【摘要】目的 分析甲胎蛋白異質(zhì)體比率（AFP-L3%）與原發(fā)性肝細(xì)胞癌（PLC）患者臨床資料和病理特征的關(guān)系，并探討AFP-L3%水平升高的影響因素。方法 回顧性分析2020年1月至2023年12月安徽省潁上縣中醫(yī)院收治的135例PLC患者的臨床資料。所有患者均進(jìn)行血清甲胎蛋白（AFP）與甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）水平檢測，計(jì)算AFP-L3%，并進(jìn)行超聲和組織病理學(xué)檢查。根據(jù)患者AFP-L3%水平分為高水平組（AFP-L3%≥ 10%，86例）與低水平組（AFP-L3<10%，49例），對兩組患者的臨床資料與病理特征進(jìn)行單因素分析；將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素納入多因素Logistic回歸分析模型，篩選出AFP-L3%水平升高的影響因素。結(jié)果 高水平組中消化道癥狀、黃疸、肝硬化及Child-Pugh分級>A級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者占比均高于低水平組；多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，消化道癥狀、黃疸、肝硬化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均為APF-L3%水平升高的影響因素（OR=6.307、4.408、5.884、3.408，均P<0.05）。結(jié)論 AFP-L3%水平與消化道癥狀、肝硬化、Child-Pugh分級、黃疸、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)，且均為PLC患者血清AFP-L3%水平升高的影響因素。臨床監(jiān)測PLC患者的AFP-L3%水平變化有利于降低Child-Pugh分級升高、腫瘤直徑增大、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，改善其預(yù)后。

【關(guān)鍵詞】原發(fā)性肝細(xì)胞癌 ; 甲胎蛋白異質(zhì)體 ; 甲胎蛋白異質(zhì)體比率

【中圖分類號】R735.7 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2096-3718.2024.17.0115.05

DOI：10.3969/j.issn.2096-3718.2024.17.037

肝癌是一種惡性腫瘤，可分為原發(fā)性肝癌（primary liver cancer，PLC）和繼發(fā)性肝癌，全球每年因其死亡的人數(shù)約為70萬人[1]。由于PLC的早期癥狀不明顯，且影像學(xué)檢查難以發(fā)現(xiàn)疾病早期階段中較小的腫塊，導(dǎo)致很多患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于晚期，難以進(jìn)行有效的治療。因此，早期診斷原發(fā)性肝癌非常重要。目前臨床主要采用甲胎蛋白（AFP）作為PLC的腫瘤標(biāo)志物，但其陽性檢出率在33%～65%之間，部分患者會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果，且早期PLC患者血清AFP水平較低，影響早期診斷的敏感度，導(dǎo)致檢測結(jié)果不甚理想[2]。因此，需要尋找一種更有效的、特異性更高的腫瘤標(biāo)志物以應(yīng)用于PLC的早期診斷。甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3）較AFP有更高的濃度和更長的半衰期，因此被認(rèn)為是一種更具特異性的生物標(biāo)志物[3]。血清AFP-L3表達(dá)水平占總AFP的比值即甲胎蛋白異質(zhì)體比率（AFP-L3%），研究表明，AFP-L3%能夠作為診斷PLC的高特異性指標(biāo)，其在肝癌早期診斷、疾病進(jìn)展監(jiān)測及預(yù)后評估等方面具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值[4]。目前，關(guān)于AFP-L3在肝癌早篩早診方面臨床研究較為廣泛，但是對AFP-L3%在PLC患者的臨床資料及病理特征分析的相關(guān)研究較少?；诖?，本研究旨在探討AFP-L3%與PLC患者臨床資料和病理特征的關(guān)系，以及AFP-L3%水平升高的影響因素，為臨床應(yīng)用AFP-L3%早期診斷PLC提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月至2023年12月安徽省潁上縣中醫(yī)院收治的135例PLC患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017年版）》 [5]中PLC的診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑵經(jīng)穿刺或手術(shù)確診為PLC；⑶確診PLC后檢測AFP-L3%。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴臨床資料和病理特征信息不完整；⑵有妊娠計(jì)劃或處于妊娠期、哺乳期的女性；⑶繼發(fā)性肝癌。本研究經(jīng)安徽省潁上縣中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 研究方法 ⑴血清學(xué)指標(biāo)檢測。抽取所有患者清晨空腹靜脈血5 mL，以3 000～3 500 r/min的轉(zhuǎn)速離心3 min后得上層血清，按照甲胎蛋白異質(zhì)體比率（AFP-L3%）檢測試劑盒（磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫分析法）（北京熱景生物技術(shù)股份有限公司，國械注準(zhǔn)20173401411，規(guī)格：B型）說明書操作，采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（北京熱景生物技術(shù)股份有限公司，京械注準(zhǔn)20222220001，型號：C2000）測定患者血清AFP與AFP-L3水平，計(jì)算AFP-L3%，AFP-L3%=AFP-L3/AFP×100%。當(dāng)結(jié)果顯示AFP-L3<0.6 ng/mL時(shí)，無需計(jì)算AFP-L3%，檢驗(yàn)結(jié)果按AFP-L3%<5%報(bào)告。⑵超聲檢查。采用彩色超聲診斷系統(tǒng)[飛利浦醫(yī)療（蘇州）有限公司，國械注準(zhǔn)20223060937，型號：EPIQ 5]進(jìn)行檢查，檢查前禁食2～3 h，患者取平臥位，雙臂上舉高于頭頂，平穩(wěn)呼吸。首先行常規(guī)模式掃描，記錄腫瘤形態(tài)、邊界等，再切換至彩色模式檢測腫瘤內(nèi)部與血流供應(yīng)情況。⑶組織病理學(xué)檢查?；颊呓?jīng)穿刺或手術(shù)獲得距離腫瘤邊界0～2 cm處的組織病理學(xué)標(biāo)本，采用馬松染色和蘇木精 - 伊紅染色進(jìn)行組織病理學(xué)檢查，并記錄腫瘤轉(zhuǎn)移、神經(jīng)侵犯及腫瘤分化程度等情況。

