摘要：本文概述了電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)、分類與用途，并簡(jiǎn)介透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、反射電子顯微鏡和發(fā)射電子顯微鏡的工作原理，綜述電子顯微技術(shù)在昆蟲觸角、單眼與復(fù)眼、口器、發(fā)聲器、外生殖器、不同蟲態(tài)體表特征、內(nèi)部器官、分類以及病理學(xué)等方面的應(yīng)用與研究進(jìn)展。基于對(duì)已有文獻(xiàn)的綜合分析，提出建議：在條件許可的情況下，今后的昆蟲學(xué)研究應(yīng)拓展視野，引入冷凍電子顯微鏡技術(shù)；開發(fā)可對(duì)活體昆蟲進(jìn)行電子顯微學(xué)觀察的技術(shù)與方法，使研究工作更加切合實(shí)際；在注重超微結(jié)構(gòu)研究的同時(shí)，協(xié)同采用電化學(xué)、酶學(xué)與放射性示蹤等技術(shù)手段，探明昆蟲各種感器、發(fā)聲器、生殖器超微結(jié)構(gòu)與生理功能的關(guān)系，為有害昆蟲的綜合防控與資源昆蟲的開發(fā)利用提供支持。

關(guān)鍵詞：電子顯微學(xué)； 技術(shù)； 昆蟲學(xué)； 應(yīng)用及進(jìn)展

中圖分類號(hào)：Q96；TB302.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1671-8151（2024）06-0036-12

世界上首臺(tái)透視電子顯微鏡由恩斯特·盧斯卡和馬克斯·克諾爾于1931 年研制成功，此后電子顯微技術(shù)快速發(fā)展并廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究中。尤其在材料學(xué)［1-2］、醫(yī)學(xué)［3-4］、植物學(xué)［5-6］與動(dòng)物學(xué)［7-8］等領(lǐng)域，電子顯微技術(shù)協(xié)助研究人員取得一系列科研成果。電子顯微技術(shù)在昆蟲學(xué)研究中也被大量采用，研究者通過選取不同種類的昆蟲，制作不同組織或器官的電鏡切片，選擇相應(yīng)的電子顯微鏡開展微觀結(jié)構(gòu)觀察，在不同的方向均取得有價(jià)值的研究結(jié)果。然而，該技術(shù)在昆蟲學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用及研究進(jìn)展鮮有報(bào)道。

鑒于此，本文對(duì)國(guó)內(nèi)外有關(guān)在昆蟲學(xué)研究中涉及電子顯微技術(shù)的文獻(xiàn)作了歸納分析，總結(jié)該技術(shù)在昆蟲觸角［9-11］、單眼與復(fù)眼［12-14］、口器［15-17］、發(fā)聲器［18-20］、外生殖器［21-23］、不同蟲態(tài)體表特征［24-27］、內(nèi)部器官［28-30］、分類［31-33］以及病理學(xué)［34-35］等方面的應(yīng)用結(jié)果。通過分析探討，提出現(xiàn)有研究中存在的不足之處及解決方法，期望本研究的結(jié)果能對(duì)后續(xù)研究者有所借鑒。

1 電子顯微技術(shù)的類型

電子顯微技術(shù)是一種利用高分辨率和高放大倍率的電子顯微鏡對(duì)觀測(cè)對(duì)象進(jìn)行特征分析（如超微結(jié)構(gòu)觀察、能量色散X 射線譜分析）的技術(shù)，該技術(shù)通過不同用途與成像原理的電子顯微鏡實(shí)現(xiàn)。

電子顯微鏡有3 個(gè)組件，分別是鏡筒、真空裝置和電源柜［36］。其中主要組件為鏡筒，呈柱狀，內(nèi)含電子源、電子透鏡、樣品架、熒光屏和探測(cè)器等。電子透鏡相當(dāng)于光學(xué)顯微鏡中的玻璃透鏡，只不過它不是聚焦可見光，而是用作聚焦電子束，電子透鏡有磁透鏡和靜電透鏡2 種。電子源則包括釋放自由電子的陰極、柵極與環(huán)狀加速電子的陽極。樣品架既可固定樣品，還可通過移動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)、加熱、降溫、拉長(zhǎng)等改變樣品的狀態(tài)。熒光屏作用是將電子影像轉(zhuǎn)化為可見光影像，以供研究者觀察。探測(cè)器用以收集電子信號(hào)或次級(jí)信號(hào)。真空裝置提供了顯微鏡內(nèi)的真空狀態(tài)，使得電子束在其路徑上不會(huì)被吸收或偏轉(zhuǎn)，它由機(jī)械真空泵、擴(kuò)散泵和真空閥門等組成，并通過抽氣管道與鏡筒相聯(lián)接。電源柜由高壓發(fā)生器、勵(lì)磁電流穩(wěn)流器和各種調(diào)節(jié)控制單元組成。一般按結(jié)構(gòu)、用途與成像原理，電子顯微技術(shù)可分為透射式、掃描式、反射式和發(fā)射式4 種形式。

1. 1 透射式電子顯微技術(shù)

透射式電子顯微技術(shù)是通過透射式電子顯微鏡來實(shí)現(xiàn)，此鏡成像是由電子槍發(fā)射出高速電子束，經(jīng)過 1～2 級(jí)聚光鏡會(huì)聚后均勻照射到樣品的某一待觀察微小區(qū)域，入射電子與樣品發(fā)生碰撞與非碰撞，由于樣品極薄（電子的穿透能力很弱，因此樣品必須極薄），大部分電子穿透樣品，其強(qiáng)度分布與所觀察樣品區(qū)的超微形態(tài)、組織、結(jié)構(gòu)一一對(duì)應(yīng)。透射出樣品的電子經(jīng)過物鏡、中間鏡和投影鏡的三級(jí)磁透鏡放大投射在觀察圖像的熒光屏上，熒光屏把電子強(qiáng)度分布轉(zhuǎn)化為人眼可見的光強(qiáng)分布，于是在熒光屏上顯出與樣品超微形態(tài)、組織、結(jié)構(gòu)相應(yīng)的圖像，以供觀察［37］。透射式電子顯微鏡因電子束穿透樣品后，再用電子透鏡成像放大而得名，所以主要用于觀察記錄樣品的三維空間結(jié)構(gòu)。當(dāng)電子束穿透樣品時(shí)，難免會(huì)對(duì)其微觀結(jié)構(gòu)造成損傷，一般采用負(fù)染色法來減輕損傷，即在可接觸的分子表面涂上含有重原子的試劑，但圖像分辨率較低。1974 年，Taylor 和導(dǎo)師Glae?ser［38］首次發(fā)現(xiàn)冷凍于低溫下的生物樣品可以在真空的透射電鏡內(nèi)耐受高能電子束輻射并保持高分辨率結(jié)構(gòu)，由此開啟了冷凍電子顯微技術(shù)的研發(fā)之路。冷凍電子顯微技術(shù)也叫冷凍電鏡技術(shù)，本質(zhì)上是在低溫下（常在液氮或液氦中進(jìn)行冷凍）使用透射電子顯微鏡觀察樣品的顯微技術(shù)。

1. 2 掃描式電子顯微技術(shù)

掃描式電子顯微技術(shù)實(shí)施的儀器為掃描式電子顯微鏡，該鏡是利用聚焦高能電子束在樣品表面逐步掃描，激發(fā)樣品產(chǎn)生各種物理信號(hào)，隨后根據(jù)各種信號(hào)的產(chǎn)額大小，將信號(hào)放大，以明暗相間的圖像形式表現(xiàn)，從而呈現(xiàn)樣品表面特征［39］。由于這種顯微鏡中電子不必透射樣本，因此對(duì)電子束加速的電壓要求不是非常高。從成像原理可見，掃描式電子顯微技術(shù)主要用于觀察與研究固體表面的超微結(jié)構(gòu)。

1. 3 反射式電子顯微技術(shù)

反射式電子顯微技術(shù)的運(yùn)用離不開反射式電子顯微鏡，它是通過電子束以一定的掠射角打擊樣品表面，表面不同部位的散射（反射）電子聚焦在透鏡后不同位置，沿Z 軸移動(dòng)樣品可將選定的樣品部位聚焦在選定的像平面上產(chǎn)生樣品表面像和反射高能電子衍射花樣。所以反射式電子顯微技術(shù)可用于材料的表面結(jié)構(gòu)、電子態(tài)密度以及化學(xué)成分等信息的獲取。比如，獲取材料的晶體結(jié)構(gòu)、晶格常數(shù)等信息，晶片表面缺陷、雜質(zhì)分布的檢測(cè)等，以及生物組織和細(xì)胞表面超微結(jié)構(gòu)的觀察［36］。

