摘要 建立了一種基于1-丁基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([Bmim][NTf2])和1-癸基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([C10mim][NTf2])的疏水離子液體反膠束電膜提?。↖L-RM-EME)樣品前處理方法,用于環(huán)境水樣中四環(huán)素(TC)的檢測。支撐液膜(SLM)種類、膜孔徑、電壓、供相和受相溶液pH 值和含鹽量等對四環(huán)素的提取效率均有較大的影響,單因素條件優(yōu)化結(jié)果顯示,在不添加鹽條件下,使用[Bmim][NTf2]離子液體SLM、PC 膜孔徑為5 μm、電壓為30 V、供相pH=2.5 以及受相pH=7.5 時, IL-RM-EME 對TC 的提取率最高,達到77.8%,遠高于中性(吐溫85-異丙醇-正己烷)反膠束電膜體系(41.4%)。與傳統(tǒng)的樣品前處理方法相比,本方法具有操作簡單、環(huán)境污染小、試劑消耗少和費用低等優(yōu)勢,在環(huán)境有機污染物檢測中具有良好的應(yīng)用前景。
關(guān)鍵詞 離子液體;反膠束;電膜提?。凰沫h(huán)素
四環(huán)素(Tetracycline, TC)是一種合成抗生素,主要通過與微生物核糖體的30S 亞單位結(jié)合抑制微生物[1]。TC 具有良好的抗菌活性和較小的副作用,被廣泛應(yīng)用于人類和動物細菌感染的治療[2]。但是,TC 難以降解,過度使用會導(dǎo)致其在環(huán)境中不斷積累,目前在土壤、地表水、地下水甚至飲用水中均已檢出TC。環(huán)境中存在的TC 對微生物、植物和動物都有一定的毒性,會擾亂生態(tài)系統(tǒng)的正常運轉(zhuǎn),因此已被列入新興有機污染物名錄[3]。
水環(huán)境中的TC 濃度很低,因此TC 的分離及分析通常需要進行樣品提取和凈化等前處理步驟。然而,在前處理過程中TC 易產(chǎn)生差向異構(gòu)體,與金屬離子形成絡(luò)合物,發(fā)生光、熱降解,這些因素均會影響其提取率[3-4]。電膜提?。‥lectromembrane extraction, EME)技術(shù)是一種基于外部電場作用下,分析物在兩個水室(供/受)之間的跨支撐液膜(Supported liquid membrane, SLM)電遷移的小型化提取技術(shù)。該技術(shù)具有有機溶劑使用少、提取速度快、樣品有效凈化以及選擇性良好等特點,近年來已被廣泛應(yīng)用于環(huán)境污染物的分析和處理過程中[5-8]。選擇合適的SLM 溶劑是實現(xiàn)高效電膜提取的關(guān)鍵, 1-辛醇[9-10]、二乙基己醇[11]和二硝基苯辛醚[12-13]是EME 過程中常用的溶劑。然而,這些溶劑黏度小且揮發(fā)性強,在操作條件下溶劑損失嚴重,嚴重影響其提取能力。室溫離子液體(Room temperature ionic liquids, RTILs)是一類環(huán)境友好的綠色溶劑,具有高導(dǎo)電性、低揮發(fā)性、低毒性、黏度和極性可調(diào)、高提取性等獨特的理化性質(zhì),相比于常用的有機溶劑,其適用性更強,提取效果更好[14-17],因此目前常作為有機溶劑的替代品用于EME[16-17]。
反膠束(Reversed micelle, RM)是表面活性劑在有機溶劑中自發(fā)形成的一種納米尺度的透明聚集體。RM 提取具有較高的選擇性、低能耗和操作條件溫和等特點[18-21],常被用于生化物質(zhì)的提取,在提取蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸等生物活性分子時,可以避免這些物質(zhì)與有機溶劑直接接觸,進而提高生物活性分子的回收率。然而,RM 提取中常用的表面活性劑用量較大,并且大部分有毒,容易對環(huán)境造成二次污染[22],采用環(huán)境友好的離子液體(Ionic liquid, IL)替代傳統(tǒng)的有機溶劑和表面活性劑構(gòu)建反膠束體系是解決此問題的有效方法。
