摘" " 要" " 目的" " 探討超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)評(píng)估克羅恩?。–D）炎癥活動(dòng)度的臨床價(jià)值。方法" " 選取于我院就診的CD患者95例，依據(jù)是否處于炎癥活動(dòng)期分為炎癥活動(dòng)期組67例和非炎癥活動(dòng)期組28例，比較兩組超聲造影定量參數(shù)［達(dá)峰時(shí)間（TTP）、上升時(shí)間（RT）、峰值強(qiáng)度（PI）］和血清學(xué)指標(biāo)［血清微小RNA-223（miR-223）、白細(xì)胞介素6（IL-6）］的差異。繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析超聲造影定量參數(shù)、血清學(xué)指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)CD炎癥活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值。結(jié)果" " 與非炎癥活動(dòng)期組比較，炎癥活動(dòng)期組TTP、RT均減低，PI及血清miR-223、IL-6均增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）。ROC曲線分析顯示，TTP、RT、PI、血清miR-223、IL-6單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度的曲線下面積分別為0.735、0.703、0.796、0.858、0.805、0.962，靈敏度、特異度分別為100%、97.0%、80.6%、73.1%、50.7%、97.0%和50.0%、46.4%、67.9%、89.3%、100%、96.4%。結(jié)論" " 超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度具有較高的臨床價(jià)值。

關(guān)鍵詞" " 超聲檢查；造影劑；微小RNA-223；白細(xì)胞介素6；克羅恩??；炎癥活動(dòng)度

［中圖法分類號(hào)］R445.1；R735.7" " " ［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

Clinical value of contrast-enhanced ultrasound quantitative parameters combined with serum indexes in the evaluation of inflammatory

activity in Crohn’s disease

CHEN Yuli，LIU Liu，YOU Qinxia

Health Management Center，the Third People’s Hospital of Chengdu，Chengdu 610014，China

ABSTRACT" " Objective" " To explore the clinical value of contrast-enhanced ultrasound quantitative parameters combined with serum indexes in the evaluation of inflammatory activity in Crohn’s disease （CD）.Method" " A total of 95 patients with CD who visited our hospital were selected and divided into inflammatory active phase group（67 cases） and non inflammatory active phase group（28 cases） according to whether they were in the inflammatory active phase.The differences of" contrast-enhanced ultrasound quantitative parameters［time to peak（TTP），rise time（RT），peak intensity（PI）］ and serum indexes（miR-223，IL-6） were compared between the two groups.Receiver operating characteristic（ROC） curve was drawn to analyze the value of contrast-enhanced ultrasound quantitative parameters，serum indexes applied alone and their combination in evaluating the inflammatory activity in CD.Results" " Compared with the non inflammatory active phase group，the inflammatory active group showed a decreasing in TTP and RT，and an increasing in PI and serum miR-223，IL-6，with statistical significance（all Plt;0.05）.ROC curve analysis showed that the area under the curve of TTP，RT，PI，serum miR-223，IL-6，and their combined application for evaluating inflammation activity in CD were 0.735，0.703，0.796，0.858，0.805，and 0.962.The sensitivity and specificity were 100.0%，97.0%，80.6%，73.1%，50.7%，97.0% and 50.0%，46.4%，67.9%，89.3%，100%，96.4%，respectively.Conclusion" " The combination of contrast-enhanced ultrasound quantitative parameters and serum indexes has high evaluation value for CD inflammation activity.

KEY WORDS" " Ultrasonography；Contrast agent；MicroRNA-223；Interleukin-6；Crohn’s disease；Inflammation activity

克羅恩?。–rohn’s disease，CD）是一種消化道慢性、復(fù)發(fā)性和非特異性的炎性病變，可累及全消化道，近年來(lái)該病在我國(guó)的發(fā)病率呈逐漸上升趨勢(shì)。CD的臨床表現(xiàn)主要為腹部腫塊、腹瀉、腹痛、便血等，部分患者還可能伴關(guān)節(jié)腫痛、口腔潰瘍、貧血、發(fā)熱、營(yíng)養(yǎng)不良等癥狀，甚至出現(xiàn)消化道出血、腸梗阻。CD的發(fā)病特征是緩解期和炎癥活動(dòng)期相互交替，因此評(píng)估其炎癥活動(dòng)度十分重要。超聲具有性價(jià)比高、無(wú)輻射、無(wú)創(chuàng)等優(yōu)點(diǎn)，隨著超聲造影定量分析技術(shù)的發(fā)展，定量參數(shù)能夠客觀反映組織的血流灌注情況，在評(píng)估CD的炎癥活動(dòng)度中具有較高的靈敏度和特異度［1］。微小RNA-223（miR-223）是RNA的表達(dá)因子，能夠反映腸道病變的炎癥情況。研究［2］表明，血清miR-223與潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)病相關(guān)。白細(xì)胞介素6（IL-6）是促炎細(xì)胞因子，在診斷CD消化道黏膜損傷中具有重要作用。本研究旨在探討超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)對(duì)CD炎癥活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2020年1月至2022年12月于我院就診的CD患者95例，男70例，女25例，年齡18～40歲，平均（28.82±6.63）歲；均經(jīng)臨床及影像學(xué)檢查診斷為CD，且經(jīng)病理結(jié)果證實(shí)，符合《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見(jiàn)（2018年·北京）》［3］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤、風(fēng)濕免疫系統(tǒng)疾病、感染性疾病及慢性消耗性疾??；②長(zhǎng)期使用免疫抑制劑，對(duì)超聲造影劑有禁忌癥；③妊娠期、哺乳期婦女。以克羅恩病活動(dòng)指數(shù)（Crohn’s disease activity index，CDAI）≥150分判為炎癥活動(dòng)，將95例患者分為炎癥活動(dòng)期組67例和非炎癥活動(dòng)期組28例，其中炎癥活動(dòng)期組男50例，女17例，年齡18～40歲，平均（28.93±6.45）歲，病變位于回腸末端28例，結(jié)腸10例，回結(jié)腸29例；非炎癥活動(dòng)期組男20例，女8例，年齡18～39歲，平均（28.57±7.16）歲；病變位于回腸末端10例，結(jié)腸5例，回結(jié)腸13例。兩組性別、年齡、病變部位比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)批準(zhǔn)，所有患者或家屬均簽署知情同意書。