1.3 觀察指標(biāo) ⑴AFP-L3%水平與患者臨床資料的關(guān)系。依據(jù)患者AFP-L3%水平分為高水平組（AFP-L3% ≥10%）與低水平組（AFP-L3<10%） [6]，對兩組患者的臨床資料進(jìn)行單因素分析，包括性別、年齡、有無納差乏力、有無消化道癥狀、有無黃疸、有無乙型病毒性肝炎、有無肝硬化、有無脾大、有無腹水、Child-Pugh分級[7]（A級，>A級）、合并基礎(chǔ)疾?。晕秆?、脂肪肝、高血脂）、有無并發(fā)癥（高血壓、高血糖）、有無飲酒史。⑵AFP-L3%水平與患者臨床病理特征的關(guān)系。對高水平組與低水平組患者的臨床病理特征進(jìn)行單因素分析，包括血管內(nèi)癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、神經(jīng)侵犯、腫瘤分化程度[8]。⑶影響AFP-L3%水平的多因素Logistic回歸分析。將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素納入多因素Logistic回歸分析模型，篩選出AFP-L3%水平升高的影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以[例（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用多因素Logistic回歸分析篩選影響患者AFP-L3%水平升高的因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AFP-L3%水平與患者臨床資料的關(guān)系 高水平組患者伴有消化道癥狀、黃疸、肝硬化及Child-Pugh分級>A級占比均高于低水平組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），見表1。

2.2 AFP-L3%水平與患者臨床病理特征的關(guān)系 高水平組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者占比高于低水平組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩組患者血管內(nèi)癌栓、神經(jīng)侵犯及腫瘤分化程度占比經(jīng)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P>0.05），見表2。

2.3 影響AFP-L3%水平的多因素Logistic回歸分析 將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素納入多因素Logistic回歸分析模型，以消化道癥狀（是=1，否=0）、黃疸（是=1，否=0）、肝硬化（是=1，否=0）、Child-Pugh分級>A級（是=1，否=0）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（是=1，否=0）為自變量，以AFP-L3%水平升高作為因變量，納入多因素Logistic回歸分析模型，結(jié)果顯示，消化道癥狀、黃疸、肝硬化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均為APF-L3%水平升高的危險(xiǎn)因素（OR=6.307、4.408、5.884、3.408），效應(yīng)值均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），見表3。