1. 4 發(fā)射式電子顯微技術(shù)

發(fā)射式電子顯微技術(shù)利用二次電子或背散射電子成像，對(duì)樣品表面放大一定的倍數(shù)，實(shí)現(xiàn)超微形態(tài)觀察。同時(shí)，利用電子激發(fā)出樣品表面的紫外線、同步輻射、特征X 射線對(duì)微區(qū)成分進(jìn)行定性與定量分析。攜帶信息的電子束發(fā)射來自樣品，造成電子發(fā)射的能量源可以是熱（熱離子發(fā)射）、光（光電子發(fā)射）、離子或中性粒子，但不包括場(chǎng)發(fā)射和其他涉及點(diǎn)源及尖端的發(fā)射［40］。該技術(shù)是一種表面敏感技術(shù)，因?yàn)榘l(fā)射的電子來自被觀測(cè)樣品的淺層，適用于樣品表面微觀結(jié)構(gòu)的觀測(cè)。

昆蟲學(xué)研究文獻(xiàn)中大多采用掃描式電子顯微技術(shù)和透射式電子顯微技術(shù)，反射式電子顯微技術(shù)和發(fā)射式電子顯微技術(shù)極少見到。

2 電子顯微技術(shù)在昆蟲學(xué)中的應(yīng)用

2. 1 昆蟲觸角的超微結(jié)構(gòu)

昆蟲觸角的超微結(jié)構(gòu)研究主要針對(duì)其表面各種感器的形態(tài)觀察與分類而展開，由于感器都位于觸角的表面，一般使用掃描式電子顯微技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。

十余年來學(xué)者對(duì)曲紋稻弄蝶（Parnaraganga）［9］、小黃鰓金龜（Metabolus flavescens）［10］、小黑棕金龜（Apogonia chinensis）［10］、毛黃鰓金龜（ Ho?lotrichia trichophora）［11］、赤絨鰓金龜（Maladera ver?ticalis）［11］和黑絨鰓金龜（Maladera orientalis）［11］、桃蛀螟（Conogethes punctiferalis）［41］ 、梨小食心蟲（Grapholita molesta）［41］和桃白小卷蛾（Spilonota al?bicana）［41］、小菜蛾（Plutella xylostella）［42］、美國(guó)白蛾（Hyphantria cunea）［43］、綠翅絹野螟（Diaphania an?gustalis）［44］、Earias vittella［45］、棉鈴蟲（Helicoverpaarmigera）［46］和枸杞線角木虱（Bactericera gobica）［47］等的觸角感器做了深入研究（表1）。

由表1 可見，昆蟲幼蟲觸角感器類型較少，成蟲觸角感器類型較多，以6～8 種居多。其中，毛型感器、刺型感器、耳型感器、腔錐型感器、鱗型感器與B?hm's 鬃毛為最常見；有些感器又可分為2～3種不同的亞型。

目前，推測(cè)觸角感器可以對(duì)機(jī)械力、溫度、信息素分子等加以識(shí)別。比如，感器對(duì)外界碰觸、空氣流動(dòng)、空氣濕度、大氣壓力等的感觸屬于對(duì)機(jī)械力信息的識(shí)別范疇，機(jī)械力與環(huán)境溫度信息應(yīng)該作用于感器后引發(fā)感器上神經(jīng)興奮，由神經(jīng)纖維直接將信息傳至神經(jīng)中樞。信息分子則通過感器進(jìn)入昆蟲血液，與受體蛋白結(jié)合，通過神經(jīng)元將化學(xué)信息轉(zhuǎn)換為神經(jīng)信息，最終傳至神經(jīng)中樞，所以識(shí)別信息分子的感器多屬于嗅覺感器。隨著技術(shù)手段的進(jìn)步，今后對(duì)不同感器信息接受與傳遞路徑與機(jī)理的了解一定會(huì)越來越詳盡。另外，對(duì)昆蟲觸角節(jié)間連接的超微結(jié)構(gòu)研究很少見到，這對(duì)觸角在空間的移動(dòng)及姿勢(shì)調(diào)整的機(jī)理探討意義重大，其結(jié)果有仿生學(xué)價(jià)值。

2. 2 昆蟲單眼與復(fù)眼的超微結(jié)構(gòu)

2016 年，陳慶霄等［12］研究了蝎蛉科（Panorpi?dae）大雙角蝎蛉（Dicerapanorpa magna）幼蟲復(fù)眼的超微結(jié)構(gòu)，其幼蟲復(fù)眼屬于并列像眼，含50 多個(gè)小眼。每個(gè)小眼由1 個(gè)角膜、1 個(gè)晶體、8 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞、2 個(gè)初級(jí)色素細(xì)胞和數(shù)個(gè)次級(jí)色素細(xì)胞等組成；視網(wǎng)膜細(xì)胞有4 個(gè)遠(yuǎn)端細(xì)胞和4 個(gè)近端細(xì)胞，遠(yuǎn)端細(xì)胞的視小桿向上延伸包裹晶體的基部，使視桿末端呈漏斗狀。王茁［13］于2019 年報(bào)道了利用光學(xué)顯微鏡、掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡，對(duì)玫瑰黃腹三節(jié)葉蜂（Arge pagana）幼蟲側(cè)單眼的研究結(jié)果，側(cè)單眼包含大約1000 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞，相鄰的8 個(gè)或9 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞聚成一簇，共形成大約100 個(gè)視桿；含8 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞的視桿和含9 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞的視桿分別位于區(qū)域I 和區(qū)域II，區(qū)域I位于側(cè)單眼中央，區(qū)域II 位于側(cè)單眼后緣；在區(qū)域II 的外側(cè)分布著色素細(xì)胞束，這些色素細(xì)胞束從角膜生成細(xì)胞的遠(yuǎn)端延伸至視網(wǎng)膜細(xì)胞的近端。

人們對(duì)昆蟲視網(wǎng)膜和基底基質(zhì)（basal matrix ，BM）下色素細(xì)胞類型的了解相對(duì)有限。2020 年，Mohr 等［14］在赤眼蜂（Trichogramma evanescens）二維透射電子顯微鏡切片中觀察到色素細(xì)胞形成的視網(wǎng)膜下色素屏障，這些細(xì)胞出現(xiàn)在基底基質(zhì)下方，并形成一個(gè)單獨(dú)群體。連續(xù)切片透射電子顯微鏡的三維重建結(jié)果揭示，赤眼蜂的視網(wǎng)膜下色素屏障不是由單一細(xì)胞類型形成的，而是由穿透基底基質(zhì)間隙的側(cè)邊緣色素細(xì)胞的延伸所形成。由于在赤眼蜂的基底基質(zhì)上方既不存在次生色素細(xì)胞的色素延伸，也不存在錐體細(xì)胞突起延伸中的色素顆粒，因此側(cè)緣細(xì)胞的視網(wǎng)膜下延伸可以被視為對(duì)小型化的功能適應(yīng)，以保持近端屏障功能。2021 年，Guo 等［48］利用掃描和透射電子顯微鏡研究捕食性昆蟲黑紋花蝽（Montandoniola moraguesi）復(fù)眼形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示黑紋花蝽每只復(fù)眼含有約195 個(gè)小眼，每個(gè)小眼都有一個(gè)直徑約為9 μm、厚約7 μm 的層壓角膜晶狀體，一個(gè)長(zhǎng)約5. 5 μm 的晶體錐（形似遠(yuǎn)端大于近端的啞鈴），8 個(gè)長(zhǎng)約25. 6 μm 的簇狀視網(wǎng)膜細(xì)胞，2 個(gè)初級(jí)色素細(xì)胞和8個(gè)次級(jí)色素細(xì)胞。8 個(gè)視網(wǎng)膜細(xì)胞（2 個(gè)細(xì)長(zhǎng)和6 個(gè)外周視網(wǎng)膜細(xì)胞）的橫紋肌節(jié)形成1 個(gè)圓形分層橫紋肌節(jié)。R7 和R8 細(xì)胞的橫紋肌節(jié)沿著錐體的基底外側(cè)表面分布，形成1 個(gè)中心融合的橫紋肌瘤，幾乎橫跨整個(gè)小眼。外周橫紋?。≧1～R6）的微絨毛呈放射狀排列，在中心橫紋肌內(nèi)形成雙葉V 形。