TC 在一定條件(強光照、強酸和強堿等)下容易發(fā)生異構(gòu)化,傳統(tǒng)的樣品提取條件可能對抗生素分子的結(jié)構(gòu)和活性產(chǎn)生不利影響。本研究以徑跡刻蝕聚碳酸酯(Polycarbonate, PC)濾膜為液膜載體,含咪唑基的[NTf2]型低粘度疏水性離子液體為SLM 組成成分,開發(fā)了一種基于1-丁基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽[Bmim][NTf2]的離子液體反膠束電膜提取(IL-RM-EME)新技術(shù),為抗生素類藥物污染檢測提供了一種有效的前處理手段。
1 實驗部分
1.1 儀器與試劑
SV-2100 紫外-可見分光光度計(昆山科美儀器有限公司);MS1201D 可調(diào)直流穩(wěn)壓電源(東莞邁勝電源科技有限公司),電壓調(diào)節(jié)范圍0~120 V;KX-1740T 超聲波清洗機(北京科璽世紀科技有限公司)。
1-丁基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([Bmim][NTf2],98%)、1-己基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([Hmim][NTf2],97%)、1-辛基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([Omim][NTf2],98%)、1-癸基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽([C10mim][NTf2],≥98%)、甲基橙(Methyl orange, MO,96%)、阿莫西林(Amoxicillin, AMC,≥99%)和土霉素(Oxytetracycline, OTC,≥98%)(上海阿拉丁試劑有限公司);TC(96%,上海源葉生物科技有限公司);濃HCl、NaOH、NaCl 和NaH2PO4·2H2O(分析純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司)。實驗薄膜采用徑跡刻蝕(PC)膜(Whatman);實驗用水為超純水(18.2 MΩ·cm)。環(huán)境水樣采集自揚州大學(xué)朗月湖,水樣使用0.22 μm 濾膜過濾去除其中的懸浮雜質(zhì)和微生物,于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
磷酸鹽緩沖溶液(PBS,50 mmol/L):稱取0.78 g NaH2PO4·2H2O 溶于適量超純水中,振蕩搖勻,用0.1 mol/L 的NaOH 和HCl 調(diào)節(jié)pH 值,以超純水定容至100 mL。
檸檬酸緩沖溶液(50 mmol/L):稱取1.29 g 檸檬酸鈉溶于適量超純水中,振蕩搖勻,用NaOH 和HCl調(diào)節(jié)pH 值,以超純水定容至100 mL。
MO溶液(0.24 mmol/L):稱取7.9 mg MO溶于適量超純水中,振蕩搖勻,以超純水定容至100 mL。
TC 儲備液(6 mmol/L):稱取0.27 g TC 溶于適量超純水中,振蕩搖勻,以超純水定容至100 mL。使用PBS 將TC 儲備液稀釋至所需濃度,制得TC 標(biāo)準溶液。
1.2 實驗方法
1.2.1 電膜提取步驟
預(yù)制反膠束膜:取1.5 mL [Bmim][NTf2]與適量的[C10mim][NTf2]混合,超聲15 min, 以獲得離子液體混合物(ILs),將其作為SLM。將PC 膜置于載玻片上,滴加ILs,待PC 膜充分浸透后,用氮氣吹去膜表面上多余的ILs, 置于塑料器皿中,備用。將SLM 負載于徑跡刻蝕的PC 膜孔中,可大致認為液膜厚度不受離子液體粘度的影響。為了提供充分的反膠束運輸相,液膜為一次性使用,每次EME 操作后再次添加SLM。