3 討論

PLC是臨床常見的消化道腫瘤，由肝炎病毒感染、脂肪性肝病、致癌物質(zhì)等多種因素共同作用導(dǎo)致的病變。PLC以腹部腫脹、肝區(qū)疼痛、容易瘀傷等癥狀為主，由于早期階段無明顯癥狀，導(dǎo)致很多患者確診時(shí)疾病已發(fā)展至中晚期，此時(shí)手術(shù)是主要的治療方法，可延長患者的生存期，但肝細(xì)胞癌的血供較豐富，術(shù)后易生成新生血管，導(dǎo)致癌癥復(fù)發(fā)，嚴(yán)重影響患者的生命安全[9]。因此，早期診斷是提高PLC患者生存率、改善其預(yù)后的有效方法。當(dāng)肝細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，肝癌細(xì)胞會(huì)合成AFP，血清AFP水平會(huì)顯著升高，因此AFP就成為診斷原發(fā)性肝癌的一個(gè)臨床指標(biāo)。若患者血清AFP水平異常升高，并排除慢性肝炎、肝硬化等影響，則高度懷疑為肝癌。但部分患者的血清AFP水平正常，單一的血清AFP指標(biāo)診斷易造成漏診。

隨著對肝癌診斷血液分子標(biāo)志物的探索，目前出現(xiàn)了多種肝癌診斷的標(biāo)志物，包括AFP-L3、異常凝血酶原等。研究表明，AFP-L3是AFP的一種異質(zhì)體形式，肝細(xì)胞發(fā)生癌變后，其糖鏈結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生變異，同時(shí)其表達(dá)水平顯著上調(diào)，AFP-L3僅在肝癌細(xì)胞中合成，因而其對肝癌的診斷特異性較高，可用作PLC早期診斷的標(biāo)志物。研究表明，AFP-L3的表達(dá)水平與腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤血管等密切相關(guān)，且不會(huì)受到總AFP水平的影響，因此，AFP-L3%能夠作為肝癌早期診斷的特異性指標(biāo)[10]。本研究中，依據(jù)患者AFP-L3%水平分為高水平組（AFP-L3%≥10%）與低水平組（AFP-L3<10%），高水平組患者伴有消化道癥狀、黃疸、肝硬化及Child-Pugh分級>A級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移占比均高于低水平組，這提示AFP-L3%水平較高的患者，其消化道癥狀、肝硬化、Child-Pugh分級升高、黃疸、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高。

AFP-L3%水平與肝癌患者的臨床資料、病理特征有關(guān)，基于AFP-L3%水平對PLC患者的臨床資料和病理特征的分析，能夠提高AFP-L3%早期診斷PLC的準(zhǔn)確性。血清AFP-L3主要是由肝癌細(xì)胞在PLC早期階段分泌，其表達(dá)水平較高的肝癌細(xì)胞有早期血管浸潤和轉(zhuǎn)移的傾向，隨著疾病進(jìn)展，其表達(dá)水平逐步上調(diào)，因此，AFP-L3%水平越高則代表腫瘤惡性程度越高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)也越高。研究發(fā)現(xiàn)AFP-L3的表達(dá)與多種慢性肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，其表達(dá)水平異常升高，表明AFP-L3%水平與肝臟的損傷程度相關(guān)，其在Child-pugh>A級時(shí)具有較高的陽性預(yù)測率，高水平的AFP-L3%通常與腫瘤的侵襲性強(qiáng)、進(jìn)展快，以及預(yù)后較差有關(guān)，患者通常表現(xiàn)為更差的肝功能狀態(tài)，因此在面對高水平的AFP-L3%時(shí)，應(yīng)警惕PLC患者的肝功能變化[11]。

本研究中，多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，消化道癥狀、黃疸、肝硬化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均為APF-L3%水平升高的影響因素。分析其原因?yàn)?，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移會(huì)引起PLC患者血清AFP-L3表達(dá)水平升高，進(jìn)而APF-L3%水平升高。在肝癌的發(fā)展過程中，肝癌細(xì)胞中AFP基因的轉(zhuǎn)錄激活，會(huì)導(dǎo)致AFP的表達(dá)水平增加，且在肝癌細(xì)胞中合成的AFP的糖鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生異質(zhì)性，會(huì)形成AFP-L3，且AFP-L3的表達(dá)水平會(huì)隨著肝癌的發(fā)展而升高[12]。多數(shù)PLC是在慢性肝病中發(fā)生的，肝硬化、乙型病毒性肝炎等是PLC發(fā)生的主要影響因素[13]。當(dāng)患者出現(xiàn)消化道癥狀、肝硬化、黃疸等，患者體內(nèi)的AFP-L3%可能處于一個(gè)較高的水平，尤其是需警惕易發(fā)生轉(zhuǎn)移的惡性肝癌，在治療過程中應(yīng)考慮監(jiān)測AFP-L3%水平變化。