有關(guān)昆蟲單眼與復(fù)眼超微結(jié)構(gòu)研究的文獻(xiàn)較少，不同種、不同屬及不同科同一蟲態(tài)（幼蟲或成蟲）眼的超微結(jié)構(gòu)比較研究更是鮮見報(bào)道。今后有望通過大量對(duì)比探究，總結(jié)昆蟲單眼與復(fù)眼超微結(jié)構(gòu)上的共性及不同種類眼的特性，構(gòu)建單眼與復(fù)眼超微結(jié)構(gòu)理論模型。另外，昆蟲單眼與復(fù)眼超微結(jié)構(gòu)受控基因及其表達(dá)的研究也應(yīng)給予加強(qiáng)，若取得進(jìn)展，可通過基因致盲對(duì)有害昆蟲進(jìn)行無公害防控。

2. 3 昆蟲口器的超微結(jié)構(gòu)

昆蟲口器有5 種基本類型，即咀嚼式、嚼吸式、刺吸式、舐吸式和虹吸式，其中咀嚼式最原始，后4種均由咀嚼式演化而來。

在口器超微結(jié)構(gòu)上，2008 年以來，學(xué)者以梭毒隱翅蟲（Paederus fuscipes）［15］、閃藍(lán)束毛隱翅蟲（Di?anous coeruleotinctus）［15］、瘦突眼隱翅蟲（Stenustenuipes）［15］、中華蚊蝎蛉（Bittacus sinensis）［16］、對(duì)雙委夜蛾（Athetis dissimilis）［17］、煙草嘎葉蟬（Alobal?dia tobae）［49］、電光葉蟬（Maiestas dorsalis）［49］、Stire?llus indrus［49］、在寬脛夜蛾（Protoschinia scutosa）［50］和弄蝶科17 種（5 亞科，16 屬）［51］昆蟲等為對(duì)象，觀察了口器上唇、內(nèi)唇、下唇須、上顎、外顎葉、下顎須等部位的感器，并對(duì)其作了分類描述（表2）。由表2 可見，與昆蟲觸角上感器相比，口器上感器類型數(shù)量較少，多數(shù)為3～5 類，說明口器上感器感觸的信息譜不如觸角感器寬泛。除毛型感器、錐型感器、刺型感器、栓錐型感器和腔錐型感器等在觸角與口器都有見到外，口器上還發(fā)現(xiàn)柱型感器、簇狀感器、指型感器、掌型感器和棒型感器，這5 類感器在觸角上很少見，有必要對(duì)其生理功能進(jìn)行深入研究。

2. 4 昆蟲發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)

2002 年，謝令德等［18］對(duì)小音蟋（Phonarellusminor）、黃足音蟋（Phonarellus flavipes）和利特音蟋（Phonarellus ritsemae）的聲銼和聲齒超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察，結(jié)果表明，聲銼中部略彎曲，聲齒的不規(guī)則橢圓形為其屬共有特征；拐角大小、聲齒兩端形狀、聲齒數(shù)、聲齒頂緣線等特征在種間存在明顯差異，而種內(nèi)差異不明顯。李玲等［19］于2013 年利用掃描電鏡觀察并描述了曲紋花天牛（Lepturaarcuata）、光肩星天牛（Anoplophora glabripennis）和栗山天牛（Massicus raddei）發(fā)音器的超微形態(tài)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)雌性和雄性發(fā)聲器的形態(tài)、大小、音齒數(shù)目、分布及排列等存在種間差異，3 種天牛前胸背板后緣前端均生長(zhǎng)有整齊的硬毛，這些硬毛結(jié)構(gòu)在天牛的聲音通訊方面起著重要作用。

2021 年，Chen 等［20］記錄了兩色姬螽（Metriop?tera bicolor）2 種翅形態(tài)的鳴聲，并在掃描電子顯微鏡下觀察了聲波發(fā)生器，發(fā)現(xiàn)盡管2 翅形態(tài)在聲學(xué)信號(hào)上存在差異，但形態(tài)結(jié)構(gòu)上無明顯差異。2022 年，Yang 等［52］對(duì)柑橘鳳蝶（Papilio xuthus）蛹的發(fā)聲器形態(tài)進(jìn)行了掃描電鏡觀察，并使用Au?dacity 軟件分析所捕獲的聲音信號(hào)，結(jié)果表明，柑橘鳳蝶蛹的發(fā)聲器位于腹部第4、5 節(jié)和第5、6 節(jié)的節(jié)間膜上。發(fā)聲器由具多層甲殼素的刮器和板組成，刮器和板上有50～90 個(gè)突起；當(dāng)蛹的腹部被寄生蜂觸角刺激30 s 以上時(shí)，刮器和板會(huì)迅速相互摩擦，腹部反復(fù)擺動(dòng)發(fā)出聲音；蛹發(fā)出的聲音由一系列每2000～3000 ms 發(fā)生3 次的短脈沖組成，頻帶很寬，主要分布在5～20 kHz；新鮮蛹和越冬蛹的活性不同，聲強(qiáng)也不同。該研究結(jié)果還支持一些蛹對(duì)寄生生物進(jìn)化出一種特殊的防御機(jī)制（聲學(xué)防御）的假說。通過比較2 種生境柑橘鳳蝶蛹的聲波特征，研究者提出同一物種在不同地理區(qū)域可以產(chǎn)生“方言”的假說［52］。

國(guó)內(nèi)外關(guān)于昆蟲發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)研究的報(bào)道比較少，至于昆蟲聽覺器官的電鏡觀察文獻(xiàn)尚未檢索到。以上研究表明，研究人員不但對(duì)成蟲發(fā)聲器的超微結(jié)構(gòu)做了研究，而且也有針對(duì)蟲蛹發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)的研究?？傊^大多數(shù)的研究是在成蟲上展開，對(duì)雌雄成蟲發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較，認(rèn)為其結(jié)構(gòu)的差異導(dǎo)致聲音上產(chǎn)生顯著差別。在后續(xù)研究中，應(yīng)該把發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)研究成果應(yīng)用于人工模擬發(fā)聲器的研制上，在有害昆蟲求偶期通過投放雌性人工模擬發(fā)聲器達(dá)到擾亂求偶、誘集雄蟲并消滅的目的。

聲音的發(fā)生與聲音信號(hào)的接收是一個(gè)完整的信息傳播途徑，所以建議把昆蟲發(fā)聲器與其聽覺器官統(tǒng)一起來進(jìn)行觀察，研究二者在超微結(jié)構(gòu)上是如何契合的。

2. 5 昆蟲外生殖器超微結(jié)構(gòu)

洪健等［22］運(yùn)用掃描電子顯微技術(shù)觀察虎鳳蝶屬中華虎鳳蝶（Luehdorfia chinensis）、長(zhǎng)尾虎鳳蝶（L． longicaudata）、烏蘇里虎鳳蝶（L． puziloi）和日本虎鳳蝶（L. japonica）雄性外生殖器，發(fā)現(xiàn)抱器、鉤狀突、陽莖、陽莖軛片的超微結(jié)構(gòu)存在差異。針對(duì)昆蟲外生殖器不同部位超微細(xì)節(jié)的比較研究鮮有報(bào)道，多數(shù)文獻(xiàn)則聚焦于外生殖器的感器，如云斑天牛（Batocera horsfieldi）［23］、灰地種蠅（Deliaplatura）［53］、霍氏嚙小蜂（Tetrastichus howardi）［54］、扶桑綿粉蚧（Phenacoccus solenopsis）［55］和黑肩綠盲蝽（Cyrtorhinus lividipennis）［56］ 等（表3）。由表3可見，昆蟲外生殖器上感器一般有2～7 種，以4 種的居多，其中毛型感器、錐型感器、刺型感器和栓錐型感器也常見于昆蟲觸角與口器。為什么不同的器官上分布有同類感器？ 它們?cè)谟|角、口器及外生殖器上的生理功能是否相同？ 發(fā)育是否同源？對(duì)這些問題的研究還未見報(bào)道。

2. 6 昆蟲不同蟲態(tài)體表超微結(jié)構(gòu)