二、儀器與方法

1.超聲檢查：使用GE Logiq E9彩色多普勒超聲診斷儀，9L線陣探頭，頻率6.0～9.0 MHz?；颊邫z查前1 d囑其流質(zhì)飲食，禁食至少8 h，檢查前45 min內(nèi)口服10%常溫甘露醇水溶液2000 ml?；颊呷⊙雠P位，先行常規(guī)超聲檢查，發(fā)現(xiàn)病變腸管后行超聲造影檢查，采用儀器自帶的高保真調(diào)幅造影模式，增益16 dB，機(jī)械指數(shù)0.16，深度6.0 cm。使用配制好的造影劑（SonoVue，意大利Bracco公司）混懸液2 ml經(jīng)患者外周靜脈團(tuán)注，尾隨5 ml生理鹽水沖管，連續(xù)觀察2 min并保存動(dòng)態(tài)圖像。應(yīng)用儀器自帶的定量分析軟件沿腸壁輪廓勾畫感興趣區(qū)（ROI），面積≥2 cm2，自動(dòng)生成時(shí)間-強(qiáng)度曲線（time-intensity curve，TIC），獲取峰值強(qiáng)度（PI）；再進(jìn)入Sonoliver工作站調(diào)取超聲造影動(dòng)態(tài)圖像，選取分析區(qū)（目標(biāo)ROI）及參考區(qū)（全層腸壁），面積均≥2 cm2，擬合優(yōu)度均gt;75%，獲取達(dá)峰時(shí)間（TTP）、上升時(shí)間（RT），上述參數(shù)測(cè)量時(shí)均重復(fù)選取2次ROI，測(cè)量4次取平均值。

2.實(shí)驗(yàn)室檢查：抽取患者空腹靜脈血10 ml，離心取上清液置于EP管中，-80℃保存。提取血清總RNA，檢測(cè)吸光度值，取總RNA 2 μg合成cDNA，使用德國(guó)羅氏公司的Transcriptor First Stand cDNA Synthesis Kit 反轉(zhuǎn)錄試劑盒，將cDNA置于PCR擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增；miR-223相對(duì)表達(dá)量采用2-ΔΔCt表示。使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)IL-6。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以x±s表示，采用t檢驗(yàn)。繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析超聲造影定量參數(shù)、血清學(xué)指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)CD炎癥活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)" 果

一、兩組超聲造影定量參數(shù)比較

與非炎癥活動(dòng)期組比較，炎癥活動(dòng)期組TTP、RT均減低，PI增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.001）。見(jiàn)表1和圖1。

二、兩組血清學(xué)指標(biāo)比較

炎癥活動(dòng)期組和非炎癥活動(dòng)期組血清miR-223、IL-6分別為2.53±0.55和1.79±0.42、（18.42±5.64）pg/ml和（10.48±3.22）pg/ml，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.001）。

TTP：達(dá)峰時(shí)間；RT：上升時(shí)間；PI：峰值強(qiáng)度

三、ROC曲線分析

ROC曲線分析顯示，TTP、RT、PI、血清miR-223、IL-6單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度的曲線下面積分別為0.735（95%可信區(qū)間：0.621～0.850）、0.703（95%可信區(qū)間：0.583～0.824）、0.796（95%可信區(qū)間：0.695～0.898）、0.858（95%可信區(qū)間：0.782～0.934）、0.805（95%可信區(qū)間：0.712～0.899）、0.962（95%可信區(qū)間：0.950～0.988）。見(jiàn)表2和圖2。