實驗采用的H 型電膜提取裝置如圖1 所示,左側(cè)為待提取供相室,上方開口以泡沫鈦連接電源正極,下方開口連接膠圈;右側(cè)為提取受相室,上方開口以鉑絲連接電源負極,下方開口連接膠圈,兩側(cè)供相和受相室容積相同。供相溶液為使用環(huán)境水樣配制的含有60 μmol/L TC(或OTC、AMC)的PBS 緩沖溶液(50 mmol/L, pH 2.5),受相溶液為相同體積的PBS 緩沖溶液(50 mmol/L, pH 8.0)。將液膜夾在供相和受相室下方處O型膠圈中間,用不銹鋼夾固定兩邊的供相和受相,并在下方放置超聲裝置(40 kHz, 120 W)。
1.2.2 咪唑類表面活性劑含量的確定
以MO 的紫外吸收峰值來衡量反膠束的產(chǎn)生量[23]。以不同含量的[C10mim][NTf2](7.2、10.8、14.4、21.6、43.2、64.8 和86.4 mg)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的表面活性劑,并與1.5 mL(2.16 g)[Bmim][NTf2]混合,加入5 mL2.4×10–4 mol/L 的MO 溶液,超聲15 min 后靜置,待溶液再度分層后,移除上層溶液,得到澄清態(tài)反膠束溶液。使用紫外-可見分光光度計測定反膠束中MO 的紫外吸收峰值,根據(jù)紫外吸收峰值的大小確定[C10mim][NTf2]的最佳用量。
1.2.3 IL-RM-EME 條件的優(yōu)化及提取率計算
為獲得TC 最佳提取效率,對SLM 種類、膜孔徑、電壓、含鹽量和供相和受相溶液的pH 值等條件進行了優(yōu)化。預(yù)實驗結(jié)果表明,TC 在387 nm 處的吸光度與濃度線性相關(guān),其回歸方程為A=0.01177C+0.02681(r2=0.9986),其中, A 為吸光度, C 為TC 濃度(μmol/L)?;诖嘶貧w方程,可通過測定的吸光度計算TC 濃度。由于采用的供相與受相溶液的體積相同,提取率(Rm)計算公式為:Rm=(ma/md)×100%=(CaV/CdV)×100%=(Ca/Cd)×100%, 其中, md 為供相中TC 質(zhì)量, ma 為受相中TC 質(zhì)量, Ca 為受相中TC 濃度, Cd 為供相中TC 濃度。
1.2.4 IL-RM-EME 回收率的計算
向3 份配制濃度為30.00 μmol/L TC 的5.0 mL 環(huán)境水樣中分別添加4.2、8.4 和16.8 μL 的TC 儲備液,即相對樣品分別添加了5.00、10.00 和20.00 μmol/L 的標(biāo)準TC,在最佳條件下,使用紫外-可見分光光度計測定樣品經(jīng)IL-RM-EME 前后在波長387 nm 處的吸光度,平行測定3 次,并通過標(biāo)準方程計算TC 濃度,加標(biāo)回收率(P)計算公式為:P=(C1–C0)/Cr×100%,其中, C1 為加標(biāo)后受相溶液中的TC 濃度, C0 為加標(biāo)前受相溶液中的TC 濃度, Cr 為供相樣品中加入的標(biāo)準TC 濃度。
2 結(jié)果與討論
2.1 咪唑類表面活性劑含量的確定
反膠束的產(chǎn)量可采用溶劑化顯色探針進行測定。前期研究表明,水溶液中的TC 分子在Cnmim[NTf2](n=2,4,6)離子液體界面發(fā)生擴散,不適合作為反膠束探針,而MO 不溶于Cnmim[NTf2]離子液體,是很好的判斷反膠束形成的探針[23]。因此,本研究采用MO 探究表面活性劑[C10mim][NTf2]的添加量對反膠束形成的影響。如圖2 所示,未添加[C10mim][NTf2]表面活性劑時, MO 溶液與[Bmim][NTf2]混合后自然分層(圖2A),無法溶入[Bmim][NTf2]離子液體形成反膠束;添加[C10mim][NTf2]并進行超聲處理(圖2B)后,部分MO 水溶液進入到[Bmim][NTf2]層形成反膠束,分層后可得到穩(wěn)定澄清的微乳液(圖2C)。添加不同量的[C10mim][NTf2]后,微乳液中MO 在波長433 nm 處的吸光度(Amax)變化如圖2D 所示,當(dāng)添加量小于10 mg 時, Amax 維持在0.6 左右,說明此時尚未形成反膠束;當(dāng)添加量在10~20 mg 之間時, Amax 隨著添加量的增加而急劇上升,表明有更多的MO 進入到反膠束中;當(dāng)添加量超過20 mg 后, Amax 隨著[C10mim][NTf2]含量增加而逐漸下降,說明添加量為20 mg 左右時反膠束含水量已飽和,繼續(xù)增加[C10mim][NTf2]不能形成反膠束,還會破壞已形成的反膠束。因此,后續(xù)實驗中[C10mim][NTf2]添加量均采用21.6 mg。