齊寶瑛等［31］利用掃描電子顯微鏡觀察了網(wǎng)蝽科11 屬18 種成蟲及2 種若蟲的體表特征，發(fā)現(xiàn)成蟲體表存在2 類感覺結(jié)構(gòu)，包括幾乎遍布腹部背板的小瘤突（呈半球形、錐形或短指形）和多位于背板兩側(cè)的感覺窩（呈火山口狀）；若蟲體表沒有與成蟲相同的感覺結(jié)構(gòu)，但2 種若蟲體表存在一種形似平臺(tái)的結(jié)構(gòu)，遍布頭、前胸背板、翅芽、腹部背板，且在背板的前緣更加密集。張迎春等［57］利用掃描電鏡觀察研究4 種昆蟲鞘翅超微結(jié)構(gòu)的差異，葉甲科的楊葉甲（Chrgsomela populi）和柳二十斑葉甲（Chuysomela vigintip unctsta）鞘翅體表不被毛，具凹陷，有一細(xì)毛自凹陷中伸出；瓢蟲科的菱斑食植瓢蟲（Epilachna insignis）和銀蓮花食植瓢蟲（Epilachna convexa）鞘翅體表被毛，凹陷中不著生細(xì)毛。Alencar 等［58］在掃描電子顯微鏡下觀察軻蚊屬（Coquillettidia albifera）卵的超微結(jié)構(gòu)和形態(tài)計(jì)量學(xué)，發(fā)現(xiàn)卵呈橢圓型，前區(qū)細(xì)長(zhǎng)，管狀，長(zhǎng)（661±2. 59） μm，寬（183±2. 59） μm（ 長(zhǎng)寬比3. 61±0. 08），背表面覆蓋六邊型、五角型和矩型絨毛膜網(wǎng)絡(luò)，結(jié)節(jié)隨機(jī)分布。珠孔盤的直徑為（18. 91±0. 65） μm，周圍有1 個(gè)厚度為（4. 4±0. 3） μm 的連續(xù)隆起環(huán)。

表皮碳?xì)浠衔铮–HCs）是昆蟲表皮的重要組成部分，直接關(guān)系昆蟲的發(fā)育與生存。昆蟲特異性CYP4G 亞家族酶屬于P450 酶，催化CHCs 生物合成中的氧化脫羰步驟。Wang 等［59］使用RNA干擾介導(dǎo)的表達(dá)沉默揭示NlCYP380C10 基因在水稻害蟲褐飛虱（Nilaparvata lugens）表皮防水與保水中的作用，敲除NlCYP380C10 可顯著降低褐飛虱體重并導(dǎo)致死亡；掃描電鏡結(jié)果顯示，注射dsNlCYP380C10 的成蟲，其腹部角質(zhì)層表面的脂質(zhì)層丟失。Manuela 等［60］則使用掃描和透射電子顯微鏡研究了黑水虻（Hermetia illucens）的幼蟲和蛹角質(zhì)層的超微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)CaCO3 存在于幼齡幼蟲的角質(zhì)層中，主要以無定形碳酸鈣的形式存在，其含量隨幼蟲發(fā)育而增加，CaCO3 的存在導(dǎo)致角質(zhì)層硬化。幼蟲和蛹的角質(zhì)層含有大量的彈性蛋白，保證了角質(zhì)層的柔韌性。

盡管對(duì)昆蟲體表微觀結(jié)構(gòu)的研究涉及所有蟲態(tài)，即成蟲、幼蟲、蛹及卵，但大多只描述體表超微特征，很少闡明昆蟲體表超微結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。

2. 7 昆蟲內(nèi)部器官超微結(jié)構(gòu)

電子顯微技術(shù)應(yīng)用于昆蟲內(nèi)部器官的研究亦有報(bào)道。李怡萍等［29］采用電鏡觀察棉大卷葉螟（Sylepta derogata）、黃刺蛾（Cnidocampa flave?scens）、玫瑰三節(jié)葉蜂（Arge pagana）等幼蟲的氣管系統(tǒng)，研究顯示：氣管結(jié)構(gòu)與體壁相似，但層次相反，從氣管腔的內(nèi)表面開始向外，依次為表皮質(zhì)內(nèi)膜、管壁細(xì)胞層和底膜；表皮質(zhì)內(nèi)膜分為表層、上表皮層與原表皮層，上表皮層分為外上表皮層和內(nèi)上表皮層，原表皮層分為外表皮和內(nèi)表皮，表皮質(zhì)內(nèi)膜局部加厚形成螺旋絲。李怡萍等［30］運(yùn)用電鏡與亞甲基藍(lán)標(biāo)記法觀察粘蟲（Leucania sepa?rata）和棉大卷葉螟（Sylepta derogata）幼蟲的肺結(jié)構(gòu)與功能，表明肺存在于第8 腹節(jié)的氣管處，該處氣管分支細(xì)短而豐富，形成氣管簇；血流方向由前向側(cè)后方，經(jīng)第8 腹節(jié)和臀腔，最后流回心臟；第8腹節(jié)氣管簇的管壁比其它各節(jié)顯薄，管壁內(nèi)膜具有更多適合運(yùn)動(dòng)的細(xì)管，有利于氣體的通透。Li 等［61］通過電鏡和光鏡觀察麥紅吸漿蟲（Sitodiplosis mo?sellana）幼蟲絲腺的超微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)滯育和非滯育幼蟲的絲腺均由156 個(gè)呈念珠狀的細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)含有發(fā)達(dá)的細(xì)胞器，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體和脂滴；非滯育幼蟲的細(xì)胞器比滯育幼蟲更發(fā)達(dá)，此形態(tài)特征可用于區(qū)分幼蟲的滯育狀態(tài)。

中腸是昆蟲消化道的重要組成部分，馬氏管是昆蟲重要的排泄與滲透調(diào)節(jié)器官，劉璐［62］于2018 年對(duì)長(zhǎng)翅目（Mecoptera）蝎蛉科（Panorpidae）和蚊蝎蛉科（Bittacidae）的中腸與馬氏管做了電鏡觀察，結(jié)果表明：這2 個(gè)科幼蟲中腸從外到內(nèi)依次由肌肉層、基膜、上皮組織和管腔組成，上皮細(xì)胞基部細(xì)胞膜內(nèi)折或與基膜密切相連；中腸表面縱肌在河南新蝎蛉（Neopanorpa longiprocessa）中排列稀疏，但是在扁蚊蝎蛉（Bittacus planus）中排列緊密。蝎蛉科和蚊蝎蛉科馬氏管均有6 根，由基膜、上皮組織和中央管腔組成；上皮細(xì)胞的基部細(xì)胞膜深度內(nèi)折并產(chǎn)生膜迷路，上皮組織由較大的主細(xì)胞和較小的的星狀細(xì)胞組成，纏繞蚊蝎蛉（Terrobittacus implicatus）主細(xì)胞富含球晶體，微絨毛端部膨大且含有線粒體，而南五臺(tái)單角蝎蛉（Cerapanorpa nanwutaina）主細(xì)胞不含球晶體，微絨毛纖細(xì)不含線粒體。

Nunez-Pascual 等［63］利用共聚焦和透射電子顯微鏡觀察革翅目（Dermaptera）的Forficula auricu?laria 和Euborellia annulipes 特異性多營(yíng)養(yǎng)化卵巢的形態(tài)發(fā)生。Nurcan 等［64］使用光學(xué)顯微鏡和掃描電子顯微鏡對(duì)I. speciosus 的雄性生殖系統(tǒng)解剖和組織學(xué)進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，I. speciosus 的雄性內(nèi)生殖系統(tǒng)由1 對(duì)睪丸（每個(gè)睪丸都有1 對(duì)單獨(dú)的睪丸葉）、2 對(duì)輸精小管、1 對(duì)輸精管和1 個(gè)射精管組成。每個(gè)睪丸葉大約含有65 個(gè)睪丸卵泡，睪丸葉均通過輸精小管與輸精管相連。輸精管腔內(nèi)充滿大量成熟的精子，輸精小管上皮細(xì)胞呈圓柱形，輸精管上皮細(xì)胞則呈立方形。輸精管通過射精管通向陽莖，射精管由脊?fàn)顑?nèi)膜層、單層上皮細(xì)胞和肌肉層構(gòu)成。