討" 論

評(píng)估炎癥活動(dòng)度在CD的治療和隨訪中十分重要，對(duì)后續(xù)臨床決策具有重要參考價(jià)值。CDAI是用于評(píng)估克羅恩病患者疾病活動(dòng)度和嚴(yán)重程度的臨床評(píng)分系統(tǒng)，包括患者的癥狀、體征、實(shí)驗(yàn)室檢查和治療項(xiàng)目等方面，目前已廣泛用于臨床。臨床醫(yī)師根據(jù)CDAI可以判斷CD患者的疾病活動(dòng)度和嚴(yán)重程度，從而制定相應(yīng)的治療方案。超聲具有無(wú)創(chuàng)、無(wú)輻射、重復(fù)性佳、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，能夠準(zhǔn)確觀察CD患者的炎癥活動(dòng)程度［4-5］。文獻(xiàn)［6-7］報(bào)道，超聲造影可準(zhǔn)確反映CD患者炎癥活動(dòng)度，且具有較高的靈敏度（81%），但特異度僅63%，無(wú)法滿足臨床需求。本研究旨在探討超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)對(duì)CD炎癥活動(dòng)度的評(píng)估價(jià)值。

莊楠等［8］研究顯示，當(dāng)CD患者處于炎癥活動(dòng)期時(shí)，其病變腸壁局部炎癥浸潤(rùn)，導(dǎo)致腸壁微循環(huán)灌注量和新生血管增加，以及毛細(xì)血管擴(kuò)張，此時(shí)超聲表現(xiàn)為腸壁階段性不規(guī)則增厚，且血供增多，超聲造影定量分析能夠準(zhǔn)確反映病灶的血流灌注情況。本研究結(jié)果顯示，炎癥活動(dòng)期組TTP、RT均較非炎癥活動(dòng)期組減低，PI增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.001），表明CD患者處于炎癥活動(dòng)期時(shí)，其病變腸壁受到炎癥因子的刺激，會(huì)產(chǎn)生新的微血管網(wǎng)，導(dǎo)致造影劑從進(jìn)入病變組織到達(dá)峰時(shí)間縮短，血流灌注量也明顯增多。TTP是超聲造影期間ROI內(nèi)造影劑從進(jìn)入至其達(dá)到峰值強(qiáng)度的時(shí)間；RT是超聲造影期間ROI內(nèi)增強(qiáng)水平從峰值強(qiáng)度10%上升到峰值強(qiáng)度90%的時(shí)間；PI是超聲造影期間最大信號(hào)強(qiáng)度，能夠反映最大血流灌注量［9］。本研究ROC曲線分析顯示，TTP、RT、PI評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度的AUC分別為0.735、0.703、0.796，提示超聲造影定量參數(shù)對(duì)CD炎癥活動(dòng)度均有一定的評(píng)估價(jià)值。與王韋力等［10］研究結(jié)果相似。

血清學(xué)指標(biāo)可以直接反映CD患者炎癥活動(dòng)情況，Kalla等［11］研究顯示CD患者外周血或組織中的miR-223與健康人群存在差異，有助于評(píng)估其炎癥活動(dòng)，且miR-223可能與炎癥反應(yīng)有關(guān)。此外，在CD的發(fā)病過(guò)程中，IL-6會(huì)使腸黏膜發(fā)生微循環(huán)障礙、增強(qiáng)上細(xì)胞的通透性、激活核因子-kB通路等［12］。研究［13］顯示，炎癥活動(dòng)期CD患者血清IL-6升高。本研究結(jié)果顯示，炎癥活動(dòng)期組血清miR-223、IL-6均高于非炎癥活動(dòng)期組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.001）。與楊莉麗等［14］研究結(jié)果相似。分析其機(jī)制：炎癥活動(dòng)期間，由于免疫系統(tǒng)的激活和炎癥反應(yīng)的增加，miR-223、IL-6等促炎細(xì)胞因子也會(huì)相應(yīng)升高，該變化對(duì)于評(píng)估CD病情及指導(dǎo)臨床治療均有重要意義。本研究ROC曲線分析顯示，血清miR-223和IL-6評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度的AUC分別為0.858、0.805，提示血清miR-223和IL-6對(duì)CD炎癥活動(dòng)度具有一定的評(píng)估價(jià)值。

本研究進(jìn)一步將超聲造影定量參數(shù)與血清學(xué)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度，結(jié)果顯示其曲線下面積為0.962，靈敏度和特異度分別為97.0%、96.4%。提示超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)評(píng)估CD炎癥活動(dòng)度的價(jià)值更高。

綜上所述，超聲造影定量參數(shù)聯(lián)合血清學(xué)指標(biāo)對(duì)CD炎癥活動(dòng)度具有較高的評(píng)估價(jià)值。但本研究樣本量相對(duì)較小，且未分析超聲造影定量參數(shù)和血清學(xué)指標(biāo)對(duì)CD患者預(yù)后的價(jià)值，有待今后進(jìn)一步行大樣本、多中心研究深入探討。

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（收稿日期：2023-11-28）