2.2 液膜(SLM)的選擇
分別采用[Bmim][NTf2]、[Hmim][NTf2]和[Omim][NTf2]這3 種具有不同烷基鏈的[NTf2]型離子液體作為SLM 組分,在電壓30 V、供相樣品溶液pH=2.5、受相溶液pH=8.0 以及提取時間分別為3 和6 min 的條件下,對TC 的IL-RM-EME 效果進行了對比(圖3)。
Cnmim[NTf2] (n=2,4,6) 3 種SLM 水溶液的溶解度和電導(dǎo)率隨烷基鏈長增加而降低[24],因此推測烷基鏈最長的[Omim][NTf2]在水溶液中最穩(wěn)定,TC 提取效果最好,[Hmim][NTf2]和[Omim][NTf2]符合上述規(guī)律(圖3)。然而,無論是在3 min 還是在6 min, [Bmim][NTf2]作為SLM 時得到的TC 濃度均最高,其原因可能與[Bmim][NTf2]-[H2O]兩相界面上溶出的[Bmim][NTf2]不發(fā)生簇集有關(guān)[25]。[Hmim][NTf2]和[Omim][NTf2]的臨界簇集濃度(Critical aggregation concentrations, CACs)低,而不同程度的簇集影響了IL-RM-EME 效果。因此,后續(xù)研究均采用[Bmim][NTf2]作為SLM 組分進行反膠束電膜提取。
2.3 徑跡刻蝕PC 膜載體的孔徑選擇
選取0.2、0.8 和5.0 μm 孔徑的徑跡刻蝕PC 膜,考察PC 膜提供的通道大小對IL-RM-EME 效果的影響。EME 條件為電壓30 V,供相樣品溶液pH=2.5,受相溶液pH=8.0,未加鹽。結(jié)果表明,0.2 和0.8 μmPC 膜的TC 提取效率相差較小,都低于5.0 μm PC 膜(圖4),其原因可能是0.2 和0.8 μm 的PC 膜遷移通道太窄,不能提供充分的反膠束運輸相,導(dǎo)致TC 提取效果差。本研究還考察了10.0 μm PC 膜的效果,但由于其孔徑過大, SLM 承受不住溶液壓力而直接被破壞,導(dǎo)致供相室和受相室的溶液直接互溶,所以10.0 μm 以上孔徑的PC 膜不適合作為離子液體的支撐載體。因此,本研究后續(xù)實驗采用5.0 μm PC 膜作為SLM 的支撐載體。
2.4 電壓的選擇
在IL-RM-EME 過程中,施加的電壓是TC 傳輸?shù)闹饕?qū)動力,因此考察了不同電壓對TC 提取效果的影響。前期實驗結(jié)果表明,當(dāng)施加50 V 以上電壓時,SLM 極不穩(wěn)定,因此本研究選擇施加電壓為5~50 V。在5~50 V 電壓范圍內(nèi),隨著施加電壓升高,TC 提取效率先逐漸上升,在30 V 電壓下受相溶液中TC 濃度達到最高,此后逐漸下降(圖5)。在電場作用下,荷正電的RM 穿過SLM 并在受相溶液中向負極遷移,最終被捕獲在受相溶液中[5],理論上, TC 遷移效率隨電壓增大而上升。然后, TC 隨電流遷移,此電流必須保持在較小的值以抑制SLM 電解(Electrolysis)[17]。恒定電壓下,EME 系統(tǒng)的總電阻基本由SLM 確定[26],當(dāng)電壓升至30 V 以上時,電流的增大會導(dǎo)致SLM 電解,進而又會造成TC 提取率下降。因此,為保證SLM 的穩(wěn)定性,后續(xù)實驗選擇30 V 作為EME 運行電壓。
2.5 鹽添加量的影響