2. 8 昆蟲超微結(jié)構(gòu)特征的分類學(xué)價(jià)值

1996 年，齊寶瑛等［31］對(duì)網(wǎng)蝽科18 種成蟲及２種若蟲進(jìn)行電鏡觀察，根據(jù)體表感覺結(jié)構(gòu)（小瘤突和感覺窩）的主要特征將所觀察的11 個(gè)屬大致劃分為6 個(gè)類群，證實(shí)體表感覺結(jié)構(gòu)的差異性在屬水平上具有分類學(xué)意義，在屬的鑒別上是一類可靠而適用的新型特征依據(jù)，對(duì)屬內(nèi)某些種的區(qū)分具有一定參考價(jià)值。彭凌飛等［32］于2010 年將掃描電鏡技術(shù)應(yīng)用于中國(guó)寬額蛾蠟蟬屬的分類研究，認(rèn)為盡管新種三色寬額蛾蠟蟬（Bythopsyrna trichrousa sp.nov.）與B. circulata 的外形很近似，但其雌雄外生殖器有明顯區(qū)別，電鏡照片顯示，新種的觸角感覺器只分布在第2 節(jié)，且圍繞四周分布；雌性肛節(jié)和第3 產(chǎn)卵瓣上分布有蠟腺，這盡管與蛾蠟蟬一些種類相類似，但是形狀和排列方式差異較大；據(jù)觀察，蛾蠟蟬科有些種類的肛節(jié)沒有蠟腺。2011 年，李曉強(qiáng)［33］運(yùn)用掃描電鏡技術(shù)比較了10 種蟋蟀的發(fā)聲器和前翅表面的微觀結(jié)構(gòu)，并且利用每種蟋蟀的聲齒間距、聲齒和聲銼的長(zhǎng)度進(jìn)行聚類分析，結(jié)果表明：發(fā)聲器的聲銼部分在種間的差異性明顯，可作為分類的主要特征，刮器部分僅在科間存在一定差異，對(duì)分類單元的確立起到輔助作用；前翅表面的微毛結(jié)構(gòu)在科間存在較大差異，種間無明顯差異，翅背面結(jié)構(gòu)在科、屬間存在較大差異，種間無明顯差異，二者可作為蟋蟀分類的輔助手段；采用電鏡技術(shù)對(duì)吉林省蟋蟀總科部分種類微觀結(jié)構(gòu)的研究結(jié)果與形態(tài)學(xué)分類結(jié)果相吻合，說明其進(jìn)化的平行性，同時(shí)也證明掃描電鏡技術(shù)可以鑒定出形態(tài)學(xué)難以區(qū)分的近緣種，彌補(bǔ)形態(tài)學(xué)方法的不足。

鱗翅目卵殼的結(jié)構(gòu)對(duì)分類學(xué)研究具有重要意義，Xu 等［65］首次使用掃描電子顯微鏡描述Zinaspayoungi 卵的表面超微結(jié)構(gòu)，認(rèn)為具有高分辨率和三維清晰度的超微結(jié)構(gòu)特征在分類應(yīng)用上非常有價(jià)值。Su 等［66］用光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察了條沙葉蟬（Psammettix striatus）和橫線葉蟬（Exitia?nus nanus）成熟精子的超微結(jié)構(gòu)，雖然與其他亞科的精子相比存在7 個(gè)相似之處，但是精子長(zhǎng)度、頂體突起、精子核、線粒體衍生體等在亞科之間具有明顯差異，這些差異在葉蟬亞科分類和系統(tǒng)發(fā)育研究中具重要意義。Symonds 等［67］首次對(duì)澳大利亞南部針葉樹（Callitris）屬中的直翅目昆蟲進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查和分類，并對(duì)其中的代表物種進(jìn)行掃描電子顯微結(jié)構(gòu)觀察和描述。

綜上所述，有研究者認(rèn)為體表感覺結(jié)構(gòu)（小瘤突和感覺窩）的差異具備分類學(xué)意義，有的認(rèn)為雄性外生殖器超微結(jié)構(gòu)的差異可作為分類鑒定依據(jù)，還有人認(rèn)為聲銼與聲齒超微結(jié)構(gòu)的不同具有分類學(xué)意義，甚至有人主張鱗翅目的卵殼與葉蟬成熟精子的超微結(jié)構(gòu)可作為分類依據(jù)。超微結(jié)構(gòu)特征能否在昆蟲分類上發(fā)揮更大作用，關(guān)鍵在于發(fā)現(xiàn)同屬不同種之間超微結(jié)構(gòu)的顯著差異，甚至種下不同亞種之間的顯著差異，因?yàn)閭鹘y(tǒng)的形態(tài)分類法可以輕易解決昆蟲在屬及以上分類單元（如綱、目、科）的區(qū)分問題。

2. 9 昆蟲病理組織的超微結(jié)構(gòu)

2013 年，Marzban 等［34］采用透射電鏡和掃描電鏡觀察棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）感染細(xì)胞質(zhì)多角體病毒（HaCPV）后中腸細(xì)胞的病理學(xué)變化。結(jié)果表明，宿主幼蟲感染1～2 d 后，在中腸柱狀細(xì)胞中觀察到HaCPV 多面體包涵體（PIB），其直徑為0. 5～3. 5 μm，病毒顆粒直徑約46 nm。一些感染的柱狀細(xì)胞在3 d 后破裂，將PIB 釋放到腸腔中；感染5～6 d 后，杯狀細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)PIB。2016 年，Mo?hammadyani 等［35］使用掃描電鏡記錄球孢白僵菌（Beauveria bassiana）和綠僵菌（Metarhizium aniso?pliae）在長(zhǎng)角甲蟲（Osphranteria coerulescens）幼蟲上引起的病理變化過程，認(rèn)為長(zhǎng)角甲蟲對(duì)2 種真菌都敏感，但球孢白僵菌的致死率顯著高于綠僵菌。2017 年，Gao 等［68］用光學(xué)顯微鏡、掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察受蠟蚧輪枝菌（Lecanicil?lium lecanii）菌株3. 4505 侵染的白蠟綿粉蚧（Phe?nacoccus fraxinus）2 齡若蟲的組織病理學(xué)變化。結(jié)果顯示，接種后24 h，3. 4505 菌株的分生孢子粘附在蟲體表面的節(jié)間皺褶上。隨后分生孢子萌發(fā)，產(chǎn)生芽管、附著胞和延伸的菌絲，以附著胞形式或直接通過菌絲穿透角質(zhì)層；48 h 后，體壁、組織和器官，包括角質(zhì)層、氣管、脂肪體、肌肉、馬氏管和神經(jīng)節(jié)等被菌絲分枝破壞。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)肥大并形成明顯的指紋結(jié)塊，血細(xì)胞中的線粒體腫脹變形。最后菌絲完全占據(jù)整個(gè)血腔；幼蟲身體包裹于白色菌絲中，菌絲向外延伸。2023 年，She 等［69］從罹患軟腐病的幼蟲體內(nèi)分離出病原體GX6，經(jīng)鑒定為硫胺素類芽孢桿菌（Paenibacillus thiaminolyticus），用GX6 孢子處理幼蟲時(shí)，未觀察到對(duì)其生長(zhǎng)的顯著影響，當(dāng)把GX6 營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞接種到培養(yǎng)基中時(shí)，6 d 齡光亮扁角水虻幼蟲的死亡率增加到29. 33%±2. 05%，透射電子顯微鏡觀察表明，GX6 破壞了圍食期基質(zhì)和腸道微絨毛，損傷了幼蟲腸道的上皮細(xì)胞。

在已有的報(bào)道中，關(guān)于昆蟲因真菌與病毒感染導(dǎo)致的病變組織超微結(jié)構(gòu)觀察較多，未來應(yīng)加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌性與線蟲性病害引起的昆蟲病理組織超微結(jié)構(gòu)的研究，以及寄生性昆蟲對(duì)宿主昆蟲組織損傷的超微觀察，以期為害蟲生物防治研究工作的深入開展奠定基礎(chǔ)。

3 電子顯微技術(shù)在昆蟲學(xué)研究中存在的不足

通過對(duì)已有文獻(xiàn)的綜述，發(fā)現(xiàn)盡管電子顯微技術(shù)在昆蟲研究中的應(yīng)用越來越廣泛，但目前仍存在以下問題：（1）大多數(shù)關(guān)于昆蟲超微結(jié)構(gòu)的研究與昆蟲生理及生活習(xí)性的研究未能協(xié)同進(jìn)行。生命體的組織與器官結(jié)構(gòu)服務(wù)、甚至決定其生理機(jī)能與生活習(xí)性，僅明確超微結(jié)構(gòu)的空間狀態(tài)、數(shù)量與分布，但不清楚此種結(jié)構(gòu)的生理功能或?qū)ι盍?xí)性的影響，顯然不夠完備。在以后的研究中，可以把昆蟲超微結(jié)構(gòu)觀察與其行為學(xué)、生理學(xué)等研究結(jié)合起來，實(shí)現(xiàn)跨學(xué)科交叉探究，以便從昆蟲生理功能上理解其超微結(jié)構(gòu)的意義與價(jià)值。（2）對(duì)昆蟲超微結(jié)構(gòu)編碼基因的探索有限，將超微結(jié)構(gòu)的研究與昆蟲分子學(xué)研究結(jié)合展開的報(bào)道較少。生物體的構(gòu)造與結(jié)構(gòu)也是由其特定基因編碼的，昆蟲亦不例外，由電子顯微鏡觀察到的昆蟲超微結(jié)構(gòu)僅是其基因的表現(xiàn)型而已?？梢岳美ハx基因組注釋研究的成果，在明確研究對(duì)象特定部位編碼基因的基礎(chǔ)上，采用基因敲除法逐一排除非目標(biāo)基因，以確定編碼基因。（3）目前的電子顯微學(xué)技術(shù)在昆蟲研究上尚存在成本高、顯微切片制作時(shí)易破壞原有組織結(jié)構(gòu)、不能直接掃描活體昆蟲等弊端。該問題的解決方案一是提高觀察儀器的共享水平，在行業(yè)內(nèi)開放共用，通過業(yè)務(wù)量的提升降低使用成本；二是不斷開發(fā)電子顯微切片所需的新型廉價(jià)材料；三是創(chuàng)新切片制作工藝與技術(shù)，使新技術(shù)與新工藝既可降低制片成本，也能最大限度地保護(hù)昆蟲組織結(jié)構(gòu)的完整性；四是研發(fā)無需切片，通過電子束直接照射待查部位，即可成像的新型電鏡技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)活體昆蟲的電鏡觀察。（4）對(duì)昆蟲超微結(jié)構(gòu)圖片的處理分析大多要依賴人工完成，效率低、準(zhǔn)確性不高?？蓪?duì)已有昆蟲超微結(jié)構(gòu)電鏡圖片進(jìn)行整理，出版昆蟲超微結(jié)構(gòu)高清圖集，或者開發(fā)分析軟件，供科研人員參考使用，提高解析昆蟲電鏡圖片的效率與準(zhǔn)確性。