綜上，PLC患者的AFP-L3%水平升高，其消化道癥狀、黃疸、肝硬化、Child-Pugh分級升高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高，不利于患者預(yù)后。臨床應(yīng)監(jiān)測肝硬化和存在消化道癥狀、黃疸患者的AFP-L3%水平變化，有助于PLC的早期診斷，以及預(yù)防PLC患者的Child-Pugh分級升高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等發(fā)生，改善患者預(yù)后。但本研究仍存在一定的局限性，患者來源單一，缺少非PLC對照組樣本的數(shù)據(jù)，一些結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)誤差，后續(xù)研究需完善數(shù)據(jù)的收集，增加非PLC研究對象數(shù)據(jù)，以明確影響AFP-L3%水平升高的因素。

參考文獻(xiàn)

SUNG H， FERLAY J， SIEGEL R L， et al. Global cancer statistics 2020： GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J]. CA Cancer J Clin， 2021， 71（3）： 209-249.

姚愛武， 廖和壁， 張璟. 血清AFP、AFP-L3與肝細(xì)胞癌經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞術(shù)后療效的關(guān)系分析[J]. 分子診斷與治療雜志， 2023， 15（4）： 690-693， 698.

周靜娣， 華馨， 胡耀仁， 等. 血清甲胎蛋白異質(zhì)體在慢性肝病中的表達(dá)及對肝癌的診斷價(jià)值探討[J]. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志， 2020， 34（5）： 527-531.

關(guān)貴文， 姚明解， 錢相君， 等. AFP和AFP-L3%聯(lián)合檢測在肝細(xì)胞癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J]. 臨床肝膽病雜志， 2019， 35（7）： 1514-1519.

中華人民共和國衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì). 原發(fā)性肝癌診療規(guī)范（2017年版）[J/CD]. 腫瘤綜合治療電子雜志， 2017， 3（4）： 14-30.

高春芳， 房萌， 季君. 多學(xué)科甲胎蛋白異質(zhì)體臨床應(yīng)用專家共識[J]. 現(xiàn)代免疫學(xué)， 2018， 38（1）： 2-7.

林國楨， 代天星， 劉榮強(qiáng)， 等. 不同肝功能Child-Pugh分級對肝癌肝移植受者預(yù)后的影響[J]. 器官移植， 2019， 10（3）： 308-312.

何垚， 楊龍， 袁建軍， 等. 原發(fā)性肝癌超聲造影血流灌注參數(shù)與腫瘤分化程度及微血管生成的關(guān)系[J]. 中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù)， 2021， 37（8）： 1177-1181.

查穎， 譚娜， 曾鵬飛， 等. 乙肝肝硬化癌變患者血清AFP-L3及HBV DNA的變化及其可能的臨床意義[J]. 東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2019， 38（3）： 481-485.

羅鐸， 歐志濤， 黃韞， 等. 原發(fā)性肝癌患者血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ水平及與病理特征和預(yù)后的關(guān)系分析[J]. 現(xiàn)代消化及介入診療， 2022， 27（2）： 140-143.

李燕京， 張泳， 許永攀， 等. 甲胎蛋白異質(zhì)體在原發(fā)性肝癌患者血清中的表達(dá)[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)， 2019， 38（8）： 3765-3770.

IBRAHIM H M， ELGHANNAM M Z， ELKHAWAGA O A Y， et al. Evaluation of serum alpha fetoprotein-L3 as an accuracy novel biomarker for the early diagnosis of hepatocellular carcinoma in Egyptian patients[J]. Saudi J Biol Sci， 2021， 28 （10）：5760-5764.

SINGAL A G， LAMPERTICO P， NAHON P.Epidemiology and surveillance for hepatocellular carcinoma： New trends[J].J Hepatol， 2020， 72（2）： 250-261.

基金項(xiàng)目：2021年度阜陽市衛(wèi)生健康委科研項(xiàng)目（編號：FY2021-179）

作者簡介：亓睿，大學(xué)本科，副主任技師，研究方向：臨床檢驗(yàn)。