考察了不同NaCl 添加量對TC 提取率的影響,結(jié)果表明,NaCl 濃度在0~0.15 mol/L 范圍內(nèi),供相TC的濃度未達到6 μmol/L, 即TC 的提取效率未超過10%(圖6)。當(dāng)添加量超過0.15 mol/L 時,體系電流值變大, SLM 被電解破壞。在傳統(tǒng)的液-液提取過程中,通常采用加鹽的方式增加水溶液的離子強度,降低被提取物在水樣中的溶解度,進而增加其在有機相中的分配比。然而,在IL-RM-EME 中添加鹽產(chǎn)生了與傳統(tǒng)提取方式不同的效果[17]:一方面,添加鹽可能會使TC 在水中溶解度降低,更多地分配到IL-RM 中,并在電場下遷移到受相溶液中;另一方面,添加鹽會導(dǎo)致體系離子強度增加,電阻減小,電流增大, SLM更易電解,進而影響TC 的提取。上述結(jié)果表明,添加鹽對SLM 的穩(wěn)定性影響較大,但對提取率提升并無明顯作用。因此,后續(xù)實驗中均未添加鹽。
2.6 供相和受相溶液pH 值的優(yōu)化
TC 是由酚羥基(C—OH)、二甲氨基(—N(CH3)2)、酰氨基(—CONH2)和酮-烯醇共軛雙鍵體系構(gòu)成的兩性化合物,具有3 種不同的pKa 值,分別為3.3、7.7 和9.7[27-28]。當(dāng)pH 值從酸性提高到堿性時, TC發(fā)生去質(zhì)子化,表現(xiàn)為陽離子(pHlt;3.3)、兩性離子(3.3≤pH≤7.7)和陰離子(pHgt;7.7)。
為確保TC 能夠在電場作用下從供相轉(zhuǎn)移到受相,將供相設(shè)置為含60 μmol/L TC 的PBS 緩沖溶液(pH=1.5~3.0),受相為pH=7.5 的PBS 緩沖溶液(供相和受相PBS 緩沖溶液濃度均為50 mmol/L), 考察TC以陽離子形態(tài)存在時的提取效果。如圖7A 所示,供相pH=2.5 時,不僅TC 的提取濃度遠高于其它pH 條件,而且達到提取飽和濃度的時間也最短。pH=3.0 時的提取效果相對較低的原因可能是更酸性的環(huán)境可以確保更多的TC 以電離形式存在,因而更容易在電場中遷移[16]。pH=1.5 與pH=2.0 供相輔助提取的效果分別在18 min 和12 min 后變差,此時受相溶液出現(xiàn)絮凝渾濁現(xiàn)象,影響吸光度的測定。推測在低pH 值和長時間的持續(xù)高電流作用下,SLM 被嚴重破壞,導(dǎo)致大量SLM 組分溶出到受相溶液中,這也解釋了當(dāng)供相pHlt;2.5 時,即TC 電離程度更大的條件下提取效果反而不佳的原因。當(dāng)pHgt;3 時,部分帶電分析物將轉(zhuǎn)化為分子形式并被反提取到SLM 中。強堿性環(huán)境也可使TC 電離,但此時TC 易生成具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體,并且過程不可逆,這與提取回收TC 的初衷相悖。因此,后續(xù)實驗選擇供相溶液pH=2.5。
為了防止TC 結(jié)構(gòu)改變,同時實現(xiàn)高效提取,考察了受相溶液pH 值分別為7.5 和8.0 時TC 的提取效果。結(jié)果表明,隨著提取時間延長,兩種pH 值條件下受相溶液接收TC 的量持續(xù)增長,分別在24 min(pH=8.0)和36 min(pH=7.5)時達到峰值39.54 μmol/L 和46.68 μmol/L(提取率分別為65.9%和77.8%,圖7B)。綜合考慮,選取pH=7.5 的受相溶液提取TC。
2.7 IL-RM-EME 的選擇性
為評估IL-RM-EME 的選擇性,分別采用等濃度的OTC 和AMC 替換TC,在相同條件下分別進行了OTC 和AMC 的提取實驗。結(jié)果表明, OTC 的提取率達到76.1%,而AMC 的提取率僅為7%左右。這說明IL-RM-EME 法對不同類別的抗生素具有較好的提取選擇性,而對同類抗生素提取選擇性較差。由于不同類別的抗生素分子的分子結(jié)構(gòu)和離子化狀態(tài)不同,因此在反膠束中,基于靜電或疏水作用的增溶效果也不同,利用這種差異可以選擇性地提取某些不同類的抗生素[29]。
2.8 IL-RM-EME 的回收率