4 展望

基于以上對(duì)電子顯微技術(shù)原理與應(yīng)用的介紹，及其在昆蟲學(xué)研究中不足之處分析，建議在今后加強(qiáng)如下工作：（1）在昆蟲觸角感器的電鏡觀測(cè)中，結(jié)合生物電化學(xué)的研究方法，通過探究不同感器的電化學(xué)信號(hào)變化規(guī)律來明確其生理機(jī)能。（2）對(duì)昆蟲發(fā)聲器超微結(jié)構(gòu)的研究應(yīng)輔以聲學(xué)與生物力學(xué)的測(cè)定技術(shù)，探明不同超微結(jié)構(gòu)與發(fā)聲器官振幅及頻率的關(guān)系，為人工發(fā)聲器的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。（3）在昆蟲外生殖器超微結(jié)構(gòu)的研究上，結(jié)合昆蟲求偶行為進(jìn)行深入探究。（4）加強(qiáng)電子顯微技術(shù)在昆蟲消化系統(tǒng)超微結(jié)構(gòu)觀察上的應(yīng)用，結(jié)合酶學(xué)、放射性示蹤等技術(shù)研究昆蟲消化系統(tǒng)的功能。（5）將冷凍電子顯微技術(shù)應(yīng)用到昆蟲學(xué)研究中，對(duì)參與昆蟲生理生化反應(yīng)的蛋白酶進(jìn)行解構(gòu)分析。（6）總結(jié)具有分類特征的昆蟲超微結(jié)構(gòu)研究結(jié)果，為分類工作提供借鑒；同時(shí)，嘗試研發(fā)便攜式超微結(jié)構(gòu)掃描儀器，方便野外研究工作的開展。（7）不應(yīng)局限于電子顯微技術(shù)，可探索將CT 掃描成像技術(shù)和核磁共振成像技術(shù)應(yīng)用于昆蟲學(xué)研究，使切片觀察過渡到整體標(biāo)本觀察或活體昆蟲觀察，并比較這2 種研究方法與電鏡觀察結(jié)果的異同，有望獲得新發(fā)現(xiàn)。（8）條件許可時(shí)，可利用掃描隧道顯微技術(shù)和原子力顯微技術(shù)，在原子精度（0. 1 nm）對(duì)昆蟲超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，尤其對(duì)微米級(jí)別的感器作組織構(gòu)成解析（目前的研究結(jié)果主要為感器形狀、分布等的描述）。（9）研究人工智能技術(shù)在昆蟲超微結(jié)構(gòu)照片分析中的應(yīng)用問題，以提高效率與準(zhǔn)確度。

參考文獻(xiàn)

［1］Ihara S， Yoshinaga M， Miyazaki H，et al. In situ electrontomography for the thermally activated solid reaction ofanaerobic nanoparticles［J］. Nanoscale， 2023，15（23）：10133-10140.

［2］Wang H Y， Liu L L， Wang J X，et al. The development ofiDPC-STEM and its application in electron beam sensitivematerials［J］.Molecules，2022，27（12）：3829.

［3］Liv N， Fermie J， Brink C B M， et al. Functionalcharacterization of endo-lysosomal compartments by correlativelive-cell and volume electron microscopy［J］. Methods in CellBiology，2023，177：301-326.

［4］Struckman H L， Moise N， Vanslembrouck B，et al. Indirectcorrelative light and electron microscopy （iCLEM）： A novelpipeline for multiscale quantification of structure from moleculesto organs［J］. Microscopy and Microanalysis，2024，30（2）：318-333.

［5］Yuan J， Yang L， Yu P， et al. Comparison and development ofscanning electron microscope techniques for delicate plant tissues［J］. Plant Science，2024，340：111963.

［6］Ali S， Zafar M， Ahmad M，et al. Palyno-taxonomic approachthrough light and scanning electron microscopy for theidentification of herbaceous Asteraceae species from SikaramMountain Pak-Afghan border［J］. Microscopy Research andTechnique， 2023， 86（10）：1274-1297.

［7］Sigmund F， Berezin O， Beliakova S，et al.Genetically encodedbarcodes for correlative volume electron microscopy［J］. NatureBiotechnology，2023，41（12）：1734-1745.

［8］Jufaili S M A， Echreshavi S， Esmaeili H R. Scales surfacetopography： Comparative ultrastructural and decorativecharacteristics of a modern elasmoid fish scales in a cyprinidfish， Garra shamal （Teleostei： Cyprinidae） using digital opticallight and scanning electron microscope imaging［J］. MicroscopyResearch and Technique，2023， 86（1）：97-114.

［9］袁向群，高 可，張國(guó)云，等. 曲紋稻弄蝶觸角感器超微結(jié)構(gòu)觀察［J］. 中國(guó)植保導(dǎo)刊，2013（12）：18-20.

Yuan X Q， Gao K， Zhang G Y， et al. Ultrastructure of antennalsensilla of Parnara ganga Evans［J］. China Plant Protection，2013（12）：18-20.

［10］劉 玲，耿 碩，仵均祥，等.2 種金龜甲觸角感器超微結(jié)構(gòu)的研究［J］. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，28（6）：2572-2576.

Liu L，Geng S H，Wu J X，et al. Study on ultrastructure ofantennal sensilla of two scarabs［J］.Southwest China Journal ofAgricultural Sciences，2015，28（6）：2572-2576.

［11］張國(guó)云，劉方方，高可，等. 金龜甲成蟲觸角感器超微結(jié)構(gòu)觀察與比較［J］. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，25（10）：1561-1566.

Zhang G Y，Liu F F，GaoＫ，et al.Observation and comparisonof the ultrastructure of antennal sensilla in scarab beetles（Coleoptera：Scarabaeidae）［J］. Acta Agriculturae BorealioccidentalisSinica， 2016，25（10）：1561-1566.

［12］陳慶霄，花保禎. 大雙角蝎蛉幼蟲復(fù)眼超微結(jié)構(gòu)及其在全變態(tài)類幼蟲側(cè)單眼演化中的意義［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2016，59（10）：1133-1142.

Chen Q X，Hua B Z.Ultrastructure of larval compound eyes ofDicerapanorpa magna （Mecoptera： Panorpidae） and itsimplications for the evolution of stemmata of holometabolouslarvae［J］.Acta Entomologica Sinica，2016，59（10）：1133-1142.

［13］王 茁. 玫瑰黃腹三節(jié)葉蜂幼蟲側(cè)單眼形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)［D］. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2019.

Wang Z. Morphology and ultrastructure of the larval stemmataof Arge pagana （Hymenoptera：Argidae）［D］. Yangling：Northwest Aamp;F University，2019.

［14］Mohr T， Meinertzhagen L A，F(xiàn)ischer S. Novel type of subretinalpigment shield in the miniaturized compound eye ofTrichogramma evanescens［J］. The Journal of ComparativeNeurology，2020，528（2）：167-174.

［15］劉志萍，李燕飛，王進(jìn)軍. 三種隱翅蟲下顎須和下唇須感器超微結(jié)構(gòu)的比較研究（鞘翅目：隱翅蟲總科）［J］. 昆蟲分類學(xué)報(bào)，2008，30（1）：25-30.

Liu Z P，Li Y F，Wang J J. Comparision of sensilla on themaxillary and labial palpus of three species of Staphylinidae（Coleoptera：Staphylinoidea）［J］. Entomotaxonomia，2008，30（1）：25-30.

