳（Crepidotus malachius）、布拉赫粉褶菌（Entoloma dichroum）、異色粉褶菌（E. bulakhae）、紫褐鱗裸傘（Gymnopilus purpureosquamulosus）、疣狀馬勃（ Lycoperdon scabrum ）、間型蟻巢菌（ Termitomyces intermedius ）、純白微皮傘（ Marasmiellus candidus ）、稀少裸腳傘（Gymnopus nonnullus）、無味裸柄傘（G. indoctus）、彎凸裸腳傘（G. gibbosus）、漸狹亞側(cè)耳（Hohenbuehelia angustata）、中華矮菇（Chamaeotasinica）、白黃小脆柄菇（Candolleomyces candolleanus）、繆斯擬鬼傘（Coprinopsis musae）、花狀脆柄菇（Psathyrella floriformis）、棍棒干朽菌（Serpula dendrocalami）、木生地星（Geastrummirabile）、有害紅皮孔菌（Pyrrhoderma noxium）、剛毛絲齒菌（Hyphodontia setulosa）、謙遜蘭氏孔菌（ Ranadivia modesta ）、白耙齒菌（ Irpexlaceratus）、棗紅孔韌菌（Porostereum spadiceum）、膨脹大孔菌（Megasporoporia inflata）。

2.4 海口市大型真菌物種保護情況評估

經(jīng)調(diào)查評估，在海口市區(qū)域已知的110 種大型真菌中，有44 種在2018 年生態(tài)環(huán)境部和中國科學(xué)院聯(lián)合發(fā)布的《中國生物多樣性紅色名錄——大型真菌卷》中做了評估。其中，巨大口蘑（Macrocybe gigantea）（圖4）被評為近危（NT）物種，27 種被評為無危（LC）物種，16 種因數(shù)據(jù)缺乏（DD）而未做評估。掃描下方二維碼（圖5），可查看?？谑写笮驼婢锓N名錄。

3 討論

海口市各調(diào)查采集點植物以熱帶經(jīng)濟樹種為主，如椰子、棕櫚、龍眼、荔枝、橡膠樹、菠蘿蜜、黃皮、橄欖、檳榔等，在部分區(qū)域有竹林和草坪。調(diào)查區(qū)域內(nèi)大型真菌物種以腐生真菌為主。除了金牛嶺公園和馮塘綠園部分地區(qū)人為干擾較少外，其他調(diào)查區(qū)域受人為干擾嚴重，主要以土腐菌和木腐菌為主，共生真菌較少。?？趨^(qū)域內(nèi)大型真菌多樣性組成中，以熱帶成分居多，兼有廣布種。熱帶成分以杏黃膠孔菌（Favolaschia calocera）、毛杯菌（ Cookeina tricholoma ）、布雷白環(huán)蘑（ Leucoagaricus bresadolae）、滴淚白環(huán)蘑（L.lacrymans）、巨大口蘑（Macrocybe gigantea）、熱帶紫褐裸傘（Gymnopilus dilepis）、間型蟻巢菌（Termitomyces intermedius）、齒緣竹蓀（Phallusserratus）、熱帶膨瑚菌（Physalacria tropica）等，這些種廣布于南亞及東南亞地區(qū)[33]。

統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，?？谑形锓N多樣性熱點區(qū)域主要集中在中部龍華區(qū)金牛嶺公園、中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院院區(qū)植物園和西部秀英區(qū)的馮塘綠園，發(fā)現(xiàn)的大型真菌種類分別9 目22 科35 屬43 種、7 目18 科26 屬31 種和5 目11 科17 屬21 種。而東部美蘭區(qū)東寨港國家級自然保護區(qū)植物主要以紅樹林為主，大型真菌數(shù)量極少，僅發(fā)現(xiàn)2 個種；瓊山區(qū)云龍鎮(zhèn)橡膠林下因人為干擾嚴重，無真菌種類與其形成共生關(guān)系，只有少數(shù)木腐生真菌。

在海口市區(qū)域發(fā)現(xiàn)的110 種大型真菌中，包括食用菌8 種、藥用菌14 種。但是調(diào)查發(fā)現(xiàn)，開發(fā)利用情況基本未開展。對發(fā)現(xiàn)的有柄靈芝（Ganoderma gibbosum）進行分離純化、馴化栽培出芝，經(jīng)檢測，其子實體粗多糖含量和氨基酸含量達到赤芝（G. lingzhi）水平，可作為新的靈芝資源進行開發(fā)利用。

大型真菌多樣性是生物多樣性和生態(tài)穩(wěn)定的決定因素之一，也是人類賴以生存的生物資源寶庫之一，其種類多，數(shù)量大，包括許多有益的食用菌、藥用菌、外生菌根菌及一些作為分解者的種類，在植物保護、可持續(xù)發(fā)展以及生態(tài)環(huán)境建設(shè)上占有重要地位，菌物多樣性的喪失會直接影響森林生態(tài)系統(tǒng)的協(xié)調(diào)和穩(wěn)定[34-35]。菌物學(xué)家李玉院士提出大型真菌資源“一區(qū)一館五庫”體系，這對全面、持續(xù)地保護菌物多樣性及合理開發(fā)利用具有重要意義[36-37]。海南省自2022年批準熱區(qū)大型真菌“一館五庫”建設(shè)，該體系從資源調(diào)查采集、菌種分離馴化、活性物質(zhì)篩選、遺傳基因資源篩選及資源信息共享等方面，全面推動海南省菌物資源的可持續(xù)發(fā)展。因此，組織開展對重點地區(qū)大型真菌種質(zhì)資源的調(diào)查與收集，摸清我國菌物資源底數(shù)，加強珍稀和瀕危菌物資源保藏、保護、良種繁育及其生物轉(zhuǎn)化研究，建立區(qū)域特有食藥用菌種質(zhì)資源庫，可為后續(xù)研究和開發(fā)利用提供標(biāo)本材料和種質(zhì)資源，對于該地區(qū)大型真菌的異地保護和可持續(xù)利用具有重要意義。