在TC 濃度為30.00 μmol/L 的環(huán)境水樣中分別添加5.00、10.00 和20.00 μmol/L 的TC 標(biāo)準品,進行加標(biāo)回收實驗,以加標(biāo)前經(jīng)過IL-RM-EME后受相溶液中測得的TC濃度為C0。如表1 所示,采用本方法測定TC的加標(biāo)回收率為87.2%~93.8%,表明本研究建立的IL-RM-EME方法具有較好的穩(wěn)定性與準確性。
2.9 IL-RM-EME 與吐溫85 中性反膠束的提取效果比較
以吐溫85 作為非離子表面活性劑,將吐溫85、異丙醇和正己烷按質(zhì)量比為1∶1∶5 配制的中性反膠束溶液[30]作為非IL-RM-SLM,在上述最佳條件下提取TC。如圖8 所示,前10 min 中性RM-SLM 提取的TC 濃度都隨時間延長而快速上升,12 min 后中性RM-SLM 提取的TC 濃度幾乎恒定在24.85 μmol/L, 此時,TC 提取率的計算結(jié)果僅為41.4%,遠低于基于[Bmim][NTf2]的IL-RM-SLM(77.8%,圖7B)。
與中性非離子型反膠束中單純的擴散運輸不同,[Bmim][NTf2]在電提取過程中,外加電場不僅對TC離子施加驅(qū)動力,也促進了SLM 中的IL 反膠束粒子向陰極電泳移動,進而推動TC 從供相到受相的轉(zhuǎn)移。IL-RM-EME 的提取原理與微乳電動色譜(MEEKC)[31-33]類似:徑跡刻蝕PC 膜提供了微乳液(ME)傳輸通道,通道中的[Bmim][NTf2]型離子液體和[C10mim][NTf2]與水溶液共同形成了油包水型(W/O)ME 系統(tǒng),作為疏水性表面活性劑,[C10mim]+疏水性尾部朝向[Bmim][NTf2]相,而[NTf2]–基則頭朝向水相,[NTf2]–在RM 納米水池中的溶解度大于[Bmim]+,從而使微乳粒子帶正電,在電場下產(chǎn)生IL-RM-EME。供相溶液中的TC 分子按分配比在離子液體相和水相之間分配,大部分水相中的TC 發(fā)生IL-RM-EME,最終在SLM 受相一側(cè)溶液中隨著RM 被破壞而釋放;少部分TC 分配在IL 相,以擴散方式通過SLM 發(fā)生提?。▓D9)。
與其它常用的抗生素提取方法進行了對比(表2),本研究提出的EME 方法與分散液-液微提?。―LLME)、固相提?。⊿PE)和濁點提取(CPE)等方法的提取率尚有差距。然而,本方法提取所用的溶劑量極少,通常只需幾微升溶劑充分浸漬膜即可;采用的提取裝置簡單,操作簡便。相比于常用的EME,IL-RM-EME 需要的電壓更小,能耗更低,對環(huán)境幾乎無害,由于反膠束的存在, TC 被提取到受相溶液后,性質(zhì)不易發(fā)生變化,可回收循環(huán)利用。與DLLME 方法相比,IL-RM-EME 對TC 提取率偏低,主要是由于在較強的電場下SLM 不穩(wěn)定,隨著時間延長,構(gòu)成的離子液體反膠束被破壞并溶解到供相和受相溶液中。后續(xù)研究中,將采用膜通道固定離子液體SLM,并通過更細致的條件優(yōu)化來增強SLM 的穩(wěn)定性,以獲得更高的提取效率。
3 結(jié)論
本研究通過[Bmim][NTf2]反膠束電膜提取環(huán)境水中的TC,為抗生素污染樣品的定量分析提供了一種新的預(yù)處理技術(shù)。在供相溶液pH=2.5、受相溶液pH=7.5、5 μm PC 膜、30 V 施加電壓以及未加鹽等優(yōu)化條件下,采用本方法對TC 的提取率可達到77.8%。本方法操作簡便、成本低、能源消耗少、綠色環(huán)保。此外,由于臨床常用的TC 是從微生物培養(yǎng)液中提取或化學(xué)方法合成,其生產(chǎn)過程需要分離純化,本研究提出的IL-RM-EME 法改進后或可應(yīng)用于TC 生產(chǎn)中。
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浙江省海產(chǎn)品健康危害因素關(guān)鍵技術(shù)研究重點實驗室(舟山市疾病預(yù)防控制中心)開放課題項目(No.202304)資助。