［16］黃 晶，馬繼文，劉歆然，等. 中華蚊蝎蛉成蟲口器感器的超微結(jié)構(gòu)［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2011，54（1）：110-116.

Huang J， Ma J W， Liu X R，et al. Ultrastructure of themouthpart sensilla in adult Bittacus sinensis Walker（Mecoptera： Bittacidae）［J］.Acta Entomologica Sinica， 2011，54（1）：110-116.

［17］宋月芹，董鈞鋒， 孫會(huì)忠. 雙委夜蛾幼蟲觸角、口器感器的類型與分布［J］. 植物保護(hù)，2018，44（2）：122-128.

Song Y Q，Dong J F，Sun H Z. Types and distribution ofsensilla on larval antennae and mouthparts of Athetis dissimilis［J］.Plant Protection，2018，44（2）：122-128.

［18］謝令德，鄭哲民. 音蟋屬三種蟋蟀發(fā)聲器特征的比較［J］. 武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002（4）：99-101.

Xie L D， Zheng Z M. Stridulatory files of three species of thegenus Phonarellus ［J］. Journal of Wuhan PolytechnicUniversity， 2002（4）：99-101.

［19］李 玲，遲德富，李 燕，等.3 種天?？评ハx摩擦發(fā)音器的超微結(jié)構(gòu)及摩擦發(fā)音機(jī)制分析［J］. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，37（1）：71-77.

Li L，Chi D F， Li Y，et al.Stridulatory organs ultrastructure ofthree longhorned beetles and their stridulation mechanism ［J］.Journal of Nanjing Forestry University （Natural ScienceEdition），2013，37（1）：71-77.

［20］Chen Q，Zhang X，Tan H W，et al. Macroptery might producemore attractive calling songs： Acoustic differences betweentwo wing morphologies of Metrioptera bicolor Philippi（Orthoptera： Tettigoniidae）［J］. Transactions of the AmericanEntomological Society，2021，147（4）：855-865.

［21］Teves S C，Goncalves T C M， De Freitas S P C，et al.External female genitalia of Triatoma jatai， Triatomacostalimai and Triatoma williami （Hemiptera： Reduviidae：Triatominae）［J］.Parasit Vectors，2020，13（1）：538.

［22］洪健，葉恭銀，邢連喜，等. 虎鳳蝶屬雄性外生殖器超微結(jié)構(gòu)的比較（鱗翅目：鳳蝶科）［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，1999，42（4）：381-386.

Hong J， Ye G Y， Xing L X， et al. Ultrastructural comparisonsamong male external genitalias of four Luehdorfia species（Lepidoptera： Papilionidae）［J］. Acta Entomologica Sinica，1999，42（4）：381-386.

［23］嵇保中，錢范俊. 云斑天牛生殖系統(tǒng)的研究［J］. 南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1995，19（4）：14-20.

Ji B Z， Qian F J. A study on the reproductive system ofBatocera horsfieldi （Hope）［J］. Journal of Nanjing ForestryUniversity，1995，19（4）：14-20.

［24］Liébanas G， Sáez á ， Luna á，et al. The morphology ofColpocephalum pectinatum （Phthiraptera： Amblycera：Menoponidae） under scanning electron microscopy ［J］.Arthropod Structure amp; Development，2021，64：101085.

［25］Orengo-Green J O， Quinto J， Ricarte A，et al. Combinedstereomicroscope and SEM disentangle the fine morphology ofthe undescribed larva and puparium of the hoverfly Milesiacrabroniformis （Fabricius，1775） （Diptera： Syrphidae）［J］.Micron， 2023， 165：103397.

［26］Llorente-Bousquets J， Nieves-Uribe S， Flores-Gallardo A.Exochorion in the tribe Nymphalini （Lepidoptera：Nymphalidae）： the genus Hypanartia Hbner， ［1821］ andcomparison with related genera［J］. Zootaxa， 2023，5330（2）：151-200.

［27］Bello E， Alleyne M. Brochosome size variation and itsinfluence on leafhopper （Hemiptera： Cicadellidae） wingwettability［J］. Journal of Insect Science，2024，24（1）：6.

［28］Zelinger E， Brumfeld V， Rechav K，et al. Three-dimensionalcorrelative microscopy of the Drosophila female reproductivetract reveals modes of communication in seminal receptaclesperm storage［J］.Communications Biology，2024，7（1）：155.

［29］李怡萍，劉惠霞，袁向群. 昆蟲氣管系統(tǒng)的超微結(jié)構(gòu)［J］. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2002，11（1）：57-60.

Li Y P，Liu H X，Yuan X Q.The ultrastructure of the trachealsystem in insect［J］. Acta Agriculturae Boreali-occidentalisSinica，2002，11（1）：57-60.

［30］李怡萍，劉惠霞，袁 鋒，等. 粘蟲和棉大卷葉螟幼蟲體內(nèi)肺結(jié)構(gòu)的存在與功能驗(yàn)證［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，2009，52（12）：1298-1306.

Li Y P，Liu H X，Yuan F，et al. Existence of lungs incaterpillars of Leucania separata（Lepidoptera：Noctuidae） andSylepta derogata （Lepidoptera：Pyralidae） and confirmation oftheir functions［J］. Acta Entomologica Sinica，2009，52（12）：1298-1306.

［31］齊寶瑛，楊曉英，馬旭東，等. 網(wǎng)蝽科十一屬昆蟲體表感覺結(jié)構(gòu)的電鏡觀察［J］. 昆蟲學(xué)報(bào)，1996，39（1）：21-27.

Qi B Y， Yang X Y， Ma X D，et al. An observation on sensorystructures of eleven genera in Tingidae［J］. Acta EntomologicaSinica，1996，39（1）：21-27.

［32］彭凌飛，張雅林，王應(yīng)倫. 中國(guó)寬額蛾蠟蟬屬分類研究（半翅目：蛾蠟蟬科）［J］. 昆蟲分類學(xué)報(bào)，2010，32（3）：171-178.

Peng L F，Zhang Y L，Wang Y L. A taxonomic study on thegenus Bythopsyrna Melichar（ Hemiptera： Flatidae） from China［J］.Entomotaxonomia，2010，32（3）：171-178.

［33］李曉強(qiáng). 吉林省蟋蟀總科昆蟲分類學(xué)研究［D］. 長(zhǎng)春：東北師范大學(xué)，2011.

Li X Q. Study taxonomy on the Grylloidea Jilin Province［D］.Changchun：Northeast Normal University，2011.

［34］Marzban R， He Q，Zhang Q W，et al.Histopathology of cottonbollworm midgut infected with Helicoverpa armigeracytoplasmic polyhedrosis virus ［J］. Brazilian Journal ofMicrobiology，2013，44（4）：1231-1236.

［35］Mohammadyani M， Karimi J， Taheri P， et al.Entomopathogenic fungi as promising biocontrol agents for therosaceous longhorn beetle， Osphranteria coerulescens ［J］.BioControl，2016，61（5）：579-590.

［36］付洪蘭. 實(shí)用電子顯微鏡技術(shù)［M］. 北京：高等教育出版社，2004：1-204.

Fu H L.Practical electron microscopy technology［M］.Beijing：Higher Education Press，2004：1-204.

［37］劉冰川，曲利娟，劉慶宏. 透射電子顯微鏡成像方式綜述［J］.醫(yī)療設(shè)備信息，2007，22（9）：43-46.

Liu B C， Qu L J， Liu Q H. Overview of imaging devices fortransmission electronic microscope［J］.China Medical Devices，2007，22（9）：43-46.

［38］Taylor K A ， Glaeser R M. Electron diffraction of frozen，hydrated protein crystals［J］. Science，1974，186（4168）：1036-1037.

［39］楊 顯，胡建軍，郭 寧，等. 掃描電子顯微鏡成像模式在金屬材料研究中的選用［J］. 重慶理工大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)），2018，32（7）： 132-137.

Yang X，Hu J J，Guo N， et al. Imaging mode selection ofscanning electron microscope for metal materials research［J］.Journal of Chongqing University of Technology （NaturalScience） ，2018，32（7）： 132-137.

［40］第二屆生物物理學(xué)名詞審定委員會(huì). 生物物理學(xué)名詞［M］. 第二版. 北京：科學(xué)出版社，2018：1-322.

The Second Term of the Biophysics Terms VettingCommittee. Chinese Terms in Biophysics［M］.Second Edition.Beijing： Science Press，2018：1-322.

［41］Li Y P， Liu F F， Du X， et al. Ultrastructure of antennalsensilla of three fruit borers （Lepidoptera：Crambidae orTortricidae）［ J］. PLoS ONE，2018，13（10）：1-10.

［42］Li Y P， Du X， Liu F F， et al.Ultrastructure of the sensilla onantennae and mouthparts of larval and adult Plutella xylostella（Lepidoptera： Plutellidae） ［J］. Journal of IntegrativeAgriculture， 2018，17（6）：1409-1420.

［43］Zhang J，F(xiàn)u L，Cheng B，et al. Morphological characteristics ofantennal sensilla in Hyphantria cunea （Drury） （Lepidoptera：Erebidae）［J］. Transactions of the American EntomologicalSociety，2019，145（3）：421-434.

［44］Zhang Y J，Chen D Y，Chao X T，et al. Morphologicalcharacterization and distribution of antennal sensilla ofDiaphania angustalis Snellen （Lepidoptera： Crambidae）［J］.Microscopy Research and Technique，2019，82（10）：1632-1641.

［45］Rani A T， Shashank P R， Meshram N M，et al.Morphologicalcharacterization of antennal sensilla of Earias vittella（Fabricius） （Lepidoptera： Nolidae）［J］. Micron，2021，140：102957.

［46］Thammaiah R A ， Pathour S， Meshram N， et al.Morphological characterization and distribution of antennalsensilla of Helicoverpa armigera （Hübner） （Lepidoptera：Noctuidae） using scanning electron microscopy［J］.MicroscopyResearch and Technique， 2022，85（4）：1371-1391.

［47］Ge Y， Smith Q M， Chen W L，et al. Morphologicalcharacterization and sexual dimorphism of the antennal sensillain Bactericera gobica Loginova （Hemiptera： Psyllidae）– ascanning and transmission electron microscopic study［J］.PeerJ，2022，10：e12888.

［48］Guo F Z，Ning S Y，F(xiàn)eng J N，et al. Ultrastructure andmorphology of the compound eyes of the predatory bugMontandoniola moraguesi （Insecta：Hemiptera：Anthocoridae）［J］. Arthropod Structure and Development，2021，528（2）：167-174.

［49］Zhang Y T，Dietrich C H，Duan Y N.Structure and sensilla ofthe mouthparts of Alobaldia tobae ， Maiestas dorsalis andStirellus indrus（ Hemiptera：Cicadellidae：Deltocephalinae）［J］.Zoomorphology，2020，139（2）：1-10.

［50］胡桂林，張傳敏，路紀(jì)琪. 寬脛夜蛾成蟲觸角和下唇須感器的超微形態(tài)［J］. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào)，2022，44（3）：756-767.

Hu G L，Zhang C M，Lu J Q. Ultramorphology of adultantennal and labial palp sensilla of Protoschinia scutosa（Lepidoptera： Noctuidae： Heliothinae） ［J］. Journal ofEnvironmental Entomology，2022，44（3）：756-767.

［51］Yi M F，Sun M，Hou L Z，et al.Ultrastructure of the proboscisand antennal sensilla in the family Hesperiidae （Insecta：Lepidoptera）［J/OL］. Zoomorphology，2024. ［2024-08-25］.https：//doi.org/10.1007/s00435-024-00666-3.

［52］Yang S，Liu F，Zhao Y F，et al. Microstructure and defensefunction of the acoustic organ of Papilio xuthus （Lepidoptera：Papilionidae） pupae（in English）［J］.Acta Entomologica Sinica，2022，65（ 9）：1196-1203.

［53］Wang Q K，Yang Y Z， Liu M Q，et al.Fine structure of Deliaplatura （Meigen） （Diptera： Anthomyiidae） revealed byscanning electron microscopy［J］. Microscopy Research andTechnique，2014，77（8）：619-630.

［54］鄭溢華，王 鑫，廖永林，等. 霍氏嚙小蜂外生殖器及其感器的超微結(jié)構(gòu)［J］. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào)，2016，38（5）：1011-1017.

Zheng Y H， Wang X， Liao Y L， et al. Ultra-structure of thegenitalia and genitalial sensilla of Tetrastichus howardi （Olliff）（Hymenoptera： Eulophidae）［J］. Journal of EnvironmentalEntomology，2016，38（5）：1011-1017.

［55］Ghany N M A E， Aziz S E A E， Faucheux M J. Theultrastructure of nymphal dermal pores and the genitalia ofadult male of Phenacoccus solenopsis （Hemiptera：Pseudococcidae）［J］.Scientific Reports，2024，14（1）：1227.

［56］楊韓英，張振飛，張 揚(yáng)， 等. 黑肩綠盲蝽外生殖器及其感器的超微結(jié)構(gòu)［J］. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào)，2021，43（3）：768-774.

Yang H Y， Zhang Z F，Zhang Y，et al. Ultra-structure of the genitalia and genitalial sensilla of Cyrtorhinus lividipennisReuter （Himiptera： Miridae）［J］. Journal of EnvironmentalEntomology，2021，43（3）：768-774.

［57］張迎春，張 瑩，鄭哲民，等. 4 種昆蟲鞘翅表面超微結(jié)構(gòu)的比較［J］. 西北大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2001，31（6）：522-524.

Zhang Y C， Zhang Y， Zheng Z M，et al. A comparative studyon elytral ultrastructures in beetles of four species［J］.Journal ofNorthwest University（Natural Science Edition），2001，31（6）：522-524.

［58］Alencar J，Gil-Santana H R， Ferreira De M C，et al.Ultrastructure and morphometry of the egg of Coquillettidiaalbifera （Prado） with illustrations of male genitalia （Diptera：Culicidae）［J］. Zootaxa， 2019，4565（1）：1-13.

［59］Wang Z C，Peng L Y，Cheng X，et al. A CYP380C10 gene isrequired for waterproofing and water retention in the insectintegument［J］.Journal of Insect Physiology，2022，138：104380.

［60］Manuela R， Gianandeea S， Sllvana P，et al. The armouredcuticle of the black soldier fly Hermetia illucens［J］. ScientificReports，2023，13（1）： 22101-22111.

［61］Li Y P， Wu J X， Cheng W N， et al.Comparison of silk glandsof diapause and non-diapause larval Sitodiplosis mosellana［J］.Journal of Insect Science， 2012，114： 407-415.

［62］劉 璐. 蝎蛉科與蚊蝎蛉科幼蟲中腸和馬氏管超微結(jié)構(gòu)比較（長(zhǎng)翅目）［D］. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2018.

Liu L. Comparative ultrastructure of the larval midgut andmalpighian tubules of Panorpidae and Bittacidae （Mecoptera）［D］.Yangling：Northwest Aamp;F University，2018.

［63］Nunez-Pascual V， Calleja F， Pardo R V，et al.The ring-leggedearwig Euborellia annulipes as a new model for oogenesis anddevelopment studies in insects［J］. Journal of ExperimentalZoology Part B： Molecular and Developmental Evolution，2023，340（1）：18-33.

［64］Nurcan ? K，Selami C， üzeyir C. Anatomical and histologicalstructures of male reproductive system in long-horned beetleIsotomus speciosus （Schneider， 1787） （Coleoptera：Cerambycidae）：Light and scanning electron microscopic study［J］. Microscopy and Microanalysis，2023，29（3）：1258-1266.

［65］Xu H M， Wang M. Surface ultrastructure of the egg chorion ofZinaspa youngi Hsu amp; Johnson （Lepidoptera： Lycaenidae）［J］. Lepidoptera Science，2013，64（1）：27-29.

［66］Su M，Dietrich C H，Zhang Y L，et al. Ultrastructure of thespermatozoa of Psammotettix striatus （Linnaeus） andExitianus nanus （Distant） （Hemiptera： Auchenorrhyncha：Cicadellidae： Deltocephalinae ［J］. Arthropod Structure andDevelopment，2014，43（6）： 559-570.

［67］Symonds C L，Cassis G. Systematics and analysis of theradiation of Orthotylini plant bugs associated with callitroidconifers in Australia： Description of five new genera and 32new species（Heteroptera：Miridae：Orthotylinae）［J］. Bulletinof the American Museum of Natural History，2018，422：1-226.

［68］Gao Y，Xie Y P，Xiong Q，et al.Ultrastructural exploration onthe histopathological change in Phenacoccus fraxinus infectedwith Lecanicillium lecanii［J］. PLoS ONE，2017，10（1）：e0117428.

［69］She W J，Xiao Q，Meng Y，et al. Isolated and identifiedpathogenic bacteria from black soldier fly larvae with \"soft rot\"reared in mass production facilities and its incidencecharacteristics［J］.Waste Management，2023，163：85-95.

（編輯：馬榮博）

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金（32270486）